鸡胚垂体生长激素细胞的发生及其变化

为研究鸡胚垂体中生长激素细胞的发生及其在发育过程中的变化 ,分别在鸡胚发育的第 3 5～ 2 0 5天采集鸡胚垂体 ,用免疫组织化学方法研究鸡胚垂体中生长激素细胞的发生和细胞形态、数量、在垂体中的分布特点和在发育过程中的变化。结果表明 ,鸡胚发育中期第 9 5天可观察到少量的生长激素阳性细胞散在分布于垂体后叶 ,细胞多排列成索状或团状 ,细胞之间边界不清 ,细胞核较大。在鸡胚发育的第 12 5天以后 ,生长激素细胞的细胞浆与细胞核比值逐渐变小 ,且均匀分布于腺垂体的后叶。生长激素细胞数在鸡胚发育的第 12 5天之后显著升高 (P <0 0 1) ,在鸡胚发育的第 16 5天 ,生长激素细胞占垂体细胞总数的 9 4 %。以上结果证明鸡胚垂体中生长激素细胞增殖和分化过程主要发生在发育的中期至出壳之前 ,而生长激素细胞的分泌功能在鸡胚发育的后期最为活跃。     

鸡胚发育过程中垂体促乳素的表达及其细胞的发育

利用免疫荧光标记方法研究了鸡胚发育过程中垂体促乳素(PRL)细胞的发生。结果表明，在鸡胚发育的第14.5天可观察到有少量PRL免疫荧光阳性细胞散在分布于腺垂体前叶。随着胚龄的增加，垂体PRL细胞的体积逐渐增大。细胞直径从第14.5天的6.83μm增加到第20.5天的11.24μm，胞核直径从4.27μm增加到5.99μm。PRL细胞占腺垂体细胞总数的百分比在胚胎发育的第14.5天为0.86％，第20.5天增加到18.85％，并且分布于整个腺垂体前叶。细胞多呈索状排列或团状分布。研究结果表明。鸡胚垂体催乳素细胞的增殖、分化和对PRL的分泌功能主要发生和建立于胚胎发育后期。     

幼龄山羊腺垂体分泌TSH活动的季节和昼夜变化

用RIA法测定幼龄去势莎能公山羊血清中TSH含量的季节和昼夜变化,发现血清中TSH的年平均含量为3.198±1.02μIU/ml。冬季昼夜平均含量最高,为4.454±0.34μIU/ml,春季、秋季、夏季昼夜平均含量分别为3.510±0.39μIU/ml,2.748±0.41μIU/ml,2.078±0.59μIU/ml。各季度血清中TSH含量,有着极明显的季节差异。全年平均含量的昼夜变化及各季度含量的昼夜变化,均无明显的昼夜差异,但血清中TSH含量有明显的个体差异。     

异育银鲫促甲状腺激素β亚基基因的克隆及序列分析

利用RT-PCR、RACE及克隆等方法获得了异育银鲫促甲状腺激素β亚基(TSHβ)基因全长cDNA序列。该cDNA全长926 bp,5’端非编码区68 bp;3’端非编码区372 bp;开放阅读框(ORF)486 bp,编码161个氨基酸。经序列分析显示,其编码的氨基酸序列与金鱼[Carassius auratus(goldfish)]、鲤(Cyprinus carpio)、鳙(Aristichthysnobilis)、斑马鱼(Danio rerio)、虹鳟(Salmo gaidnerii)、鲑(Salmo salar)、鳗鲡(Anguilla anguilla)具有较高的相似性,其相似性分别为91.3%、87.6%、83.2%、77%、58.6%、56.1%、43.55%,同源性较高,这说明TSHβ亚基在长期的进化中具有较高保守性。而且在比较中还发现:异育银鲫和其它7种鱼类相比在5’端多11个氨基酸序列,并且都含有定位保守的12个半胱氨酸残基和一个N糖基化位点。     

游离甲状腺激素和促甲状腺激素在二氧化碳气腹手术中的变化及其意义

目的:探讨在二氧化碳气腹下腹腔镜胆囊切除术中游离T3(FT3)、游离T4(FT4)和促甲状腺激素(TSH)的变化及其意义.方法:42例腹腔镜胆囊切除术患者在麻醉前、气腹前、气腹后10min、气腹后30min及气腹毕各个时间点抽取静脉血标本,放免法检测FT3、FT4、TSH浓度,同时记录生命体征变化.结果:FT4在气腹后10min、30min及气腹毕明显升高(P＜0.01),TSH和FT3在气腹前后与麻醉前相比,差异无显著性;.结论:气腹可明显影响FT4浓度,导致应激反应增强.对原有甲亢病的患者施行气腹时应引起注意,以免造成意外.     

