马铃薯品种‘并薯6号’遗传转化体系的建立

以马铃薯品种‘并薯6号’无菌试管苗茎段作为外植体,通过对遗传转化过程中预培养时间、植物激素的种类及配比、筛选剂浓度和抗生素的种类及浓度进行研究,初步建立了马铃薯品种‘并薯6号’的愈伤再生转化体系。结果表明,预培养时间为2 d时,愈伤组织诱导率、出苗率及转化频率最高。最适外植体愈伤组织诱导的培养基配方为MS+2.0 mg/L 6-苄氨基嘌呤(6-BA)+0.5 mg/L 2,4-二氯苯酚代乙酚(2,4-D)+0.4 mg/L激动素(KT),愈伤组织的诱导率为86.7%,愈伤组织形态较紧密,为深绿色,茎段两端膨大呈哑铃状,表面的白色须状物和毛状根较少。最适愈伤组织分化的培养基配方为MS+1 mg/L 6-苄氨基嘌呤(6-BA)+1 mg/L赤霉素(GA_3)+1 mg/L玉米素(ZT),幼苗比较粗壮,长势良好。最适的植株再生及生根筛选剂为10 mg/L的潮霉素(Hygromycin B,Hyg),转化频率较高,为20.3%。农杆菌抑制剂的最适浓度为200 mg/L的特美汀(Timentin,TMT),且在愈伤组织诱导、分化及生根阶段都需要加入TMT。综上所述,通过对农杆菌介导的愈伤再生转化过程中各个因素的研究,初步建立了‘并薯6号’的遗传转化体系,为马铃薯分子育种发展提供一定的基础。     

平贝母愈伤组织和不定芽诱导研究

目的应用组织培养技术对平贝母进行离体培养,从而得到愈伤组织和不定芽。方法以鳞茎为材料诱导愈伤组织与不定芽,采用正交实验设计确定最佳的激素种类与浓度。结果适当的激素组合及配比可诱导出愈伤组织和不定芽,最高的诱导率可分别达到14%以上、86.7%。结论愈伤组织最佳诱导培养基为MS+2,4-D 1.0mg/L+6-BA 0.9mg/L+NAA 0.5mg/L;最佳继代培养基为MS+2,4-D0.5mg/L+6-BA 0.3mg/L;不定芽最佳诱导培养基为MS+KT 0.8mg/L+NAA 0.3mg/L。     

老虎须的组织培养与植株再生

以老虎须茎段为试验材料,采用不同激素组合对其进行愈伤组织诱导和分化、芽增殖与生根研究。结果表明：老虎须茎段愈伤组织诱导和分化的最适培养基分别为MS＋6-BA 1.0 mg/L＋KT 3.0 mg/L＋NAA 0.5 mg/L和MS＋6-BA 1.0 mg/L＋KT 1.0 mg/L＋NAA 0.5 mg/L;芽增殖的最适培养基为MS＋6-BA 2.0 mg/L＋IAA 0.2 mg/L;生根的最适培养基为1/2 MS＋IBA 0.5 mg/L。     

贵港报春苣苔的叶片组培与植株再生

以贵港报春苣苔的叶片为外植体,研究不同培养基对其不定芽诱导和增殖、愈伤组织诱导与分化以及生根的影响。结果表明,外植体叶片以纵切为宜,不定芽诱导最适培养基为MS+6-BA 4.0 mg/L+IAA 1.5 mg/L,愈伤组织诱导最适培养基为MS+6-BA3.0～5.0 mg/L+2,4-D0.5～1.0 mg/L,不定芽诱导率以及愈伤组织诱导率均为100.00%;愈伤在MS+KT 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+potato 30 g/L+banana 30 g/L+apple 20 g/L+coconut juice 100 mL/L培养基上分化系数达12.64;不定芽在MS+ZT 1.0 mg/L+NAA 0.10 mg/L+potato 30 g/L+banana 30 g/L+apple 20 g/L+coconut juice 100 mL/L培养基的增殖系数为8.55;不定芽在3/4 MS+NAA 0.01～0.05 mg/L+活性炭1.0～3.0 g/L培养基上的生根率为100.00%。综上所述,叶片纵切后能通过不定芽途径以及愈伤组织途径建立贵港报春苣苔的组织培养技术体系,在该体系下不定芽增殖系数高、愈伤分化高,组培苗生根好。     

