蓝狐精子常温保存与低温保存的比较研究

为探讨行之有效的精液保存方法,提高狐人工授精技术的效率,对9只种公蓝狐的精液进行了常温保存与低温保存试验。结果表明,常温保存精液精子平均存活时间为26.2 h,平均生存指数为12.75;低温保存精液精子平均存活时间为40 h,平均生存指数为17.92。低温保存可以延长精子的体外存活时间。数据分析结果表明,低温保存生存指数与常温保存生存指数的比值与常温保存生存指数呈线性关系,即低温保存效果与精液品质呈正相关,精液品质越高,低温保存效果越好。     

不同稀释液对蓝狐精子低温保存的影响

为探讨行之有效的精液保存方法,提高狐人工授精技术的效率,用4种稀释液对4只公蓝狐精液进行体外低温保存,采用伊红-苯胺黑法检测精子活率,低渗肿胀法检测精子质膜的完整性,考马斯亮蓝染色法检测精子的顶体状态。结果表明:低温保存时精子的活率、质膜的完整性、顶体的完整性明显比常温保存时比率高;氨基乙酸稀释液对精子的保存效果优于其他3种稀释液,精子活率为(63.62±2.47)%,质膜完整性为(57.00±3.17)%,顶体完整性为(65.30±2.48)%。     

不同稀释液低温保存对公鸡精子存活时间和生存指数的影响

试验观察了3种稀释液在低温(0～5℃)环境中的保存效果,通过分析不同稀释液对种公鸡精子存活时间及其生存指数的影响,旨在筛选出保存效果最好的稀释液。结果表明:由果糖、谷氨酸钠、K_2HPO_4、KH_2PO_4配制而成的稀释液C低温保存条件下精子的存活时间达到159.5 h,生存指数为83.95,有效存活时间为5 d,显著高于由果糖、谷氨酸钠、柠檬酸钠配置而成稀释液A和醋酸钠、柠檬酸钠、Na_2HPO_4·12H_2O配制而成的稀释液B的保存效果(P0.05),在3种稀释液中保存效果最好。     

培养液中不同浓度肝素对蓝狐精子体外获能的影响

采用上游法分离优化精子,以mTyrod's液作为基础培养液检测培养液中不同质量浓度肝素对蓝狐精子体外获能的影响,试验设4个肝素质量浓度:0,10,20,50 μg/mL,38.5℃、5%C02培养箱进行孵育,获能培养时间为6h.利用考马斯亮蓝染色法检测精子顶体反应率,伊红-苯胺黑染色法检测活精子比率,观测法检测精子活力...     

低温保存对绵羊精子质膜完整性的影响

为了探讨低温保存对绵羊精子质膜完整性的影响,研究采用低渗肿胀-伊红拒染(HOS-EY)法检测低温保存前后绵羊精子头膜和尾膜的完整性。试验设计了5个HOS-EY低渗染液浓度梯度组合(110,130,150,170,190 mOsm),按精子尾部肿胀与否和头部着色与否分为4种类型进行统计。结果表明:低温保存后,绵羊精子头膜、尾膜均完整的Ⅳ型精子发生率和头膜、尾膜均损伤的Ⅰ型精子发生率与鲜精相比分别极显著减少和增多(P<0.01),说明低温保存过程对精子质膜完整性有极显著影响;在低温保存过程中头膜损伤-尾膜完整的Ⅱ型精子发生率极显著增多(P<0.01),而头膜完整-尾膜损伤的Ⅲ型精子发生率显著减少(P<0.05),说明精子头膜或尾膜的损伤是独立发生的,且头膜比尾膜更易损伤。5种低渗液中,150 mOsm染液检测效果最好。     

不同培养液对蓝狐精子体外获能效果的比较试验

采用上游法分离优化精子,用mTyrod’s液(T)、BO液(B)以及高渗液(HIS)3种不同培养液,在5%CO2的培养箱中进行获能培养,获能培养时间为6h。利用考马斯亮蓝染色法检测精子顶体反应率,伊红-苯胺黑染色法检测活精子比率以及观测法检测精子活力。在培养的0、1、2、4、6h时分别检测上述指标并统计分析,从而筛选出适合蓝狐精子体外获能的培养液。结果显示:B培养液优于T、HIS培养液,最佳获能培养时间t≥6h;HIS可以提高精子顶体反应率,但较高的渗透压不利于精子保存,不建议使用。     

