我国商业鸡群多种免疫抑制性病毒共感染的研究

在2000～2006年间通过对来自我国4个主要养鸡省区的193个商业鸡群共808只病/死鸡分别进行5种免疫抑制性病毒CIAV、IBDV、MDV、REV和ALV感染情况的调查,结果显示:CIAV、IBDV、MDV、ALV和REV的群阳性率和个体阳性率分别为65.56%和30.94%、49.14%和23.98%、35.63%和12.5%、12.22%和4.29%、12.22%和4.16%,其中被检鸡二重及多重混合感染的总阳性率为31.73%,最常见的共感染形式是MDV CIAV(阳性率为10.02%)和MDV ALV(阳性率为8.50%);7个不同品种鸡被各种病毒的感染率也不尽相同。结果证实,免疫抑制性病毒的感染在4个省区的商业鸡群中普遍存在。     

江苏地区发病鸡4种免疫抑制性病原混合感染的检测

为了解鸡免疫抑制性病原混合感染的流行情况及其感染间相互作用的关系,本研究应用PCR方法对来自江苏地区不同鸡群的376只病鸡进行鸡贫血病毒(chicken anemia virus,CAV)、马立克氏病病毒(Marek’s disease virus,MDV)、网状内皮组织增生症病毒(reticuloendotheliosis virus,REV)和禽白血病病毒(avian leukosis virus,ALV)的检测。结果显示CIAV、MDV、REV和ALV的检出率分别为37.50%、25.00%、12.77%和33.51%,CIAV、MDV、REV和ALV的单一感染检出率分别为15.16%、9.04%、1.60%和12.50%,被检鸡混合感染的总检出率为30.59%,二重感染以CIAV+ALV最为常见,检出率为7.45%,三重感染以CIAV+MDV+ALV最为常见,检出率为3.46%,四重感染检出率为1.06%。4种免疫抑制性病原感染间相互作用的比较经统计学分析表明,CIAV和REV感染间存在相互促进的趋势(P0.01)。结果表明,鸡群免疫抑制性病原的混合感染普遍存在,与临床上鸡群发病率高、多种病原感染、疫苗免疫效果不佳、生长缓慢等密切相关。     

2014年广西地方鸡群病毒性肿瘤病例的检测分析

2014年,广西地区部分鸡群发生了以内脏出现各种肉眼可见肿瘤、生长阻滞、消瘦和采食量下降为特征的病例。通过对病鸡进行肉眼剖检观察,对病料组织分别进行肿瘤病毒PCR检测、DF-1细胞分离培养及其细胞培养上清进行禽白血病病毒(ALV)p27抗原检测,结果显示12批病例中,单独感染ALV的鸡群有5群,单独感染马立克氏病病毒(MDV)的鸡群有1群,ALV与MDV的二重混合感染鸡群有4群,MDV和网状内皮组织增殖病病毒(REV)的二重混合感染的鸡群有1群,ALV、MDV和REV的三重混合感染有1个鸡群。表明ALV的感染及其与其他肿瘤病毒的共感染是当前临床肿瘤病例的主要病因。     

进口白羽肉种鸡禽白血病疫情鉴定

2018年以来,某进口品种肉种鸡发生疑似禽白血病病例,流行范围广,危害严重,为确定该次疫情的病原,本研究从辽宁、山东等地发病鸡场采集55份疑似禽白血病病料样品。病理组织切片观察显示,病料样品肝脏和脾脏均有髓细胞样肿瘤细胞增生。针对禽白血病病毒(ALV)、鸡马立克氏病病毒(MDV)和网状内皮组织增生症病毒(REV)的特异性PCR检测结果显示,55份病料样品中ALV阳性样品12份(21.8%),MDV阳性样品1份(1.82%),REV均为阴性。将12份ALV阳性病料样品经处理后接种DF-1细胞进行病毒分离,ELISA检测结果显示有8份ALV群特异性抗原阳性。ALV多重PCR检测结果表明,8个分离株均为J亚群ALV(ALV-J),测序结果显示,8个分离株之间核苷酸序列同源性为99.5%~100%,与A、B、C、D、E亚群ALV的同源性仅为56.5%~58.8%,与ALV-J的同源性为90.7%~96.6%,进一步表明所有分离株均为ALV-J。上述结果表明,引起该次进口白羽父母代肉种鸡发生禽白血病的病原主要以ALV-J为主,该研究结果为疫情的溯源和有效防控奠定了基础。     