绵羊妊娠期胎儿垂体促性腺激素细胞的发生发育与血浆B-LH浓度的变化关系

为了研究绵羊胚胎期垂体中促性腺激素细胞的发育及功能变化，分别在胎儿发育的第60、90、120天和出生期采集垂体和血液，利用免疫荧光标记和生物学测定方法研究了垂体中促黄体激素β亚单位（LH-β)的表达和血液中LH生物活性的变化。结果证明：在胚胎发育的第60天，在腺垂体可观察到少量散在的LH-β阳性细胞；在胎儿发育的90d，LH-β阳性细胞率显著高于60d(P＜0．01)时，且均匀分布于整个腺垂体；在胎儿发育的120d，LH-β阳性细胞率达到高峰，但出生期又显著降低。胚胎发育过程中，垂体的LH-β细胞阳性率与血液中B-LH浓度呈现相似的变化趋势，且无显著的性别差异。以上研究征明绵羊垂体促性腺激素细胞的功能在胚胎中期之后最活跃，在后期垂体中LH-β阳性细胞率和血浆BLLH浓度都有降低，这种波动可能与胎儿垂体-性腺物的负反馈调节机制的建立有关。     

bcl-2基因在成年和胚胎鸡免疫器官中的表达及其与细胞凋亡的关系

用一步法从17 日龄来克亨SPF鸡胚和90 日龄成年鸡的法氏囊、脾脏和胸腺组织中提取总RNA(TRNA),用鸡B-细胞淋巴瘤/白血病-2基因 (bcl-2) cDNA探针进行Northern blot杂交。发现bcl-2 在成年和胚胎鸡的不同免疫器官中表达量不同, 成年鸡bcl-2 的表达量多少依次为胸腺、脾脏、法氏囊, 而胚胎鸡则是胸腺、法氏囊、脾脏。同时用流式细胞法测定这些器官的细胞凋亡情况, 胚胎鸡法氏囊、脾脏和胸腺的细胞凋亡率分别是0.40% , 0.68% 和0.38% ; 成年鸡则是6.98% , 1.17% 和0.61% 。结果表明, 鸡bcl-2 基因通过阻抑细胞凋亡直接调控正常免疫器官的发育, 在淋巴细胞发育过程中bcl-2是免疫细胞亚型选择的重要调节物。     

异育银鲫促甲状腺激素β亚基基因的克隆及序列分析

利用RT-PCR、RACE及克隆等方法获得了异育银鲫促甲状腺激素β亚基(TSHβ)基因全长cDNA序列。该cDNA全长926 bp,5’端非编码区68 bp;3’端非编码区372 bp;开放阅读框(ORF)486 bp,编码161个氨基酸。经序列分析显示,其编码的氨基酸序列与金鱼[Carassius auratus(goldfish)]、鲤(Cyprinus carpio)、鳙(Aristichthysnobilis)、斑马鱼(Danio rerio)、虹鳟(Salmo gaidnerii)、鲑(Salmo salar)、鳗鲡(Anguilla anguilla)具有较高的相似性,其相似性分别为91.3%、87.6%、83.2%、77%、58.6%、56.1%、43.55%,同源性较高,这说明TSHβ亚基在长期的进化中具有较高保守性。而且在比较中还发现:异育银鲫和其它7种鱼类相比在5’端多11个氨基酸序列,并且都含有定位保守的12个半胱氨酸残基和一个N糖基化位点。     

