猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型共感染对外周血单个核细胞促炎细胞因子mRNA表达的影响

将猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）和猪圆环病毒2型（PCV2）单感染和共感染6周龄健康仔猪,采用Real-ti me PCR技术对外周血单个核细胞（PBMC）中IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α等促炎细胞因子的mRNA表达进行定量分析。结果表明,病毒感染后,PRRSV感染组、PCV2感染组IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α的mRNA表达水平均上调,其中PRRSV感染组的IL-6、IL-8显著上调,PCV2感染组的IL-6、IL-8和TNF-α显著上调;PRRSV/PCV2共感染组仅有IL-8和TNF-α的mRNA表达水平上调且差异显著;并且,PRRSV/PCV2共感染组IL-1β、IL-6和IL-8的mRNA表达水平均低于单独感染组,仅TNF-α的mRNA表达水平显著高于单感染组。结果提示,TNF-α的过量表达可能在PRRSV和PCV2协同致病机制中扮演重要角色。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5重组蛋白对外周血单个核细胞功能的影响

为了研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5重组蛋白(rGP5)对猪外周血单个核细胞(PBMC)功能的影响,本研究选取PRRSV-PC疫苗株中的ORF5基因片段,对其进行原核表达并纯化,结果显示rGP5以可溶性和包涵体两种形式表达,分子质量约为30 ku;将该纯化蛋白免疫大耳白兔,按常规方法制备抗血清并进行酶联免...     

猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型共感染对猪体内病毒动态及免疫反应的影响

将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)单感染和共感染6周龄健康仔猪,采用实时定量PCR(Real-time PCR)对血清、组织(心、肝、肺、肾、胰、脾、胸腺、扁桃体、腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结)中的PRRSV和PCV2载量进行检测,分别采用间接ELISA和间接IFA对血清中的PRRSV和PCV2特异性抗体进行检测,采用MTT法对猪外周血淋巴细胞(PBLC)的增殖能力进行检测.结果,PRRSV/PCV2共感染组血清、组织中PRRSV的载量均显著高于PRRSV单感染组,PCV2的载量均显著高于PCV2单感染组;共感染组PRRSV和PCV2特异性抗体阳转的时间均晚于并且效价均显著低于PRRSV或PCV2单感染组;共感染组和单感染组PBLC的增殖能力均受到抑制,其严重程度依次为:PRRSV/PCV2组>PRRSV组>PCV2组.由此表明,PRRSV和PCV2在猪体内对彼此的增殖具有促进作用;PRRSV和PCV2共感染对猪的免疫抑制具有加重作用.     

猪生殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型共感染对猪外周血天然免疫细胞含量的影响

将猪生殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）和猪圆环病毒2型（PCV2）单感染和共感染的6周龄仔猪，于感染前和感染后第3、7和10d，采用血常规法、SWC3a单色流式细胞术以及CD3／CD4／CD8三色流式细胞术分析了感染猪外周血中白细胞、粒细胞、单核细胞、NK细胞、弦T细胞的含量。结果，感染后第3d和第7d，PRRSV感染组、PCV2感染组以及PRRSV＋PCV2共感染组猪的白细胞、单核细胞、粒细胞、NK细胞、弦T细胞总数显著下降，并且共感染组比单感染组下降更加严重。结果表明，PRRSV＋PCV2共感染对仔猪外周血天然免疫细胞的影响具有协同效应，意味著在感染旱期可导致更加严重的先天免疫抑制。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型混合感染研究进展

1病原简介 猪繁殖与呼吸综合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的，以母猪的繁殖障碍、哺乳仔猪的高死亡率及呼吸症状为特征的一种传染病。PRRSV是有囊膜的单股正链RNA病毒，属于动脉炎病毒科动脉炎病毒属。该病1987年在美国首先发生，随后在世界各主要养猪国家流行。按其遗传差异和抗原性差异，可分为欧洲型（A群）与美洲型（B群）。该病毒的基因组全长约为15kb，含有8个开放阅读框架（ORFs），其中ORF1a和ORF1b编码病毒非结构蛋白，ORF2-ORF7编码病毒的结构蛋白。我国1996年由郭宝清等首次报道该病，研究证明其为美洲型。PRRS在我国大部分地区均有流行，造成巨大的经济损失。     

