Xenorhabdus luminescens菌株菌落功能二型性的特殊性

Akhurst(1980)注意到 Xenorhabdus 属细菌在指示培养基平板上呈现两种菌落形态,定为初生型及次生型。初生型菌可从感染期线虫肠腔中分离到。它不稳定,在体外培养时易转为次生型。初主型及次生型菌的区别在于色素、溴百里酚兰和甲基红的吸收,抗菌能力的差异和卵磷脂酶的存在(Akhurst 1980;Akhurst & Boemare 1988)。初生型还对线虫繁殖有促进作用(Akhurst 1980;Bedding 1981)。     

不同Xenorhabdus spp菌株培养物游离氨基酸的含量分析

本文测定了在加入六个 Xenorhabdus luminescens 菌株和 X.nematophilus A24菌株后,一种豆粉鸡蛋线虫培养基游离氨基酸含量的变化.Xenorhabdus luminesces 菌株和 X.nematophilus A24菌株培养物中游离氨基酸的含量差别明显,后者未测出谷氨酸,苯丙氨酸极微;而这两种氨基酸在 X.luminescens 菌株中都占很大比例,Xenorhabdus luminescens不同的菌株培养物中游离氨基酸的含量变化很大,这可能反映出各菌株含氮代谢的差别.但这些变化与线虫对细菌的营养专化性未见直接的相关.     

昆虫病原线虫Neoaplectana和Heterorhabditis共生细菌Xenorhabdus spp.两种型的形态学和功能

前言三个属的昆虫病原线虫已知与细菌有特殊的共生关系:线虫Neoaplectana spp.和Heterorhabditis spp.与细菌Xenorhabdus spp.共生(Thomas和Poinar,1979),线虫Steinernema kraussei与细菌Flavobacterium sp.共生(Mracek,1977)。每一种线虫都与单一种的细菌共生。经检查,所有Heterorhabditis spp.都有共生菌Xenorha-     

枯草芽孢杆菌B-903菌株的研究Ⅱ.抗菌物质的理化特性

枯草芽孢杆菌Ｂ－９０３菌株产生的抗菌物质,在偏酸性条件下能经受１２１℃（１．４Ｐａ／ｃｍ＾２）高温２０分钟,仍保持原来的抗菌活性;在中性和偏碱性环境中不具备稳定性,该抗菌物质ＰＨ＝４的溶液中,半年以上仍保持活性,但在碱性条件下２个月即失活性,显示了其稳定性。在强酸ＰＨ２￣３条件下,可有效物质从溶液中沉淀分离出来,调高ＰＨ值桑台使其重新地水 中。     

枯草芽孢杆菌G3菌株的抗菌物质及其特性

 产几丁质酶枯草芽孢杆菌G3菌株的固体培养物在黄瓜灰霉病菌和番茄叶霉病菌抑菌试验中证实,抑菌活性物质存在于过滤上清液中,它们是从酸沉淀物中提取出的伊枯草菌素、生物表面活性素和存在于盐析粗蛋白中的几丁质酶。在叶霉孢子萌发试验中,伊枯草菌素微弱地抑制孢子萌发但强烈破坏芽管和新生菌丝;生物表面活性素和几丁质酶则强烈抑制孢子萌发并长久性地抑制芽管伸长。在PDA平板上的灰霉菌丝抑菌试验中,伊枯草菌素抑制菌丝生长,引发菌丝顶端膨大,形成泡囊,泡囊破裂后原生质外泄;几丁质酶抑制菌丝生长,引发产生不规则的菌丝团;生物表面活性素在平皿上对菌丝则不显示出抑菌活性。     

拮抗细菌菌株Bacillus spp.间的相互作用及其对水稻纹枯病的抑制

测定了6个Bacillus spp.和1个Pseudomonas sp.P-13(G-对照菌株)在PPM培养基上的相互作用。在总共42个组合中，有27个组合是可亲和性的。在以B5423为单剂之一的5个组合中，亲和性的组合有4个。在温室条件下通过分批播种，在水稻分蘖盛期喷以B5423-R(B5423的标记菌株，是利福平抗性的突变体)为单剂之一的4个亲和性组合的菌悬浮液，以检测该组合中B5423-R在水稻茎基部的种群数量。结果发现，与单剂B5423-R相比，在应用1～7天内，组合B5423-R B45中，B5423-R的群体数量显著性降低；组合B5423-R B95、B5423-R B77中，B5423-R的群体数量与单剂无显著差异；组合B5423-R B4313中，B5423-R的群体数量在应用1～4天内与单剂无显著性差异，但在应用第7天显著地高于单剂。离体叶片纹枯病痛斑面积的抑制试验表明，与各自的单剂相比，组合B95 B5423及B95 Er77显著地抑制了纹枯病病斑面积；而组合B45 B80、B45 B5423和B45 B95纹枯病病斑面积显著地高于各自的单剂；其余10个组合与各自的单剂无显著差异。     