细胞凋亡基因P53在固始鸡免疫器官内的表达及其生理意义

【研究目的】探讨细胞凋亡基因p53在固始鸡免疫器官内的表达及其生理意义;【方法】应用免疫组织化学技术和Leica显微图像处理系统;【结果】p53阳性蛋白表达于法氏囊和胸腺内淋巴细胞细胞膜、细胞质和细胞核。在不同发育阶段固始鸡法氏囊内均有少量p53表达阳性细胞,阳性细胞主要分布于黏膜上皮层与淋巴小结之间靠近上皮层的固有膜内,其次是淋巴小结边缘及淋巴小结与淋巴小结之间的固有膜层内。在1周龄和12周龄固始鸡胸腺内有少量p53表达阳性细胞,阳性细胞主要分布于胸腺小叶皮质与髓质交界处,其次是皮质内,很少出现在髓质内。p53在不同发育阶段固始鸡脾脏内均无表达;【结论】在正常生理情况下,细胞凋亡基因p53参与了固始鸡中枢免疫器官内淋巴细胞发育分化过程中的凋亡调控,对免疫器官的稳定发挥重要作用。     

bcl—2基因在成年和胚胎鸡免疫器官中的表达及其与细胞凋亡？…

用一步法从１７日龄来克亨ＳＰＦ鸡胚和９０日龄成年鸡的法氏囊、脾脏和胸腺组织中提取总ＲＮＡ（ＴＲＮＡ）,用鸡Ｂ－细胞淋巴瘤／白细胞病－２基因（ｂｃｌ－２）ｃＤＮＡ探针进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ杂交。发现ｂｃｌ－２在成年和胚胎鸡的不同免疫器官中表达量不同,成年鸡ｂｃｌ－２的表达量多少依次为胸腺、脾脏、法氏囊,而胚胎鸡则是胸腺、法氏囊、脾脏。同时用流式细胞法测定这些器官的细胞凋亡情况,胚胎鸡法氏囊、     

鸡胚破骨细胞的分离培养与鉴定

从18日龄鸡胚长骨（股骨和胫骨）中机械分离破骨细胞于盖玻片和骨片上培养,以建立鸡胚破骨细胞体外培养方法。结合倒置相差显微镜、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色、甲苯胺蓝染色及透射电镜（TEM）和扫描电镜（SEM）对其形态和功能进行观察鉴定。结果表明,直接分离的细胞具有典型的破骨细胞的形态特点：属多核大细胞,TRAP染色阳性,能在骨片表面形成吸收陷窝。结论：鸡胚长骨机械分离法可获得一定数量并具有骨吸收活性的破骨细胞。     

鸡胚肺动脉内皮细胞与平滑肌细胞的分离培养及鉴定

探索简单快速实用的鸡胚肺动脉内皮细胞和平滑肌细胞培养方法:在严格无菌条件下对肺动脉内皮细胞和平滑肌细胞分离培养,待细胞融合度达约80%时进行传代,得到的内皮细胞利用差速消化法纯化,并观察2种细胞形态特征及培养特性,待细胞稳定生长后,采用荧光免疫组化技术鉴定细胞,并进行冻存和复苏,观察复苏后细胞活性。结果显示:24 h后组织块周围即有少量细胞爬出,内皮细胞大量生长后呈突起状排列,立体感强,平滑肌细胞在培养后的第5天呈现峰谷样外观,经免疫荧光法证明是内皮细胞和平滑肌细胞的纯培养,冻存于液氮中1~2个月复苏后细胞的活性都较好,可以恢复旺盛生长。结论:本研究提出的组织贴块法能成功获得内皮细胞和平滑肌细胞的纯培养,比酶消化法操作简单,更适合小血管内皮细胞、平滑肌细胞的原代培养。     

日本海马(Hippocampus japonicus)脑垂体的组织学观察

本文应用组织学方法对日本海马(Hippocampus japonicus)脑垂体的形态结构和激素分泌细胞的鉴别作了研究。结果表明日本海马脑垂体属前后型。由腺垂体和神经垂体构成。腺垂体分为前腺垂体(RPD),中腺垂体(PPD)和后腺垂体(PI)。用O.F.G染色,腺垂体内可鉴别出七种激素分泌细胞,其中RPD内两种:促肾上腺皮质激素(ACTH)分泌细胞和催乳激素(PRL)分泌细胞;PPD内三种:生长激素(GH)分泌细胞、促甲状腺激素(TSH)分泌细胞和促性腺激素(GTH)分泌细胞;PI内两种:促黑激素(MSH)分泌细胞和一种机能不明的细胞。神经垂体狭窄,长带状位于整个腺垂体的背上方。     

