两优932中不同串粉混杂株型的DNA指纹分析

采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳结合快速银染检测,利用筛选到的5对SSR引物建立了两优932的6种不同串粉混杂株型的DNA指纹图谱。分析结果表明,6份材料的SSR指纹不同,5对SSR引物区分这6份材料的能力也各不相同,其中RM277的区分能力最差,在4份材料中扩增出与真杂种F1相同的带,RM287和RM302的区分能力最强,在4份材料中都扩增出与真杂种F1不同的带型。最后根据区分特异带与真杂种F1带型的难易程度,确定RM302为鉴定两优932种子纯度的首选引物。     

利用SSR标记鉴定南校969杂交一代种子纯度

为了建立一套便捷、准确、稳定的玉米种子纯度鉴定方法,本研究以南校969玉米杂种一代及其亲本为材料,对20对均匀分布于玉米染色体上的SSR引物进行筛选,SSR引物phi085适合该品种纯度鉴定。对利用幼嫩胚芽和干种子为材料提取DNA的实验效果进行比较,建立了一套利用SSR标记技术简便高效进行玉米杂种一代纯度鉴定的技术体系。研究结果证明,利用玉米幼嫩胚芽和干种子胚提取DNA,通过一对SSR引物扩增和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,可以方便地进行玉米杂交种纯度鉴定。     

利用清蛋白PAGE技术鉴定甜玉米杂交种初报

利用改进的聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对7个甜玉米杂交种的清蛋白进行分析。结果表明,甜玉米种子清蛋白存在一定的多态性,每个品种都有各自独特的清蛋白PAGE“指纹”。利用该技术对7个不同甜玉米杂交种的种子纯度进行了室内检验,同时利用田间种植鉴定法进行了测定,通过对其中5个杂交种的电泳纯度和田间纯度进行相关分析,二者达显著水平（r=0.9408）,说明改进的聚丙烯酰胺凝胶电泳技术用于甜玉米种子纯度鉴定是可行的,可用于甜玉米杂交种纯度鉴定。     

利用芯片毛细管电泳检测技术鉴定玉米种子纯度的研究

选用玉米杂交种先玉335、郑单958及其亲本自交系PH6WC、PH4CV、郑58和昌7-2作为试验材料,采用SSR检测技术结合芯片毛细管电泳检测技术,筛选出适用于鉴定先玉335和郑单958种子纯度的特异引物umc2105、bnlg2291、bnlg161。     

不同检测方法对甜菜ISSR引物多态性的影响

为了探讨不同检测方法对甜菜ISSR引物扩增效果的影响以及各方法的优缺点,笔者应用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和琼脂糖凝胶电泳两种检测方法对甜菜ISSR 引物扩增效果进行了检测。利用12个不同的甜菜品种,对10 个ISSR引物进行扩增,分别采用6%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、1%的琼脂糖凝胶电泳以及2%的琼脂糖凝胶电泳对ISSR-PCR的扩增产物进行分离。结果表明：6%的聚丙烯酰胺凝胶电泳无论是检测的总条带数还是多态性条带数均远高于琼脂糖凝胶电泳,且条带清晰,易于识别,而2%的琼脂糖凝胶电泳检测的条带数高于或等于1%的琼脂糖凝胶电泳,且条带更易于识别,因此,对于利用ISSR 引物进行QTL定位、指纹图谱构建以及遗传多样性分析时,推荐使用6%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,而对于种子纯度鉴定以及需要对ISSR扩增产物进行测序,则推荐使用2%的琼脂糖凝胶电泳。     

正确识别电泳谱带 快速测定玉米种子纯度

正确识别电泳谱带快速测定玉米种子纯度河北省保定市种子监督管理站刘素萍杂交玉米种子纯度是影响玉米产量的重要因素，也是在种子检验中划分种子质量等级的主要指标。在鉴定杂交玉米种子纯度方法上，目前常采用传统的田间种植鉴定法和刚兴起的蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳法...     

毛细管与聚丙烯酰胺凝胶电泳检测甜菜SSR位点的比较研究

为了探究毛细管与聚丙烯酰胺电泳方法的适用情况，比较其优缺点。本研究以8个甜菜栽培种资源为材料，选择8个SSR位点，分别使用聚丙烯酰胺凝胶电泳银染检测和毛细管电泳荧光检测每个位点的多态性，并对这两种方法的检测结果进行了比较。毛细管电泳荧光标记法可以准确的知道DNA片段的分子大小；PAGE电泳只能用肉眼与Marker比较估测得出大致分子量，不能得出准确分子量。8对引物两种检测方法的匹配比率分别是75%、87.5%、50%、75%、25%、100%、37.5%、50%。研究结果证明，两种检测平台数据整合存在较大差异。检测结果与引物是否是单拷贝、引物多态性，稳定性等因素有直接关系。测序检验结果表明，样品较少时利用PAGE电泳的方法来检测SSR位点的多态性，既能节省成本又能节省时间，还能保证检测结果的准确性。     

玉米种子蛋白质电泳纯度鉴定之管见

玉米种子蛋白质电泳纯度鉴定之管见河南省周口地区种子管理站（４６６００２）李怀记电泳技术是３０年代发明的一种生化分析技术，６０年代研究用于农作物品种鉴定，在我国种子检验室推广应用也不过是近几年的事。当前品种鉴定较常用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）。...     

