不同摄食水平对牙鲆幼鱼生长及能量收支的影响

在水温(20.0±0.5)℃,摄食水平分别为体质量的1.0%、1.5%及饱食条件下,进行牙鲆幼鱼[体质量为(35.08±0.05)g]的生长和能量收支的研究。试验结果表明,随着摄食水平的增加,鱼体干物质、蛋白质和能量表观消化率随摄食水平的增加而增加;湿质量特定生长率随摄食水平的增加呈线性上升,干物质、蛋白质和能量特定生长率呈对数增加;饲料湿质量转化效率不受摄食水平的影响,饲料干物质、蛋白质和能量转化效率随摄食水平的增加先升后降。粪能占摄食能的比例随摄食水平的增加而显著降低,生长能占摄食能的比例随摄食水平的增加先升后降,代谢能占摄食能的比例变化与生长能占摄食能的比例变化相反。各个摄食水平下能量收支式为:1.0%:100.00C=28.99G+2.34F+6.03U+62.64R;1.5%:100.00C=37.19G+1.94F+5.27U+55.60R;饱食:100.00C=30.73G+1.36F+5.16U+62.75R。     

牙鲆仔,幼鱼期饵料的选择与投喂

通过饵料的对比试验表明，在牙鲆育苗中，选择轮虫作为仔鱼开口铒料，投喂密度为５－７个／毫升；选择大卤虫或大卤虫和卤虫无节幼体混合投喂体为幼鱼初期食性转换的饵料，提高了鱼苗的成活率，并使鱼苗正常生长。     

牙鲆幼鱼消化道内蛋白酶活性及食糜蛋白的GFP示踪

用添加绿色荧光蛋白（GFP）饲料投喂牙鲆,研究了不同消化时间内食糜在牙鲆消化道中的分布情况,采用福林一酚法测定了不同时间胃、前肠、中肠和后肠各组织黏液蛋白酶活性。结果表明,牙鲆在摄食后消化道蛋白酶活性随着食糜在消化道内的分布而变化,食物的刺激引起消化腺体分泌蛋白酶。牙鲆摄食后1h食糜达到中肠,胃和中肠蛋白酶活性与空腹相比迅速增高;食糜在5h时遍布整个消化道,此时胃蛋白酶活性几乎检测不出,而前肠蛋白酶活性迅速增高,5h达到最高,然后开始降低;8h时中肠蛋白酶活性一直很高,之后降低;而后肠直到12h其蛋白酶活性仍维持在较高水平,说明牙鲆这种消化道较短的鱼类其肠道比胃在蛋白质消化过程中发挥更重要的作用。     

摄食后不同时间牙鲆消化道蛋白醛活性变化的研究

在牙鲆摄食后1．5、3、5、7和21小时分别检测胃、幽门盲囊和肠道组织中的蛋白酶活性。结果表明，胃蛋白酶的活性在摄食3小时时达到高峰，在摄食后3～5小时，是蛋白质消化由胃向肠道转移的过渡时期，在此期间，胃蛋白酶活性逐渐降低，而肠道蛋白酶活性逐渐增加。摄食后7小时，肠道蛋白酶的活性达到最高值，蛋白质的消化主要由肠道来完成，此时胃蛋白酶活性处于极低水平。幽门盲囊中的蛋白酶活性与胃和肠道密切相关。在下一次摄食前，消化道各部位的蛋白酶活性均处于较高水平。     

牙鲆早期发育阶段的摄食规律研究

对人工饲养条件下牙鲆(Paralichthysolivaceus)早期发育阶段摄食节律进行实验研究。在水温15.0~17.5℃条件下,初孵仔鱼约经5~6d开口摄食,开口饵料为经120目筛网过滤的褶皱臂尾轮虫,17~20d投喂卤虫无节幼体,21d后开始投喂桡足类直至幼鱼阶段,通过对1090尾仔、稚、幼鱼的测定,统计结果得出:饵料充足时饱食个体占65.8%,日间摄食率达93.7%,10日龄后[全长大于(5.20±0.24)mm]牙鲆日间的摄食率达100%,空胃个体主要出现在10日龄前。仔、稚鱼在早晨8:00和下午16:00出现两个摄食高峰,夜间基本不摄食。幼鱼夜间摄食则比较活跃,摄食量与仔、稚鱼相比明显增加,下午16:00仍为幼鱼摄食高峰,实验结果表明,牙鲆仔、稚、幼鱼具有明显的摄食节律,呈现白天摄食为主,清晨和黄昏双高峰的特点。     