犬精液低温保存稀释液的研究

试验对苏联红犬精液的低温保存稀释液进行了研究。结果表明,犬精液低温保存的稀释液以Tris-葡萄糖稀释液(Tris3.04%,柠檬酸1.7%,葡萄糖1.25%,卵黄20%)为最佳,在4℃保存3 d后,犬精液的精子活率仍可达0.662 5±0.058 2,精子活率>0.1的存活达5.750 0 d±0.462 9 d。在Tris-葡萄糖稀释液中加入0.5%的甘氨酸或1%的牛血清白蛋白并不能明显提高犬精子的低温保存效果,反而添加BSA后,精子活率在0.1以上的存活时间出现明显缩短(P<0.01)。     

不同稀释液成分对绵羊精子低温保存效果的影响

本实验旨在探究一种更为高效可行且有利于绵羊精液在 4℃条件下延时保存的稀释液配方。采用含有不同成分及含量脱脂牛奶、维生素 A、维生素 D、维生素 E 等物质的 6 个稀释液配方稀释精液,每隔 6 h 测定稀释后精液中精子的畸形率、死亡率、活力以及运动速率,持续检测 96 h。结果表明:72 h 时配方四稀释液稀释后精子畸形率为 15.89%、死亡率为 48.52%、活力为 41.05、运动速率为 42.10 μm/s,精子畸形率和死亡率极显著低于其他 5 个稀释液配方(P<0.01),精子活力和运动速率极显著高于其他 5 个稀释液配方(P<0.01);通过测定分析,配方四精液稀释液中添加脱脂牛奶、维生素 A、维生素 D、维生素 E、卵黄、恩诺沙星、双抗和高浓度柠檬酸钠有助于提高精子活力和保存时间,筛选出的最佳精液稀释液配方操作过程简便有效,快速可行,精液保存 48 h 后精子活力达 68.17%,可用于绵羊人工授精。     

去甲肾上腺素和睾酮对低温保存犬精子的影响

本试验就去甲肾上腺素和睾酮对低温保存犬精子的影响液进行了研究。试验结果表明：①稀释液—Tris-葡萄糖稀释液（Tris3．04％,柠檬酸1．7％,葡萄糖1．25％,卵黄20％）中加入去甲肾上腺素后,犬精液低温保存的效果显著优于对照稀释液和加入睾酮的稀释液,在4℃保存4d后,加入去甲肾上腺素的稀释液中的精子活率高达0．6500-0．01378,精子活率〉0-3的存活时间达8．3333&#177;2．5819d,而对照稀释液和加入睾酮的稀释液中的精子活率分别只有0．45&#177;0．16和0．36&#177;0．11,精子活率〉0．3的存活时间分别为5．67&#177;1．75和4．67&#177;1．03。②对去甲肾上腺素的不同的4种添加剂量研究后发现,100μL稀释液中加入15μL去甲肾上腺素时犬精子低温保存的效果最好。     

精清对蓝狐精子常温保存存活时间的影响

用手按摩法采集蓝狐精子和精清,并用同源精清和稀释液分别在不同稀释倍数下稀释同一份精液,测出此种条件下蓝狐精子的存活时间。统计分析表明,精清与稀释液处理的蓝狐精液差异显著(P <0 .0 5 ) ,精清不利于蓝狐精子的体外常温保存     

添加牛磺酸和黄芪多糖对羊精子低温保存的影响

为了研究羊精子低温保存时牛磺酸和黄芪多糖对精子质量的影响,本试验在BTS(Beltsville thawing solution)精液稀释液的基础上添加牛磺酸和黄芪多糖,随后对4℃低温保存条件下羊精子的精子活率、质膜完整率和顶体完整率进行考察,采用两因素五水平的中心设计法优化精子稀释液添加牛磺酸和黄芪多糖的浓度,并进一步验证经优化缓冲液的保护效果。结果显示,牛磺酸和黄芪多糖的最优添加浓度分别为27.83 mmol/L和346.91 mg/mL;采用该添加浓度能显著提高低温保存后羊精子的精子活率、质膜完整率和顶体完整率(P<0.05)。结果表明,牛磺酸和黄芪多糖对低温保存羊精子具有显著的保护作用。     

不同稀释液对鸡精液低温保存影响的研究

本试验旨在研究不同稀释液对鸡精子活率的影响,试验配制了四种p H值接近的鸡精液稀释液,在37℃下每隔12 h测定一次精子活率,直到精子全部死亡,计算精子存活的时间以及生存指数。结果表明:从存活时间、有效存活时间、存活指数来看,保存效果较好的是C、D组,两组之间的差异均不显著(P0.05)。在C组和D组中,D组比C组的三个测定指标均高,所以D组保存效果比C组好,所以在0~4℃下,保存效果最好的为D组。     

