鸭胚卵内注射rhIGF-1对其出壳后卵泡抑素基因表达及胸肌发育的影响

本研究通过卵内注射技术,注射120、100、80和0(对照组)ng.mL-1的重组人胰岛素样生长因子(rhIGF-1)到孵化中的鸭胚蛋白中,并检测2日龄雏鸭胸肌发育和卵泡抑素(FST)表达的情况,探讨不同浓度rhIGF-1对FST表达及鸭胸肌发育的影响。结果表明,卵内注射不同浓度的rhIGF-1对雏鸭体质量的影响不显著(P>0.05);但雏鸭胸肌质量、胸肌率随rhIGF-1注射浓度的增加而升高,120 ng.mL-1处理组胸肌质量、胸肌率相对对照组有显著差异(P<0.05);120 ng.mL-1的rhIGF-1处理组肌纤维直径和横切面积最大,显著高于对照组(P<0.05);FST基因在雏鸭胸肌中的表达水平也随rhIGF-1的浓度增大而升高,其中以120 ng.mL-1处理组FST基因表达量最高,显著高于其它各处理组(P<0.05)。结果表明IGF-1对FST的调控作用以浓度依赖的方式进行,高浓度的IGF-1导致FST高表达并促进肌肉发育。     

胚内注射胰岛素样生长因子-1可促进雏鸭肌肉发育

四川农业大学动物遗传育种研究所丁庆峰等通过胚内注射技术,将120、100、80和0ng/mL重组人胰岛素样生长因子(rhIGF-1)注射到孵化中的鸭胚蛋白中,并检测2日龄雏鸭胸肌发育和卵泡抑素(FST)表达情况,探讨不同浓度rhIGF-1对FST表达及鸭胸肌发育的影响。结果,胚内注射不同浓度的rhIGF-1对雏鸭体     

鸭发育早期骨骼肌NFATc3 mRNA差异表达及其与生长性状的相关性研究

为研究不同品种鸭胚胎期和出雏早期骨骼肌中NFATc3基因mRNA表达规律及其与生长发育的相关性,运用荧光绝对定量PCR技术检测了生长速度差异较大的高邮鸭和金定鸭13、17、21、25、27胚龄和7日龄胸肌和腿肌中NFATc3 mRNA的表达水平。结果表明胸肌和腿肌NFATc3 mRNA在两鸭品种中均具有相似的表达模式,不存在品种效应,胸肌和腿肌NFATc3 mRNA的表达均是13胚龄时表达量最高,显著高于其它各胚龄或日龄(P0.05);相关性分析结果表明两个品种鸭骨骼肌NFATc3 mRNA表达量与其组织重、体重均呈极显著负相关(P0.01),而与肌肉组织中IGF-Ⅰm RNA的表达量呈极显著正相关(P0.01)。鸭骨骼肌中NFATc3主要在早期的肌纤维生成中起作用,与IGF-Ⅰ可能共同参与了对骨骼肌生长发育的调节。     

高邮鸭和金定鸭胸肌早期发育及MyoD1基因表达分析

 
采用qPCR分析生肌调节因子MyoD1基因在高邮鸭和金定鸭胚胎期及初生早期(13、17、21、25、27胚龄和出雏后7日龄)胸肌发育中的表达模式以及与胚胎和胸肌发育的相关性。结果表明,MyoD1 mRNA在两个品种鸭胸肌早期发育中表现出一致的表达规律,均呈“波浪形”,在13胚龄时表达量相对较高,17胚龄时下降,21胚龄时上升到最高,随后下降,出雏后又维持较高水平;品种间比较结果显示除了在25胚龄时金定鸭胸肌中MyoD1 mRNA表达量稍低于高邮鸭,在其他所检测的胚龄/日龄中,金定鸭胸肌中MyoD1 mRNA表达量均高于高邮鸭胸肌中的表达量(P>0.05);高邮鸭胸肌MyoD1 mRNA表达与胚胎和胸肌发育无显著相关性,而金定鸭胸肌中MyoD1 mRNA的表达与其胚胎和胸肌发育呈强负相关(P胚重=0.048;P胸肌重=0.006)。MyoD1基因参与鸭胚胎期及出雏早期胸肌的发育,胸肌中MyoD1基因表达分析研究为进一步深入研究MyoD1基因在胚胎期胸肌发生过程及其调控机理中的功能提供一定的理论依据     