牙鲆幼鱼纤毛虫病的防治

牙鲆（Paralichthys olivaceus）属冷温性底栖肉食性经济鱼类，是北方沿海工厂化养殖的主要品种。在牙鲆的育苗、暂养和幼鱼养殖的过程中，纤毛虫病是危害最严重的病害之一。尤其在鱼体表面有创伤的情况下，其疾病一旦暴发则很难控制。而且该病害传染性强，一旦有鱼感染，很快殃及全池。该纤毛虫除侵害鱼体表皮肤、鳍、肌肉，亦可侵入腹腔、肾脏、胰脏甚至脑而造成大量死亡。     

牙鲆(Paralichthys olivaceus)仔稚幼鱼肠道菌群结构比较分析

采用MiSeq 16S rRNA高通量测序技术和生物信息学分析方法,构建了牙鲆(Paralichthys olivaceus)工厂化人工育苗模式下仔稚幼鱼阶段6个不同发育时期18个样品的16SrRNA基因测序文库,共获得7462个OTU (Operational Taxonomic Unit),分类为42个菌门972个菌属.对肠道菌群的形成过程及结构多样性变化分析显示,牙鲆初孵仔鱼的菌群组成多样性丰富,体内的优势菌为变形菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidetes);在9日龄和21日龄摄食轮虫(Rotifer)和卤虫(Artemia sp.)幼体样品中,肠道的优势菌群结构较单一,变形菌门成为此时期肠道的优势菌群;45日龄摄食配合饲料后,肠道中变形菌门的相对丰度显著降低,厚壁菌门和拟杆菌门的相对丰度明显增大,成为肠道菌群的优势菌群.在属水平的菌群结构中发现,牙鲆仔稚幼鱼肠道优势菌群的种类和数量都发生了较大变化,在9日龄和21日龄时期肠道中弧菌属(Vibrio)相对丰度最高,到45日龄后相对丰度锐减到最低水平;拟杆菌属(Bacteroides)和普氏菌属(Prevotella)在80日龄后达到较高水平,成为肠道优势菌属;厚壁菌门的8个菌属在80-115日龄时期均发展成为优势菌属,定植于牙鲆的肠道.本研究揭示了工厂化人工育苗模式下牙鲆仔稚幼鱼肠道菌群结构及演替规律.     

温度对漠斑牙鲆幼鱼生长与存活的影响

本文根据温度实验,对漠斑牙鲆幼鱼的生长及存活的影响进行了探讨。结果表明：漠斑牙鲆幼鱼适宜生长温度范围为15—30℃,最适温度范围为18～27℃。在适宜温度下,漠斑牙鲆幼鱼生长快,存活率高。过高或过低的温度对幼鱼的生长发育均有一定的抑制作用。在生产上,当培育水体温度低于15℃时应进行人为加温,对促进幼鱼的生长发育与存活有积极意义。     

牙鲆幼鱼对EPA和DHA的营养需求

研究了EPA和DHA水平对牙鲆生长的影响,饲料中含0.5%EPA和1.0%～1.5%DHA能保证牙鲆幼鱼最适生长,鱼体水分最低,肝体指数最小,脂肪含量有较大幅度提高,肝脏极性脂中EPA和DHA达到最大积累;在肝脏和肌肉的非极性脂部分,各组间的脂肪酸组成没有显著变化,而极性脂部分能体现出饲料中n-3 HUFA含量对鱼体脂肪酸组成的影响,极性脂中的EPA和DHA含量远高于非极性脂;在肌肉和肝脏的极性脂和非极性脂中都含有较高的16:0和18:1n-9; 18:1n-9/n-3HUFA可以作为必需脂肪酸满足程度的一个判据,18:1n-9值的升高往往是缺乏必需脂肪酸的表现,在生长最佳时18:1n-9/n-3HUFA比值下降,为0.62和0.74.     