‘黄天霸’百合花器官愈伤组织诱导及植株再生

以‘黄天霸’百合花器官为外植体,采用正交试验,进行愈伤组织诱导及再分化研究,获得再生植株。结果表明,‘黄天霸’百合花器官的不同部位,其分化能力不同,出愈率由高到低依次是花丝>花柱>子房>花瓣>花药,花丝是较适宜诱导产生愈伤组织的外植体。花丝愈伤组织诱导的适宜培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA+0.3 mg/L 2,4-D,出愈率为69.56％,适宜愈伤组织增殖培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA;适宜芽分化的培养基为MS+0.6 mg/L 6-BA+0.6 mg/L NAA,芽诱导率达100％;最适生根培养基为MS+0.1 mg/L NAA,生根率达100％;试管苗移栽于草炭 ∶ 蛭石 ∶ 珍珠岩 ∶ 园土 ∶ 河沙=2 ∶ 1 ∶ 1 ∶ 1 ∶ 1的基质中,成活率达92％。     

云蔗03-194甘蔗组培快繁技术

以甘蔗新品种云蔗03-194的幼嫩叶片作为外植体,采用不同2,4-D浓度对幼嫩叶片的切片进行愈伤诱导,以不同6-BA和KT激素配比对甘蔗愈伤进行分化诱导和增殖培养,以不同NAA浓度及香蕉汁添加量诱导甘蔗组培苗生根。结果表明:适宜甘蔗幼嫩叶片愈伤诱导的培养基为MS+2,4-D 1.5mg/L,诱导分化培养以MS+6-BA1mg/L+KT 0.5 mg/L为宜,增殖培养以6-BA 2.0 mg/L+KT 1.0 mg/L为宜,适宜的生根培养基为MS+NAA 1.5mg/L+30mL香蕉汁。以河沙:红壤土(2∶1)为假植基质,假植成活率达92%～96%,植株生长健壮,长势良好。     

花生不同外植体芽诱导制约因素研究

以花生品种远杂9102成熟种胚发芽12d、4d的幼叶为外植体,对花生幼叶不定芽诱导制约因素进行了研究,结果表明,采用较高浓度的6-BA（8mg/L）、较低浓度的NAA（1mg/L）,不定芽诱导率可达70%以上。最佳诱导培养基为MS＋6-BA8mg/L＋NAA0.5mg/L＋AgNO32mg/L 最佳继代培养基为MS＋6-BA5mg/L＋NAA2mg/L＋AgNO32mg/L。同时试验发现种子预培养4d的幼叶不定芽诱导率较预培养12d的高 花生幼叶近叶柄基部切口处不定芽诱导率较高,是较理想的不定芽诱导部位。以远杂9102预培养2d的子叶作外植体,对愈伤组织诱导及分化进行试验,确定MS＋6-BA4.5mg/L＋2,4-D2.2mg/L为诱导愈伤的最佳培养基,愈伤组织诱导率达79.8%,最佳分化培养基为MS＋KT（0.15mg/L）。     

玉米幼胚培养及植株再生的研究

以不同玉米自交系幼胚为外植体,研究不同2,4-D浓度对愈伤组织诱导、6-BA浓度对愈伤组织分化和6-BA与NAA配合使用对试管苗生根的影响。结果表明:不同2,4-D浓度对愈伤组织诱导率影响差异不明显,但对胚性率诱导有明显影响,其诱导最佳培养基为MS+2,4-D 2 mg/L+水解酪蛋白500 mg/L+脯氨酸500 mg/L;愈伤组织分化的最佳培养基是MS+6-BA0.5 mg/L+水解酪蛋白500 mg/L+谷氨酰胺200 mg/L+PP₃₃₃ 2 mg/L;试管苗生根的最佳培养基是1/2 MS+6-BA0.5 mg/L+NAA2.0 mg/L+PP₃₃₃ 2.0 mg/L+活性炭0.2%。     

甘蔗新品系桂南亚08-212的组培快繁技术

以广西南亚热带农业科学研究所自育甘蔗新品系桂南亚08-212的幼嫩叶片作为外植体,采用不同2,4-D浓度对幼嫩叶片的切片进行愈伤诱导,以不同6-BA浓度对甘蔗愈伤进行分化诱导和增殖培养,以不同NAA浓度诱导甘蔗组培苗生根。结果表明:适宜甘蔗幼嫩叶片愈伤诱导的培养基为改良MS+2,4-D 2.0 mg/L,诱导分化培养以改良MS+6-BA 2.0 mg/L为宜,增殖培养以改良MS+6-BA 2.0 mg/L为宜,适宜的生根培养基为改良MS+NAA 5.0 mg/L。     

