饲喂粪肠球菌对断奶仔猪粪便与猪舍气溶胶中细菌群落结构的影响

为了研究日粮添加粪肠球菌对猪粪便和猪舍空气中细菌群落结构特征的影响,选取254头断奶仔猪,随机分成2组,其中对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中添加粪肠球菌。饲喂38 d后,采集粪便和猪舍空气样品,采用Illumina高通量测序技术分析粪便和猪舍空气的细菌群落结构特征。结果表明:试验组与对照组猪粪便及猪舍空气中细菌多样性无显著性差异(P0.05);厚壁菌门(Firmicutes)在所有粪便和空气样品中相对丰度最高,介于65.45%～81.10%之间,但试验组和对照组中厚壁菌门相对丰度没有显著性差异(P0.05);试验组猪粪便和猪舍空气中蓝细菌门(Cyanobacteria)相对丰度显著高于对照组(P0.05),变形菌门(Proteobacteria)相对丰度显著低于对照组(P0.05)。饲喂粪肠球菌可使粪便和猪舍空气中条件致病菌不动杆菌属(Acinetobacter)和埃希氏菌属-志贺氏菌属(Escherichia-Shigella)相对丰度显著降低(P0.05),对于养殖对象和饲养工人健康以及周边生态环境都具有有益作用。     

饲喂复合脂肪酸酯及粪肠球菌对改善肉鸡早期肠道健康的影响

试验研究复合有机酸酯(丁酸甘油酯与单月桂酸甘油酯混合物)和粪肠球菌对肉仔鸡生长性能与肠道健康状况的影响。选用840只1日龄爱拔益加(AA)雄性肉仔鸡,随机分为6组。对照组(A组)肉仔鸡饲喂玉米-豆粕型基础饲粮,B、C、D、E和F组在基础饲粮中分别添加复合有机酸酯、金霉素、复合有机酸酯+金霉素、粪肠球菌和粪肠球菌+复合有机酸酯。试验期42 d,分别于21和35日龄时采集样品进行分析。结果表明:添加复合有机酸酯和粪肠球菌这2种添加剂对肉仔鸡的生产性能没有显著影响(P0.05);与A组相比,D组21和35日龄肠道损伤评分显著降低(P0.05);35日龄时,B组盲肠中沙门菌和大肠杆菌含量显著低于A组(P0.05);C、D和E组21日龄时空肠黏膜分泌型免疫球蛋白A(SIg A)含量显著高于A组(P0.05);相比于A和F组,D组21日龄时空肠黏蛋白(MUC)2的mRNA表达量显著提高(P0.05);各组间回肠MUC2表达量没有显著差异(P0.05)。综上所述,饲粮中添加复合有机酸酯和粪肠球菌虽对肉仔鸡的生长性能没有显著影响,但可改善肠道健康,尤其对早期鸡只肠道的健康生长起到促进作用。     

粪肠球菌对仔猪后期生长性能的影响

在昆明市石林县维则乡云南神农育种公司对90头PIC仔猪进行试验,以研究粪肠球菌对仔猪后期生长性能的影响。选择42日龄的仔猪,按体重相近原则随机分栏成为两个试验组和1个对照组(基础日粮):试验组I和试验组II分别在基础日粮中添加0.050kg/t和0.075kg/t的粪肠球菌,每个处理2个重复(♂和♀各1栏),每个重复14头猪,试验期为9d。结果表明,对照组和试验组的平均日采食量分别为0.611kg、0.488kg和0.556kg;平均日增重分别为0.334kg、0.317kg和0.341kg;平均料肉比分别为1.83、1.54和1.63。对照组的平均日采食量和平均料肉比均比两个试验组高;对照组的平均日增重高于试验组Ⅰ而少于试验组Ⅱ。     

