四君子汤对实验性脾虚证模型大鼠血浆内几种神经肽含量的影响

为了阐明脾虚证模型大鼠血浆中部分神经肽的变化规律和健脾益气方剂四君子汤对神经肽的调节作用以及对脾虚证病理过程的保护机制，应用利血平和苦寒中药方剂小承气汤两种方法复制出脾虚证大鼠模型，以特异性放射免疫分析法检测了血浆β－内啡肽（β－endorphin,β-EF)、降钙素基因相关肽（Calcitonin gene related peptide,CGRP)和神经肽Y（Neuropeptide Y,NPY)的含量变化。结果表明：两种方法复制的大鼠脾虚证模型均表现为血浆β－EP、CGRP比对照组显著升高（P＜0.01)，NPY比对照组显著降低（P＜0.01)，以上变化经四君子汤治疗后都有不同程度的好转，与模型组比较差异极显著（P＜0.01)，接近对照组水平。提示脾虚证的病理变化过程与β－EP、CGRP、NPY等神经肽类的失衡有一定的相关性，而健脾益气方剂四君子汤对脾虚让模型大鼠血浆内神经肽含量有较好的调节作用，推测这也许是该方能够治疗脾虚证的作用机制之一。     

实验性脾虚证大鼠血浆胃泌素和胃动素含量变化及四君子汤对其调整作用

通过大鼠肌肉注射利血平的方法复制了脾虚证动物模型，并应用四君子汤治疗反证，研究了脾虚证大鼠血浆胃泌素（GAS）和胃动素（MOT）的含量变化。结果表明，脾虚证大鼠血浆GAS和MOT含量显著降低，与对照组和四君子汤治疗组比较差异极显著（P＜0．01），对照组与四君子汤治疗组之间GAS和MOT的变化无明显差异（P＜0．05）；脾虚时的消化吸收机能障碍和胃肠动力学的改变与GAS和MOT的分泌减少密切相关；四君子汤能够提高血浆GAS和MOT含量，有效地改善脾虚证的胃肠功能。     

四君子汤对脾虚北京鸭胃肠组织中血管活性肠肽和生长抑素mRNA表达的影响

为从分子水平阐明脾虚与胃肠激素之间的关系以及健脾中药四君子汤防治脾虚的机制，首次用北京鸭复制脾虚证模型，以半定量的RT—PCR方法检测其腺胃、十二指肠和空肠血管活性肠肽（VIP）和生长抑素（SS）mR—NA表达的变化。结果表明，脾虚组腺胃VIPmRNA表达显著高于对照组（P〈0．05），十二指肠和空肠VIPmR—NA表达有所升高（P〉0．05）；脾虚组腺胃（P〈0．01）、十二指肠（P〈0．05）和空肠（P〈0．01）SSmRNA表达显著低于对照组。经四君子汤预防和治疗后二者恢复到接近对照组水平。提示脾虚证与VIP和SS有一定关系，四君子汤对VIP和SS水平的影响可能是该方治疗脾虚证的作用机制之一。     

实验性脾虚证与自由基代谢的相关性及四君子汤对其的调整作用

分别用小承气汤和利血平复制大鼠脾虚证模型，通过检测血清和心、肝、脾、肾等组织中抗氧化酶SOD和GSHP－Px的活性及脂质过氧化反应终产物MDA含量，研究脾虚证与自由基代谢的相关性及四君子汤对其影响。结果表明：两种方法复制脾虚证模型与对照组比较均表现为SOD活性显著升高（P＜0．05），GSH－Px活性显著降低（P＜0．05）；四君子汤反证治疗组与脾虚证组比较表现为SOD活性显著下降（P＜0．05），GSH－Px活性显著升高（P＜0．05），MDA含量显著降低（P＜0．05），与正常对照组接近。表明大鼠虚证动物模型与体内自由基代谢紊乱，脂质过氧化作用增强存在一定关系，健脾益气方药四君子汤能够提高体内抗氧化酶活性，拮抗自由基对生物膜的过氧化损伤，具有抗脂质过氧化损伤的作用。     