鸡传染性贫血病毒与其他禽免疫抑制性疾病病毒的混合感染

应用多重PCR方法对广西主要养鸡地区的514只可疑鸡传染性贫血与其他禽免疫抑制性疾病临床病／死鸡进行了检测。结果显示，鸡传染性贫血病毒（CIAV）与其他禽免疫抑制性疾病病毒的二重或多重感染率达48．05％；CIAV阳性鸡群中，马立克氏病病毒（MDV）、网状内皮增生症病毒（REV）、禽白血病病毒（ALV）的群阳性率和个体阳性率均明显高于CIAV阴性鸡群，表明CIAV的感染与3种肿瘤病病毒的感染具有明显相关性，其中CIAV与MDV的感染具有明显相互促进作用；被调查鸡群中，传染性法氏囊病病毒（IBDV）和禽呼肠孤病毒（ARV）也有一定的感染率。结果表明,商业鸡群中各种免疫抑制性病毒的混合感染很普遍．与鸡群临床上所表现的生长阻滞、疫苗免疫效果不佳、总的发病率和死淘率增加等密切相关。     

地方品种JS鸡多发肿瘤病的病原学分析

为探究江苏地方品种JS鸡种易发肿瘤病的原因,本研究从病原学方面进行相关分析。通过剖检发现JS鸡疑似发生肿瘤病;观察组织切片发现禽白血病病毒(ALV)、马立克病毒(MDV)引起其的特征性病变;分别应用2对可区分MDV野毒和疫苗毒的鉴别引物、1对ALV群特异性引物、5对可区分不同亚型ALV的鉴别引物,以及3对网状内皮组织增生症病毒(REV)特异性引物对病料样品和细胞培养物进行PCR检测;同时,采用间接免疫荧光试验(IFA)检测培养细胞中的禽REV,ELISA检测细胞上清中ALV-p27抗原。检测结果显示,鉴定出的MDV为血清1型MDV野毒,ALV为J亚型(ALV-J),REV为阴性。采集同群发病鸡血液分离MDV、ALV-J,将获得的病毒株人工接种1日龄SPF鸡,感染后5 d自实验鸡血液中分离到MDV、ALV-J,表明该分离株可感染SPF鸡,具有良好的生物学活性。本研究从JS品种鸡中检测到了致瘤性病毒MDV和ALV-J,这可能是该品种鸡肿瘤病多发的主要原因之一,这一研究结果对JS鸡肿瘤病的防制提供了科学依据。     

鸡传染性贫血病的研究进展

鸡传染性贫血病(CIA)是由鸡传染性贫血病毒(CIAV)引起的一种以雏鸡再生障碍性贫血和全身淋巴组织萎缩为主要特征的病毒性传染病.它和马立克氏病病毒(MDV)、传染性法氏囊病病毒(IBDV)、网状内皮增生症病毒(REV)、禽白血病病毒(ALV)和禽呼肠孤病毒(ARV)是危害养鸡业最常见的免疫抑制性病毒.     

