黄瓜花叶病毒甜菜分离物的分离鉴定

 从新疆石河子地区春季采种甜菜和夏播母根用甜菜上分离到3个病毒分离物,代号为石-B-2、石-B-5和石-B-D,自然感染甜菜引起叶片黄色花叶、扭曲、皱缩和植株严重矮化。病毒粒体球状、直径28~30 nm、均含有分子量约为2 9k D外壳蛋白、3种相同的较大片段的双链RNA (即3400 bp的RNA1、3100 bp的RNA₂、2300 bp的RNA₃)和片段大小约400 bp的小RNA,石-B-2和石-B-D具有1100 bp的RNA4,在ELISA和琼脂双扩散试验中,3个分离物均与CMV-83抗血清有特异反应,初步认为这3个球状病毒分离物属于CMV,但它们具有狭窄的寄主范围,不感染心叶烟、蔓陀罗、番茄,在寄主反应、双链RNA4和卫星RNA的大小上明显不同于国内外报道的CMV株系或分离物,同时说明侵染甜菜的CMV可能存在着株系分化。     

新疆石河子、伊宁地区黄瓜花叶病毒株系分化

为了研究新疆黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)分子变异及株系分化,对从石河子和伊宁地区采集的205个加工番茄、23个辣椒、4个番茄、2个南瓜样品进行酶联免疫检测和RT-PCR检测.在4种寄主上均检出了亚组Ⅰ型CMV,其中加工番茄的感染率高达74.15％.进一步对来自辣椒的YN-6、LJ-4、L-10,加工番茄的S1-1、S1-14,番茄的YN-2,以及南瓜的YN-9等7个样品CP、RNA3、MP核苷酸序列进行相似性和进化树分析.7个样品与CMV亚组ⅠB株系分离物的相似性较高、亲缘关系最近,均可归为CMV亚组ⅠB.而来自辣椒的LJ-4、L-10与其余5个样品的序列相似性较低,亲缘关系较远,在进化树上形成独立分支.说明在新疆加工番茄及其它蔬菜上广泛流行的CMV存在分子变异.     

表达dsRNA的细菌提取液可抑制黄瓜花叶病毒对烟草的侵染

 利用RT-PCR分别克隆了CMV P3613株系的RNA2片段、MP(movement protein)基因片段及CMV AN株系的CP(coat protein)基因片段。以CP基因为中间间隔序列,分别构建了含有RNA2片段和MP基因反向重复片段的原核表达载体。体外转录试验表明:两个载体转录后都能形成预期大小的dsRNA。经过IPTG诱导,在大肠杆菌HT115(DE3)菌株中可表达产生预期大小的核酸片段,经DNase和RNaseA消化处理,证实为dsRNA。将表达病毒基因dsRNA的细菌超声破碎后处理烟草,进行保护和治疗试验,结果表明:表达CMV MP基因和RNA2片段dsRNA的细菌破碎液能够诱导烟草对CMV产生抗性。接种病毒60d后,保护效果试验病株率分别为45%和60%,治疗效果试验病株率分别为75%和85%,而其他对照发病率均为100%。本研究结果证明了利用RNA沉默的原理,构建具有反向重复序列的原核表达载体,用细菌表达dsRNA的粗提取物可防治CMV对烟草的侵染。     

卫星RNA作为黄瓜花叶病毒的生防因子——Ⅲ.含有卫星RNA的黄瓜花叶病毒S51的某些生物学特性的研究

 1982~1983年比较了含有卫星RNA的黄瓜花叶病毒(CMV)S51和CMV分离物的寄主范围、症状反应和蚜虫传染的特性。对属于8科25种以蔬菜为主的植物的接种和回接实验证明:S51比CMV的寄主范围窄得多,只侵染茄科、葫芦科和藜科中的10种植物,CMV侵染6科的20种植物。S51除在西葫芦的部分植株上有花叶症状外,均无症状;而CMV能引起重花叶、畸形和坏死等症状。桃蚜对S51的传染效率比CMV低,潜育期延长2~6天。     

中国小麦花叶病毒(CWMV)复制酶基因在病株体内的表达分析

中国小麦花叶病毒(Chinese wheat mosaic virus,CWMV)是引起我国小麦花叶病的重要病原之一,其基因组由2条单链正义RNA片段(RNA1-2)组成。本研究根据发表的基因组序列设计特异性引物,扩增了CWMV复制酶基因的部分片段(nt102~1101),并克隆至原核表达载体pGEX-6P1,然后导入大肠杆菌E.coli BL21(DE3)pLysS中诱导表达。重组的复制酶蛋白经亲和层析纯化后免疫家兔制备多克隆抗体。Western-blot分析表明该抗体具有高度的特异性,能用于病株体内CWMV复制酶蛋白的检测。检测分析显示在病株体内,CWMV基因组RNA1可直接充当其复制酶基因的mRNA;在感染的细胞中,其复制酶组分主要是RNA1 ORF1编码的蛋白,分子量约153 kDa,且特异性地定位于膜结构上。     