猪繁殖与呼吸综合征与猪圆环病毒2型混合感染的诊断分析

猪繁殖与呼吸综合征和猪圆环病毒病是目前养猪业广泛存在且危害较大的疾病,严重影响了种猪的繁殖性能和仔猪的生长性能,多表现为地方性流行和持续性感染,是其他猪病多发和频发的主要原因。2016年5月,湖北省某规模化猪场内育肥前期猪只出现以呼吸困难、高热、皮肤出现不规则丘疹、渐行性消瘦等临床症状的急性传染病,造成猪只生长发育受阻、饲料转化率降低。根据临床症状,结合流行病学、临床剖检观察、实验室诊断等方法,最终确诊其为猪繁殖与呼吸综合征与猪圆环病毒2型的混合感染引起,同时对检测数据进行分析并采取相应措施,有效减缓了疾病的流行与蔓延。研究通过对该场疾病发生的原因及防控措施进行分析,以期为当前养殖场该类疾病的临床防控提供参考。     

“猪高热病”中猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒Ⅱ型的检测分析

为有效防控猪"高热病",对该病的病原进行了分析。根据GenBank中已发表的相关序列,建立并应用RT-PCR和PCR方法,对2007年6月～2009年9月期间收集于江西等地区的323份"猪高热病"病料进行了检测。结果显示PRRSV阳性率为85.14%(275/323),PCV-2阳性率为36.84%(119/323),其中PRRSV和PCV-2的混合感染率为2105%(68/323)。说明在"猪高热病"疫情中PRRSV和PCV2起了重要作用。     

规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型混合感染的控制

2022年2月1日,陕西省某规模化母猪场产房仔猪断尾去势液检测猪繁殖与呼吸综合征病毒核酸阳性,该批仔猪于2022年2月23日断奶至下游育肥猪场,猪群断奶后3 d出现咳嗽、少食、发热等临床症状,根据临床症状、剖检大体病理变化、兽医实验室检测结果诊断为猪繁殖与呼吸综合征病毒和圆环病毒2型混合感染。为迅速控制猪群病情,对该猪场免疫程序及保健方案进行调整,并对猪群进行为期18周的猪繁殖与呼吸综合征和圆环病毒2型病毒血症期和抗体水平的持续跟踪发现,紧急防控方案实施后2周大群趋于稳定,猪繁殖与呼吸综合征疫苗二免后10周猪群的病毒血症消失,圆环病毒2型疫苗二免后猪群的病毒血症虽未消失,但阳性率有所下降,猪繁殖与呼吸综合征的抗体水平在猪群二免后8周趋于稳定,猪群受圆环病毒2型疫苗毒株及野毒的双重刺激,抗体衰减规律较为复杂,从持续的跟踪检测分析发现圆环病毒2型疫苗二免后6周抗体水平有所下降,8周后抗体水平上升并持续至该批猪出栏。     

广西出现猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型混合感染

2004年4月以来,广西的桂林、玉林、南宁、崇左、贵港、来宾6市共8个规模化猪场均发生以肺部严重病变、淋巴结肿大出血为主要特征的疫病。在流行病学调查、临床症状、病理剖检的基础上,采用已建立的诊断猪繁殖与呼吸综合征病毒的RTPCR技术和诊断猪圆环病毒2型的PCR技术,从这几个规模化猪场的病料中均扩增出特异的目的基因片段,证实为猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型混合感染。     