CP7菌株的抗菌活性及菌种鉴定

经分离、筛选获得一株高效分泌抗菌物质的CP7菌株,从该菌株中提取的抗菌产物,对大肠杆菌标准株、金黄色葡萄球菌标准株、苏云金杆菌等细菌;瓜类炭疽病菌、水稻纹枯病菌等真菌有较好的抑菌作用。用16S rDNA序列分析法进行生物分子的分类,该菌株16S rDNA序列与类芽孢杆菌属的34个细菌的同源性为96%~99%,与多粘类芽孢杆菌的同源性为99%。用传统细菌学的方法对CP7菌株进行鉴定,其形态特征、生理生化特性与多粘类芽孢杆菌的特征特性相一致。表明CP7菌株属于多粘类芽孢杆菌。     

列当(Orobanche spp. and Phelipanche spp.)种子的采集与预处理方法

列当(Orobanche spp.and Phelipanche spp.)是一种在世界范围内危害严重的根寄生杂草,防除列当的研究也越来越多。正确地采集和预培养列当种子是获得正确防除列当研究结果的前提。列出了大田正确采集列当种子的方法,以及对采集到的种子进行过筛提纯、加洗洁精和吐温20清洗后,再表面消毒和预培养,并通过发芽试验检验此方法的可行性。结果表明,经过处理的向日葵列当、瓜列当种子的发芽率最高分别为54.4%、59.1%。此方法可以应用于列当的采集和预处理过程中,可为列当研究和防除提供参考。     

盾壳霉抗菌核净菌株的诱导及其特性初步研究

为筛选可与菌核净配合防治作物菌核病的盾壳霉菌株,进行了紫外线辐射和药剂驯化试验,分别得到4个和2个盾壳霉抗菌核净突变菌株,并研究了其生物学特性。结果表明:除菌株D-1外,其余突变菌株生长速率(菌落直径57.00 ~62.75 mm,生物量6.38 ~8.63 mg/mL)均大于亲本菌株(菌落直径54.00 mm,生物量5.91 mg/mL);大部分突变菌株产孢量(对数值7.33 ~8.16)小于亲本菌株(8.40);菌核净对突变菌株的EC50值是亲本菌株的2.23 ~191.84倍;突变菌株D-3、U-6有微弱的几丁质酶活性,且除U-4外的突变菌株葡聚糖酶活性增强(亲本菌株8.96 U,突变菌株9.18 ~17.61 U)。综合分析,U-6菌株既有较高的葡聚糖酶活性又有几丁质酶活性,并能保持较快的生长速率,是值得开发的优良菌株。     

马铃薯抗菌蛋白分离、纯化、理化特性及免疫金定位

 首次发现并纯化了抗青枯病马铃薯品种MS-42.3(CIP800928)植株中抗青枯病菌(Pseudomonas solanacearumE.F.Smith)的32k D蛋白(AP1),并对其理性特性、氨基酸组成、N端部分序列、抑菌谱和细胞内定位进行了研究。     

马铃薯抗菌蛋白分离、纯化、理化特性及免疫金定位

 首次发现并纯化了抗青枯病马铃薯品种MS-42.3(CIP800928)植株中抗青枯病菌(Pseudomonas solanacearumE.F.Smith)的32k D蛋白(AP1),并对其理性特性、氨基酸组成、N端部分序列、抑菌谱和细胞内定位进行了研究。     

萝卜软腐病生防菌株Hy11的筛选、鉴定及定殖特性

为探讨银杏内生细菌对萝卜软腐病的防病作用,通过块根接种和温室盆栽试验筛选对萝卜软腐菌Pectobacterium carotovorum subsp.carotovorum具有高效抑制作用的生防菌株,共获得8株拮抗作用较强的内生细菌,其中菌株Hy11抑菌作用明显.对生防菌株Hy11进行了形态观察、生理生化特性测定、16S rDNA和gyrB基因序列分析,并应用绿色荧光蛋白基因标记菌株Hy11,研究该菌株在萝卜体内的定殖动态.结果显示,该菌株对萝卜软腐病具有较好的防效,对萝卜块根和幼苗的防治效果分别为77.9％和66.7％;对萝卜幼苗的促生率达113.28％.经鉴定,菌株Hy11为解淀粉芽胞杆菌Bacillus amyloliquefaciens.标记菌株Hy11-gfp在喷雾接种银杏叶片后0～3 d种群数量呈急剧下降趋势,10d后保持相对稳定;其在萝卜的根、茎和叶中均能够定殖,在根中的定殖数量最高可达1.2×104 CFU/g.     