微生态制剂对牙鲆幼鱼脂肪酶的影响

试验结果表明,微生态制剂可提高牙鲆幼鱼消化道的脂肪酶活性,微生态制剂的使用方式和使用的间隔时间影响其使用效果。拌饲投喂与在水中同时使用微生态制剂,在7 d内使脂肪酶活性大大提高,但随后采用这种使用方式的试验组脂肪酶活性又迅速降低。而只在水中使用微生态制剂的各试验组的脂肪酶活性却随着试验的进行,逐步提高。有利于脂肪酶活性提高的最佳方案是只在水中使用微生态制剂,使用间隔时间为7 d,芽孢杆菌∶乳酸菌为10∶1,菌液密度为105/m l。     

褐牙鲆水中阻力的初步研究

鱼类在水中游泳时,需要克服水的阻力从而需要消耗一定的能量.鱼类依鱼种、大小以及形态特征的差异,在同样的水流条件或游泳速度下,其水中阻力也不相同.本研究通过对褐牙鲆(Paralichthys olivaceus)在垂直循环水槽中进行游泳阻力测试实验,分别用3种特征面积(横截面积、湿表面积和鱼体体积的2/3次方),获得褐牙鲆3种不同的阻力系数.经比较分析发现,在雷诺数Re为2.7×104～1.91×105时,采用湿表面积作为褐牙鲆的特征面积获得的阻力系数的平均值为0.020,此时标准差最小,仅为0.000 76.而分别用横截面积和鱼体体积的2/3次方时获得的阻力系数的标准差相对较大.因此,用褐牙鲆的湿表面积计算得到的阻力系数更适合于该种鱼类个体水中阻力的研究.     

牙鲆消化道发育的组织学观察

牙鲆（Paralichthys olivaceus）肉质鲜美、营养价值高,是我国重要的海水养殖鱼类之一,同时,牙鲆二次变态显著,是研究硬骨鱼类变态发育很好的模式生物。在其变态过程前后,外型上最大的变化是其右眼的移位,内部器官如脑颅骨、骨骼肌等都发生结构和功能上的改变,而消化道的发育和分化,特别是其胃在变态前后有显著的变化。消化系统的发育关系到饵料的选择,与仔鱼成活率有直接关系,有较为重要的研究价值。[第一段]     

牙鲜幼鱼能量代谢的初步研究

对个体重２．５～８７．６ｇ的牙鲆幼鱼的代谢进行测试。结果表明：温度和体重对牙鲆幼鱼的耗氧率及二氧化碳排出率有明显的影响;牙鲆幼鱼的呼吸商为０．８２±０．０８,氧氮比为２３．８±６．６,其能源物质以蛋白质和脂肪为主;牙鲆在盐度为３０、２５、２０和１５的水中,平均代谢率分别为３．０８、３．０７、３．８７和３．２８Ｊ／ｇ·ｈ,说明牙鲆幼鱼适盐较广,在本实验盐度阈值内,对鱼体代谢基本没影响。     

Development of microparticle diets for Japanese flounder Paralichthys olivaceus larvae

ABSTRACT:   Two newly designed microparticle diets (MD), with two kinds of peptide (C700 and C800) as a protein source were developed. Microparticle diet Q (MD-Q) contained C700 (molecular weight ∼30 000 Da) and C800 (molecular weight 1000–2000 Da); in contrast, microparticle diet T (MD-T) contained C700 only. Two separate trials, representing larvae from different hatches, were conducted. Japanese flounder Paralichthys olivaceus larvae were fed newly designed MD or a combination of them with live food (LF) between 3 and 10 days after hatching (d.a.h.) in experiment I, or between 11 and 20 d.a.h. in experiment II, and compared them to LF and a commercial diet (CD) feeding groups. The growth and survival rates in both experiments were the highest in the LF treatment. But in the microparticle treatment larvae fed MD-Q had a higher survival rate and better growth than those fed MD-T, either alone or in combination with LF. First-feeding larvae fed on MD-Q had a 20.5% survival rate and 1.12 mm gain by 10 d.a.h. Unfed larvae died within 6 d.a.h. These results indicate that using a mixture of different molecular weight peptides is good protein sources and also this type of microparticle diet can be applied to flounder from larval to juvenile stages.     

