用NBT还原法检测细菌无细胞溶解物中SOD活性

目的：了解不同细菌无细胞溶解物中ＳＯＤ活性。方法：采用ＮＢＴ还原法检测２株大肠杆菌和８株沙门氏菌（其中７株伤寒沙门氏菌、１株鼠伤寒沙门氏菌）无细胞溶解物中ＳＯＤ活性。结果：２株大肠杆菌ＳＯＤ活性明显低于８株沙门氏菌（Ｐ〈０．０１）;鼠伤寒沙门氏菌ＳＯＤ活性明显高于伤寒沙门氏菌（Ｐ〈０．０１）;而伤寒沙门氏菌Ｌ型返祖株ＳＯＤ活性低于其它株伤寒沙门氏菌（Ｐ〈０．０１）。结论：不同细菌的ＳＯＤ活性有差异     

邻苯三酚自氧化法测定SOD活性中检测波长的优化

[目的]确定邻苯三酚自氧化法测定SOD活性的波长。[方法]采用双光束紫外可见分光光度计分别对不同时间点及时间段邻苯三酚自氧化中间产物吸光度进行测定。[结果]邻苯三酚自氧化初始中间产物的吸收度在320nm处线性好、灵敏度高。[结论]320nm可作为邻苯三酚自氧化法测定SOD活性的测定波长。     

龙眼胚胎发育过程中SOD活性的变化

在对红核子龙眼胚胎发育过程进行形态学观察的基础上,对龙眼胚胎发育过程中SOD活性变化进行测定。结果表明:龙眼子叶形胚的形成过程较长且较复杂,不但其体积发生很大变化,而且子叶的色泽也有很大变化;在子叶形胚发育早期,SOD活性迅速升高,之后上升比较平缓。     

奶中超氧化物歧化酶(SOD)活性的研究

采用邻苯三酚自氧化法，对五种有代表性的动物奶中ＳＯＤ活性进行了研究。结果表明：在种间是猪＞狗＞人＞奶山羊＞奶牛，在种内随个体略有变化，在泌乳期间是初乳＞末乳＞常乳，在泌乳期内随泌乳时间呈规律性变化。奶中所含的ＳＯＤ，既能提高饮奶人的免疫功能，又利于奶本身的保鲜。     

4种蔬菜中SOD活性测定研究

利用氮蓝四唑(NBT)光化还原法来测定4种蔬菜中SOD活性的大小。蔬菜中SOD通过抑制超氧阴离子的形成,以防止体内自由基的损伤,从而保护生物体自身。试验结果表明,SOD起着歧化O2-为H2O2和O2的作用,CAT分解H2O2生成H2O和O2,从而减少了过氧化物的生成,以苔菜的SOD总活性最大,而菠菜、生菜、茼蒿3种蔬菜的SOD总活性值相关不大。     

热应激中蛋鸡血液和肝脏SOD活性的动态变化

人工气候室中 ,32 0日龄海赛褐蛋鸡 14 4只连续 10d热应激 2 7～ 38℃。用NBT光还原法测定持续高温下血液中红细胞SOD活性 ;用亚硝酸盐形成法测定组织SOD活性。结果表明 :高温组与常温组相比 ,血液中红细胞SOD动态活性降低 ,并维持在一个低于常温组的新水平上 ;肝脏SOD动态活性同时降低 ,其最低值低于常温组 ;肝脏和血液SOD活性呈显著正相关 ,相关系数为γ =0 .6 5。     

几种食用菌子实体中SOD活性测定方法的比较

食用菌子实体SOD测活方法有10余种,为了确定一种操作简单、结果可靠、测定成本较低、适用性较广的食用菌子实体SOD活性测定的方法,对目前常用的2种测定方法——核黄素-NBT光还原法和邻苯三酚自氧化法进行了比较研究。结果表明,核黄素-NBT光还原法灵敏度好,邻苯三酚自氧化法的重复性和产物稳定性好,因此邻苯三酚自氧化法更适用于食用菌子实体SOD活性的测定。对不同的邻苯三酚自氧化法进行研究和比较,所比较方法的结果间无差异(P0.01)。建议一般情况下用420 nm终止法;当样品中SOD很少时用325 nm终止法。     

不同温度和时间对鲜鹿茸中SOD活性的影响

目的 本研究通过对鲜鹿茸提取液加热温度的高低、时间的长短,分析其对超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响.方法 制备鲜鹿茸的匀浆上清液,在4 ℃、25 ℃、40 ℃、55 ℃、70 ℃加热1 h和2 h,80 ℃加热10 min和20 min,用邻苯三酚自氧化法测定SOD的活性.结果 鲜茸提取液中的SOD活性,在55 ℃加热l h和2 h达最高,活力单位分别为328.8 u/g,260.3 u/g;在80℃,加热20 min达最低,活力单位为13.7 u/g.结论 试验表明,传统方法对鲜鹿茸进行高温加工处理,将降低SOD的活性,从而影响其药用价值.     

