草莓离体诱变及耐盐筛选技术初探

以‘全明星’草莓组培苗为试材,分别用甲基磺酸乙酯(EMS)、60Co-γ射线以及60Co-γ射线+EMS的复合诱变剂对叶片进行处理,并对‘全明星’草莓进行初步耐盐筛选。结果表明:EMS溶液处理草莓离体叶片适宜的浓度和时间是0.2%+2.0 h及0.4%+1.0 h,60Co-γ射线诱变处理的剂量率为30 R/min时,适宜的剂量为3~5 kR,复合处理的适宜剂量为60Co-γ(3 kR)+0.1%EMS处理2.0 h及60Co-γ(3 kR)+0.2%的EMS处理1.0 h。对3种处理间进行比较发现,各处理的叶片存活率和再生率都比对照有所下降。其中,复合处理对草莓叶片的生理损伤作用显著提高,叶片的再生率比单一诱变剂处理下降了10%~15%。再生植株经过初步NaCl筛选后,复合诱变处理再生植株的生物产量显著高于其它处理,盐害率和盐害指数也都显著低于其它处理,表现出较强的耐盐性,而单一诱变剂处理之间的差异不显著。     

丰香草莓叶片离体再生的试验研究

通过对丰香草莓离体再生的研究，结果表明丰香草莓叶片在TDZ2.0mg/L IBA0.2 2,4-D0.1mg/L的分化培养基上再生频率较高，平均每叶片再生芽数为2.2，叶片是获得草莓优良突变株系的重要来源。     

草莓叶片植株再生技术

组织培养具有繁殖系数高及可保持植物特性的优点;采用叶片为外植体,采集不受时间及季节限制,消毒处理和切割较容易,且繁殖系数较高.利用草莓叶片植株再生技术进行育苗,即可解决田间无性繁殖出现的种性退化问题,又操作简单易于掌握.本文阐述如何利用草莓植株再生技术繁育种苗,以期促进草莓组培苗的推广及应用.     

草莓叶片离体再生技术的研究

以红颊、章姬、丰香叶片为试材,对影响草莓叶片不定芽再生的主要因素进行了试验研究,建立了草莓离体叶片的再生体系。试验结果表明,基因型、不同激素种类和配比、叶龄直接影响了草莓叶片再生芽的发生。基因型是影响草莓叶片再生能力的决定因素,叶片四周刻伤处理能有效地提高不定芽的诱导率,适度的暗培养有利于不定芽的发生。叶片愈伤组织的诱导培养基以MS＋TDZ2～3mg/L较理想,芽伸长的理想培养基为MS＋6-BA0.3～0.5mg/L,生根培养基以1/2MS＋I-BA0.3mg/L较适宜,移栽成活率可达90%以上。     

影响草莓叶片植株再生因素的研究

目前建立草莓的再生体系大多采用TDZ作为主要激素,本研究以广泛栽培的四个草莓品种为材料,系统地研究了不同基因型、叶龄、褐化、暗培养、基本培养基、不同激素组合、Ag^ 等诸多因素对叶片再生的影响,建立了不依赖于TDZ的弗吉尼亚草莓叶片外植体的不定芽再生体系。研究结果表明Ag^ 并不能促进草莓弗吉尼亚植株的再生,反而起到了抑制作用。以顶部充分伸展的18～21d叶龄的无菌苗叶片为外植体,再生效果最好,将此类叶片放在以MS为基本培养基、附加1．6～1．8mg/L6-BA,0．1mg／L NAA,0．4-0．5mg／L KT,O．1mg/L2,4-D的分化培养基上,14d后便可见到不定芽,经过愈伤组织阶段从叶片上分化产生,出现的高峰期在接种后的20—30d,芽分化率高达60％以上。该再生体系可作为基因转化的受体系统。     

丰香草莓叶片的植株再生研究

[目的]为采用叶片组织培养技术进行大规模生产草莓种苗提供依据。[方法]以丰香草莓叶片为外植体,用4种不同的培养基诱导其愈伤组织,并对愈伤组织进行扩繁,筛选最佳的诱导培养基。[结果]MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L培养基最快产生愈伤组织,愈伤组织诱导率、生根率、不定芽诱导率均最高,分别为69.4%、10%、11.67%,且愈伤组织体积较大,生根总数最多,不定芽生长茂盛,叶片多而大,最终获得具根系可移植室外的完整植株543株,增殖扩繁倍数达50,增殖效果极好。MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1mg/L培养基的愈伤组织诱导率为63.8%,且愈伤组织体积最大。[结论]草莓叶片诱导愈伤组织、不定芽并最终获得大量再生植株的最佳培养基是:MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L。     