我国部分地区蛋鸡群ALV-J及与REV、MDV、CAV混合感染检测

为了解J亚群禽白血病病毒(ALV-J)及其与禽网状内皮细胞增生症病毒(REV)、马立克氏病病毒(MDV)和鸡传染性贫血病病毒(CAV)的混合感染现象,本研究从宁夏、湖北、广东、山东、辽宁、吉林、黑龙江7个省的39个蛋鸡群收集临床表现和剖检病理变化疑似禽白血病的病料样品184份,采用PCR、病毒分离和IFA检测样品中ALV-J、REV、MDV和CAV。结果表明,7个省蛋鸡场均存在ALV-J感染,病料样品阳性率为60.9%,检测鸡群阳性率为82.1%,与REV、MDV、CAV的混合感染率分别为13.6%、24.5%、22.8%,其中存在较为严重的双重感染(29.0%)和3重感染(18.8%),甚至4重感染(1.7%)。研究结果表明,我国蛋鸡群中普遍存在ALV-J感染,而且与REV、MDV、CAV混合感染严重;提示ALV-J已经可以引起蛋鸡群发病,在临床诊断和致病性研究中,应考虑到多重感染的影响。     

2016年鲁北地区鸡群病毒性肿瘤病例的检测分析

为了解鸡马立克病病毒(MDV)、禽白血病病毒(ALV)和禽网状内皮组织增生症病毒(REV)在鲁北地区鸡群中的感染情况,对来自21个鸡群的送检病例进行了病原核酸的PCR检测.结果显示,MDV阳性率为28.5%,ALV-J阳性率为23.8%,REV阳性率为14.3%,肿瘤病毒的二重感染率为28.6%.结果表明,3种肿瘤病毒在鲁北地区蛋鸡和地方品种鸡群中的感染严重,病毒的混合感染较多.因此,做好MD的疫苗防护,对ALV-J及REV的感染状况要进行定期检测,控制好养殖环境,尽量避免3种肿瘤病毒的继发感染.     

山东省肉种鸡群三种家禽肿瘤性疾病流行病学调查

为调查山东省家禽肿瘤性疾病的流行情况,本研究以血清学、病理组织学、免疫组织化学、病原学等检测手段,在山东省境内17家AA种鸡场进行检测.血清学试验结果显示:马立克氏病病毒(MDV)平均抗原阳性率为1.87%;禽白血病病毒J亚群(ALV-J)和网状内皮组织增生症病毒(REV)平均抗体阳性率分别为9.52%和39.78%;双重及三重感染,MDV+ALV-J、MDV+REV、ALV-J+REV及MDV+ALV-J+REV感染率分别为1.12%、1.21%、3.92%和0.65%.对57羽疑似肿瘤病的病鸡检测显示:MDV、ALV-J和REV的抗体阳性率分别为19.3%、47.37%和57.89%;MDV+ALV-J、MDV+REV和ALV-J+REV的双阳性率分别为1.75%、3.5%和19.3%;无三重感染.病理组织学观察显示:病鸡体内既有各病毒引起的单纯肿瘤,也有双重肿瘤共存的现象.免疫组织化学检测显示,MDV、ALV-J和REV抗原阳性信号在病鸡中的比例分别为38.6%、54.39%和28.07%.PCR检测结果表明:MDV、ALV-J和REV的阳性率分别为43.86%、64.91%和33.33%;MDV+ALV-J、MDV+REV、ALV-J+REV和MDV+ALV-J+REV阳性率分别为15.79%、10.53%、12.28%和7.02%.本研究结果表明,山东省境内AA肉鸡群中仍存在较高的肿瘤性病毒感染率.     

河北省蛋种鸡3种免疫抑制病的感染情况分析

为了解河北省蛋种鸡禽白血病(AL)、禽网状内皮组织增殖症(RE)和鸡传染性贫血(CIA)的感染情况,采集河北省5个地区的7个种鸡场的种蛋997枚以及血清487份,采用ELISA的方法进行ALV p27抗原、REV和CIAV的抗体检测。结果显示,ALV p27抗原的场阳性率为85.71%(6/7),个体阳性率为2.71%(27/997);REV抗体场阳性率为100%(7/7),个体阳性率为11.29%(55/487);CIAV抗体场阳性率为100%(7/7),个体阳性率为100%(487/487)。其中海兰灰ALV p27抗原的阳性率最高,为6.04%,依次为坝上长尾鸡为4.31%,北京油鸡3.33%,太行鸡2.07%,而海兰褐和巴布考克B380未检测出ALV p27抗原。海兰褐REV抗体的阳性率最高,为29.27%,依次为巴布考克B380为14.75%,太行鸡为4.6%,坝上长尾鸡阳性率4.31%,海兰灰为2%,北京油鸡未检测出REV抗体。CIAV抗体不同品种的检出率都是100%。结果表明不同养殖场和品种间二重感染或三重感染较为普遍。     