DHV对雏鸭肝组织中SOD活性和MDA含量的影响

用不同毒力株鸭肝炎病毒人工感染雏鸭 ,分别于 1 ,3 ,5 ,7天测定雏鸭肝组织中丙二醛(MDA)的含量和超氧化物歧化酶 (SOD)的活性 ,并研究MDA和SOD在鸭病毒性肝炎 (DVH)发病过程中的作用。结果表明 :雏鸭感染不同毒力株鸭肝炎病毒后 ,强毒株组雏鸭肝组织MDA含量均显著或极显著高于对照组 ,而弱毒株组和中毒株组的肝组织MDA含量只在感染的中后期即分别在 5天和 3天以后才显著高于对照组 ;中毒株组和强毒株组的肝组织SOD活性均显著或极显著低于对照组 ,弱毒株组肝组织SOD活性在 3天以后才显著低于对照组。     

洛阳地区犊牛腹泻病中细菌的分离鉴定与药敏试验研

犊牛腹泻是一种常见的犊牛病症、引起犊牛腹泻得病因有多方面,有管理因素(喂初乳过晚,喂犊牛的奶温过低,喂奶不经稀释直接喂牛犊,喂奶没有定量,环境以及气温突变)。根据对洛阳地区牛场的调查,在排除其它病因后,对腹泻犊牛进行细菌的分离与鉴定,并做了药敏试验,以便挑出敏感药物,进行针对性治疗。菌株分别取自白马寺、升升乳业、洛宁王村、偃师、伊川高山等地养殖场犊经过病原菌的分离鉴定,发现有一头牛是大肠杆菌和沙门氏菌的混合感染,其它七头为大肠杆菌感染,有两头为非细菌性感染。分析的原因有两点:一,由于养殖户的知识有限,他们不能科学合理的使用抗生素;二,由于细菌本身发生了变化,特别是它们能够获取其它耐药菌株的耐药基因。     

SOD活性和同工酶检测系统中干扰因素的研究

采用NBT光化还原反应检测SOD活性时,反应系统中蛋白质含量在100 μg以上将对SOD活性测定造成严重干扰,并且干扰程度随蛋白质含量的增加而加剧;连苯三酚自氧化系统受维生素C的干扰,当反应系统中维生素C的含量在20 μg以上,则明显抑制连苯三酚的自氧化.同一植物材料的SOD同工酶在不同浓度的凝胶系统中分离将显示出不同的分离效果.     

鹌鹑大肠杆菌与沙门氏菌混合感染的病原分离与鉴定

通过对病鹌鹑的肝脏和脾脏中分离到的细菌，进行培养、生化鉴定及动物接种试验，确诊为大肠杆菌和沙门氏菌混合感染，在不同禽舍中采取的三处水样中，同样分离出了上述两种细菌，分离的6株大杆菌血清型鉴定结果Y2，Y6，Y8为O1；Y3，Y7，Y9为O22，并且均产生肠毒素，药敏试验结果从脏器中分离细菌对庆大霉素、卡那霉素、新霉素高度敏感；水样中分离的细菌对氯霉素高度敏感。     

抗菌肽Cecropin B基因的克隆及体内活性检测方法的构建

根据家蚕抗菌肽基因的序列设计引物，从家蚕蛹脂肪体中扩增家蚕Cecropin B基因，并利用CST融合表达系统进行表达。融合蛋白的表达量受表达诱导剂IPTG浓度控制，利用融合蛋白对宿主菌的部分抑菌作用，建立灵敏、简便的家蚕Cecropin B体内抗菌活性检测方法。     

鸭源大肠杆菌3种tet基因的多重PCR检测

利用肉汤稀释法测定21株鸭大肠杆菌对四环素等7种抗茵药物的敏感性,并用多重PCR方法同时检测3种四环素耐药基因(tetA、tetB和tetC).结果显示:所有菌株均呈现tetA、tetB和tetC基因阳性,与药敏试验结果阳性符合率76.67%,携带3种tet基因的临床分离鸭大肠杆茵不仅对四环素类药物耐药,还对头孢噻肟、...     

