禽流感血凝和血凝抑制试验的影响因素分析

在进行禽流感血凝和血凝抑制试验时,要严格按照操作规程,考虑多方面的因素,尤其要注意各步骤操作的细节,认真细致地进行操作,尽量消除不利影响,减少误差,确保试验结果的准确性.     

禽流感灭活疫苗和禽流感-新城疫重组二联活疫苗对比试验

为得到较好的禽流感免疫效果,根据本地区禽流感流行特点选用两种不同剂型流感疫苗,即禽流感灭活苗和禽流感-新城疫重组二联活疫苗,分别对蛋鸡和肉鸡进行免疫接种,通过血凝抑制试验来检测两种不同剂型疫苗免疫后禽流感抗体水平.结果显示,禽流感灭活苗无论对蛋鸡还是对肉仔鸡的抗体检测效价均高于禽流感-新城疫重组二联活疫苗,免疫接种后21 d时,禽流感灭活疫苗(H5N1亚型)的HI抗体水平平均为6.5,而禽流感-新城疫重组二联活疫苗的HI抗体水平平均为3.75.     

稀释液对禽流感HA和HI试验影响的分析

针对稀释液对禽流感血凝及血凝抑制试验的影响进行了试验研究。结果显示,用pH7.0的PBS缓冲液测定抗原的血凝滴度比常用生理盐水和调pH至7.0的生理盐水高出将近一倍,测定的阳性血清的抗体滴度高出一孔。试验表明用PBS为稀释液能够降低试验成本、提高检出率。该研究为标准化禽流感血凝及血凝抑制试验提供了可靠的实验依据。     

禽流感的快速诊断方法

最近一些亚洲国家相继报道有禽流感发生，首先报道的是韩国、日本、越南，其次为柬埔寨、印度尼西亚、巴基斯坦和中国。越南是在联合国协助之下做出诊断，柬埔寨是将病料送往法国作出的诊断，泰国最初被误诊为禽霍乱，印度尼西亚则被误诊为新城疫，目前仍可听到某些地区有疑似禽流感     

2018年贵州省部分地区高致病性禽流感H5和H7亚型免疫抗体检测分析

为了评价贵州省高致病性禽流感的免疫效果,采用血凝试验和血凝抑制试验对2018年贵州省10个地区76个养殖场(33个散养户和43个规模化养殖场)送检的1304份禽血清样本进行高致病性禽流感H5和H7亚型免疫抗体检测.结果:(1)H5亚型免疫抗体总体合格率为68.10%(888/1304),其中冬春季节合格率为78.34%(358/457),夏秋季节合格率为62.57%(530/847);H7亚型免疫抗体总体合格率为65.57%(855/1304),冬春季节合格率为70.46%(322/457),夏秋季节合格率为62.93%(533/847).(2)检测的10个地区中,毕节市、安顺市、遵义市、贵阳市4个地区H5亚型免疫抗体合格;毕节市、贵阳市、安顺市、遵义市、黔西南州5个地区H7亚型免疫抗体合格.(3)检测的76个养殖场中,规模化养殖场H5亚型免疫抗体合格率为80.85%(587/726),有36个养殖场免疫抗体合格;散养户合格率为52.08%(301/578),有16个养殖户免疫抗体合格.规模化养殖场H7亚型免疫抗体合格率为83.19%(604/726),有35个养殖场免疫抗体合格;散养户合格率为43.43%(251/578),有17个养殖户免疫抗体合格.     

禽流感免疫抗体效价检测

为掌握H5N1高致病性禽流感疫苗免疫效价,了解乌鲁木齐市米东区鸡群禽流感免疫抗体水平,对该地区不同鸡场进行了禽流感抗体检测。结果表明,40只免疫鸡,免疫抗体效价合格数33只,总合格率为82.5%。说明近几年对高致病性禽流感采取的强制免疫措施达到了比较显著的效果。     

具有HI活性的抗H5亚型流感病毒特异性单克隆抗体的研制

以H5N1亚型禽流感病毒分离株A/Duck/Zhejiang/11/00(H5N1)(DZJ/1100)作为免疫原,浓缩纯化后免疫BALB/c小鼠,三次免疫后,取免疫小鼠脾细胞与SP2/O细胞融合,融合阳性细胞用血凝抑制(HI)方法进行检测,阳性细胞株经三代克隆纯化后,获得三株能稳定分泌抗血凝素特异性HI单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为DD7、FG10、CG12.三株杂交瘤细胞株产生的小鼠腹水和细胞培养液上清的HI滴度分别是213、215、211和27、8、23.与其他具有血凝活性的禽类病毒以及其他14个HA亚型的禽流感病毒的交叉HI试验表明:这三株单抗具有良好的禽流感病毒亚型特异性;与其他H5亚型流感病毒分离株的HI试验和中和试验证实这三株单抗具有良好的交叉性(分别为7/8、8/8、8/8)和中和活性(6/8、8/8、8/8).该亚型特异性单克隆抗体的研制成功为H5亚型禽流感病毒的疫情病原学快速诊断提供了坚实的物质保障.     