枯草芽孢杆菌B-903菌株的研究Ⅲ.影响抗菌物质产生和积累的主要因素

培养液的初始 p H值直接影响 B- 90 3菌株的生长繁殖 ,从而对其抗菌物质的产生和积累产生重要影响。 p H值小于 5时 ,不利于细菌生长繁殖 ,滤液中抗菌物质活性弱 ;p H值在 6～ 8时有利于细菌的增殖 ,抗菌活性亦最强。培养过程中供氧条件与菌体繁殖和抑菌活性呈正相关 ,而培养液初始接菌量高时可缩短抗菌物质出现的时间。基本营养物质的初步筛选试验证明 :大米粉、豆饼粉、麦麸、酵母粉和 Ca CO3 及 KH2 PO4是发酵培养基中最佳的营养物质 ,可满足抗菌物质产生对碳、氮和矿物质的营养需求。B- 90 3的发酵过程可分为两个阶段 :在 30℃下 ,2 4小时内 ,细菌数量达最大值 ,p H值由低向高变化 ,但此阶段检测不出抗菌物质的活性 ;第二阶段 ,培养 41小时后 ,抗菌物质活性开始显露 ,至 112小时后达最大值 ,p H值也逐渐由高变低。培养过程中 ,p H值的变化对细菌繁殖和抗菌物质的产生与积累有明显的伴随关系     

Bt菌株FB的生物学特性及其cry、vip基因型鉴定

菌株FB是1株对小菜蛾Plutella xylostella幼虫具有高毒力的苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis （Bt）。本研究通过扫描电子显微镜、大质粒电泳、总蛋白SDS-PAGE及菌株生长特征观察的方式研究了菌株FB特征,克隆得到了基因cry1Ia、cry1Ea、cry1Ab、cry2Ab和vip3Aa全长,依据全基因组测序结果得到了1个cry8基因部分片段,首次在Bt菌株中同时发现基因cry1类和cry8类,这五种基因推导的氨基酸序列与已知基因序列相比,最高相似性分别为99%、98%、99%、100%、99%,而cry8半长基因与已知基因仅为63%。生测结果表明,蛋白Cry1Ia、Cry1Ea和Cry1Ab对小菜蛾幼虫具有较高杀虫活性。     

和田鞘氨醇杆菌AMCC 100218菌株的筛选、鉴定及杀线虫特性

为筛选对南方根结线虫具有致死效果的生防细菌,从山东省10个县市蔬菜主产区番茄根际土壤中分离可培养细菌,采用离体杀线虫试验测定分离菌株对南方根结线虫Meloidogyne incognita的致死活性,结合生理生化特征及分子生物学方法对高效杀线虫菌株进行分类鉴定,同时对其杀线虫特性进行表征,并通过盆栽试验进一步验证其生防潜力。结果显示,从山东省蔬菜主产区番茄根际土中分离到1株高效杀线虫菌株AMCC 100218,结合生理生化试验与16S rRNA序列分析,鉴定此菌株为和田鞘氨醇杆菌Sphingobacterium hotanense;该菌株对南方根结线虫2龄幼虫的致死效果可达88.87%,其杀线虫活性物质具有较好的热稳定性和储存稳定性,且耐碱不耐酸;盆栽试验结果表明,该菌能够显著减少土壤中的虫口密度,降低番茄发病率。表明和田鞘氨醇杆菌AMCC 100218菌株是1株具有防治根结线虫病潜力的生防细菌。     

利用拮抗的Pseudomonas spp.和无致病力的P.solanacearum防治青枯病的研究

 从番茄、烟和木麻黄根围土壤中分离了606个Pseudomonas spp.菌株,94a和22a对番茄、烟和花生青枯病有一定效果。用番茄青枯菌和花生青枯菌通过Co⁶⁰辐射和紫外光诱变的无致病力菌株,25c、55b对番茄青枯病;45b对花生青枯病;107b对花生青枯病;有一些效果。但不够理想。试验结果证明从植物根围土壤筛选有拮抗作用的P.spp.有可能用于防治青枯病。     

内生菌BS-2菌株的抗菌蛋白及其防病作用

 BS-2菌株为一株能在多种植物体内定殖,对多种植物炭疽病具有良好防治效果,并对植物生长具有良好促进作用的枯草芽孢杆菌,其BPY培养液经30%~70%硫酸铵盐析、高温(100℃)处理后,以SDS-PAGE、MALDI-TOF检测,该菌株分泌的抗菌蛋白为分子量 ≤ 2884.39 D的多肽;该抗菌多肽对热稳定并抗紫外线照射,对植物炭疽病菌和番茄青枯病菌等多种植物病原真菌和细菌有强烈的抑制作用,并对辣椒果炭疽病具有69.79%(9 d后)的防病效果;抑制病菌生长,引起菌丝(或芽管)细胞消融,导致菌丝畸形以及抑制病菌分生孢子的产生和萌发等可能是该抗菌多肽主要的防病机制。     

烟草赤星病拮抗菌株B75产生抗菌物质的条件

从烟草根际分离筛选到一株可产生抗烟草赤星病菌物质的枯草芽孢杆菌菌株B75。在以NB培养液进行试验时发现，B75在对数生长的中期开始产生抗菌物质，在生长的衰退期前存在一个产生抗菌物质的高峰期；在25～50℃、pH4．0～8．5范围内均可产生抗菌物质，其中30℃和pH6．0的培养条件下最适。不同的装液量试验结果表明，在三角瓶装液量为100ml／500ml时，是B75菌株菌体生长及产生抗菌物质的最适宜量。不同的碳、氮源试验结果表明，甘露醇、酵母膏最有利于B75菌株菌体生长，且产生的抗菌物质抑菌活性较强。