肝脏缺血再灌注损伤的分子机制及其在兽医临床应用的研究进展

肝脏缺血再灌注损伤是肝脏外科和肝脏移植的重要内容,对肝脏缺血再灌注损伤的发生机制、影响因素及防护作用的了解有助于采取必要的手段及防制措施改善临床上肝脏手术及肝脏缺血再灌注损伤的预后。文章就肝脏缺血再灌注的发生机制、影响因素及防护作用方面的研究现状作以综述。     

6-苄氨基嘌呤对大鼠小肠缺血再灌注损伤的影响

本试验旨在研究6-苄氨基嘌呤(6-BA)对大鼠小肠缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用。选取80只雄性SD大鼠,随机分为4组,即对照组、I/R模型组和低、高剂量6-BA组。低、高剂量6-BA组于术前3周分别连续灌胃10、20mg/kg的6-BA,对照组和I/R模型组灌胃同体积的生理盐水,每天1次。对照组在暴露肠系膜上动脉后不做阻断;I/R模型组和低、高剂量6-BA组阻断肠系膜血管30min后再灌注60min。随后取大鼠空肠组织分别进行总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量检测;采用单细胞凝胶电泳法检测细胞DNA损伤程度,采用免疫组化法检测半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3(Caspase-3)表达情况。结果显示,与I/R模型组相比,补充10、20 mg/kg的6-BA后,T-SOD、GSH-Px活性显著升高(P0.05),MDA含量显著降低(P0.05);小肠细胞DNA的拖尾现象好转,尾部DNA含量和拖尾率都显著低于I/R模型组(P0.05);Caspase-3阳性表达细胞数量显著减少(P0.05)。由此可见,10、20 mg/kg的6-BA能有效防护I/R对小肠的损伤,且20mg/kg的6-BA作用效果尤为明显。     

缺血-再灌注对家兔肾脏的病理性损伤及肾微循环内中性粒细胞和微血栓的变化

目的:探讨家兔肾脏缺血-再灌注损伤的病理学特征及中性粒细胞和微血栓在病变形成过程中的作用.方法:家兔全身麻醉,开腹后分离并夹闭左肾动脉造成左肾缺血,40 min后松开动脉夹,恢复左肾血液再灌注,维持1.5 h后处死动物,取出左肾,用逆流灌注法收集滞留在微循环中的中性粒细胞和微血栓并计数;肾组织常规石蜡切片,HE染色,镜...     

右美托咪定对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响

为了探讨右美托咪定对肝脏缺血再灌注损伤的影响及其可能的分子机制,本试验将45只清洁级成年雄性SD大鼠随机分为空白组、假手术组、损伤组(肝脏缺血再灌注组)、预给药组(缺血前30 min给予右美托咪定)和后给药组(再灌注后30 min给予右美托咪定)。建立大鼠肝脏缺血再灌注模型,于再灌注后6 h和12 h取样。用全自动生化分析仪检测谷丙转氨酶(ALT)水平;光镜下观察肝细胞的形态学改变;TUNEL法检测肝细胞凋亡率;实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测内质网应激和凋亡相关基因PERK、ATF-6、GRP-78和Caspase-12 mRNA表达水平。结果显示,与空白组相比,损伤组ALT含量极显著升高(P<0.01),肝组织病理学评分和肝细胞凋亡率均极显著上升(P<0.01),内质网应激相关基因PERK、ATF-6、GRP-78和Caspase-12的mRNA相对表达量均极显著上调(P<0.01);与损伤组相比,预给药组、后给药组ALT含量和肝组织病理学评分极显著降低(P<0.01),预给药组肝细胞凋亡率极显著下降(P<0.01),后给药组肝细胞凋亡率显著下...     