鹅胰岛素样生长因子-Ⅰ基因的克隆及其mRNA在组织中的表达量变化

利用半定量反转录聚合酶链反应（RT—PCR）克隆了黑龙江籽鹅IGF-Ⅰ基因，并检测了生长期间该基因mRNA在各组织中的表达量变化。结果表明，鹅IGF-Ⅰ基因与鸡、鸭IGF-Ⅰ基因的同源性分别为97．6％、99．3％；鹅肝组织中IGF-ⅠmRNA的表达水平在30日龄和60日龄较高，而30日龄的表达量极显著高于22、28日龄鹅胚和1日龄籽鹅，显著高于10日龄雏鹅；30日龄雏鹅IGF-ⅠmRNA在肝、卵巢、胸肌、肺、脾、腿肌、垂体、肌胃、肾、心等组织中都有表达，其中肝、卵巢、胸肌、肺的表达量较高。     

皖西白鹅与朗德鹅下丘脑-垂体-肌肉生长轴基因表达的比较

选择90日龄的皖西白鹅和朗德鹉各20只,取下丘脑、垂体、胸肌组织.采用半定量逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)的方法,以β-actin为内标,对下丘脑中的生长激素释放激素(GHRH)、垂体中的生长激素(GH)、肌肉组织中生长激素受体(GHR)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、胰岛素样生长因子-Ⅰ型受体(IGF-1R)的mRNA表达量分别进行比较分析,并分别与鹕的胸肌重及胸肌率进行相关性分析.结果表明:皖西白鹩的屠体质量胸肌重与朗德鹩无显著差异;皖西白鹅垂体中GH的mRNA表达低于朗德鹅(P<0.05),而下丘脑中GHRH和肌肉中GHR、IGF-1、IGF-1R mRNA在两品种间无显著差异;胸肌重与IGF-1 mRNA的表达显著正相关(r=0.57,P<0.01),而与GHR、IGF-1R mRNA无显著的相关性.结果提示,鹅肌肉的生长主要取决于GH的靶机制,而与GH无关.     

鸭胚骨骼肌生肌调节因子MyoD1和Myf5发育性变化研究

本研究采用Real-timePCR分析生肌调节因子MyoD1和Myf5在不同鸭品种(高邮鸭和金定鸭)胚胎期及初生早期(13、17、21、25、27日胚龄和出雏后7日龄)骨骼肌发育中的表达模式以及表达差异。结果表明,MyoD1mRNA和Myf5mRNA在两个品种鸭胸肌早期发育中表现出一致的表达规律,均呈"波浪"型;在腿肌早期发育中均呈近似"反√"型的表达趋势,在27日胚龄时表达量最低,出生后7日龄表达量又上升,但MyoD1mRNA的表达量仅有小幅增加,与27日胚龄的表达量差异不显著(P>0.05),而Myf5mRNA的表达量有大幅增加,与27日胚龄的表达量差异极显著(P<0.01),胸肌和腿肌中两基因的mRNA表达量在同一胚龄不同品种间差异均不显著。结果提示:骨骼肌中MyoD1和Myf5基因表达具有显著的时空性,但不存在品种差异,为进一步深入研究MyoD1和Myf5基因在胚胎期骨骼肌发生过程及其调控机理中的功能提供一定的理论依据。     

高邮鸭的饲养技术规程

正高邮鸭又称高邮麻鸭,是江苏里下河地区劳动人民经长期选育而形成的兼用型地方优良品种,高邮鸭以其蛋肉品质优异,善产双黄蛋而闻名于世。已列入国家级畜禽品种资源保护名录。为了加强高邮鸭种鸭的饲养管理,笔者经过前期科学研究,制定高邮鸭饲养技术规程,供广大的养殖户朋友参考。1育雏前期饲养管理1.1进雏前准备进雏前一周完成育雏室及用具的冲冼、维修、消毒工作,做好进雏准备。准备好饲料和药品、垫草地等。     