鸡致病性大肠杆菌耐药性检测

从河南省4个地市（区）商品肉鸡病料中分离了15株大肠杆菌（E．coli）,在对其进行生化鉴定的基础上,采用微量倍比稀释法测定了17种抗菌药物对它们的体外最小抑菌浓度（MIC）,并按照美国临床实验标准化委员会（NCCLS）的抗菌药物敏感性标准（2009年第十九版）进行耐药性判断和耐药谱比较分析。结果显示：15株鸡E．coli对17种抗菌药物中的16种药物均有不同程度的耐药性,其中对头孢唑林、恩诺沙星、新霉素、环丙沙星的耐药性比例达90％～100％,对阿莫西林、头孢曲松、庆大霉素、阿奇霉素的耐药性比例达到80％以上,对多西环素、大观霉素、左氧氟沙星的耐药性比例达到60％以上。17种抗菌药物敏感性比例达到60％以上的有多粘菌素B、阿米卡星、氟苯尼考,其余药物的敏感性比例均在40％以下。15株鸡E．coli均为多重耐药菌株,耐药谱最多的药物达到14种,耐药谱最少的药物有6种。说明鸡E．coli对常用抗菌药物已产生比较普遍的耐药性,而且耐药谱较宽。     

猪、牛和兔粪中致病性大肠杆菌LEE毒力岛的检测分析

畜禽粪便中含有大量微生物,在发生传染性疾病时,粪便常常会成为重要的传染源.通过从种猪场、奶牛场和种兔场粪便中分离鉴定致病性大肠杆菌,并对分离到的大肠杆菌进行LEE毒力岛上eaeA基因的PCR检测,鉴定出含有LEE毒力岛大肠杆菌,调查携带LEE毒力岛的大肠杆菌在猪、牛和兔粪便中的存在情况.实验结果表明,猪、牛、兔粪便样品中携带LEE毒力岛的大肠杆菌检出率分别为12.9％、14.0％、22.5％.eaeA阳性的大肠杆菌应是导致仔猪、10日龄以内的初生犊牛和兔场断奶后幼兔发生腹泻症的主要细菌性病原.LEE毒力岛的检测能够作为大肠杆菌的诊断和流行分子病学调查的主要手段.     

云南普洱茶中大肠杆菌的检测

对不同产地、不同厂家、不同形状、不同类型、不同生产日期的14种普洱茶样品,检测其大肠杆菌,实验结果表明,14种普洱茶中的大肠杆菌检测均符合国家标准。     

鸡源大肠杆菌浮游菌与生物被膜菌超广谱β-内酰胺酶的检测

采用平板培养法建立鸡源大肠杆菌生物被膜的体外模型,银染后经显微镜观察鉴定,并用双纸片协同法检测浮游菌与生物被膜菌超广谱β-内酰胺酶的产生情况,同时用双光束紫外分光光度计测定超广谱β-内酰胺酶的活性,为研究鸡源大肠杆菌生物被膜的耐药机制奠定方法学基础。结果表明,27株鸡源大肠杆菌均形成了生物被膜,肉眼可以看到硅胶片上有黑色膜样物质形成,用银染法处理过的生物被膜菌在显微照相系统下可清楚地看到生物被膜的结构;鸡源大肠杆菌生物被膜中超广谱β-内酰胺酶的检出率(70.4%)高于浮游菌的检出率(55.6%),且生物被膜菌中超广谱β-内酰胺酶的酶活性((0.71±0.23)U.mg-1)高于浮游菌的酶活性((0.42±0.12)U.mg-1),前者是后者的1.73倍。     

消毒威对几种菌株的杀灭效果研究

为了检测消毒威消毒剂对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、巴氏杆菌和沙门氏菌的杀灭效果．通过采用悬液定量杀菌法对几种标准菌株进行杀灭效果观察。发现20mg／L的消毒威作用5min．对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌可达到全部杀灭作用,对沙门氏菌可达到消毒效能,对巴氏杆菌需适当加大浓度。以此笔者认为消毒威对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌及巴氏杆菌均具有快速强效杀灭作用,适用于畜禽舍内外环境的消毒。     

PCR技术检测饲料中沙门氏菌的应用研究

用聚合酶链式反应穴PCR雪技术检测饲料中沙门氏菌,对已知被沙门氏菌污染的动物饲料的培养物均能检出阳性,说明PCR方法对检测饲料中沙门氏菌具有特异性高,且灵敏、快速等特点,适用于快速、准确地检测饲料中沙门氏菌的需要。