肉种鸡肿瘤病料中MDV、REV和CAV共感染的检测

从山东省东营、日照、潍坊、聊城等地区肉种鸡群采集102份有肿瘤病变的病、死鸡肝脏样品,用特异性核酸探针对样品进行马立克氏病病毒(Mareks disease virus,MDV)、网状内皮组织增生症病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)、鸡传染性贫血病病毒(chicken anemia virus,CAV)检测.结果显示,MDV、REV、CAV的检出率分别为88.24%、79.41%、47.06%,且存在严重的共感染现象,三重感染检出率达30.39%;二重感染检出率为59.80%,以MDV和REV共感染检出率最高,为44.12%;单一感染和阴性个体仅占3.92%和1.96%.结果表明,多种免疫抑制性病毒的共感染已普遍存在,是目前肿瘤性疾病发病率日趋上升的重要流行病学因素之一.     

基于Multi-PCR的淮南王土鸡J亚群禽白血病诊断及病原鉴定

为确诊疑似J亚群禽白血病病例,试验从湖北某养殖户送检的散养淮南王土鸡典型病变组织中,提取DNA,用分别针对A、B、J亚群禽白血病病毒(ALV)和针对马立克氏病病毒(MDV)、网状内皮增生症病毒(REV)的Multi-PCR方法进行检测,结果只扩增出与ALV-J对应的条带,而无MDV、REV、ALV-A、ALV-B对应条带,表明鸡群感染ALV-J。用DF-1细胞进行病毒分离培养,以抗ALV-J的单克隆抗体JE9为一抗进行间接免疫荧光试验结果显示DF-1细胞呈现亮绿荧光,表明从病料中分离到的病毒为ALV-J,这也是首次从淮南王土鸡分离到ALV-J。     

广西鸡传染性贫血流行病学的研究

应用PCR检测技术 ,对采自广西五个主要养鸡地区 5 0多个鸡群 3 2 1羽病鸡的组织样品 ,进行了鸡传染性贫血病毒核酸的检测。结果检测的病例平均阳性率为 2 8 3 4%;三黄鸡的阳性检出率最高 ( 3 9 2 8%) ;各种日龄的鸡均可检出 ,其中最小的为 7日龄、最大的为 3 5 0日龄 ;对 5个免疫器官的检测结果显示 ,骨髓的检出率最高( 84 3 8%) ;CIAV阳性病例中与MDV、REV和ALV的混合感染率共计 48 40 %。     

江苏省某鸡场CAstV、CIAV和REV感染情况的调查及分析

为研究鸡星状病毒(Chicken-origin astrovirus,CAst V)、鸡传染性贫血病毒(Chickeninfectious anemia virus,CIAV)和禽网状内皮组织增生症病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)在江苏某鸡场的流行和混合感染情况,采集该鸡场1日龄雏鸡的脏器,应用PCR和RT-PCR检测CAst V、CIAV和REV的单独感染以及混合感染情况。结果显示:1日龄雏鸡CAst V、CIAV、REV单独检出率分别为45%、37.5%和0%,其中CAst V和CIAV双重感染率为25%。表明该鸡场CAst V阳性率较高,提示养禽企业需增强对该病毒的关注。     