miR-21在鸭胚胎期胸肌发育中的功能研究

旨在通过研究鸭miR-21的分子特征、时空表达模式以及对鸭骨骼肌卫星细胞的增殖与分化的影响,为探索骨骼肌发育机制提供支撑。本研究选取180枚(98±5)g鸭蛋,相同条件孵化。从孵化第11天到第27天每天取3枚鸭蛋(分别表示为:E11、E12、E13……E26、E27),无菌状态下逐只采集鸭胚胸肌样品。E27时另取3只鸭胚逐只采集腿肌、心、肝、肾、肌胃、小肠、腹脂和皮脂。混合酶消化法和差速贴壁法分离和纯化骨骼肌卫星细胞,骨骼肌卫星细胞增殖、分化时期分别过表达和干扰miR-21表达,利用荧光定量、蛋白杂交、EdU检测及流式细胞术等检测miR-21对鸭骨骼肌卫星细胞增殖和分化的影响。qRT-PCR结果显示,miR-21的表达随着孵化时间的增加而增加,E19天时到达最高,然后逐渐降低;E27时,miR-21在肝中的表达量最高。在增殖的鸭骨骼肌卫星细胞中过表达miR-21,荧光定量PCR检测CDK2和CyclinD1基因的mRNA表达量分别显著(P<0.05)和极显著增加(P<0.01),EdU检测阳性细胞数目显著增加(P<0.05),流式细胞仪检测发现G2期细胞数目极显著降低(P<0.01)、S期细胞数量显著增加(P<0.05)。在增殖的骨骼肌卫星细胞中,干扰miR-21表达,所得结果相反。在分化的鸭骨骼肌卫星细胞中过表达miR-21,qRT-PCR检测MyoG和MyHC基因的mRNA表达量均极显著增加(P<0.01);蛋白杂交(WB)检测结果显示,MyoG蛋白表达显著增加(P<0.05),MyHC蛋白表达极显著增加(P<0.01)。免疫荧光检测发现,MyHC阳性细胞数和10核以上的肌管数都极显著增加(P<0.01)。在分化的鸭骨骼肌卫星细胞中,干扰miR-21的表达,所得结果相反。结果表明,miR-21具有促进成肌细胞鸭骨骼肌卫星细胞增殖和分化的作用。     

日粮能量、蛋白水平对高邮鸭育雏期生长性能的影响

将高邮鸭蛋用品系0日龄鸭360只,采用3×3因子设计了9个不同能量水平(11.70、11.90和12.12MJ/kg)、蛋白水平(18.0、19.0和20.0%)的日粮,分别饲喂9个处理组鸭,每个处理组4个重复,每个重复10只,进行28天的饲养试验,并结合屠宰试验进行高邮鸭蛋鸭育雏阶段日粮能量、蛋白需要水平的初步探讨,试验结果表明:在高邮鸭蛋用品系鸭0～28日龄的育雏期内,日粮能量水平为11.70MJ/kg和蛋白水平在18%左右,能更好的发挥高邮鸭的生长性能.     

CSRP3基因在鸡胚胎期胸肌、成肌细胞中的表达及其与胸肌质量的相关性研究

为研究CSRP3在鸡骨骼肌早期生长发育中的作用，本研究通过实时荧光定量PCR技术探讨了CSRP3mRNA在生长速度不同的花山鸡和清远麻鸡胚胎期胸肌中以及体外培养的鸡成肌细胞中的表达，并分析2个品种鸡胚胎期胸肌中CSRP3 mRNA的表达与其胸肌质量、体质量的相关性。体内外研究结果均表明，CSRP3基因的表达随着鸡骨骼肌肌纤维分化进程逐渐升高；同一胚龄时，比较CSRP3mRNA在2个品种鸡胸肌中的表达，均是慢生型清远麻鸡显著高于快大型花山鸡；相关性结果表明，2个品种鸡胚胎期胸肌中CSRP3mRNA表达量与其胸肌质量、体质量均呈正相关，与胸肌质量的相关性达极显著水平。结果提示，鸡胸肌中CSRP3基因的表达具有品种特异性，与胸肌肌纤维的生长和分化有着密切联系。     