黄瓜花叶病毒分离物核酸酶保护试验(RPA)方法的株系分化研究

 采用黄瓜花叶病毒((CMV)亚组Ⅰ株系Fny-CMV及亚组Ⅱ株系Ls-CMV的RNA₂的特定序列片段的cDNA克隆,体外转录,同时掺入³²P标记制备负链RNA探针,再与纯化的甜椒上的CMV中国分离物的RNA进行杂交,检测其与探针之间的同源性。共检测样品分离物3份。试验结果表明:河南新乡和北京密云的CMV甜椒分离物与Fny-CMV的核苷酸有高度同源性,隶属于Fny-CMV为代表的亚组Ⅰ株系。来自福建的样品与亚组Ⅱ的Ls-CMV株系有高度同源性,隶属于CMV亚组Ⅱ株系。本试验同时利用源于我国CMV亚组Ⅰ的K株系的RNA₂两个EcoR Ⅰ位点间1657-2125 nt的核苷酸序列为探针,同样与以上3份CMV中国分离物进行RNA杂交,进一步比较分析了这几个分离物与我国亚组Ⅰ的K-CMV株系的关系,证明了我国CMV存在亚组与株系分化。     

两种类型黄瓜花叶病毒卫星RNA的序列、结构以及对辅助病毒的致病性调控分析

黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)卫星RNA(satellite RNA,satRNA)通常影响CMV的致病性。本研究设计了检测satCMV的简并引物,通过RT-PCR从山东省泰安市3种自然发病寄主中检测到satCMV,发现了两类长度有明显差异的satCMV:白菜与萝卜中克隆的satCMV为339个核苷酸,二者的核苷酸一致率为99.41%;烟草中克隆的satCMV为383个核苷酸,与白菜和萝卜中satCMV的核苷酸序列一致率均为71.06%。系统进化分析表明这两类长度有明显差异的satCMV亲缘关系较远。两种类型的satCMV与CMV-Fny混合接种对CMV致病症状的调控存在明显差异。利用m Fold软件分析了两类不同长度的CMV卫星RNA基因组及其互补链的RNA结构特征,表明两类sat CMV与CMV互作的活跃度以及核心结构域存在差异。两类satCMV全基因组的克隆以及结构分析为研究不同类型satCMV与CMV的互作及其对CMV致病性的影响奠定了基础。     

关于CMV-CP基因番茄植株的抗病表现

黄瓜花叶病毒病(CMV)严重危害番茄生产,降低番茄产量和质量。目前,CMV-CP基因转化番茄在国内外获得成功,已得到抗CMV的转基因番茄植株。本试验以带有CMV-CP基因的番茄品种80-2-1为试材,不带CMV-CP基因的80-2-1作对照,参照JeffersonR.A.方法,研究转基因番茄R1～R4代植株对CMV的抗病表现及外源标志基因的表达。转CMV-CP基因的番茄植株对CMV侵染表现显著的抗性,温室中接种的植株无症率为:R1代94%,R2代95.1%,R3代95.4%,R4代95%;大田中自然发病的植株无症率为:R2代65.6%,R3代76.9%。在转基因的番茄植株中,外源基因GUS(β-gluc…     

甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV)RNA4基因组的克隆与表达

 以甜菜坏死黄脉病毒内蒙分离物(BNYVV-NM1) RNA为模板,通过反转录和PCR扩增得到含有全长RNA4基因组的cDNA克隆pGBF6。序列分析结果表明。     

侵染厦门百合的百合无症病毒的鉴定及其分子检测

百合无症病毒(Lily symptomless carlavirus, LSV)属于香石竹潜隐病毒组(Carlavirus),是单链正义RNA病毒。基因组全长为8 394 bp,共有6 个开放阅读框(Open reading fragment,ORF),分别编码RNA依赖的RNA复制酶,三基因连锁结构, 外壳蛋白和16 kD核酸结合蛋白。主要侵染百合属、郁金香属植物,通常在百合上不产生明显症状,与黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus, CMV)复合侵染时,导致叶片出现坏死斑。LSV 是危害百合的重要病毒,在世界各地都有分布。近年来国内陆续有该病毒病的报道,其发病率一般在40％-50％,二代种球的带毒率在90％以上, 严重制约了我国百合鲜切花的产量和质量,目前LSV已成为各口岸进出口百合种球的主要检疫对象。     

Weed control in direct-seeded lowland rice under poor water control conditions

Several herbicides applied singly and in combination were evaluated for weed control and for their effects on crop yield in direct-seeded lowland rice under poor water management conditions characteristic of the conditions in which lowland rice is grown by most farmers in West Africa. Several herbicides including cyperquat at 3.0 kg/ha, a mixture of cyperquat and 2,4-D at 2.0 + 0.5 kg/ha, bentazon at 2.0 kg/ha and avirosan satisfactorily controlled sedges in the 3-year study. Crop yield was consistently high in plots where weeds were controlled with post-emergence application of MCPA + propanil at 1.0+1.7 kg/ha, propanil + thiobencarb 2.2+1.2 kg/ha, oxadiazon 1.5 kg/ha, bentazon 2.0, granular 2,4-D at 1.0 kg/ha, and a pre-emergence application of bifenox at 2.0 kg/ha. Crop yields in plots treated with these herbicides were generally better than with two hand-weedings.     