铅对SD大鼠成骨细胞磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C的影响

在体外培养新生sD乳鼠的成骨细胞中暴露不同浓度的醋酸铅（O、20、40、80μmol／L）,作用24h后检测细胞磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C（PC-PLC）活性与PC—PLC蛋白的表达量。结果表明：不同浓度的醋酸铅均可使成骨细胞PC—PLC活性和PC-PLC蛋白表达量极显著降低（P〈0．01）,呈明显的剂量-效应关系,表明成骨细胞铅暴露可通过抑制PC—PLC而发挥毒性作用。     

亚低温对肝脏缺血再灌注犬动物模型肝损伤保护实验的辅助工作体会

~~亚低温对肝脏缺血再灌注犬动物模型肝损伤保护实验的辅助工作体会@杨献群$广东省韶关市粤北人民医院医学动物实验室!广东韶关512026~~~~     

富氢生理盐水干预小型猪肝脏缺血再灌注合并肝脏部分切除损伤中内质网应激影响的研究

为探究富氢生理盐水（hydrogen-rich saline,HRS）干预小型猪肝脏缺血再灌注合并肝脏部分切除损伤中内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ERS）影响,试验选取4~6月龄、体重20~30 kg的健康巴马小型猪18头,随机分为3组,每组6只,分别为假手术组、模型组和HRS干预组。假手术组仅进行翻动肝叶,维持气腹3 h;模型组用腹腔镜手术建立右半肝脏缺血60 min合并左半肝脏切除模型;HRS干预组建立手术模型并于门静脉置管在再灌注前10 min及术后1、2、3 d经静脉注射10 mL/kg HRS。各组分别于术前、再灌注即刻、术后即刻、术后1 d、术后3 d经腹腔镜手术采取肝脏组织,进行HE染色检测,并检测肝脏组织中ERS参数：PKR样ER调节激酶（PERK）、需肌醇酶1（IRE1）、活化转录因子6（ATF6）、葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、活化转录因子4（ATF4）、C/EBP转录因子（CHOP）mRNA的表达水平。结果显示,模型组、HRS干预组肝脏组织病理变化较假手术组严重,且与假手术组相比,模型组、HRS干预组ERS相关参数mRNA表达水平上调;HRS干预组肝脏组织病理变化较模型组轻微,且各项ERS相关参数mRNA表达水平均低于模型组。结果表明,缺血再灌注损伤（ischemia-reperfusion injury,IRI）能诱导肝脏ERS,导致肝脏损伤,而HRS可能是通过抑制过度的ERS从而减轻肝脏IRI。     

抑制NF-κB信号通路保护缺血/再灌注损伤心肌的研究进展

目的:介绍抑制NF-κB信号通路的药物防治心肌缺血/再灌注损伤方面的研究进展。方法:查阅近五年的国内外文献,总结药物作用于NF-κB信号通路防治心肌缺血再灌注损伤方面的研究进展。结果:槲皮素、赤芍总苷、绞股蓝皂苷、红景天苷和三七皂苷R1有良好的抗心肌缺血再灌注损伤作用。作用机理包括:抑制NF-κB活化和下调ICAM-1表达。结论:药物可以通过抑制NF-κB信号通路保护缺血心肌。     

葛根素对大鼠局灶性脑缺血再灌注的保护作用

目的:研究葛根素对大鼠局灶性脑缺血再灌的保护作用,研究相关机制。方法:大鼠大脑中动脉内栓线阻断法制备局灶性脑缺血再灌损伤模型,缺血1.5h再灌注18h后,观察大鼠的神经功能损害并评分,测定脑梗死体积和脑含水量,检测氧自由基(ROS)及Caspase-3的生成。结果:葛根素能显著缩小脑缺血再灌注后的梗死范围,降低脑水肿的程度,降低Caspase-3的活性。结论:葛根素对大鼠脑缺血再灌注损伤具有显著的保护作用,可能与Caspase-3酶活性有关。     

