冰冻切片免疫酶和免疫荧光技术快速检测REV抗原

以禽网状内皮组织增生病病毒(reticuloendotheliosis virus,REV)的单克隆抗体11B154作一抗,建立了在冰冻切片中快速检测REV的免疫酶(IHC)和免疫荧光技术(Mc-IFA)。运用两种技术对人工接种REV的肉种鸡和疑似REV田间病例的肝脏、脾脏、腺胃、心脏、骨髓等器官的组织进行了检测,并同病毒分离方法进行了敏感性和特异性的比较。结果表明:在人工接种的肉种鸡中,采用IHC、Mc-IFA和病毒分离方法结果一致,均为阳性;在送检的疑似RE的24份病料中,用IHC检测出阳性率51.7%(13/24),Mc-IFA检测出阳性率62.5%(15/24),其中13份存在交叉;病毒分离的阳性率为37.5%(9/24),阳性数包括在13份IHC阳性病料中。由此表明冰冻切片免疫酶和免疫荧光技术都可用于临床快速检测,其中免疫荧光可用于早期的粗检,而免疫酶可用于细胞内抗原定位。     

用免疫荧光技术快速诊断仔猪大肠杆菌病

为建立一种快速、准确的仔猪大肠杆菌病诊断方法,从某猪场腹泻病死的小猪采取病料,经处理后取处理病料腹腔注射12只小白鼠,同时以灭菌生理盐水作对照.24 h内,注入病料的小白鼠全部死亡.采取死亡小白鼠的肝脏,充分研磨后加灭菌生理盐水作1∶5稀释,向稀释液中加入适量大肠杆菌兔血清抗体,混匀后分别于5,10,30 min时取病料涂片,用荧光标记的抗兔IgG抗体染色,荧光显微镜观察.结果显示:从死亡小白鼠病料涂片中能检测出大肠杆菌,其形态与标准大肠杆菌革兰氏染色形态一致.接种生理盐水小鼠未出现死亡,处死后取病料,以同样的方法进行检测,未检测出大肠杆菌.     

用酶联免疫吸附试验技术检疫猪瘟

采用酶联免疫吸附试验,确诊甘肃天水一起疫情引起发病的原因为猪瘟病毒。并从猪瘟的流行病学调查、检验诊断等方面进行了系统的论述。     

猪瘟的快速诊断——用反向间接血凝试验检测猪瘟抗原

以猪瘟免疫血清提取1gG,致敏用丙酮醛、甲醛固定的绵羊红血球,作反向间接血凝试验,可以检出猪瘟病料(脾及淋巴结)中的抗原。以其他IgG,如出败血清IgG、正常猪IgG致敏的血球作对照试验,非特异性凝集极小。以健康猪或其他高热病如出败、猪丹毒、弓形体病猪脾脏作阴性样品对照,血凝滴度也很低或阴性。以猪瘟高免血清作血凝抑制试验,有明显抑制作用。说明这种试验,对猪瘟抗原是有特异性的,可以作为猪瘟诊断用。 在40头血毒猪中,其脾脏有31头(77.5％)是阳性,淋巴结有30头(75％)是阳性。在此40头猪中,仅有3头在脾或淋巴结均为阴性,未检出抗原,因此,实际有37头(92.5％)的脾脏或淋巴结或两者都检出猪瘟抗原。但是,在病猪血液中不能检出抗原(凝集滴度过低),在脾脏浸出液中,如含有血色素过多,也不易检出。在新鲜采取的脾脏或淋巴结中,非特异性凝集不易排除,影响检出结果。脾脏或淋巴结1克剪碎,加蒸馏水或生理盐水5毫升,在8—10℃静置1—2天后,即可排除大部分非特异性凝集。堪称猪瘟诊断中最简便的方法之一,具有血清学的一般特异性。但尚缺乏天然病例的试验。     

用免疫荧光技术诊断猪传染性胃肠炎的研究

为了进一步提供在实验室研究猪传染性胃肠炎(TGE)病毒的手段和快速诊断方法,我们于1977年6月开始,参考Konishi,S.(1967),E.O.Haelter-man(1972)对TGE实验感染猪的研究,A.Way-ne(1973)对TGE实验感染猪压抹片的研究,Mar-garet,H.(1970)对TGE组织培养的研究,M.B.Pernsoert(1968)对TGE野外诊断的研究等资料,对TGE实验感染猪的诊断、压抹片的检查和不同感染时间的检查等三项进行了研究,已取得一定结果,现分别告报如下:     

用免疫荧光技术诊断猪自然感染传染性胃肠炎

我们应用免疫荧光技术,在上海市郊11个牧 场的发病乳猪中,每场抽采2～5头病猪小肠材料进行检查,结果发现10个牧场中的病猪小肠材料为猪传染性胃肠炎(TGE)阳性。同时,分别在普遍发生白痢、黄痢的5个牧场中及用致病性大肠杆菌(O_(139))人工接种发病的乳猪采集小肠材料,应用上述方法检查,结果均无猪传染性胃肠炎阳性反应。在被检有猪传染性胃肠炎阳性反应的10个牧场中,     