H5亚型禽流感单克隆抗体的研制及应用

以禽流感H5亚型病毒分别免疫BABL／C小鼠，取其脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞融合，用血凝抑制试验(HI)和间接ELISA检测细胞上清液，结果获得了3株抗禽流感H5亚型病毒特异性单克隆抗体，分别命名为186，1D4，7D1；其中1D4株为抗禽流感H5亚型病毒血凝素特异性单克隆抗体细胞株．186株和7D1株为针对禽流感病毒NP蛋白的单克隆抗体细胞株。经3次亚克隆后，100％杂交瘤细胞保持了分泌抗禽流感病毒抗体的能力。这些单克隆抗体小鼠腹水ELISA效价为10^5，HI效价为2^11-12。研究结果表明，所有这些单克隆抗体仅与相应的禽流感病毒株发生特异性反应，而不与鸡新城疫病毒、产蛋下降综合征病毒、鹅副粘病毒等反应。所有这些单抗在禽流感诊断中将发挥重要作用。     

禽流感免疫抗体检测方法比较

禽流感是由正粘病毒科流感病毒属，A型流感病毒引起的禽类烈性传染病，我国兽医部门将其列为一类动物疫病。随着我们国家动物防疫对禽流感的重视，各地兽医部门对该病的免疫、监测迅速加以控制防止疫病蔓延显得尤为重要，为了寻找到一种更为准确、实用的监测方法，2003年7月份，我们对禽流感病毒进行比较了琼脂凝胶免疫扩散试验与血凝抑制试验两种监测方法的准确性研究。现将报告如下：     

黔东南州2015年"两节"期间禽流感监测分析

目的:了解禽流感病毒H5与H7亚型在不同场所外环境的分布状况,切实做好"两节"期间禽流感防控工作.方法:从养殖场、活禽交易市场、散养户、环境采集样品进行检测.结果:荧光RT-PCR复核,764份样品,H5亚型阳性数19份,阳性率为2.49%,H7亚型阳性数为零.H5亚型阳性分别来自交易市场和禽宰杀点.结论:黔东南州部分交易市场和禽宰杀点存在着H5亚型禽流感病毒,接触禽类内脏及活禽交易市场和家禽屠宰点是感染禽流感的高危因素,应加强环境卫生整治,落实环境消毒,以减少H5亚型禽流感传播至人的风险.     

浅谈禽流感血凝和血凝抑制试验注意事项

禽流感血凝和血凝抑制试验可用于血清中抗体水平的监测,也可用于判断未使用疫苗群体的感染状态.这两种试验在实践中应用的比较多,但也容易出错,现对该试验过程中应注意的事项做一探讨.     

苏州地区高致病性禽流感抗体水平监测

禽流感，尤其高致病性禽流感对养禽业的危害十分严重。禽类在紧急免疫后的抗体水平直接关系疫情的控制、养禽业的发展以及人类的健康。因此我们用血凝及血凝抑制试验对高致病性禽流感抗体水平进行监测显得十分重要和必要。     

高致病性禽流感抗体水平监测

高致病性禽流感的发生对养禽业危害十分严重，禽类在紧急免疫禽流感疫苗后产生的抗体水平直接、关系到疫情的控制、养禽业的发展以及人类的健康。因此在大力发展养禽业的同时我们通过血凝及血凝抑制试验对荣昌县免疫高致病性禽流感抗原后的家禽的抗体水平进行了实时监测，取得了满意效果。     