山莨菪碱对缺血再灌注心脏搏出液心肌酶谱的影响

心肌缺血坏死是冠状动脉供血障碍的直接后果,临床上通过运用溶栓疗法、经皮冠状动脉腔内血管成形术、冠状动脉搭桥术等疗法使急性心肌梗死时缺血的心肌重新得到血液灌注。然而,心肌缺血再灌注损伤现象的存在,往往会降低再灌注疗法治疗心肌梗死的效果,为此,探讨减轻缺血再灌注损伤的方法和途径显得非常重要。山莨菪碱为M胆碱受体阻断剂,临床上主要用于松弛平滑肌,解除血管痉挛,改善微循环,增强人体免疫功能等。近些年来,临床上用于尝试治疗室性心动过速、病态窦房结综合征,有实验通过在大鼠和小型猪缺血再灌注模型动物从血流动力学及细胞生物学方面研究显示山莨菪碱对心肌具有保护作用,     

抑制内质网应激保护心肌缺血再灌注损伤的药物研究进展

目的:介绍药物防治心肌缺血再灌注损伤方面的研究进展。方法:根据近几年的研究文献,总结药物防治心从缺血再灌注损伤方面的研究进展。结果:4-苯基丁酸、柚皮素、绞股蓝皂苷、黄连素有良好的抗心肌缺血再灌注损伤作用。作用机理包括:抗氧化应激、抗内质网应激等。结论:药物可以通过抑制内质网应激保护缺血心肌。     

西洋参皂苷对新生鼠缺血-再灌注心肌细胞凋亡的影响及机制

目的:探讨西洋参皂苷对缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响,及抑制心肌细胞凋亡的机制。方法:利用原代培养的乳鼠心肌细胞模拟缺血再灌注模型;采用MTT、TUNEL法检测心肌凋亡细胞;Western blot检测caspase-3,caspase-9蛋白的表达。结果:缺血再灌注组出现心肌凋亡细胞;caspase-3,caspase-9的表达缺血再灌注组较对照组明显增加(P0.05),PQS治疗组较缺血再灌注组明显下降(P0.05)。结论:心肌缺血再灌注诱导心肌细胞凋亡,PQS治疗可以显著减少缺血再灌注心肌细胞的凋亡。PQS通过抑制caspase-3;caspase-9,而抑制心肌细胞凋亡。     

家兔脑缺血再灌注损伤后边缘系统一氧化氮合酶活性的变化及血塞通对其变化的影响

为了研究家兔脑缺血再灌注损伤后边缘系统一氧化氮合酶(NOS)活性的变化及血塞通对其活性变化的影响,探讨血塞通对全脑缺血家兔的脑保护作用.选取3月龄哈白兔63只,体质量(1500±150)g,随机分为脑缺血治疗组,脑缺血未治疗组和对照组3组,手术建立家兔全脑缺血模型,应用生化检测技术测定脑缺血再灌注后不同时间边缘系统NOS活性变化及血塞通对其活性的影响.结果表明,边缘系统内NOS活性在脑缺血再灌注2 h后开始升高,6 h达到高峰,随后逐渐下降,24～96 h活性持续下降,120 h后恢复至正常水平;脑缺血治疗组下降幅度大、速度快,在96 h即恢复至正常水平.缺血治疗组和正常对照组NOS的活性极最著低于缺血未治疗组(P<0.01).结果提示,血塞通可以通过减弱NOS活性进而维持NO的生理含量,对全脑缺血再灌注损伤家兔有明显的脑保护作用.     