紫茉莉愈伤组织诱导的激素优化研究

[目的]该研究以紫茉莉（Mirabilis jalapaL.）为供试植物,建立愈伤组织诱导及继代培养体系,为后期的细胞悬浮培养奠定基础。[方法]以MS为基础培养基,加入不同浓度的6-BA、2,4-D、NAA、KT,设计L16（44）正交试验。[结果]得出最佳愈伤组织诱导组合为：6-BA 0 mg/L＋2,4-D 1 mg/L＋NAA 1 mg/L＋KT 1.5 mg/L,以附加2,4-D 1 mg/L＋KT 0.5 mg/L的继代培养基上生长的愈伤组织适合细胞悬浮培养。[结论]筛选出适合紫茉莉愈伤组织培养的激素条件,可为紫茉莉组培相关研究奠定基础。     

滁州白头翁组织培养及再生体系的建立

为建立白头翁再生体系,以白头翁主根的切段和试管苗叶片为外植体,比较2种外植体离体培养差异,探讨不同植物生长调节剂对不定芽和愈伤组织诱导、愈伤增殖和再分化及芽苗生根的影响。结果表明:叶片可以通过愈伤组织再分化和直接产生不定芽2种途径建立再生体系,而根只诱导出了愈伤组织,增殖培养中逐渐褐化死亡;在含6-BA培养基上,叶块死亡,而根只诱导出少量愈伤组织;叶片诱导不定芽的培养基为MS+TDZ 0.3 mg/L+NAA 0.1 mg/L;愈伤组织增殖的培养基为MS+TDZ 0.2 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L;再分化时,需要转接到TDZ和NAA组合的培养基上,其中处理组合TDZ 0.3 mg/L+NAA0.1 mg/L的再分化率达100%;生根培养基为1/2MS+NAA 0.2 mg/L+IBA 0.2 mg/L+蔗糖20 g/L。不同外植体离体培养存在差异,叶片较根易培养;TDZ对白头翁叶片培养效果较好,2,4-D对愈伤组织的诱导能力较强,而NAA适合于不定芽分化,NAA与IBA组合使用生根效果较好。     

彩椒的离体快繁研究

以红盾彩椒为试材,进行组培快繁,研究不同激素类型与配比组合对愈伤组织诱导、不定芽分化及芽的伸长的影响,并初步建立彩椒的组培快繁体系。 结果表明：子叶愈伤诱导最适培养基为：MS＋0.3 mg/L 6-BA＋1.0 mg/L NAA;不定芽诱导最适培养基为：MS＋3.0 mg/L 6-BA＋0.5 mg/L IAA＋4.0 mg/L AgNO3;芽伸长最适培养基为：MS＋2.0 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L IAA＋2.0 mg/L ZT＋2.0 mg/L GA3;最后在1/2MS＋0.5 mg/L IBA(或 0.5 mg/L NAA)培养基上进行生根培养。     

香蕉雄花和组培苗假茎胚性愈伤组织诱导的初步研究

从外植体来源、生长调节剂种类及浓度等方面研究影响巴西蕉胚性愈伤组织诱导的因素。结果表明,以未成熟雄花为外植体,MS培养基＋1 mg/L 2,4-D＋1 mg/L IAA＋1 mg/L NAA较适宜胚性愈伤组织诱导,26℃暗培养条件下,未成熟雄花的胚性愈伤组织诱导率为3%～4%。在MS培养基＋0.7 mg/L 2,4-D＋4 mg/L 6-BA中,以不同品种假茎为外植体的脱分化愈伤组织诱导率最高可达75%,但只有巴西(青杆)和海南本地米蕉可以诱导出胚性愈伤组织,诱导率分别为0.1%和0.5%。     

柱花草花药离体培养研究

以热研2号柱花草花药为外植体,研究不同植物生长调节剂 、培养基以及低温预处理等对柱花草花药培养的影响,以期建立柱花草花药培养体系,获得再生植株,为柱花草倍性、基因组学及分子生物学研究提供材料。结果表明：花药4 ℃低温预处理24 h诱导效果较好;N6培养基对愈伤组织的诱导效果比MS培养基好;最佳愈伤组织诱导培养基组合为N6＋2,4-D 0.5 mg/L＋KT1.0 mg/L;分化培养的最佳组合为MS＋NAA 0.2 mg/L＋6-BA 3.0 mg/L。     