雏鸡中脑视顶盖I层细胞构筑研究

为进一步阐明鸟类视觉通路的结构特征,试验采用Golgi-Cox法,灌流固定后尼氏体(Nissl bodies)染色和羰花青荧光染料DiI(1,1-’dioctadecyl-3,3,3’,3-t’etramethylindocarbo-cyanine perchlorate)逆向神经标记技术,对雏鸡视顶盖I层的厚度和该层的细胞形态、大小进行了观察研究和数理统计。结果表明,I层细胞多数呈梭形,还有少数呈圆形、椭圆形、锥形、三角形和不规则形状等。I层外侧部较背侧部和腹侧部厚。按照胞体面积大小将细胞分为4类:巨细胞、大细胞、中细胞和小细胞,I层背侧、腹侧和外侧以巨细胞最少,其中背侧、腹侧以小细胞为主,外侧以中细胞数量最多。I细胞具有2~6个主树突,其中有2个主树突的细胞最多(60.7%,n=128)。     

Effects of DNA damage on oocyte meiotic maturation and early embryonic development

DNA damage is one of the most common threats to meiotic cells. It has the potential to induce infertility and genetic abnormalities that may be passed to the embryo. Here, we reviewed exogenous factors which could induce DNA damage. Specially, we addressed the different effects of DNA damage on mouse oocytes and embryonic development. Complex DNA damage, double-strand breaks, represents a more difficult repair process and involves various repair pathways. Understanding the mechanisms involved in DNA damage responses may improve therapeutic strategies for ovarian cancer and fertility preservation.     

龙眼胚胎发育过程中SOD活性的变化

在对红核子龙眼胚胎发育过程进行形态学观察的基础上,对龙眼胚胎发育过程中SOD活性变化进行测定。结果表明:龙眼子叶形胚的形成过程较长且较复杂,不但其体积发生很大变化,而且子叶的色泽也有很大变化;在子叶形胚发育早期,SOD活性迅速升高,之后上升比较平缓。     

猪脾生长抑素阳性细胞和免疫细胞的发育

用免疫组织化学技术研究猪脾生长发育过程中生长抑素 (SS)阳性细胞、IgA阳性细胞和酸性非特异性脂酶(ANAE)阳性细胞数量的变化。结果表明 ,出生时 ,猪脾SS阳性细胞数量较少 ,3日龄时数量显著增加 (P <0 0 5 ) ,2 0日龄则极显著增加 (P <0 0 1) ,并维持到 90日龄 ,12 0日龄时SS阳性细胞数量显著减少 (P <0 0 5 )。出生时 ,猪脾内就分布有IgA阳性细胞和ANAE阳性细胞 ,IgA阳性细胞数量于 2 0日龄呈显著上升趋势 ,4 5日龄达最高峰 ,于 90日龄极显著降低 (P <0 0 1) ;ANAE阳性细胞数量在 2 0日龄开始增加 ,4 5日龄时极显著增加 (P <0 0 1) ,12 0日龄时又显著降低 (P <0 0 5 )。以上结果表明 ,猪脾中SS阳性细胞的发育对免疫细胞的发育具有重要的调节作用     

自原始生殖细胞分离克隆小鼠ES细胞研究初报

自交配后 9.5～ 13.5 d小鼠胎儿生殖嵴 /腺或其类似物及周围组织 ,采用与其同源胎儿成纤维细胞共培养的方式分离克隆到具小鼠 ES细胞诸多特征的胚胎生殖细胞 ( EG细胞 )系。即具有连续传代的能力 ( 1例来自交配后 11.5 d胎儿类 ES细胞传至 10代 ) ,部分细胞集落呈典型鸟巢状结构 ,AP染色呈阳性 ,体外分化或延迟传代、堆叠培养具有分化形成类胚体、上皮细胞、成纤维细胞或神经细胞等的能力。同样培养交配后 7.5～ 8.5 d和14.5～ 15 .5 d的小鼠胎儿 ,原代观察到类 ES细胞集落 ,继代培养未观察到类 ES细胞集落 ,16 .5～ 18.5 d小鼠胎儿原代培养未观察到 ES样细胞集落