林木白蚁的生物防治和生物源农药防治研究进展

林木白蚁在我国南方林区危害严重。目前,林木白蚁的防治仍以化学防治为主。但化学农药残毒严重,对环境和人类健康已构成极大威胁。利用生物防治以及生物源农药对林木白蚁进行防治具有高效、低毒,与环境兼容的特性,极具发展潜力。本文综述了生物防治以及生物源农药防治林木白蚁的研究现状与进展,并对其目前存在的问题和未来应用前景进行了分析。     

Site-specific weed control technologies

Site-specific weed control technologies are defined as machinery or equipment embedded with technologies that detect weeds growing in a crop and, taking into account predefined factors such as economics, take action to maximise the chances of successfully controlling them. In this study, we describe the basic parts of site-specific weed control technologies, comprising weed sensing systems, weed management models and precision weed control implements. A review of state-of-the-art technologies shows that several weed sensing systems and precision implements have been developed over the last two decades, although barriers prevent their breakthrough. Most important among these is the lack of a truly robust weed recognition method, owing to mutual shading among plants and limitations in the capacity of highly accurate spraying and weeding apparatus. Another barrier is the lack of knowledge about the economic and environmental potential for increasing the resolution of weed control. The integration of site-specific information on weed distribution, weed species composition and density and the effect on crop yield, is decisive for successful site-specific weed management.     

Pest control in coffee

Coffee pests have been estimated to cause losses of about 13% of the world yield but are most serious in Africa, particularly where Arabica coffee is grown. Coffee pests are normally indigenous and except for the berry borer beetle (Hypothenemus hampei Ferrari) there has been little movement between the main production areas. There is a great variety of pests but because the crop is perennial, evergreen and only grown in areas without climatic extremes, pest populations only rarely become intolerable, being held in check for most of the time by parasites, predators and diseases. Routine spraying of insecticides in coffee plantations is undesirable for these kill parasites and predators and often result in pest outbreaks. An effective but simple integrated control system has been evolved over many decades in East Africa, using a combination of cultural, biological and chemical control. Pest numbers are monitored continuously by growers and insecticides are used as selectively as possible. The system is ideally suited to areas where labour is cheap but technology is expensive.     

蚜虫防治技术研究进展

蚜虫是地球上最具破坏性的害虫之一,分布十分广泛.蚜虫生活史比较复杂,如世代交替,越冬方式差异,多型现象等特点,其以尖利的口器刺吸植物汁液引起植物营养恶化,甚至落叶、萎蔫,而且它还能传播多种植物病毒,造成严重的经济损失.本文根据近年来国内外对蚜虫的最新研究成果,综述了蚜虫农业防治、物理防治、化学防治、生物防治、生态调控等方面的研究进展,并对今后的研究方向进行了展望.     

桉树焦枯病药剂防治试验

桉树焦枯病Ｅｕｃａｌｙｐｔｕｓｄｉｅｂａｃｋ是国内森林检疫性病害之一。主要发生在桉树苗木和 4年生以下的幼林中 ,同时也侵染萌芽林。多发生在 5～ 9月高温高湿季节。从植株下部枝叶开始发病 ,逐渐向上蔓延。 2 0 0 0年 4～ 9月 ,广西合浦常乐、曲樟等地普遍发生 ,发病株率达 75%以上 ,感病程度Ⅲ -Ⅳ级达2 8% ,个别林分达Ⅴ级 ,直至整株枯死。严重发生面积 48ｈｍ2 ,严重发病的植株中下部叶片几乎全部感病 ,枝条失水变硬、干枯 ,叶片脱落达植株的 2 /3以上。春季感病早的至 9月份仍可生长出少量新叶 ,但叶片细小 ,发育不良 ,影响了当…     

兰花病害及防治

兰花是我国和世界的名贵花卉 ,近年来 ,“兰花热”风靡世界 ,兰花的炒作使许多花卉爱好者又增添了一个花卉品种。然而 ,要栽培兰花 ,纵使精心养护 ,也难免病害侵扰。如何防治兰花病害发生呢 ?这就要了解病因 ,对症下药 ,根据植物病害分类法 ,现将兰花病害分为细菌性病害、真菌性病害和病毒病害。1　细菌性病害有兰花腐烂病。根据发病部位不同 ,把兰花腐烂病分为蘖腐病和软腐病。症状 :蘖腐病症状——蘖芽基部呈水渍状绿豆大小的病斑 ,后成为暗绿色烫伤状大斑块 ,蔓延到芽鞘外部 ,呈深褐色腐烂 ;软腐病症状——在叶的末端出现水浸状的暗绿色…     

假高粱的特征特性及控制

假高粱又名石茅高粱、宿根高粱、阿拉伯高粱、约翰逊草、琼生草和亚刺伯高粱。学名Sorghum halepense(L．)Pers．[异名Holcus halepensis L．]，英文俗名Johnson grass，Aleppo Milletgrass。属单子叶植物纲(Monocotyledoneae)，莎草目(Cypera-les)，禾本科(Poaceae)，蜀黍属(Sorghum Moench)。