葡萄愈伤组织脯氨酸累积变异系的分离研究

以羟脯氨酸（ＨＹＰ）为选择剂，通过连续多步筛选法和间隙多步筛选法，从二倍体葡萄里扎马特品种的能再生愈伤组织中，分离出了７个稳定的ＨＹＰ抗性变异细胞无性系，连续多步选择法的选择效率为４．２４×１０＾－５，间隙多步选择法的选择效率为７．００×１０＾－５。但连续多步选择法更有利于高脯氨酸累积变异系的选择。７个ＨＹＰ抗性变异系都能稳定的累积脯氨酸，其游离脯氨的含量是对照的１．７９￣３．９３倍。     

葡萄脯氨酸累积变异系CAT和SOD活性研究

研究了无胁迫和ＮａＣｌ胁迫条件下,同基因型二倍体葡萄４个脯氨酸累积变异系和对照系愈伤组织的过氧化氢酶（ＣＡＴ）和超氧物歧化酶（ＳＯＤ）活性。结果表明,在无胁迫条件下,葡萄脯氨酸累积变异系的ＣＡＴ和ＳＯＤ活性显著高于对照系,４个变异系的ＣＡＴ活性分别是对照的２．４１,２．３０,２．２９和２．１３倍,ＳＯＤ活性分别是对照的４．５１,３．６９,３．８４和３．７２倍。在一定浓度ＮａＣｌ胁迫下,对照系和变异系的ＣＡＴ和ＳＯＤ活性都有一定的增加,变异系的ＣＡＴ和ＳＯＤ活性仍高于对照系。脯氨酸累积变异系ＣＡＴ和ＳＯＤ活性高是其对ＮａＣｌ胁迫具有较强抗性的可能原因之一     

葡萄脯氨酸累积变异系CAT和SOD活性研究

研究了无胁迫和ＮａＣｌ胁迫条件下,同基因型二倍体葡萄４个脯氨酸累积变异系和对照系愈伤组织的过氧化氢酶和超氧物歧化酶活性。结果表明,在无胁迫条件下,葡萄脯氨酸累积变异系的ＣＡＴ和ＳＯＤ活性显著高于对照系,４个变异系的ＣＡＴ活性分别是对照的２．４１,２．３０,２．２９和２．１３倍,ＳＯＤ活性分别是对照的４．５１,３．６９,３．８４和３．７２倍。     

葡萄脯氨酸累积变异系的生理生化特性分析

对葡萄二倍体品种的胚性愈伤组织以 Hydroxyproline(HYP)为选择剂在离体条件下筛选而得的脯氨酸累积变异进行了过氧化物酶 (peroxidase,简称 POD)和超氧化物歧化酶 (superoxidedism utase,简称 SOD)生理生化特性的研究与分析。结果表明 ,脯氨酸累积变异系的 POD和 SOD同工酶活性及数量均高于原形系 (对照系 ) ;在 12 0 mm ol/ L Na Cl胁迫处理下则各系的 POD及 SOD同工酶活性及数量又均较无胁迫条件下有明显增强 ,且变异系的增强幅度更大。初步认为葡萄脯氨酸累积变异与 POD和 SOD同工酶活性及数量存在一定程度的正相关 ,而变异系内 POD,SOD同工酶数量及活性的增加 ,是变异系具有抗盐性的基础。     

葡萄愈伤组织诱导及其染色体加倍

以葡萄叶片为外植体,在附加不同浓度2,4-D6、-BA及秋水仙素的MS、B5培养基上,均可诱导出愈伤组织;对颗粒状愈伤组织进行染色体鉴定结果表明:在加有秋水仙素的培养基上诱导的颗粒状愈伤组织均存在广泛的染色体变异,除2n=2x=38和2n=4x=76外,还有一些非整倍体细胞.其变异情况因品种、培养基而异.在加有20 mg/L秋水仙素,并附加1.0 mg/L 2,4-D和0.5 mg/L6-BA的B5培养基上,可获得加倍率高的愈伤组织;但诱导多倍化的愈伤组织均未分化成苗,这可能与愈伤组织染色体变异有关,或与诱导分化成苗的培养基、培养条件等因素有关.     

不同处理对黑后葡萄枝条愈伤组织形成的影响

研究了影响酿酒葡萄品种黑后一年生枝条愈伤组织产生的因素。结果表明,适宜愈伤组织产生的温度范围为25～28℃,低于或高于此温度范围愈伤组织发生率均降低;枝条剪口形状及部位与愈伤组织的产生无相关性,但新的剪口较易形成愈伤组织;生根粉处理显著提高葡萄愈伤组织的发生率。     

葡萄组织培养中愈伤组织的诱导

采用三因素(萘乙酸NAA,吲哚丁酸IBA,6-苄氨基嘌呤6-BA)四水平的正交试验设计,对"鄞红"葡萄近梢处的嫩茎段和幼果进行愈伤组织诱导试验。结果表明,6-BA对愈伤组织诱导影响最大。以嫩茎段为外植体的最佳培养基配方是MS+1.00 mg/L 6-BA+0.10 mg/L NAA+0.20 mg/L IBA,其诱导率为70.00%。以幼果为外植体的最佳培养基配方是MS+0.80 mg/L 6-BA+0.10 mg/L NAA+0.20 mg/L IBA,诱导率为61.85%。嫩茎段是"鄞红"葡萄愈伤组织诱导最理想的外植体。     