胚蛋给养蛋氨酸对朗德鹅血液生化指标和胸肌发育的影响

本试验采用胚蛋注射技术研究孵化后期补充外源性营养物质蛋氨酸对血液生化指标和胸肌发育的影响。选取300枚种蛋随机分为2组,每组3个重复,每个重复50枚种蛋。在孵化第24天进行蛋氨酸注射,对照组不做任何处理,处理组注射1.5 m L蛋氨酸营养液(Met 5 mg/m L、Na Cl 7.5 mg/m L)。出雏后,每个重复选取体重均匀和健康的雏鹅20只进行饲养试验,饲养28 d。结果表明:胚蛋给养蛋氨酸显著提高了朗德鹅的初生重和7 d体重(P0.05),处理组显著提高了0、7 d胸肌重(P0.05),有提高0 d胸肌指数的趋势(0.05≤P0.10),并且显著提高了0、7 d的肌纤维直径(P0.05);处理组有提高雏鹅血清中总蛋白含量的趋势(0.05≤P0.10),显著提高了白蛋白含量并降低了血清尿酸含量(P0.05);处理组显著提高了Myf5的相对表达量并降低了MSTN的相对表达量(P0.05)。试验结果显示,胚蛋给养蛋氨酸可通过调节Myf5和MSTN的m RNA相对表达量来促进胸肌的发育,促进了机体的生长。     

蓝刺头多糖B对胰岛素抵抗L6骨骼肌细胞耗糖量及AMPK表达的影响

为了探究蓝刺头多糖B(ETPB)对棕榈酸(PA)诱导的胰岛素抵抗L6骨骼肌细胞耗糖量及腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)表达的影响,体外培养大鼠L6成肌细胞,诱导分化为骨骼肌细胞并进行分化鉴定;采用CCK8法检测细胞存活率,筛选PA和ETPB的安全浓度;葡萄糖氧化酶法检测各组细胞耗糖量;实时荧光定量PCR法检测AMPK mRNA基因表达水平,Western blot法检测AMPK蛋白表达量。结果显示:PA诱导L6骨骼肌细胞发生胰岛素抵抗的最适造模浓度为0.4 mmol/L,ETPB的最大安全浓度为200 mg/mL;ETPB可显著提高胰岛素抵抗L6骨骼肌细胞耗糖量(P<0.05),上调AMPK mRNA表达水平,增加AMPK蛋白表达量。提示:ETPB可以通过提高AMPK基因及蛋白表达而促进胰岛素抵抗L6骨骼肌细胞耗糖,这可能是ETPB改善骨骼肌胰岛素抵抗的作用机制之一。     

胚蛋注射蛋氨酸对朗德鹅生产性能和血液生化指标的影响

本试验旨在研究胚蛋注射蛋氨酸(Met)对朗德鹅生产性能和血液生化指标的影响。将300枚种蛋分为2组,每组3个重复,每个重复50枚种蛋。在孵化第24天进行蛋氨酸胚蛋注射,对照组不进行任何处理,处理组注射Met 5 g/L,Na Cl 7.5 g/L的营养液1.5 m L。出雏后,每个重复选取体重均匀和健康的雏鹅20只进行饲养试验,饲养期28 d。结果表明:处理组对孵化率无显著影响(P0.10),但显著提高朗德鹅初生重和1~14日龄平均日增重(P0.05),同时显著降低了饲料增重比(P0.05);处理组对卵黄囊和肝脏指数无显著影响(P0.10),但显著提高了雏鹅第28天胸肌指数(P0.05);处理组显著提高了雏鹅第14天血清中总蛋白的含量(P0.05),同时有提高血清中白蛋白含量的趋势(0.05≤P0.10);在第28天,处理组有提高雏鹅血清中总蛋白和白蛋白的趋势(0.05≤P0.10);处理组显著降低了雏鹅第14和28天血清中尿酸的含量(P0.05)。试验结果显示,在孵化后期种蛋注射蛋氨酸可显著提高朗德鹅初生重和改善1~14日龄生产性能,其可能与鹅体内氨基酸利用和蛋白质沉积提高有关。     