没食子酰芍药苷在脑缺血再灌注后神经保护作用和机制

Wistar大鼠通过线栓法建立脑缺血再灌注模型,给予不同剂量没食子酸芍药苷治疗。结果显示,没食子酰芍药苷治疗使大鼠脑梗死体积明显减小,神经功能评分降低,并诱导大鼠脑组织中氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性、谷胱甘肽含量以及Nrf2/HO-1表达明显升高,而半胱天冬酶3活性、丙二醛含量、肿瘤坏死因子α和白介素1β的表达以及Tunel染色阳性细胞数明显降低。结果表明:没食子酰芍药苷可激活Nrf2/HO-1通路,减轻脑缺血再灌注后氧化应激和炎症反应,从而起到神经保护作用。     

MMP13和TIMP2在肝缺血再灌注损伤介导肝纤维化进程中的动态变化及作用

探讨肝缺血再灌注损伤(HIRI)介导肝纤维化进程中基质金属蛋白酶-13(MMP13)和基质金属蛋白酶组织抑制剂2(TIMP2)的动态变化及作用。将70只C57雄性小鼠随机分为假手术组(Sham组)及肝缺血再灌注组(I/R 0 h组、I/R 3 h组、I/R 6 h组、I/R 72 h组、I/R 7 d组及I/R 15 d组)。夹闭肝门静脉、左叶和中叶的肝动脉,缺血90 min后开夹,分别再灌0、3、6、72 h、7 d及15 d,处死小鼠。检测小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的水平;测定肝组织中羟脯氨酸(Hyp)的含量;免疫组化法检测肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达量;RT-PCR检测肝组织MMP13和TIMP2 mRNA的表达水平;HE染色观察肝纤维化程度。结果显示,与Sham组相比,I/R 0 h、I/R 3 h及I/R 6 h组血清ALT、AST升高(P<0.05),I/R 72 h、I/R 7 d及I/R 15 d组下降(P<0.05)。I/R各组肝组织Hyp含量随再灌注时间延长逐渐升高,其中I/R 72 h、I/R 7 d、I/R 15 d组显著高于Sham组(P<0.05)。免疫组化显示,肝组织α-SMA的蛋白表达量随再灌注时间延长而逐渐增加。RT-PCR显示,I/R各组MMP13 mRNA的表达水平呈先高后低的趋势,与Sham组相比,I/R 0 h、I/R 3 h组显著升高(P<0.05)。而TIMP2的表达为先低后高,与Sham组相比,I/R 72 h、I/R 7 d及I/R 15 d组显著升高(P<0.05)。HE染色结果与上述变化趋势相一致。结果表明,在HIRI介导肝纤维化形成过程中MMP13与TIMP2呈动态的协同作用,共同促进肝纤维化的发生发展,是肝纤维化形成的关键因素。     

泽泻对大鼠急性肝脏损伤的保护作用

为考察泽泻提取物对DL-乙硫氨酸(DL-ethionine)致肝脏损伤的保护作用,并探讨其作用机制。采用DL-乙硫氨酸(2.0mmol/L)处理大鼠原代肝细胞24h,制备大鼠急性肝脏损伤体外模型。分别以0.0、1.0、5.0、10.0、20.0、50.0μg/mL的泽泻粗提物作用于该模型,测定各组24h和48h细胞培养基上清液中的ALT、AST活性以及细胞裂解液中的甘油三酯(TG)、直接低密度脂蛋白胆固醇(D-LDL-C)。结果表明,添加泽泻的各组细胞培养基上清液中ALT、AST活力明显降低,细胞裂解液中TG、D-LDL-C含量降低,24h比48h时效果显著。泽泻粗提物的各浓度中,以5.0μg/mL为最佳。     