微胶囊化粪肠球菌稳定性影响因素研究

研究针对粪肠球菌制剂稳定性差的问题,采用微胶囊法对粪肠球菌进行包埋,通过真空低温冷冻干燥法干燥,制备微胶囊原菌粉,研究储藏温度、载体和残余水分等因素对微胶囊化粪肠球菌稳定性的影响。试验结果表明:采用微胶囊技术能显著提高粪肠球菌的稳定性,延长保质期;随着储藏温度的升高,微胶囊化粪肠球菌存活率降低,4~25℃粪肠球菌存活率相对较高,当储藏温度达37℃后,存活率急剧下降;使用混合载体,水分为4%,载体比例为玉米淀粉∶沸石粉=2∶1时,粪肠球菌存活率最高,且较为经济;微胶囊化粪肠球菌组与对照组相比,具有更强的耐酸、耐高温和耐胆盐特性,抗逆性强。     

1株产细菌素粪肠球菌的分离鉴定

为丰富益生菌剂的菌种来源,研究从鸡盲肠中分离获得7株疑似乳酸菌,并对其分别编号。通过对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门菌的抑菌试验获得1株抑菌活性最高的菌株HEW-A131,通过传统方法和16S rDNA分子鉴定,确定HEW-A131为粪肠球菌。     

肠溶性粪肠球菌微胶囊制备的初步研究

粪肠球菌(E.faecalis)又叫粪链球菌,普遍存在于自然界,一般栖居在动物的肠腔,也是人体上呼吸道或肠道的常居益生菌.粪肠球菌作为乳酸类肠球菌之一是动物宿主肠道内的原生菌种,具有很好的生物安全性和优良的益生特性,但是益生菌只有在人体内存活,具有增殖能力才能发挥更好的益生作用.许多研究显示,活菌制剂进入动物消化道后难以经受低pH值的盐酸、胆汁酸等的作用,很难有足够数量的活菌数量达到肠道或定植肠道而发挥作用.目前发酵乳制品中活菌的耐酸性较弱,活菌存活率低于0.2％.研究显示,当期情况下,微胶囊技术是保护菌体活力最为有效和实用的方法之一,通过对益生菌微胶囊化,在菌种外壁增加保护层,可以有效增强其对胃酸以及胆汁等不良因子的抵抗能力,同时提高其在储藏过程中的稳定性.本试验采用肠溶性材料对菌种进行微胶囊化,并结合喷雾干燥方法,制备获得的益生菌制剂可以抵抗不良环境,使得粪肠球菌具备了实际生产应用价值.     

粪肠球菌对奶牛产奶量及粪样中粗蛋白含量的影响

为研究日粮中添加粪肠球菌对奶牛产奶量及粪样中粗蛋白含量的影响,笔者在扬州大学实验农牧场选择胎次、泌乳日龄和产奶量相近的中国荷斯坦奶牛16头,随机分为2组,8头/组,分别饲喂0和60g/d粪肠球菌添加剂。结果表明,饲料中添加粪肠球菌有抑制奶牛日均产奶量下降的趋势,显著降低粪样中粗蛋白的含量,从而提高奶牛对粗蛋白的消化率。     

乳酸粪肠球菌对泰和鸡生产性能的影响

试验旨在研究不同水平乳酸粪肠球菌对泰和鸡生产性能的影响。试验选用1日龄健康正常的泰和乌鸡1200羽,随机分为6组,每组5个重复,每重复40羽,试验期分为0~4、5~8、9~12周等3个阶段。试验采用单因子试验设计,分别在对照组、试验组Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组的日粮中添加不同水平的乳酸粪肠球菌,测定平均采食量、平均日增重、和料重比等生产性能指标。结果表明:(1)0~4周龄泰和乌骨鸡的采食量、平均日增重、饲料转化率随着乳酸粪肠球菌添加不同水平的提高而呈现提高的趋势。其中,50g/t组的平均日采食量与对照组和试验40g/t组差异显著(P0.05);50g/t组的日增重与对照组和试验30g/t组、40g/t组差异显著(P0.05);50g/t组的料重比与对照组和其他试验差异显著(P0.05)。(2)5~8周龄泰和乌骨鸡的平均采食量、平均日增重、饲料转化率随着乳酸粪肠球菌添加不同水平的提高呈现提高的趋势。其中,40g/t组的平均日采食量与对照组差异显著(P0.05),其他各组差异不显著(P0.05);40g/t组的平均日增重与对照组和60g/t组差异显著(P0.05),其他各组差异不显著(P0.05);40g/t组组的料重比与对照组、30g/t、50g/t、60g/t试验组差异显著(P0.05)。(3)9~12周龄泰和乌骨鸡的平均日采食量、平均日增重、饲料转化率随着乳酸粪肠球菌添加不同水平的提高而呈现先提高后下降的趋势。但各组差异不显著(P0.05)。上述结果提示:在泰和乌鸡日粮中添加乳酸粪肠球菌能改善其生产性能,提高其采食量和饲料转化率,促进泰和乌鸡生长发育。0~4、5~8、9~12周龄泰和乌骨鸡适宜添加量分别为50g/t、40g/t、30g/t。     