巨峰葡萄外植体愈伤组织的诱导和植株再生

选取了栽培品种巨峰作为试材,进行了外植体愈伤组织诱导和植株再生的研究．通过葡萄品系巨峰无菌外植体的获得,叶片的愈伤组织诱导、再分化,以器官发生途径实现植株再生．结果表明：外植体消毒灭菌过程中,用1g／L汞处理7min,外植体污染率和茎尖褐变的比率适中,而且茎尖被诱导分化的成活率最高,可达30．0％．最适的分化培养基为MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．01mg／L;叶片愈伤组织诱导的培养基选择MS附加5．0mg／L6-BA和0．5mg／LNAA较为适宜;MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．05mg／L最适宜巨峰葡萄愈伤组织再生不定芽;将所得的不定芽继代增值诱导生根,1／2MS＋IBA0．2mg／L为理想的生根培养基,根长适中,根数较多．初步建立了巨峰葡萄栽培品系的再生体系．     

大蒜抗草甘磷愈伤组织变异系的选择研究

选取改良蒜、金堂早蒜、苍山蒜和欧引 0 1等 4个不同生态型的大蒜品种 ,采用直接接种和逐级培养法在质量分数 0 .0 2 % ,0 .0 4 % ,0 .0 6 % ,0 .0 8% ,0 .1 0 % ,0 .2 0 %的草甘磷培养基上 ,选择抗草甘磷愈伤组织细胞系。结果表明 ,草甘磷对大蒜外植体的出愈率有极强的抑制作用 ,在试验中均未诱导出愈伤组织。用愈伤组织直接在不同质量分数的草甘磷培养基上选择 ,4个品种在低质量分数 (<0 .0 4 % )胁迫下都有一定的抗性 ;经逐级抗草甘磷选择后的愈伤组织 ,其抗性能力有明显提高 ,在含有草甘磷质量分数 0 .0 6 %培养基上 ,4个品种愈伤组织的成活率为 1 0 .3%～ 1 8.2 % ,且发育良好 ;在质量分数 0 .0 8%和 0 .1 0 %的草甘磷培养基上也有部分愈伤组织成活。抗性稳定性检验证明 ,此抗草甘磷能力在一定时间内能够保持下去     

萝卜花药愈伤组织诱导及褐变因素初探

花药培养愈伤组织的培养一直是萝卜组织培养中的难点,在加上花药组织容易发生褐变,萝卜的花药培养比较难以成功.因此为了解决上述问题,该文以萝卜为试材,研究了不同激素配比、供体基因型、光照与温度以及蔗糖浓度对花药愈伤组织诱导的影响,同时比较研究了花药愈伤组织褐变过程中几种抗氧化酶活性变化.结果如下:P403在2.0mg/L 2,4-D 1.0mg/L 6-BA 2.0mg/L KT的MS培养基中愈伤组织的诱导率最高,愈伤组织开始褐化的时间晚.抗氧化酶的活性较高;同时进行低温预处理、高温预培养和初期暗培养的协同效果较任何一种单独处理好;6%的蔗糖浓度有利于愈伤组织的诱导.     

福建野生葡萄松散型愈伤组织的诱导及其继代保持

以福建野生葡萄(Vitis amurensis Rupr.)带节茎段为外植体,建立无菌株系,并以此无菌株系小苗的茎段或叶片为外植体,进行愈伤组织诱导、继代增殖和长期保持等方面的研究.结果表明,光照条件下,愈伤组织诱导以MS+BA 2.0 mg·L-1 +NAA 0.2 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1培养基最佳,诱导率可达100％;愈伤组织的继代增殖以MS+2,4-D 1.0 mg·L-1+蔗糖30g· L-1培养基最佳,可以获得生长状态良好的松散型愈伤组织;采用MS+2,4-D 1.0 mg· L-1+蔗糖30 g· L-1培养基继代培养几代后转到MS+2,4-D 1.0 mg· L-1+KT 0.5 mg· L-1+AgNO35.0 mg· L-1+蔗糖30 g·L-1培养基上培养1代,如此交替进行,同时在光照条件下,可长期继代保持野生葡萄愈伤组织,并可保持其旺盛的生长能力.     