华南地区猪圆环病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒检测分析

为了解华南地区猪圆环病毒及猪繁殖与呼吸综合征病毒的最新流行情况,采集了华南地区11个规模猪场各饲养阶段猪血清807份,用套式PCR(nPCR)检测猪圆环病毒1型(PCV-1)和猪圆环病毒2型(PCV-2);采集了若干猪场2010年1月至2011年8月期间有咳嗽、喘气、消瘦及疑似PDNS等临床症状的猪血清312份,以及无临床症状猪血清104份,以nPCR检测PCV-2,以一步法反转录PCR(RT-PCR)检测猪繁殖与呼吸综合征病毒。结果发现,所调查的11个规模猪场中只有5个检出PCV-1,所有猪场均检出PCV-2。PCV-2阳性率为30.61%,而PCV-1阳性率仅为4.21%;经产母猪和7周龄以上保育猪PCV阳性率最高;有临床症状的猪血清PCV-2阳性率为58.65%,PRRSV阳性率为37.82%,PCV-2阳性猪群中有39.89%的猪同时感染PRRSV;有症状猪群7月～9月的PCV-2感染率最高,而1月～3月最低;无临床症状猪血清PCV-2阳性率为27.9%,PRRSV阳性率为0.96%,PCV-2与PRRSV无混合感染。证明PCV尤其是PCV-2在华南地区仍广泛传播并流行,而且PCV-2与PRRSV混合感染致病情况较多。PCV-2的感染率与季节有一定的相关性,种猪带毒情况严重。     

Changes in peripheral blood leukocyte subpopulations in piglets co-infected experimentally with porcine reproductive and respiratory syndrome virus and porcine circovirus type 2

Porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) and porcine circovirus type 2 (PCV2) are pathogens, which can significantly affect the swine industry worldwide. Field surveys suggest that simultaneous PRRSV and PCV2 infection is common in pigs. The objective of this study was to measure the changes in peripheral blood leukocyte subpopulations in piglets co-infected experimentally with PRRSV and PCV2, in order to analyze the synergistic influence of co-infection on the immune system. Changes in peripheral blood leukocyte subpopulations were systematically measured by flow cytometry (FCM). The levels of antibodies to PRRSV and PCV2 were detected by indirect Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay (ELISA) and the indirect fluorescent antibody test (IFA), respectively. Serum viral loads were measured using real-time PCR. The results showed that piglets co-infected with PRRSV and PCV2 exhibited slower generation and lower levels of antibodies to PRRSV and PCV2, and increased amounts and a prolonged presence of both PRRSV and PCV2 in serum, in comparison to the piglets infected with either virus alone. The major finding in our study was that the total and differential leukocyte counts, including white blood cells (WBCs), monocytes, granulocytes and lymphocytes (T, B and NK cells, as well as T-cell subpopulations), dramatically decreased early during co-infection with PRRSV and PCV2 for about two weeks, in contrast with animals singly infected with either PRRSV or PCV2. These results suggest that PRRSV and PCV2 co-infection results in a synergistic decrease in immune cells in the peripheral blood of piglets. These data contribute to the understanding of the immunosuppressive effects resulting from PRRSV and PCV2 co-infection in pigs.     

猪圆环病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染对仔猪致病性的评估

本研究通过猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)和猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)强毒共感染3周龄健康仔猪来评价其致病性。试验动物随机分为3组,空白对照组(n=3头),PRRSV单独感染组(n=3头),PCV2和PRRSV共感染组(n=6头),从而比较相互之间的差异。通过临床症状、病理学变化、病原学和血清学检查,对二者混合感染仔猪的致病性进行了研究。结果表明PCV2和PRRSV共同感染能引起仔猪断奶后多系统消耗性综合征,表现为淋巴组织肿大、出血,肉芽肿性炎症,坏死性肝炎,仔猪消瘦、生长缓慢等特征性病变;混合感染能加重PRRSV对仔猪引起的间质性肺炎的严重程度。混合感染可以出现支气管肺炎和明显的肝病变,淋巴结多呈界限明显的块状出血等典型病变。     

广西某猪场猪繁殖与呼吸综合征和猪圆环病毒2型混合感染的诊断

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是20世纪80年代后期发现的一种新的高度传染性的疾病,临床上以母猪流产、死胎、木乃伊胎、弱仔等繁殖障碍及仔猪呼吸道症状、死亡率高为主要特征.该病自1987年在美国发现以来,至今已蔓延至世界所有养猪国家,给养猪业带来巨大的经济损失.     