橄榄苦苷对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

本研究为探讨橄榄苦苷联合依达拉奉对小鼠脑缺血再灌注损伤的影响及其保护作用机制,将50只健康小鼠分成假手术组、模型组、橄榄苦苷组、依达拉奉组、橄榄苦苷＋依达拉奉组。利用双侧颈总动脉结扎方法制备慢性脑缺血再灌注小鼠模型,造模后药物处理21 d,用放射免疫法检测脑组织肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1（IL-1β）、白细胞介素10（IL-10）含量,用比色法检测脑组织ATP酶、髓过氧化物酶（MPO）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性及丙二醛（MDA）含量,用免疫组织化学法及Western blotting法检测大脑皮层脑源性神经营养因子（BDNF）的表达。结果显示,与假手术组相比,模型组脑组织TNF-α、IL-1β、MDA的含量及MPO活性极显著升高（P<0.01）,IL-10、ATP酶、SOD、CAT水平均极显著降低（P<0.01）,大脑皮层BDNF表达水平极显著降低（P<0.01）。与模型组比较,橄榄苦苷或依达拉奉治疗后,脑组织TNF-α、IL-1β、MDA的含量及MPO活性极显著降低（P<0.01）,IL-10、ATP酶、SOD、CAT水平均极显著升高（P<0.01）,大脑皮层BDNF表达水平极显著升高（P<0.01）。橄榄苦苷和依达拉奉联合治疗后脑缺血再灌注损伤的恢复更加显著。综上所述,橄榄苦苷和依达拉奉对小鼠脑缺血再灌注损伤具有明显的保护作用,其机制可能与改善神经功能、减少自由基损伤和抑制炎症因子水平有关,橄榄苦苷和依达拉奉联合治疗可以发挥更好的作用。     

蜂胶抗心肌缺血/再灌注损伤作用机制的研究进展

本文对蜂胶抗心肌缺血/再灌注损伤作用及其机制进行归纳阐述,主要涉及抗氧化、减轻钙超载、抑制炎症反应、抑制心肌细胞凋亡、调节K~+离子通道和血管因子水平等机制,为蜂胶抗心肌缺血/再灌注损伤的相关研究提供参考。     

阿奇霉素对急性心肌梗死患者PCI后再灌注损伤的影响

[目的]探讨分析阿奇霉素对急性心肌梗死(AMI)患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)再灌注心肌损伤的影响及可能机制.[方法]选择ST段抬高AMI并成功实施PCI的患者60例.随机分成试验组和对照组,试验组给予常规药物+口服阿奇霉素治疗;对照组给予常规药物治疗.分别于入院后、PCI术后1d及术后7d,测定外周血中炎性因子白细胞介素-6的含量及高敏C反应蛋白(hs-CRP)的含量.并于术后7d、14 d行心脏超声检查测量左心室舒张束期容积(LVEDV)和左室射血分数(LVEF).[结果]两组患者PCI术后1 dIL-6及hs-CRP含量均升高,且两组 间无差别,而术后7 d IL-6及hs-CRP含量均较前明显降低(P＜0.01),试验组与对照组相比其含量也降低(P＜0.05),LVEDV和LVEF较对照组明显改善(P＜0.05).[结论]在PCI未前和术后应用阿奇零素,均可显著减轻AM I患者心肌缺血再灌注损伤,抑制炎症反应发生.     

右美托咪定抑制Ca2+超载保护大鼠脊髓缺血再灌注损伤

为了探讨右美托咪定(dexmedetomidine, Dex)对大鼠脊髓缺血再灌注(ischemia-reperfusion, I/R)损伤的保护作用及机制,通过改良Zivin法夹闭肠系膜上动脉及右肾动脉之间的腹主动脉50 min建立大鼠脊髓I/R模型。I/R前通过尾静脉进行Dex预处理,通过腹腔注射进行NPS2143和KN93预处理。采用BBB评分和HE染色评估脊髓损伤,微板法检测钙离子浓度,Western blot和荧光定量PCR分别分析CaSR和CaMKⅡ蛋白表达和mRNA转录水平分析。结果显示,与假手术组(Sham)比较,I/R 24 h、Dex 24 h、NPS2143+I/R 24 h及KN93+I/R 24 h组大鼠BBB评分均显著降低(P<0.01),I/R 48 h和KN93+I/R 48 h组BBB评分显著降低(P<0.01);与I/R组比较,Dex组大鼠BBB评分显著升高(P<0.01)。I/R 24 h与I/R 48 h组HE染色结果显示,脊髓神经元胞体固缩,胞核结构不清,染色加深,甚至消失,胶质细胞增生,提示脊髓损伤严重,而Sham组神经元未...