四君子汤对北京鸭十二指肠、空肠CCK、VIP mRNA表达的影响

本试验探讨了四君子汤对实验性脾虚鸭十二指肠、空肠胆囊收缩素（cholecystokinin，CCK）和血管活性肠肽（vasoactive intestinal peptide，VIP）mRNA表达的调控作用。采用利血平法建立北京鸭实验性脾虚模型，用半定量RT—PCR法检测了十二指肠、空肠CCK和VIP mRNA表达的变化。结果：（1）四君子汤预防组十二指肠CCK、VIP mRNA表达极显著高于脾虚组（P〈0．01），空肠CCK、VIP mRNA显著高于脾虚组（P〈0．05），四君子汤预防组和正常对照组之间无显著差异；（2）四君子汤治疗组十二指肠CCK、VIP mRNA表达极显著高于自然恢复组（P〈0．01），空肠CCK、VIP mRNA表达显著高于自然恢复组（P〈0．05）。四君子汤对北京鸭实验性脾虚症引起的十二指肠、空肠CCK和VIP表达降低有明显的上调作用，提示四君子汤上调CCK和VIP的表达可能是其健脾助消化机理之一。     

大鼠实验性脾虚证动物模型糖原和琥珀酸脱氢酶的组织化学研究

为了研究脾虚证时组织化学的变化及四君子汤对其的影响,选用Wistar大鼠,以利血平复制脾虚证动物模型,实验设正常对照组、脾虚组、脾虚治疗组,每组15只,于第7d、第14d分别扑杀各组动物,取肝脏、十二指肠、胃和肌肉组织,分别应用PAS法和Lojda法染色,组织学半定量法观察糖原和琥珀酸脱氢酶的变化。实验结果表明:第7d时,脾虚组和脾虚治疗组肝脏和肌肉组织中的糖原含量显著低于对照组(P<0.01),各组织中琥珀酸脱氢酶含量则显著高于对照组(P<0.01);第14d时,脾虚组糖原含量反而显著高于对照组和脾虚治疗组(P<0.05～0.01),琥珀酸脱氢酶含量仍明显高于对照组和脾虚治疗组(P<0.050.01)。说明脾虚证的病理变化过程与机体糖原和琥珀酸脱氢酶等的组织化学变化有一定的联系,健脾益气方剂四君子汤对脾虚证模型大鼠的组织学变化有较好的调节作用。     

银杏叶复方干预大鼠脾虚证的代谢组学初步研究

试验基于大鼠脾虚证模型,经与传统固本方剂-四君子汤比较,初步揭示银杏叶复方干预大鼠脾虚证营养物质代谢方面的影响。选择24只雄性SD大鼠,随机分为对照组、脾虚模型组、四君子汤组和银杏叶复方组,每组6只。对照组给予生理盐水灌服(10 mL/kg)和皮下注射(0.6 mL/kg),脾虚模型组给予生理盐水灌胃(10 mL/kg)和皮下注射利血平(0.6 mL/kg),四君子汤组和银杏叶复方组分别灌服相应制剂(10 mL/kg)和皮下注射利血平(0.6 mL/kg),连续12 d。结果表明:PCA得分图显示,对照组和脾虚模型组的血浆样本散点完全分开,银杏叶复方组血浆样本散点较四君子汤组向对照组更紧凑聚集;经过筛选,银杏叶复方干预大鼠脾虚证的血浆相关差异代谢物主要为多巴胺、L-脯氨酸等29种物质[变量投影重要度(VIP)>1,P<0.05],与脾虚模型组相比,在银杏叶复方组中相关差异代谢物含量下调主要有胞嘧啶、多巴胺等,上调的主要有甜菜碱、棕榈酰溶血卵磷脂等;银杏叶复方干预大鼠脾虚证的代谢通路主要为酪氨酸代谢、精氨酸和脯氨酸代谢、缬氨酸和亮氨酸及异亮氨酸生物合成、花生四烯酸代谢[拓扑分析影响因子(Impact)>0.1]。综上所述,银杏叶复方主要通过氨基酸代谢和脂质代谢有效干预大鼠脾虚证病理状态。     