Prevalence of porcine reproductive and respiratory syndrome virus and porcine circovirus type 2 in piglets after weaning on a commercial pig farm in Japan

To investigate the transition in concentration of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) and porcine circovirus type 2 (PCV2) and antibody for these viruses in serum, serum samples were collected from 29 pigs on weaning day and at 7, 14, 21, 28, 53, 84, and 120 days after weaning. The concentration of circulated PRRSV and PCV2 in serum was measured by real-time RT-PCR and real-time PCR, respectively. The specific antibody for PRRSV and PCV2 was measured using ELISA. PRRSV was not detected on 0 days post-weaning (dpw). The specific antibody for PRRSV began to increase as the concentration of PRRSV in serum increased, and the level of PRRSV then tended to decrease. PCV2 was detected in 12 of 28 pigs on 0 dpw. The concentration of PCV2 and the specific antibody for PCV2 showed a similar tendency to those of PRRSV. The correlation analysis suggests that a decline in the daily weight gain coincided with an increase in the PRRSV concentration. Pigs with a higher antibody titer against PRRSV or PCV2 on 0 dpw showed the lower level of PRRSV or PCV2, respectively.     

一步法多重RT-PCR检测猪圆环病毒2型和猪繁殖与呼吸道综合征病毒

根据猪圆环病毒2型（PCV2）的ORF2和猪繁殖与呼吸道综合征病毒（PRRSV）ORF7相对保守区序列分别设计了两对引物PH1／PH2和PT1／PT2，将PCV2和PRRSV细胞毒按1：1混合，设为模拟样品，采用病毒基因组DNA／RNA提取试剂盒同时提取PCV2 DNA和PRRSVRNA核酸，利用2对引物进行一步法多重RT-PCR。结果同时得到与实验设计相符的560bp（PCV2）和398bp（PRRSV）特异性扩增条带，而对其他5种猪病原的扩增均为阴性。敏感性试验表明，建立的一步法多重RT-PCR方法可检测出10ngPCV2 DNA和5ngPRRSVRNA。     

PRRSV与PCV2体外共感染对猪肺泡巨噬细胞免疫学功能的影响

制备猪肺泡巨噬细胞,分别接种PCV2、PRRSV、PCV2 PRRSV(先接种PCV2,12h后接种PRRSV)、PRRSV PCV2(先接种PRRSV,12h后接种PCV2)、PRRSV/PCV2(同时接种)和对照组。接种后不同时间观察细胞病变(CPE),并用real-time PCR和IFA方法检测PRRSV和PCV2滴度,INF-α、INF-γ、TNF-α、IL-8和IL-10的mRNA。结果为:①PRRSV能在PAM中增殖,有CPE;PCV2在PAM中感染率较低,无CPE。②PRRSV对PCV2增殖无明显影响。PCV2先于或同时与PRRSV感染对PRRSV的复制具有抑制作用,而PCV2后于PPRSV感染,可促进PRRSV增殖。③PCV2单独感染PAM后能促进INF-α、INF-γ、IL-8和IL-10的大量表达,对TNF-α的表达量影响不大。④PCV2与PRRSV混合感染,尤其是PCV2后于PRRSV感染后,TNF-α、IL-8和IL-10的表达量与单感染组相比明显增加,而INF-γ的表达量明显受到抑制。实验结果表明,PCV2感染时间对PRRSV的增殖影响不同,PRRSV感染后如果再感染PCV2,可以明显促进PRRSV病毒增殖;两种病毒共同刺激了TNF-α、IL-8和IL-10的大量表达,抑制了抗病毒因子INF-γ的表达,从而可能抑制体液免疫和细胞免疫,加重了病理学免疫应答。     

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒感染仔猪外周血细胞的动态变化

目的是通过检测HP-PRRS仔猪外周血细胞数量,探讨HP-PRRSV致病机制。方法是以HuN4株感染60日龄长白仔猪,应用分子生物学技术、全自动血液分析仪,对感染PRRSV仔猪外周血病毒载量、血细胞数量进行检测。结果显示PRRSV感染仔猪外周血病毒载量超过103copies/mL,WBC显著下降(P<0.05),RBC、HGB、HCT表现出周期性减少和增多(P<0.05),PLT显著下降(P<0.05);相关性分析表明,PRRSV载量对数值与WBC、PLT呈现中度负相关(0.40相似文献