猪瘟生前快速诊断试验

采取人工感染石门系猪瘟强毒病猪和自然感染可疑猪瘟病猪的粪便、尿液和直肠粘膜刮取物作为检验材料,并设猪瘟标准抗原,健康猪的粪便、尿液和直肠粘膜刮取物作对照,应用免疫扩散试验共检测人工感染石门系猜瘟病毒病猪2头,从某农场356头自然感染可疑猪瘟病猪中抽检12头,某猪舍18头可疑猪瘟病猪中抽检6头,共检20头。其结果:人工感染的     

猪瘟病毒的免疫酶组织化学定位

本实验结果证实PAP法在检测、定位猪瘟病猪组织中的病毒抗原是一种特异性强、敏感性高的一种新技术。主要优点是:①背景浅,阳性显色好,色深清楚;②适于检测、定位微量抗原。为病理诊断和鉴别诊断提供了可靠的形态学和免疫学依据。     

猪瘟“免疫”猪群暴发猪瘟的诊断

１９９９年１月至３月武汉市某种猪场发生以高热,高死亡率为特征的传染病。哺乳仔猪的发病率为６６．７％,死亡率为５８．３％,断奶仔猪的发病率为５３．６％,死亡率为１２．３％,造成巨大经济损失。经流行病学调查,病理变化观察和免疫荧光抗体检查,确诊该种猪场所暴发的传染病为猪瘟。此外,用间接血凝试验对２１日龄超前免疫仔猪的血清中猪瘟抗体水平进行了检测,表明表明仔猪的免疫合格率为７８．９％。     

用免疫酶标记法诊断急性猪弓形体病

最近,我们应用美国进口及国产的辣根过氧化物酶,标记弓形体免疫血清的球蛋白,检查了人工感染的急性弓形体病,获得了较满意的结果。现将试验结果报告如下。 材料和方法 1.弓形体免疫血清球蛋白(IgG)的提取 弓形体高免血清的制备及球蛋白的提取,参照“荧光抗体诊断猪弓形体病”的方法。猪弓形体高     

猪瘟的流行和免疫问题

本文就目前猪瘟的流行与免疫问题，从流行和发病特点的变化、免疫失败及其原因，免疫程序、免疫监测5个方面进行了论述与分析，重点对目前国内推荐使用的几种仔猪猪瘟免疫程序，应其适用范围，优缺点进行了讨论，并提出了依据疫情区域划分3种类型的新程序。     

猪瘟的实验室诊断技术

为了有效控制我国猪瘟的流行,减少养殖户的经济损失,了解和掌握猪瘟的实验室诊断方法很重要。本文简要介绍猪瘟的实验室诊断方法和相关诊断技术。     

非洲猪瘟诊断技术研究进展

非洲猪瘟(ASF)是我国农业农村部规定的一类动物疫病之一,该病具有传染性强、发病率和病死率高的特点,严重危害养猪业的健康发展。要防控非洲猪瘟,前提是对ASF快速、准确的诊断,文章综述了ASF的诊断和检测方法,旨在为ASF的诊断与防控提供参考思路。     

猪瘟诊断技术的研究进展

猪瘟是由猪瘟病毒感染引起的一种急性、热性、接触性和猪之间流行的烈性传染病,俗称“烂肠瘟”。目前尚无有效药物治疗猪瘟,因此,尽早对猪瘟进行确诊是减少该病造成损失的有效措施。本文综述了猪瘟诊断技术方面的研究进展．为猪瘟的及时诊断提供参考。     

现场快速诊断奶牛早孕与发情的酶免疫分析测试盒

奶牛配后不孕导致的产仔间隔延长、繁殖率降低、产奶量减少和饲养成本增高,长期以来制约着奶牛业的发展.     

非洲猪瘟及其诊断技术

非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒引起猪的高传染性疾病,严重威胁着我国养猪业的发展。该文从非洲猪瘟病原学、流行病学、临床症状及诊断技术等方面进行综述,以期为非洲猪瘟病毒准确、快速诊断和疫病净化提供参考。     

RT-PCR和免疫荧光抗体试验检测猪瘟病毒的比较研究

根据已发表的CSFV序列合成1对引物,以猪瘟病毒(CSFV)兔化弱毒株为模板,建立并优化了检测CSFV的RT-PCR方法,并与直接荧光抗体试验(DFA)进行比较,检测了15份临床疑似病料。结果如下:应用RT-PCR对CSFV兔化弱毒株RNA进行扩增,获得与预期大小相符长为509 bp的特异性目的片段,敏感性达到10 pg的CSFV-RNA,对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒(PRV)和猪2型圆环病毒(PCV2)进行同条件扩增均为阴性,RT-PCR产物测序结果与文献报道的CSFV不同毒株的核苷酸序列同源性达到95%~99%;15份临床疑似病料应用RT-PCR的检出率为66.7%,而应用免疫荧光试验的检出率为60.0%,二者的总符合率为80%。表明RT-PCR方法比DFA更敏感,两种方法均可用于猪瘟的快速诊断。     

猪瘟免疫程序

1.仔猪超前免疫即仔猪出生后立即注射猪瘟疫苗,剂量为每猪1头份,注射预防针后2小时才可哺食初奶。初奶前免疫注射可避开乳源免疫力的干扰,激发初生仔猪在几天后能产生足够的主动免疫力,保证乳猪不发猪瘟病。2.仔猪加强免疫仔猪40～50日龄补打1次预防针,剂量为每猪2～3头份。注射的关键是要掌握好剂量,加大疫苗剂量,以便有足够的疫苗病毒进入免疫系统而迅速引起记忆性免