实验性脾虚证大鼠免疫细胞因子变化及四君子汤对其影响

本文分别通过大鼠肌肉注射利血平和口服小承气汤两种方法复制脾虚证动物模型,比较研究了脾虚证大鼠细胞因子白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子(TNF)的含量变化,并用四君子汤治疗以反证.结果表明,不论利血平法复制脾虚证动物模型,还是小承气汤复制脾虚证动物模型,均表现为外周血IL-2、IL-6和TNF含量明显低于正常对照组与四君子汤治疗组(P＜0.01),对照组与治疗组之间除利血平所致脾虚证动物模型用四君子汤治疗后TNF含量明显高于对照组(P＜0.05)以外,以上其它指标均无明显差异(P＞0.05).说明脾虚大鼠产生IL-2、IL-6和TNF等细胞因子能力下降,使免疫功能处于低下状态,四君子汤治疗能够提高脾虚证大鼠产生细胞因子的能力,从而达到健脾益气调整机体的免疫功能.     

脾虚证模型家兔神经内分泌机能的变化及四君子汤对其调整作用

给家兔胃管投服苦寒中药大黄水煎液,复制出家兔脾虚证动物模型,研究了脾虚证模型家兔神经内分泌机能的变化和健脾益气四 君子汤对其的调 整作用。结果表 明,脾 虚证模型家兔血 浆胃泌素、ｃ Ａ Ｍ Ｐ 和ｃ Ａ Ｍ Ｐ／ｃ Ｇ Ｍ Ｐ 较试验前和对照组明显下降 （ Ｐ ＜ ００５ 或 Ｐ ＜ ００１）, 血浆胰高血糖素和血清胆碱酯酶活性较对照组和试验前极显著升高 （ Ｐ ＜ ００１）。以上各指标在经四君子汤治疗后均恢复至试验前和对照组水平,与模型期比较变化明显 （ Ｐ ＜ ００５ 或 Ｐ ＜ ００１）。由此说明,脾虚证时神经内分泌机能发生了改变,表现为交感神经机能降低和副交感神经机能相对亢进,以及胃肠道激素如胃泌素和胰高血糖素的分泌发生变化,四君子汤对其有良好的调整作用或拮抗作用。     

四君子汤在兽医临床上的应用

四君子汤在兽医临床上的应用魏道祥（遂平县畜牧兽医站４６３１００）四君子汤是中医学中益气补中，健脾养胃的代表方剂。在兽医临床实践中，以此方为基础，随证加减，治疗气虚型疾患，收到了满意疗效。现介绍于后。一、治疗牛前胃驰缓。有一键牛，因食欲废绝而就诊。主诉...     

神经肽Y免疫反应神经元在鸽小脑中的定位--SABC 法研究

采用石蜡切片和免疫组化SABC法（链霉亲合素-生物素-过氧化物酶连结法），对10只肉鸽小脑内神经肽Y免疫反应神经元的分布状况进行了研究．并与北京鸭、鸟鸡、肉鸡及大鼠的相关结果进行了比较。在光镜下观察分析了阳性神经元的分布状况．并用图像分析软件进行了半定量分析。结果显示：（1）小脑内神经肽Y（neuropeptide Y，NPY）阳性神经元主要存在于小脑皮质的蒲肯野氏细胞层，且以小叶顶端的蒲肯野氏细胞阳性明显；（2）小脑白质中央核可见到少量阳性神经元．不同于鸟鸡、肉鸡及大鼠；（3）分子层、颗粒层未见阳性反应细胞。表明：鸽小脑NPY阳性神经元的分布在皮质中与鸡、大鼠大体相似；在白质中与鸡、大鼠有差异。     

家兔脾虚动物模型免疫功能的变化

经胃管给家兔投服苦寒中药大黄,复制家兔脾虚动物模型,用四君子汤治疗,研究其免疫功能变化。结果表明：脾虚模型组家兔的体重、外周血淋巴细胞转化率、Ｅ－玫瑰花环形成率及血浆ｃＡＭＰ和ｃＣＡＭＰ／ｃＧＭＰ较对照组显著下降（Ｐ＜０．０５或０．０１）;经四君子汤治疗后以上指标均显著升高（Ｐ＜０．０５或０．０１）。说明脾虚时机体免疫功能降低,四君子汤治疗对脾虚时的免疫功能有促进作用。     