山东省白羽肉鸡中MDV、REV、CAV和ARV感染状况的病原学调查

为了解鸡马立克氏病病毒(MDV)、鸡传染性贫血病毒(CAV)、禽网状内皮增生病病毒(REV)和禽呼肠孤病毒(ARV)在山东省白羽肉用型鸡中的流行情况,试验采用地高辛标记的核酸探针-斑点杂交法对淘汰的商品肉鸡、病死商品肉鸡及淘汰肉种鸡进行了上述4种病毒病原的检测。结果表明:ARV主要以单一形式感染,在病死商品肉鸡中感染率最高(30.07%),在3种类型鸡中ARV感染率高于MDV,REV,CAV。MDV在淘汰肉种鸡中感染率(12.82%)高于其他2种鸡群,而REV,CAV,ARV感染率在病死商品肉鸡中最高。混合感染亦相当普遍,以淘汰肉种鸡最高(混合感染率达10.25%),高于任一病毒单独感染率,其次为病死商品肉鸡。     

鸡传染性贫血病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立

为建立鸡传染性贫血病毒(chicken infectious anemia virus,CIAV)的实时荧光定量PCR检测方法,本试验通过CIAV基因组保守区域设计1对扩增片段大小为180bp的特异性引物,构建pGM-T-CIAV重组质粒,制备阳性标准品,建立SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR标准曲线,并进行敏感性试验、特异性试验和重复性试验。结果显示,CIAV的Ct阈值与标准品浓度在5.33×108至5.33×103拷贝/μL间呈良好的线性关系,相关系数R2=0.998,斜率为-3.443,产物Tm值在86℃左右。该方法与网状内皮组织增生病病毒(REV)、禽白血病病毒(ALV)J亚型、马立克氏病病毒(MDV)、传染性法氏囊病病毒(IBDV)基因组均无交叉反应,敏感性为5.33拷贝/μL,比普通PCR高1 000倍,批内和批间重复试验变异系数均小于3%。结果表明,本试验建立的CIAV SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法可实现对鸡传染性贫血病的早期诊断及感染程度的定量分析的检测。     

鸡传染性贫血病的研究进展

鸡传染性贫血病（CIA）是由鸡传染性贫血病毒（CIAV）引起的一种以雏鸡再生障碍性贫血和全身淋巴组织萎缩为主要特征的病毒性传染病。它和马立克氏病病毒（MDV）、传染性法氏囊病病毒（IBDV）、网状内皮增生症病毒（REV）、禽白血病病毒（ALV）和禽呼肠孤病毒（ARV）是危害养鸡业最常见的免疫抑制性病毒。     

PCR技术在鸡场疫病检测中的应用

2017年6-9月间香格里拉市某尼西鸡养殖场有大批鸡发生临床症状比较复杂的疫病,通过发病情况调查,经临诊检查和剖解检查很难确诊,抗生素治疗无效。为了确诊病情,本研究针对流行的病毒,包括禽白血病病毒(ALV)、禽流感病毒(AIV)、新城疫病毒(NDV)、传染性法氏囊病毒(IBDV)、传染性支气管炎病毒(IBV)、传染性喉气管炎病毒(ILTV)、网状内皮增生病病毒(REV)、马立克病毒(MDV),设计特异性引物,用PCR/RT-PCR方法检测发病鸡的病料。检测结果显示,发病鸡群中ALV检出率为95%,ILTV检出率为65%,MDV检出率为59%。结合临床症状和剖检变化,确诊该尼西鸡场此次发病鸡群的主要疫病为AL、ILT以及MD,为该场尼西鸡的健康养殖提供了科学的参考依据。     

四川省禽白血病和网状内皮增殖症的流行病学调查及防治

采用自行建立的荧光定量PCR对四川省83个鸡场245份临床组织样本中网状内皮增殖症病毒(REV)和禽白血病病毒(ALV)进行了流行病学调查,结果显示REV和ALV的群体阳性率和个体阳性率分别为59.0%、71.0%、86.7%和50.8%,80日龄以下病鸡群REV和ALV的阳性率分别为95.9%和85.9%,REV和ALV的二重感染率为22.9%,表明四川省鸡群中RE和AL普遍存在,是鸡群病因复杂多样,损失严重的重要原因。采用免疫增强剂——黄芪多糖(APS)对部分确诊病例进行治疗和对污染场新引进鸡群进行预防试验,结果表明黄芪多糖对RE和AL有良好的防治效果。