金定鸭胚胎期骨骼肌发育模式及MRFs家族基因表达变化研究

MRFs (Myogenic regulatory factors,MRFs)家族包括肌分化因子MyoD、肌细胞生成素(myogenin)、生肌决定因子Myf5和Myf6,它们参与肌肉发生发育的各个环节.研究采用Real-time PCR方法研究了金定鸭胚胎期13、17、21、25和27日胚龄MRFs家族基因在骨骼肌中的表达变化,并分析其表达变化与胚重、骨骼肌发育的相关性.金定鸭胚重及骨骼肌重发育模式显示胚重在胚胎期呈持续增加趋势,但胸肌在胚胎中后期显示出较腿肌滞后的增重变化.MRFs家族基因在胚胎期骨骼肌中均能检测到表达,MyoD mRNA在21日胚龄前腿肌中的表达量高于胸肌,而在胚胎发育后期(25及27日胚龄)胸肌中表达量渐渐高于腿肌.胸、腿肌中myogenin mRNA的表达与胚重、胸、腿肌发育重量变化均呈强的负线性相关.上述研究结果首次揭示了鸭胚胎期骨骼肌中MRFs家族基因表达具有显著的时空性,推测MyoD mRNA在胸、腿肌中的表达变化可能与胸、腿肌增重表型差异有关,研究结果为进一步深入研究MRFs家族基因在胚胎期骨骼肌发生过程及其调控机理中的功能提供一定的理论依据.     

饲粮苏氨酸水平对北京雏鸭生长性能、胴体品质、免疫机能和血清激素的影响

本试验旨在研究饲粮苏氨酸水平对北京雏鸭生长性能、胴体品质、免疫机能和血清激素的影响。选取320只1日龄健康的北京鸭公鸭,随机分为5组,每组8个重复,每个重复8只。各组饲粮中苏氨酸水平实测值分别为0.65%(对照)、0.69%、0.81%、0.88%和0.98%,试验期为21 d。结果表明:1)饲粮苏氨酸水平对雏鸭平均日增重和平均日采食量有极显著影响(P0.01),对照组雏鸭平均日增重和平均日采食量显著低于其他各组(P0.05)。2)饲粮苏氨酸水平对雏鸭胸肌率有显著影响(P0.05),对照组雏鸭胸肌率显著低于0.69%、0.81%、0.88%水平组(P0.05)。3)饲粮苏氨酸水平对雏鸭法氏囊指数、脾脏指数、胸腺指数影响不显著(P0.05)。饲粮苏氨酸水平对雏鸭法氏囊重和胸腺重有极显著影响(P0.01),对照组雏鸭法氏囊重显著低于其他各组(P0.05),对照组雏鸭胸腺重显著低于0.81%、0.88%水平组(P0.05)。4)饲粮苏氨酸水平对雏鸭血清三碘甲腺原氨酸(T3)含量有显著影响(P0.05),0.81%水平组的血清T3含量最高,显著高于对照组和0.98%水平组(P0.05)。5)苏氨酸需要量分别与平均日采食量、平均日增重和胸肌率呈二次曲线关系,并当三者达到最高值时北京雏鸭的苏氨酸需要量分别为0.860%、0.852%和0.837%。由此可见,饲粮中添加适宜水平的苏氨酸可提高雏鸭生长性能、胴体品质和免疫机能。     

还原型谷胱甘肽对肉鸡生长及血清IGF-1水平、组织IGF-1 mRNA表达的影响

9日龄黄羽雌性肉鸡1 000只随机分为A、B、C、D 4个组,每组设5个重复,每个重复50只。在A、B、C、D组的日粮中分别添加剂量为0、80、120、160mg/kg的还原型谷胱甘肽(GSH),饲养期84 d。观察GSH对肉鸡生长性能、血清类胰岛素生长因子1(IGF-1)、T3、T4水平以及组织IGF-1 mRNA表达的影响。结果表明,(1)添加GSH的鸡只血中GSH水平显著高于对照组(A组);(2)添加GSH的鸡只平均体质量和平均日增重均高于A组,其中B组显著高于A组;(3)添加GSH的鸡只血中IGF-1水平显著高于A组,血中T3水平明显升高,T4水平有升高趋势;(4)各试验组肝脏IGF-1 mRNA的表达水平有所增高,但不明显。35d时,C组胸肌组织的IGF-1 mRNA表达水平显著性高于A组。结果提示,肉鸡饲粮中添加GSH可增强肝脏IGF-1的分泌和肌肉组织IGF-1 mRNA的表达,血中IGF-1水平升高,而促进鸡只生长。     