家兔脾虚证动物模型血浆环核苷酸与血清胆碱酯酶活性的研究

脾虚症是中医和中兽医临床常见症型之一。为了探讨其发生机理，试验以中兽医学的理论为指导，应用大黄水煎液，给家兔胃管投眼，复制出家兔脾虚证模型，测定其血浆环核苷酸（ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ、ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ）及血清胆碱酯酶活性（ＡＣＨＥ）变化。结果表明，脾虚模型组与对照组和造模前比较，血浆ｃＡＭＰ和ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ显著下降（Ｐ〈０．０５）；血浆ｃＧＭＰ有升高的趋势，但无统计学意义（Ｐ〉０．０５），血清Ａ     

产后奶牛子宫内膜炎神经肽（SP、VIP）对子宫免疫调节的研究

本试验研究了急性产后子宫内膜炎神经肽（SP、VIP）变化,以探讨子宫内膜炎神经肽对子宫局部免疫的影响。对10头产后急性化脓性子宫内膜炎患牛进行子宫内膜及血清SP、VIP含量的检测,并选择10头产）06-8d健康的奶牛为对照组。结果表明,产后急性子宫内膜炎患牛子宫内膜及血清中SP含量显著升高,试验组与对照组差异极显著（P〈0．01）,而VIP含量显著降低,试验组与对照组差异极显著（P〈0．01）。急性产后子宫内膜炎属于局部炎症,其发生与神经肽（SP、VIP）浓度密切相关,sP含量的升高和VIP含量的降低对机体的免疫起调节作用。     

奶牛脾、胃、肠病中药治疗的处方

1脾病 脾气虚弱,宜健脾益气,四君子汤（主要成分为党参、茯苓、白术、炙甘草、当归、炙黄芪）。脾虚下陷,宜补中益气、升阳举陷,补中益气汤（主要成分为炙黄芪、党参、当归、白术、橘皮、升麻、柴胡、甘草）。脾虚泄泻,宜补脾益气、健脾利湿,参苓白术散（主要成分为党参、白术、茯苓、炙甘草、山药、扁豆、莲肉、桔梗、薏仁、砂仁）。脾虚食少,宜健脾开胃,益气黄芪散（主要成分为黄芪、茯苓、党参、陈皮、升麻、炙甘草、苍术、泽泻、生姜）。脾阳虚衰,宜温中散寒、振奋脾阳,理中汤、附子理中汤（主要成分为党参、白术、干姜、炙甘草、肉桂）。脾虚便血,宜健脾摄血,归脾汤、升芪散（主要成分为升麻、陈皮、炙甘草、炙黄芪、地榆炭、熟地、炒白芍、炒牡丹皮、全当归）。脾虚带下,健脾祛湿、温经散寒,完带汤（主要成分为党参、白术、苍术、山药、柴胡、甘草、车前子、炒荆芥穗、白芍、陈皮）。湿邪困脾,燥湿运脾、行气和胃,加味平胃散（苍术、白术、陈皮、厚朴、焦山楂等）。     

酮病对泌乳早期乳牛体内代谢和内分泌的影响

随机选取某奶牛场10头患临床酮病乳牛和10头同期健康对照组乳牛，检测了2组乳牛血液10项指标，阐明了酮病对泌乳早期乳牛体内代谢和内分泌的影响。结果显示，酮病乳牛血糖浓度极显著降低（P〈O．01），血浆NEFA和BHBA的浓度明显增高（P〈O．01）；酮病乳牛血浆Ins、LP、NPY、E2的浓度和Ins／Gn比值均明显降低（P〈O．05），而血浆Gn浓度未明显升高，P4未明显降低（P〉0．05）。表明，酮病乳牛体内某些激素协调作用紊乱会妨碍酮病乳牛能量负平衡的缓解，并将对产后生殖机能产生不良影响。     