适宜原生质体分离的美味猕猴桃愈伤组织的筛选

由美味猕猴桃东山峰 79- 0 9品种诱导产生的 4种类型愈伤组织 ,其分离原生质体的效果不同 :A型愈伤组织分离的原生质体数量多 ,但活力较低 ;B型愈伤组织分离的原生质体不仅数量较多 ,而且活力也高 ;C型愈伤组织分离的原生质体数量少 ,但活力高 ;D型愈伤组织分离的原生质体数量较多 ,但活力低     

19个自育葡萄品种(系)指纹图谱构建

【目的】 利用SSR标记技术开展19个葡萄品种(系)的指纹图谱构建,为种苗认证、品种登记和植物新品种保护提供依据。【方法】 以19个葡萄品种(系)为试材,利用16对SSR标记荧光引物,对其进行PCR扩增和毛细管电泳,获得指纹条带,构建指纹图谱,并筛选可以将19个品种(系)区分的引物组合,绘制种质分子身份证数字码。【结果】 从16对SSR标记引物选择了VRZAG67、VVS2、VVMD7、VCHR4a、VVMD5等5对多态性信息量相对较高的SSR标记,完成了品种(系)的指纹图谱构建,并对其进行了赋值编码,形成了身份识别码。【结论】 构建的指纹图谱和分子身份证可以鉴定和区别19个品种(系),但由于葡萄种质较多,如果继续区别更多的品种,需要增加的 SSR 引物数量。     

盐胁迫对沙枣愈伤组织膜透性,膜脂过氧化和SOD活性的影响

低浓度NaCl促进沙枣愈伤干物质积累,但当培养基中的NaCl含量超过0.7%时,生长即受到抑制。蛋白质含量随NaCl 浓度的增加而降低,而脯氨酸含量、膜相对透性,MDA 含量和SOD 活性都随NaCl 浓度的增加而增加,但对SOD 同工酶酶谱没有影响,仅使迁移率小的酶带染色程度加深。本文对在盐胁迫条件下沙枣愈伤组织膜透性、膜脂过氧化及SOD 与其耐盐性的关系作了讨论。     

Production of Embryogenic Callus and Plant Regeneration from Elite Guizhou Waxy Maize Inbred Lines

Immature embryos from three elite Guizhou waxy maize inbred lines (W21019, B7, and QCL5036) were evaluated for theirability of forming callus and regeneration into plants. Immature embryos harvested at different physiological stages were used as explants to initiate callus on N6 basal medium with 0-3.5 mg L-1 of 2,4-dichlorophenoxy acetic acid (2,4-D). The concentration of 2,4-D, physiological age of immature embryos and genotype had a significant effect (P＜0.05) on the percentage of embryogenic callus formed. The optimum 2,4-D concentration for the initiation of embryogenic callus was varied among the waxy maize genotypes from 2.0 mg L-1 (B7 and QCL5036) to 3.0 mg L-1 (W21019). The shoots were generated from embryogenic callus which were transferred into the regeneration medium supplemented with 0-2.5 mg L-1of 6-benzylaminopurine (6-BA). 6-BA in the medium significantly promoted the regeneration of embryogenic callus.Embryogenic size was also an important factor that affected regeneration capacity. 0.6-0.7 cm was proved to be the best size for regeneration from embryogenic callus and the mean number of shoots per primary callus in all genotypes achieved the highest number. The ability of the plant regeneration was also affected by genotype. W21019 had the highest number of shoots formed per primary embryogenie callus. With the optimum condition, the highest mean number of shoots per primary callus was up to 12.13, 5.73, and 3.33 in line W21019, B7, and QCL5036, respectively. The successful regeneration of the two inbred lines provides a basis for development of genetic transformation to improve priority traits such as enhanced insects and drought tolerance.     

水解酪蛋白对诱导苜蓿愈伤组织的影响

以两个苜蓿品种新牧1号和新疆大叶苜蓿无菌苗的幼叶为外植体，研究了4种诱导培养基对愈伤组织的影响，增殖培养基中添加水解酪蛋白对愈伤组织增殖的影响，以及分化培养基中KT对愈伤组织分化的影响。结果表明：①叶片愈伤组织诱导培养基以MS＋2，4-D2．00mg／I，＋NAA1．00mg／L＋KT1．00mg／L为宜，新牧1号和新握大叶苜蓿的出愈率分别为100％，95．5％；②增殖培养基中附加CH0．15g／L有利于新牧1号愈伤组织的生长，附加CH1．00g／L有利于新疆大叶苜蓿的愈伤组织的生长；③分化培养培养基中附加KT4．00mg／L，两品种的分化率最高分别为新牧1号25．0％、新疆大叶苜蓿13．2％。     

三樱椒子叶愈伤组织的诱导及分化

对日本枥木三樱椒子叶愈伤组织的诱导与分化进行了系统的研究。结果表明：（１）ＮＡＡ（萘乙酸）０．１～２ｍｇ／Ｌ均能促进子叶愈伤组织的诱导及根的分化；（２）ＢＡ（６－苄基腺嘌呤）０．１～２ｍｇ／Ｌ对子叶愈伤组织的诱导及根分化均具有抑制作用，且在高浓度（２ｍｇ／Ｌ）时能抑制ＮＡＡ作用的发挥；（３）ＫＴ（激动素）２ｍｇ／Ｌ能抑制愈伤组织分化根，但ＫＴ的抑制作用比ＢＡ弱；（４）ＰＰ３３３（多效唑）０．０１ｍ