2个海南荔枝稀优品种花药培养诱导胚性愈伤组织的研究

以紫娘喜和无核荔枝花药为外植体,采用L16(44)正交表,探讨不同生长调节剂及组合对荔枝愈伤组织诱导率及质量的影响,以期建立紫娘喜和无核荔枝花药愈伤组织诱导技术体系.结果表明:以MS+0.4 g/L水解乳蛋白(LH)+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂为基本培养基,紫娘喜花药在添加1 mg/L KT、0.5 mg/L NAA和2mg/L2,4-D的培养基上诱导胚性愈伤组织效果较好;无核荔枝花药在添加0.5 mg/L BA、0.5 mg/L NAA、3 mg/L 2,4-D培养基上诱导胚性愈伤组织效果较好.     

2,4-D、NAA对甘蔗胚性愈伤组织形成及分化的影响

以新台糖22(ROC22)、福农94-0403、云蔗03-258及P44为材料,MS为基本培养基,研究切割厚薄不同的外植体及2,4-D浓度对甘蔗愈伤组织诱导的影响,R1、R2及R3三种不同培养基对分化不定芽的影响。结果表明:①外植体切片0.1cm时的诱导率较切段0.5cm高;②切片时最适2,4-D浓度为1～2mg/L,而切段时则以3mg/L时诱导率达最大;③R2和R3分化效果优于R1,R3分化培养基:MS+6-BA 1mg/L+NAA 1mg/L对愈伤组织分化不定芽的效果最佳。     

橡胶草根部离体培养诱导植株的研究

以橡胶草的根部作为外植体进行组织培养和快速繁殖研究。结果表明:橡胶草根部外植体防止褐化的最佳方法为MS+500 mg/L AC预培养3 d;根部愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+0.6 mg/L 6-BA+0.3 mg/L 2,4-D,平均诱导率为90%;分化培养基为MS+0.8 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA;生根培养基为1/2MS+0.2 mg/L NAA。     

甜叶薰衣草愈伤组织培养初步研究

以甜叶薰衣草的叶与茎段为材料,研究不同外源激素配比对甜叶薰衣草愈伤组织诱导及继代培养的影响。结果表明:同等条件下,叶愈伤组织的诱导率高于茎段,适宜叶愈伤组织诱导的培养基为MS+6-BA3.0mg/L+2,4-D 0.1mg/L;适宜茎段愈伤组织诱导的培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+2,4-D 0.1mg/L;适宜愈伤组织继代培养的培养基为MS+6-BA 3.0mg/L+NAA 0.5mg/L,以15-18 d为继代的最佳时间。     

甜菜组织培养与植株再生体系的建立

本研究以甜菜品种"甘糖7号"叶柄为外植体,通过诱导愈伤组织、愈伤组织分化不定芽、芽生根和移栽等步骤建立一套甜菜组织培养与植株再生体系。结果表明,诱导甜菜叶柄愈伤组织的最佳培养基为MS+4 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,诱导率达88.2%;诱导愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+4 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,分化率仅为9.4%;生根培养基为MS+0.1 mg/L NAA,生根率达33.3%。甜菜再生苗移栽至蛭石中,保温保湿7~10 d后,成活率可达90%以上。本研究结果将对糖料作物甜菜抗逆遗传改良及其基因工程育种具有推动作用。     

甘蔗近缘属斑茅组织培养高频再生体系的建立

以甘蔗近缘属植物斑茅的幼嫩叶片为材料,研究MS、SH、B5三种基本培养基和不同激素(2,4-D、NAA、6-BA)配比对斑茅愈伤组织诱导及继代培养的影响,并筛选出斑茅细胞高频再生体系的最优培养基配方。研究结果表明,斑茅幼嫩叶片愈伤组织诱导培养基以MS+2,4-D 3.0 mg/L+6-BA 0.4 mg/L为最适,愈伤组织继代培养基以MS+2,4-D 3.0 mg/L为最适。在此条件下诱导的愈伤组织质地疏松,具有较强的分化能力。目的是建立斑茅组织培养的高频再生体系,为斑茅材料的细胞悬浮培养、染色体加倍和细胞融合等研究提供一定参考。