IGF-Ⅱ和IGFBP5基因在鸡胚胎发育过程中腿部肌肉表达模式分析

为了研究胰岛素样生长因子-Ⅱ(IGF-Ⅱ)、胰岛素生长因子结合蛋白5(IGFBP5)在鸡胚胎腿部肌肉发育过程中的作用,研究采集藏鸡和矮小蛋鸡种蛋孵化第9天、第13天、第20天鸡胚胎的腿部肌肉组织,并利用荧光定量PCR技术检测IGF-Ⅱ、IGFBP5 mRNA的表达水平,同时检测IGF-Ⅰ基因编码区的单核苷酸多态性(SNPs)并采用RFLP方法对筛选到的SNPs进行群体水平分型。结果表明:藏鸡和矮小蛋鸡胚胎腿部肌肉组织在孵化第9天和第13天时IGF-Ⅱ的mRNA表达量均显著高于第20天(P0.05),而2个品种间在孵化第9天、第13天、第20天差异均不显著(P0.05)。IGFBP5 mRNA的表达水平在第9天时藏鸡与矮小蛋鸡均显著高于第13天、第20天(P0.05),矮小蛋鸡IGFBP5第13天的表达量显著高于第20天(P0.05),而藏鸡第13天与第20天相比差异不显著(P0.05),2个品种IGFBP5的表达量均随着孵化时间的延长而逐渐降低,且在孵化第13天时藏鸡的表达量显著低于矮小蛋鸡(P0.05)。在藏鸡和矮小蛋鸡的IGF-Ⅱ的编码区均发现c.345TC SNPs,该SNPs在藏鸡中主要以CC基因型为优势基因型,基因型频率为0.63;而在矮小蛋鸡中主要以杂合子TC基因型为优势基因型,基因型频率为0.67。IGF-Ⅱ腿部肌肉组织的表达水平在鸡胚胎孵化中期(第9天和第13天)显著高于孵化后期(第20天),IGFBP5则是在鸡胚孵化第9天显著高于孵化第13天和第20天,可能是由于孵化中期是腿部肌肉快速发育阶段而后期腿部肌肉基本发育完好,导致IGF-Ⅱ和IGFBP5的表达水平随之变化。     

IGF-1体外调控奶牛成骨细胞骨保护素和核因子κB受体活化因子配体的表达

为了研究胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor,IGF-1)对奶牛成骨细胞骨重建相关因子表达的影响,探讨IGF-1对奶牛成骨细胞形成-吸收的作用,试验采用体外分离培养奶牛成骨细胞,用改良Gomori钙钴法染色鉴定,再以0,1,10,50,100 ng/mL人重组胰岛素样生长因子-1(recombinated human insulin-like growth factor-1,rhIGF-1)干预培养5 d后,半定量RT-PCR法检测成骨细胞骨保护素(osteoprotegerin,OPG)和核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nu-clear factor-κB ligand,RANKL)mRNA的表达,ELISA检测细胞培养上清液OPG蛋白水平。结果表明:1~100 ng/mL rhIGF-1干预5 d,OPG、RNAKL mRNA表达均较未干预组增加,10,50,100 ng/mL组OPG/β-actin、RANKL/β-actin比值显著高于未干预组(P0.05),且在1~100 ng/mL浓度范围内,rhIGF-1呈剂量依赖方式上调OPG蛋白表达,其中10,50,100 ng/mL干预组与未干预组差异显著(P0.05)。说明IGF-1调控奶牛成骨-破骨细胞介导的形成-吸收偶联,促进骨形成,这可能是IGF-1参与奶牛骨代谢性疾病的重要机制之一。     

蛋鸭育雏期的饲养管理要点

正蛋鸭的育雏期一般是从出壳到4周龄。发育良好、体重适中而且健康是蛋鸭优良繁殖性能和高生产潜力发挥的基本条件,而育雏期的饲养管理直接影响雏鸭的成活率、青年鸭的生长发育以及产蛋鸭的生产性能。因此,蛋鸭育雏期的饲养管理在整个饲养过程中具有十分重要的意义。1蛋雏鸭的生理特点1.1生理发育不完全,适应能力差雏鸭体温调节能力差,刚从蛋壳中孵化出来,体温低,绒毛属于针形胎毛不保温,皮下脂肪薄,体温调节能力