低温保存对绵羊精子DNA链完整性的影响

为了探讨低温保存对绵羊精子DNA链完整性的影响,采用原位缺口末端标记(TUNEL)法对小尾寒羊新鲜和低温保存精子的DNA链完整性进行检测。结果表明:经24 h、48 h、72 h、96 h处理的低温保存绵羊精液的DNA链断裂精子百分率分别为(0.017 2±0.006 2),(0.028 0±0.0142),(0.037 3±0.017 0),(0.037 1±0.008 8)。与新鲜精液相比,低温保存的精液中DNA链断裂精子百分率虽然略有增加但无统计学差异,表明低温保存对绵羊精子DNA链的完整性没有显著性损伤。     

不同奶牛精子稀释液配方比较研究

牛的冻精稀释液是精液冷冻保存和人工授精最关键的环节。本文进行了两个方面的试验研究,一是把各个地区生产实践中应用的不同冷冻稀释液配方,进行综合筛选和比较;二是对没有条件冷冻精子的养殖场进行精子保鲜的稀释液配方进行综合筛选和比较。结果显示,当冷冻保存精液时,选择配方2为最佳配方;常温保存时选择配方2、3、4均可。     

Tris-葡萄糖稀释液中添加重酒石酸去甲肾上腺素、丙酸睾酮对低温保存犬精子活率的影响

人工授精技术可以发挥良种公犬的利用效率,但人工采集的鲜精需先用优良的稀释液稀释后再进行授精才能达到较高的人工授精受胎率.1965年,Harrop和Bendlorf等首次利用牛奶和卵黄一柠檬酸钠缓冲液稀释犬精液,5℃可存活数天;1988年,Bat-tista等比较了Tris、Test、Lactose及PIPES稀释液,结果发现无论是活率还是存活率、存活时间Tris稀释液的效果最好.     

不同稀释液对种鸡受精率的影响

<正> 鸡的人工授精是目前养鸡生产者的一门新型科学。笔者自1992年以来为了寻找最佳人工授精方法,采取了不同稀释精液法对笼养种鸡进行人工授精,受精率均达90％以上,从而可以减少种公鸡饲养数的40％～60％,降低了成本,提高了经济效益。现报告如下:     

不同剂量的稀释液对猪精子活力的影响

家畜精液保存技术在繁殖控制和现代畜牧业生产中日益显出其重要性。而猪新鲜精液常温保存的研究开始于1980年，它要求能保存3d以上，以利于人工授精技术的推广和长距离运输。研究中遇到的主要问题是不同剂量的稀释液在温度为18-22℃时对猪精液中精子保存时间长短，精子和精液中的微生物的新陈代谢强度几乎没有下降。因此，     

低温保存下的不同稀释液对鹅精液品质的影响

1材料与方法1.1实验动物本试验鹅在黑龙江省畜牧兽医职业学院小牧场饲养。共饲养3个品种,分别为籽鹅、豁鹅和莱茵鹅公鹅各4只,每个品种的母鹅各40只。公鹅单独饲养,母鹅小群饲养,公鹅和母鹅都有适当水面可以自由活动,保持羽毛清洁。     

钙离子载体诱导蓝狐精子顶体反应的研究

顶体反应(AR)是精子受精必不可少的过程之一,目前常用钙离子载体A23187(IA)来诱导精子AR.蓝狐(AlapoxZagopus)是食肉目犬科北极狐属珍贵毛皮兽.本试验对钙离子载体诱导的蓝狐精子AR的适宜浓度进行了筛选,旨在对蓝狐的体外受精和胚胎移植研究有所帮助.     

蜂王浆对低温保存绵羊精子质量和糖转运蛋白GLUTs表达的影响

实验旨在研究稀释液中添加蜂王浆对低温保存绵羊精子质量和糖转运蛋白丰度的影响。通过假阴道法采集8只杜泊公羊精液,将活率不低于0.8的精液混合,分别用含0.00%、0.25%、0.50%、0.75%和1.00%蜂王浆的稀释液将精液稀释至8倍,0.00%蜂王浆组为对照组,置于5℃保存。在保存0、24、48、72 h利用计算机辅助精子分析系统、低渗膨胀实验、双荧光探针和Western Blot分别检测精子运动参数、质膜完整性、线粒体活性以及糖转运蛋白GLUT 3和GLUT 8丰度。结果表明：在低温保存72 h时,0.75%蜂王浆组精子的活率、活力、直线运动速率、路径速度、曲线运动速率、质膜完整性和线粒体活性均显著高于对照组。WesternBlot结果显示精子GLUT3和GLUT8丰度均随保存时间延长而降低,保存72h时GLUT8的丰度显著低于0 h;保存72 h时0.75%蜂王浆组GLUT 3和GLUT 8丰度显著高于对照组。综上,在稀释液中添加0.75%的蜂王浆可有效提高低温保存绵羊精子的质量,这与精子GLUTs蛋白表达和精子能量代谢密切相关。