共培养时大肠杆菌对粪肠球菌毒力基因表达的影响

为探索大肠杆菌O157∶H7对粪肠球菌N9分离株生长特性的影响及15种毒力基因在不同生长时期的应答情况,本研究将粪肠球菌N9、大肠杆菌O157∶H7单独培养和混合培养后分别计数菌株菌落总数,绘制生长曲线,根据生长曲线4个特定的时间点,分别提取其mRNA,反转录后利用荧光定量PCR方法检测15种毒力基因的转录水平。结果显示:混合培养与单独培养相比,粪肠球菌最高菌体浓度增加4 200多倍;两菌混合培养时,大肠杆菌整体促进了粪肠球菌15种毒力基因的转录,仅psr和atn在4个生长期中一直比单独培养时高,ebpA、ebpB、ebpR、rnjB、frsA、frsB除在稳定前期较单独培养时表达量低,其余3个时期均较高;而GelE和SprE除在对数中期和稳定期,其他时期均较单独培养时表达量低。稳定期ebpB和frsA表达量分别较单独培养高154.56倍和144.37倍,其次是对数后期ebpC,其表达量较单独培养时高110.35倍。实验结果表明:共培养时大肠杆菌能明显促进肠球菌的生长及其相关毒力基因的转录。     

粪肠球菌生物膜的形成及影响因素

本试验研究了不同的培养时间、培养温度、生物膜引导材料和葡萄糖浓度对生物膜形成的影响,发现培养时间为36h,培养温度为37℃,生物膜引导材料为乳胶时生物膜内活菌数最多。在不影响细菌活力的条件下,糖浓度越高,生物膜内活菌数越多;刚果红-阿利新兰对不同培养时间的生物膜染色后,用高倍镜对其形成过程进行动态观察,发现8h时出现少量的细菌黏附;24h时开始形成一些微菌落;36h时开始大量黏附形成明显的微菌落;72h时膜细胞脱落,微菌落开始减少;通过光密度测定法测定生物膜形成过程中胞外多糖的含量,证实其分泌量与生物膜内细菌增长周期时间一致。研究探讨了细菌粘附和细菌生物膜的形成机理,为阻断细菌生物膜形成提供实验依据。     

粪肠球菌动物致病的研究进展

粪肠球菌又称粪链球菌,能在不同环境中生长存活,对外界环境抵抗力较强,部分属于动物肠道中的正常茵群,还有部分在长期的进化中出现了毒力基因。近年来,粪肠球菌感染人和动物的报道日益增加,逐渐得到人们的广泛关注。论文综述了猪、牛、羊、禽和犬粪肠球菌的主要致病性、毒力基因及耐药性,为防制动物粪肠球菌感染提供参考。     

粪肠球菌生长曲线的测定

用分光光度仪和活菌计数两种不同的方法对粪肠球菌生长曲线进行测定,结果表明,在细菌对数生长期以前,两种方法所得结果基本一致,但在衰亡期,两种方法具有差异,活菌记数法更能如实反映细菌的生长情况.     