苯噁唑和狄普诺啡对大鼠血浆、垂体和下丘脑β-内啡肽含量的影响

采用放射免疫分析法测定在苯噁唑(Rx781094) 狄普诺啡(M5050)作用下,不同时间大鼠血浆、垂体和下丘脑中β-内啡肽(β-EP)的含量。结果显示:Rx781094 M5050可降低大鼠血浆、垂体和下丘脑β-EP含量,5min开始显著降低,10min时都降到最低点,分别是8.92ng/mL、131.43ng/mg和9.32ng/mg,60min时β-EP亦低于正常值,至120min时逐渐恢复正常。垂体β-EP含量在10min时与对照组比较有显著差异。提示:Rx781094 M5050能降低大鼠血浆、垂体、下丘脑中β-EP含量,可能是发挥催醒作用的机制之一。     

艾灸足三里、肾俞穴对骨性关节炎模型大鼠PGE2、NO 及 IL-1β的影响

观察艾灸足三里、肾俞穴对骨性关节炎（OA）模型大鼠关节液中前列腺素E2（PGE2）、一氧化氮（NO）及血清中白细胞介素-1β（IL-1β）水平的影响，进一步研究艾灸足三里、肾俞穴干预 OA 炎症发生发展的作用机制。将24只 SPF 级健康雌性 SD 大鼠随机分为 Sham 组、对照组和艾灸组。通过切除双侧卵巢并切断右侧膝交叉及内侧副韧带建立 OA 动物模型，术后第4周，艾灸组给予艾灸足三里和肾俞穴治疗，Sham组及模型灌服2 ml 的生理盐水，分别于术后第4、8周采用酶联免疫吸附法（ELISA）法测定关节液中 PGE2、NO 及血清中 IL-1β的水平，对比各组数据。术后第 8周，艾灸组关节液中的 PGE2、NO 较 Sham 组明显升高（P ＜0．01），较对照组明显减少（P ＜0．05），较 Sham 组明显升高（P ＜0．01），艾灸组血清中 IL-1β的水平较对照组明显减弱（P ＜0．01）；艾灸组关节液中的 PGE2较术后第4周明显减少（P ＜0．05），其关节液中的 NO 及血清中 IL-1β较术后第4周明显减少（P ＜0．01）。艾灸足三里、肾俞穴能明显抑制 OA 大鼠关节液中 PGE2、NO 及血清中的 IL-1β水平，减缓 OA 炎症的发生发展，可作为 OA 的有效治疗方法。     

四君子汤在兽医临床上的应用

四君子汤出自《太平惠民和剂局方》,是治疗气虚证的基础方剂。1组成及用法人参45g(也可用党参45~60g代替),白术(土炒)45g,茯苓45g,炙甘草30g。水煎去渣,候温灌服。每剂煎二煎。2功用与主治益气健脾,主治脾胃气虚、运化乏力,症见四肢无力、食少便溏、舌质淡、脉细缓。3方解与症状分析脾虚则气血生化之源不足,故四肢无力;脾失健运,故食少便溏,舌质淡,脉细缓,乃脾胃气虚之象。治宜益气健脾,方用人参甘温益气补中,健脾养胃,为君药;以苦温的白术健脾燥湿为臣;以甘淡茯苓渗湿健脾为佐药,以炙甘草甘温益气调中为使药,四药合用,共奏益气补中、健脾养…     

神经肽Y免疫阳性神经元在江汉鸡延髓内的分布

为了探明江汉鸡延髓内神经肽Y（neuropeptide Y，NPY）免疫反应神经元的分布状况，采用石蜡切片和免疫组织化学链霉亲合素-生物素-过氧化物酶复合法（SABC法），对10羽江汉鸡的延髓进行了研究，并与北京鸭、乌鸡、肉鸡及大鼠的相关研究结果进行了比较。在光镜下观察分析了阳性神经元的分布状况，并用图像分析系统进行半定量分析。免疫组织化学染色结果显示，NPY阳性神经元主要存在于延髓下橄榄核中，孤束核及中缝核也有少量表达。表明，江汉鸡延髓NPY阳性神经元的分布与肉鸡、乌鸡、大鼠的大体相似；下橄榄核可能是NPY在延髓-小脑传递通路中的一个重要枢纽。