不同凝胶电泳法鉴定玉米种子纯度的比较分析

本文采用蛋白质凝胶电泳、醋酸尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳与田间种植鉴定方法分别鉴定了１８个玉米种子样品的纯度。结果表明,醋酸尿素聚丙烯酰胺电泳鉴定结果与田间种植鉴定结果的相关关系不显著,而蛋白质凝胶电泳与田间种植鉴定结果显著相关,相关系数达０．７６９,确定了回归方程为ｙ＝０．４７５＋０．５１９ｘ。说明利用蛋白质凝胶电泳法鉴定玉米种子纯度是可靠的。     

玉米杂交种及其亲本自交系的生化指纹鉴定

本试验以浙单9号等五个玉米杂交组合及其亲本自交系为材料,进行种子盐溶蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳等多种电泳鉴定方法的研究,以揭示玉米杂交种及其亲本自交系的“生化指纹”(biochenucal fingerprint),以及筛选出适合于玉米杂交种及其亲本自交系真实性和纯度鉴定的方法。结果表明,各供试玉米杂交种及其亲本自交系都具有相应的、唯一的种子盐溶蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳所显现的生化指纹。对于有些组合。玉米芽鞘和叶片绿色组织过氧化物酶同工酶电泳图谱存在阴极第4、第5酶带差异,因这两条酶带的差异稳定,并且重现性好,故能用过氧化物酶同工酶技术对其进行有效地鉴定。上述两种方法,尤其是前者,因技术要求不高,费用低,快速及重现性好等特点,能满足我国目前种子检验室日常玉米品种纯度快速测定工作的要求,具育良好的应用前景。     

杂交玉米及其亲本品种鉴定和纯度分析技术

前言该文对现行的用于玉米杂交种及其亲本品种及纯度鉴定的生化技术，同功酶电泳法，玉米醇溶蛋白等电聚胶电泳法，醇溶蛋白高压液相色谱法，蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳法，进行了系统比较和客观评价。并介绍了玉米蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳新系统作为玉米品种鉴定和纯度分析手段在我国种子系统实际应用的可行性。1同功酶电泳法：经过20多年的不懈努力，同功酶电泳法这个用于玉米遗传学研究的方法被用作玉米品种和纯度的鉴定。这种方法比形态学方法的投入要少得多，而且速度也快。在许多国家都乎用此方法作为玉米品种和纯度的鉴定，而且取得…     

甜菜DAMD引物的筛选及不同凝胶系统对扩增产物多态性的影响

为了筛选适宜于甜菜品种纯度鉴定的DAMD引物,笔者利用12 个不同的甜菜品种分别对26 条DAMD引物进行扩增,并分别采用6%聚丙烯酰胺凝胶电泳和2%的琼脂糖凝胶电泳对扩增产物进行检测。结果表明,从26 条DAMD引物中筛选出16 条扩增清晰的引物,这16 条引物共扩增出139 条带,其中多态性条带为122 条,多态性百分比为87.7%,这16 条引物可以作为甜菜品种纯度和真实性鉴定的核心引物,同时发现聚丙烯酰胺凝胶电泳与琼脂糖凝胶电泳的检测结果差异不大,而琼脂糖凝胶具有制作方便、检测简单以及不使用任何有毒药剂等优点,推荐甜菜DAMD扩增产物的检测使用琼脂糖凝胶电泳。     

两种凝胶电泳系统对SSR标记多态性的影响

利用 35个SSR引物和 14个玉米自交系直接比较了 3%Metaphor琼脂糖凝胶和 12 %聚丙烯酰胺凝胶电泳对SSR位点多态性水平的影响。结果表明 ,两种凝胶系统检测出的等位基因数目和基因多态性水平存在显著差异 ,12 %聚丙烯酰胺凝胶在区分微小差异片段能力上明显高于 3%Metaphor琼脂糖凝胶。另一方面在两种电泳检测系统下 ,14个自交系之间的遗传相似系数相关性 (r =0 516)达到了极显著水平 (P <0 0 1)。在 10个具有最大多态性信息量的SSR引物中 ,8个在两种凝胶系统中保持相同。利用 8个引物可以对供试自交系进行初步鉴定。笔者认为 ,3%Metaphor琼脂糖凝胶电泳比较适合在遗传作图或基因定位研究中应用 ;而在品种指纹图谱分析或遗传多样性研究中 ,应采用 12 %聚丙烯酰胺凝胶电泳作为检测工具     