丰香草莓叶片离体再生不定芽的研究

本试验以丰香草莓组培苗叶片为试材,研究了离体再生过程中激素配比、叶龄、放置方式、暗培养等对不定芽再生效率的影响。     

EMS处理对牛皮杜鹃组培苗叶片再生及耐热性的影响

该试验以长白山野生牛皮杜鹃组培苗为材料,探讨了EMS处理对牛皮杜鹃耐热性的影响和可能的耐热机理,为牛皮杜鹃推广应用及种质资源的创新奠定基础.结果表明,EMS浓度为0.1％处理2d时,叶片存活率48.92％.接近半致死剂量,可以将其作为耐热性突变体的筛选条件.随着温度的升高,诱变组植株叶绿素、MDA、Pro、SOD、POD活性、可溶性糖、MDA含量与对照均存在显著差异;相同温度时,诱变组植株叶绿素含量、可溶性糖含量、Pro,SOD和POD活性显著高于对照组.MDA含量显著低于对照组.EMS处理在一定程度上提高了牛皮杜鹃组培苗的的耐热性.     

草莓离体再生研究新进展

对草莓离体再生研究中的一些新进展作了介绍,从TDZ的高效利用、AgNO3、活性碳、重金属离子等附加物的作用、光对叶片再生的影响等方面进行了探讨,还对影响外植体器官发生的生理因子如活性氧和抗氧化酶与再生的关系进行了分析。当前存在的问题主要在于积累的技术要点多是经验性的,对再生机理知之较少,有必要对再生机理及遗传转化相关研究进行深入的、综合性的研究。     

EMS诱变三七种子获得抗衰老植株

三七是我国传统名贵中药材,但三七的生产易受到各种生物胁迫及非生物胁迫的影响。该项研究在于通过化学诱变的方法获得具有抗衰老的三七株系。我们使用化学诱变剂甲基磺酸乙酯(ethyl methylsulfone,EMS)以0. 3%、0. 4%和0. 5%三个浓度来诱变三七种子,筛选到一批具有表型发生明显改变的三七植株,表现为花型小、矮株、畸形叶等。同时,筛选到具有抗衰老特征的三七植株,其内源激素水杨酸、脱落酸、生长素、茉莉酸和茉莉酸-异亮氨酸的含量发生明显改变。利用EMS化学诱变的方法,为生产上获得具有抗衰老特性的三七种质资源提供了新的途径。     

玉米EMS诱变材料的抗旱性筛选

采用玉米幼苗期PEG干旱胁迫法,以失水速率、丙二醛含量、可溶性糖含量和脯氨酸含量为生理测试指标,对由玉米自交系郑58经EMS诱变选择的15个种质材料进行了抗旱性筛选及综合评价。结果表明,15种诱变材料中,Y1010-2和Y1027-1各项生理指标均明显优于对照品种及其他供试材料,是抗旱性较好的2个新种质。     

60Co-γ射线对草莓组培苗诱变效应

    开展以20～100 Gy 60Co-γ射线辐照处理丰香、章姬两品种试管苗辐射诱变育种试验.试验结果表明各处理对草莓植株的生长和发育均有影响,但不同品种对60Co-γ辐射敏感性不同,半致死剂量也不同,丰香半致死剂量约为55 Gy,章姬的半致死剂量约为64.4 Gy;60Co-γ辐射对丰香品种有明显的抑制作用,主要表现在植株变矮,开花延迟,花朵数减少,且随着剂量增大,这种趋势更加明显;不同60Co-γ辐射处理对章姬开花影响较对生长影响更为明显,单从较高变异率和优变情况来看,20 Gy处理变异率最高,达到36.53%,且优变多,是章姬品种60Co-γ辐射育种的较适宜剂量.     

3种木本地被植物耐盐性的研究

采用盆栽试验法,分别用2,3,4,5,6 μg／g NaCl溶液对亮叶忍冬(Lonicera nitida‘Maigrun’)、红叶 女贞(Ligustrum．quihoni Carr．f．atropurea)和蔓生紫薇(Lagerstroemia indica ‘summer and summer’)进行了盐胁 迫处理,测定了试材的生长量、相对生长量、盐害指数、盐害率、叶片中游离脯氨酸含量等指标,对这3种木本地被 植物的耐盐性进行了研究。结果表明,在盐胁迫下,3种供试植物的生长均受到明显抑制,其中蔓生紫薇的相对生长 量最小,亮叶忍冬的最大;盐害指数和盐害率表现为蔓生紫薇最高,亮叶忍冬最低;盐胁迫对3种植物的脯氨酸含 量均有较大影响。综合各指标的分析可知,参试3种植物的耐盐性差异较大,其耐盐性的强弱表现为亮叶忍冬>红 叶女贞>蔓生紫薇。     