禽流感血凝和血凝抑制试验体会

近年来,高致病性禽流感疫情在世界各地均有发生,而且越演越烈,人感染高致病性禽流感的事件越来越多。预防高致病性禽流感已成为全球性的大事。     

抗H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白特异性单克隆抗体的研制及鉴定

以抗H5亚型禽流感病毒（AIV）JSD株鸡胚尿囊液免疫8周龄BALB/c小鼠,第4次免疫后取其脾淋巴细胞与SP2/0-Ag-14骨髓瘤细胞融合,用血凝抑制试验（HI）对杂交瘤进行筛选,经3次亚克隆后,共获得4株针对血凝素（HA）蛋白的特异性单克隆抗体,分别命名为：2D2、2C8、3D3和3D11。该4株单抗的小鼠腹水的HI效价在2^13～2^15,ELISA效价为1.2×10^5～5.1×10^5。亚类鉴定结果表明,2D2和3D11属于IgG1,2C8属于IgG3,3D3属于IgG2a亚类;特异性试验结果表明,上述4株单抗仅与H5 AIV毒株发生特异性反应,而不与其他亚型AIV以及NDV、IBV和EDSV-76等病毒反应;鸡胚中和试验结果显示,4株单抗均具有较好的中和活性。本研究成功获得4株针对H5 AIVHA蛋白的特异性单抗,为临床H5 AIV的血清学监测及鉴定提供了必需的试剂。     

抗禽流感病毒H5和H9亚型血凝素特异性单克隆抗体的研制及应用

以禽流感题H5和H9亚型病毒分别免疫Balh／c小鼠，取其脾细胞与SP2／0的骨髓瘤细胞融合，用血凝抑制试验(HI）检测细胞培养上清，结果获得了6株特异性单克隆抗体，其中抗禽流感题亚型病毒血凝素特异性单克隆抗体细胞株3株，分别命名为4B6、4A3、3H1；抗H9亚型病毒血凝素单克隆抗体细胞株3株，命名为6E6、6B6和5B4。这些单克隆抗体小鼠腹水HI效价为2^13-15，细胞培养上清抗体HI效价为2^7-8。研究结果表明，所有这些单克隆抗体仅与试验的相应题或ID亚型病毒株发生特异性反应，而不能与鸡新城疫病毒、鹅新城疫病毒、鹅腺病毒和鸡产蛋下降综禽征病毒(EDS76)等反应。实验室检测结果证明，应用这些单克隆抗体能在24h内迅速检测出相应的禽流感病毒。所有这些单克隆抗体将在禽流感的预警预报工作中发挥重要作用。     

陕北地区鸡禽流感免疫监测及免疫方案研究

H5及H9型禽流感是目前养禽业主要防疫的两种流感病毒亚型,为调查陕西省神木县两种亚型流感病毒的防疫情况,本研究在2011年∽2012年间从神木多家种鸡场、商品鸡场及散养户采集血样,测HI效价,评价禽流感的免疫效果.结果表明：2011年在普遍采用单价疫苗免疫的情况下,H5抗体合格率较低,最好免疫效果合格率为82.40％,最差免疫效果合格率只有67.7％,而H9抗体合格率100％;2012年推广H5和H9二联疫苗免疫,H5抗体合格率达100％,而H9抗体合格率有所下降,为H5和H9禽流感免疫提供了临床参考依据,同时也为二联疫苗的使用提供参考.     

2019年秋季双鸭山市禽流感和鸡新城疫集中抗体监测与分析

通过血凝和血凝抑制试验方法,对双鸭山市内各区秋季集中免疫禽流感和新城疫的鸡群进行免疫监测,结果显示,禽流感H5亚型抗体监测群体合格率为94.3%,禽流感H7亚型抗体监测群体合格率为95.2%,鸡新城疫抗体监测群体合格率为90.4%。参照农业部相关规定,灭活疫苗家禽免疫21 d后监测群体合格率要求≥70%,结果表明,秋季集中免疫禽流感和鸡新城疫抗体水平较高,具有很好的保护力。     

禽流感病毒检测方法的研究进展

禽流感(Avian Influenza,AI)是由A型流感病毒引起的一种病毒性传染病,它于1887年在意大利首次被发现,现已呈广泛性传播和全球性分布,是世界动物卫生组织规定的A类传染病,我国也将此病列为一类动物疾病[1].     

杨陵鸡群禽流感H5亚型灭活疫苗强制免疫后抗体监测

2006年2月～2006年3月,用禽流感H5灭活疫苗对杨陵区境内的所有家禽进行了强制免疫,小鸡颈背侧皮下注射0．3mL／只,成年鸡皮下注射0．5mL／只。免疫接种后7d可测出血清HI抗体,21d抗体水平平均可迭2。左右,最高达2^6.60,免疫持续期为3个～4个月。