犬源粪肠球菌生物学特性的研究

试验分析犬源粪肠球菌EF-19的耐酸性能、耐胆盐性能、犬小肠上层细胞黏附性及抑菌物质耐温性等生物学特性。结果表明:该菌株耐受高达0.5%的胆盐时,仍有50%以上的存活率;p H 2.0和9.0处理3 h仍有80%以上的存活率;对犬小肠黏膜上皮细胞有较强的黏附性;且其代谢产物中含有抑菌物质,并有一定的热稳定性。     

猪肠源粪肠球菌的体外耐受性研究

对仔猪直肠内容物分离的粪肠球菌进行体外耐受性研究。以粪肠球菌体外存活率为考察指标,通过耐酸性、耐胆盐、耐高温试验来研究菌株的体外培养特性。耐酸性试验采用pH为2.0、3.0和7.0培养基培养菌株3h,其存活率分别为2.18%、121.01%和134.02%;胆盐浓度在0.1%~0.3%培养菌株,生长良好且存活率均在70%以上;耐高温实验是在50℃和60℃处理30min后存活率菌小于50%,菌株对高温敏感。结果表明,仔猪肠源粪肠球菌有较好的耐酸性及耐胆盐能力,但对高温敏感。     

粪肠球菌微胶囊的制备及稳定性研究

近年来,随着人们对益生菌保健作用的逐渐认识,对其活菌制剂的研究也日渐增多。活菌制剂是能够调节动物肠道菌群的生态平衡,对宿主起到有益作用的活的微生物制剂,由于它不仅具有与抗生素饲料添加剂相似的有益作用,而且还有具有无毒、无副作用、无残留、无抗药性、无污染等优点,已逐步发展成为最具有应用前景的抗生素替代品。粪肠球菌(E.faecalis)又叫粪链球菌,普遍存在于自然界,一般栖居在动物的肠腔,也是     

产enterocin E5细菌素粪肠球菌发酵条件的优化

采用琼脂扩散法测定粪肠球菌发酵上清液对大肠埃希菌K88的抑菌活性,从而确定产enterocin E5细菌素粪肠球菌的发酵条件。结果表明,粪肠球菌E5产细菌素的发酵培养基为MRS培养基,最适温度为37℃,最适起始pH值6.5,最佳接种量2%,种龄14 h,发酵时间16 h,最佳培养基组分氮源为1%胰蛋白胨、0.5%酵母浸粉,最佳碳源为1%葡萄糖、0.5%蔗糖,0.1%Tween-80有利于enterocin E5的产生。这是分离自北京优良商品猪黑六产enterocin E5粪肠球菌的首次报道。     

产细菌素粪肠球菌的分离、鉴定及体外益生特性研究

本试验通过筛选产细菌素的粪肠球菌,研究其体外益生特性,为其在动物生产中的应用奠定基础。利用肠球菌选择性培养基进行分离,孔穴琼脂扩散法进行抑菌活性筛选,并通过形态学和生理生化试验对菌种进行鉴定,然后测定其体外益生性能。研究发现,从猪粪中筛选出9株菌,经鉴定3株为粪肠球菌,通过抑菌试验,菌株DY-F03对大肠杆菌K88、大肠杆菌K99、鸡白痢沙门氏菌和金黄色葡萄球菌抑菌圈直径分别为20.63mm、22.08mm、18.58mm和18.82mm,抑菌性能在各菌株中最强,选取菌株DY-F03进行益生性能评价。通过致病菌共培养、耐酸、耐胆盐及温度耐受试验,发现菌株DY-F03具有较强的益生及抗逆性能,作为潜在的抗生素替代品具有较大开发利用价值。     

包被粪肠球菌热稳定性能评价

研究采用烘箱干热法,对比包被粪肠球菌与普通粪肠球菌,在不同温度(70、85及100℃)下,分别处理不同时间(0、5、10、15、30及60 min)后的存活率,发现包被后的粪肠球菌存活率分别上升13.6%、13.7%和17.0%,可见微囊包被技术的确可提升粪肠球菌的耐高温性能。对比饲料制粒过程中不同制粒温度(65及75℃)与饲料中的包被粪肠球菌烘箱干热处理后的存活率发现:制粒温度为65℃时粪肠球菌存活率相当于饲料在烘箱75℃下热处理28 min,85℃热处理21 min或100℃热处理13 min;制粒温度为75℃时粪肠球菌存活率相当于饲料在烘箱75℃下热处理53 min,85℃热处理41 min或100℃热处理28 min;因此,将饲料中包被粪肠球菌添加至烘箱干热处理试验可快速对制粒过程中粪肠球菌的耐受性进行评估。