百合离体抗盐变异体的筛选及生理特性研究

用甲基磺酸乙酯(EMS)对百合离体叶片进行了处理。结果表明,随着处理浓度和处理时间的增加,叶片的分化率和存活率均下降,并筛选出其半致死浓度(0.6%)和处理时间(3 h)。利用筛选的EMS浓度和处理时间对离体叶片进行处理,在1%盐浓度胁迫下进行抗盐性突变体筛选,得到抗盐性诱变植株。经鉴定,其超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活性增强,丙二醛(MDA)含量减少,细胞膜透性减小,可溶性蛋白含量增加,表明筛选的百合突变体比对照具有更强的抗盐性。     

3种园林植物耐盐性对比分析

试验以伍兹氏玫瑰(Rosa woodsiiLindl.)、复叶槭(Acer negundoLinn.)、侧柏(Platycladus orientalis)三倍体无性系1年生苗木为材料,测定在不同盐浓度(CK、1‰、2‰、4‰、6‰)胁迫下相对生长量、叶绿素含量、细胞膜透性、净光合速率、气孔导度、胞间CO2浓度、蒸腾速率、Na+、K+、Ca2+含量变化等8项指标。结果表明:随着盐胁迫浓度增加,3种苗木相对生长量、叶绿素含量、净光合速率、气孔导度、蒸腾速率均呈下降趋势,同时细胞膜透性上升,除侧柏三倍体在低盐胁迫下有一定程度下降,胞间CO2浓度无明显变化。3种苗木各个部位Na+、K+、Ca2+含量均呈不同程度变化。综上盐胁迫下,伍兹氏玫瑰以K+和Ca2+为主要的渗透调节物质;复叶槭中K+为主要的渗透调节物质;侧柏三倍体依靠Na+在地下部分大量积累,K+、Ca2+含量在地上部分保持稳定以维持其生长。     

草莓叶片不同保存方法对RT-PCR检测 草莓斑驳病毒效果的影响

植物样本保存方法不当易导致样本枯萎和腐烂,严重影响病毒检测结果。为提高PCR法检测草莓斑驳病毒（strawberry mottle virus,SMoV）的效果,明确待检测植物样本的有效保存条件,将经过RT-PCR检测感染SMoV的草莓叶片作为试验材料,设置自然风干保存、硅胶干燥保存和氧化钙（CaO）干燥保存3种不同的干燥保存条件。采用试剂盒法提取各处理草莓叶片总RNA,设计特异性引物进行RT-PCR检测。比较得到最佳干燥保存条件后,再以几种常见的低温、干燥保存为对照,分析草莓叶片不同保存方法对草莓斑驳病毒PCR检测效果的影响。电泳结果显示,含有SMoV的草莓叶片在CaO干燥保存条件下PCR检测效果最好,且操作简单易行。该方法可以为高效、便捷的保存带毒草莓叶片样本提供参考,适用于田间大量样品的采集,提高检测效率。     

竹子耐盐性研究述评

在总结植物盐害研究的基础上,就盐胁迫对竹子的生长、生理生化特征的影响及竹子耐盐机制、耐盐性鉴定指标、耐盐竹种选育等方面的研究现状进行概述,分析竹子耐盐性研究中所存在的不足,提出了该领域今后的重点研究内容。     

自然休眠期低温处理时间对生长期草莓叶片光合特性的影响

以草莓为料材,研究自然休眠期不同低温处理时间对其生长期叶片光合特性的影响.结果表明:在自然休眠过程中,随着低温处理时间延长,草莓新生叶叶面积、叶柄长度不断增加,而初生叶柄角度不断变小,完全通过休眠后,不再有显著变化.新生叶片的光合速率、气孔导度、叶绿素质量比和光合作用关键酶活性也随着低温处理时间延长而不断升高,当低温处理时间大于765 h后,不再有显著变化.自然休眠过程中,低温处理时间可通过调节气孔因素、叶绿素质量比和光合作用关键酶活性来调控生长期草莓叶片的光合作用,当完全通过休眠后,低温处理时间对草莓的生长发育和叶片的光合特性不再有显著影响.     

外源激素对盐胁迫下草莓光合性能的影响

以草莓为试验材料,研究在盐胁迫条件下喷施外源激素赤霉素、水杨酸对草莓光合性能的影响.结果表明:喷施外源激素,能有效地缓解草莓的盐害,提高草莓的净光合速率和蒸腾速率,增大气孔导度,降低胞间CO2浓度,增加气孔限制值,增加叶绿素含量,增强根系活力.