野生与人工养殖褐牙鲆亲鱼微量元素组成的差异比较

分析了野生与人工养殖褐牙鲆亲鱼肝脏、背肌及卵中硒、铁、锰、铜、铬、镉和铅等微量元素的含量。结果表明,野生褐牙鲆亲鱼肝脏中硒、铁含量均显著高于养殖亲鱼(P<0.05),铜含量则显著低于养殖亲鱼(P<0.05),其他各元素间均未见显著差异(P>0.05);野生褐牙鲆亲鱼背肌中除硒和锰的含量显著高于养殖亲鱼外(P<0.05),其他各元素含量均基本保持恒定(P>0.05);野生褐牙鲆亲鱼卵中硒、铁和锰的含量均显著高于养殖亲鱼(P<0.05),其中硒的含量约为养殖亲鱼的1.7倍,铁的含量约为养殖亲鱼的2.0倍,而锰含量则为养殖亲鱼的2.8倍。养殖褐牙鲆亲鱼卵中镉含量与野生亲鱼相比高出78%(P<0.05)。两种亲鱼卵中铜、镉、铅3种重金属含量均未见显著差异(P>0.05)。     

Dietary vitamin A requirements of juvenile Japanese flounder Paralichthys olivaceus

A 70‐day feeding experiment was conducted to assess the dietary vitamin A (VA) requirements of juvenile Japanese flounder (Paralichthys olivaceus). Six semi‐purified diets with VA supplementations of 0, 5000, 10 000, 15 000, 20 000 and 25 000 IU kg^?1 were fed twice a day to triplicate groups of 20 juveniles per tank with an initial weight of 1.59 ± 0.01 g (mean ± SE). Weight gain (WG) and specific growth rate (SGR) increased as dietary VA increased up to 10 000 IU kg^?1. Significantly lower WG and SGR were observed for the 0 IU kg^?1 treatment than for treatments of 5000, 10 000 and 15 000 IU kg^?1. Highest WG and SGR were observed in fish fed 10 000 IU kg^?1; slightly lower values were recorded in fish fed 15 000, 20 000 or 25 000 IU kg¹. No significant difference was observed in survival rate among treatments. Whole body total lipid was significantly higher in fish fed 0 and 5000 IU kg^?1 than for other levels. Reduced growth and small livers were observed as signs of VA deficiency in fish fed 0 IU kg^?1. Slightly reduced growth and pale fragile livers were observed as effects of VA excess in fish fed 25 000 IU kg^?1. Total retinol contents in liver and eyes increased with increasing levels of dietary VA. No retinol was detected in livers, and significantly lower total retinol content was observed in eyes, of fish fed 0 IU kg^?1. WG analysed by the broken line method indicated that an optimum dietary VA requirement of 9000 IU kg^?1.     

舟山褐牙鲆（Paralichthys olivaceus）仔鱼摄食和生长的研究

试验研究了褐牙鲆Paralichthys olivaceus仔鱼的摄食和生长。结果表明,仔鱼初次开口摄食时间在6日龄（16～18℃）,初次摄食率为30％,8日龄饥饿仔鱼最大初次摄食率为65％,孵出后第9天达到不可逆点（PNR）,混合营养期为3d左右。初次摄食强度和初次摄食率开始时较低,在卵黄囊耗尽时达最高,然后下降。随着饥饿时间的延长,仔鱼出现“负增长”,孵化第11天存活率仅为10％,12日龄全部死亡。     

牙鲆3个养殖群体遗传结构的微卫星分析

采用微卫星标记分析技术,用5个多态性的微卫星标记对来自3个不同国家（中国、日本和韩国）的牙鲆养殖群体进行了遗传多样性研究。研究结果表明,3个牙鲆群体平均等位基因在4．8～5．6之间,平均观测杂合度（H0）在0．3917～0．5643之间,平均期望杂合度（HE）在0．5981～0．6264之间。有多个位点在不同的群体中偏离哈代-温伯格平衡。遗传距离分析表明,中国群体与日本群体遗传距离最近,韩国群体与日本群体遗传距离最远。分子方差分析（AMOVA）表明,群体内遗传变异与群体间遗传变异分别占总遗传变异的92．44％和7．56％,固定系数（R）为0．0752（P〈0．001）,表明牙鲆3个养殖群体遗传分化显著。