聚丙烯酰胺同功酶电泳法测定玉米种子纯度分离技术

聚丙烯酰胺同功酶电泳法测定玉米种子纯度分离技术山西省原平市种子公司（０３４１００）史耀先亢银平用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定种子的纯度,是一项先进的技术,现已编入国家新的种子检验规程中。用该项技术鉴定简便、快捷、准确且成本低。现将酯酶同功酶的分离技术作如下...     

检测方法对甘蓝和大白菜品种RAPD标记鉴别多态性的影响

分析了琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳2种检测方法对甘蓝和大白菜品种RAPD标记鉴定多态性水平的影响.用12个随机引物扩增了14个甘蓝品种,琼脂糖凝胶电泳检测的结果为平均每个引物产生4.5条扩增带,其中1.5条具有多态性,多态性频率为33.3％.同时对产生条带最多的引物(S149)所扩增的产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,结果检测到了30条清晰可见的扩增带,其中19条具有多态性,为前者的6倍,可以完全鉴别14个甘蓝品种.用5个随机引物扩增了23个大白菜品种,用两种检测方法同时检测了扩增结果.结果表明,琼脂糖凝胶电泳检测的平均多态频率为30％,聚丙烯酰胺凝胶电泳检测平均多态频率为61％,后者为前者的两倍.因此,在使用RAPD标记进行甘蓝和大白菜品种鉴别时,聚丙烯酰胺凝胶电泳检测方法能大大提高检测效率.     

利用微卫星标记鉴定两系杂交稻两优培胜的种子纯度

从100对水稻SSR引物中筛选到5对表现共显性标记的SSR引物。通过进一步筛选以培矮64S为母本的杂交稻组合，获得一个对两优培胜特异性的引物RM127（SSR标记），该引物只在两优培胜中扩增出“杂合”带型，在其他37个两系杂交稻组合、不育系和常规品种中均只扩增出1条带（纯合带型）。利用该微卫星标记对两优培胜的商品种子进行了纯度鉴定，其检测结果与田间种植鉴定结果完全一致。研究结果初步表明微卫星标记技术应用于两系杂交稻种子纯度鉴定具有十分显著的商业潜力。     

蛋白质电泳法检验玉米种子纯度常见问题分析

玉米蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳法是指利用电泳技术对备检样品的种子或幼苗的蛋白质进行分离、染色,形成蛋白质电泳谱带的差异,并与标准品种相比较,从而鉴定品种的真实性和纯度的一种方法.     

SSR扩增产物检测方法比较及其实验操作注意事项

介绍了琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳和荧光标记毛细管电泳等几种PCR扩增产物检测的方法,比较了各自的优缺点,指出了应用这些方法实验操作过程中的注意事项,建议采纳试验结果精确度高、操作简便、高效的荧光标记毛细管电泳方法.     

甘蓝型双低油菜杂交种丰油10号纯度的SSR鉴定

品种纯度影响品种的一致性和稳定性,是品种鉴定的一项重要指标。为建立甘蓝型油菜杂交种丰油10号的SSR标记纯度鉴定方法,以丰油10号及其亲本为材料,利用SSR荧光标记与毛细管电泳相结合的方法,在128对SSR引物中筛选出2对可用于丰油10号纯度鉴定的引物。2对SSR引物对丰油10号的纯度鉴定结果为85.64%,与田间表型纯度鉴定的结果87.18%相比,纯度值非常接近,说明筛选的SSR标记可用于丰油10号杂交种纯度鉴定。     

甜瓜种子蛋白多态性与品种纯度快速鉴定方法研究

以杂交伽师瓜1号、雪里红、9808的杂交种及其父母本为实验材料,探讨了用种子蛋白多态性快速鉴定甜瓜杂交种品种真实性与纯度的方法及可行性.电泳结果表明,甜瓜种子中虽然含有一定量的蛋白,但含量较低,而且多态性较差,不同组分的种子蛋白没有特异性谱带,因此,种子蛋白电泳鉴定法不能用于甜瓜杂交种的鉴定.AUG-PAGE(醋酸尿素甘氨酸-聚丙烯酰胺凝胶电泳系统)是一种新的种子蛋白多态性研究方法,其分离胶溶液为10%丙烯酰胺、0.2%甲又双丙烯酰胺、2%冰醋酸、10%尿素、0.4%醋酸钠、0.02%硫酸亚铁的条件下,以1.5%冰醋酸为电极液,具有简单、快速、分离效果好等特点.