白菜花药组织总RNA提取方法比较及其分析

以白菜花药组织为试材,利用异硫氰酸胍法和改良Tris-硼酸法提取花药总RNA。结果显示两种方法提取RNA的产量都较高,异硫氰酸胍法提取纯度低,但省时高效,适用于对模板要求低的RNA提取。而改良Tris-硼酸法提取花药RNA的产量高、质量好、纯度高,适用于mRNA差异显示及基因表达的Northern印迹等的RNA提取。     

茴香叶片总RNA提取方法的比较

为促进茴香的分子生物学研究,以宁夏海原的茴香叶片为试验材料,分别采用CTAB法、CTAB改良法、CTAB水饱和酚法、Tris-硼酸法、异硫酸氰胍法、异硫酸氰胍改良法、Trizol法和Trizol改良法共8种方法提取茴香叶片RNA,比较其提取效果.结果表明:CTAB改良法提取的RNA质量最好,浓度为1481.9μg·μL...     

不同方法提取狗脊蕨叶片总RNA的比较分析

[目的]为构建狗脊蕨叶cDNA文库,保存珍贵基因资源,克隆和研究与有效成分合成相关的基因等提供技术参考。[方法]以狗脊蕨叶片为材料,采用CTAB法、一步法、酚-SDS法和RNA试剂盒提取分离法提取总RNA,通过比较分析确定最优方法。[结果]这4种方法都能提取出182、8 S的RNA,但CTAB法和试剂盒提取分离法的总RNA质量较高,CTAB法还提取出清晰的5S RNA。一步法和SDS法带型模糊,有降解现象。CTAB法提取的狗脊蕨叶片总RNA质量较好,28S1、8S和5S条带清晰,且无明显降解。CTAB提取法OD260/OD280的值在1.93~2.06,试验中其OD260/OD280值为2.012,接近2.0,纯度较高。一步法和SDS法OD260/OD280>2.0,试剂盒法OD260/OD280<2.0。[结论]CTAB法适合提取的狗脊蕨叶片总RNA,质量较好,可用于cDNA合成、文库构建等后续分子生物学试验。     

盐肤木叶片总RNA提取方法的比较研究

比较了Trizol法、异硫氰酸胍法、CTAB法、SDS法以及改良CTAB法和改良SDS法等方法提取盐肤木叶片总RNA,琼脂糖电泳和紫外检测结果表明:改良SDS法提取的盐肤木总RNA没有降解,28S和18SrRNA条带清晰,D260nm/D280nm和D260nm/D230nm分别为2.05和2.12,虽然其产量只有59.87μg/g,但是综合判断改良SDS法是适宜盐肤木总RNA提取的一种有效方法.     

红麻叶片高质量RNA提取方法比较分析

红麻叶片中富含多糖、多酚和其他次生代谢物质,影响其RNA的产量和质量.本研究应用CTAB法、热硼酸法、SDS法、Trizol法和商品化试剂盒5种方法提取福红992幼嫩叶片总RNA,并对各方法提取效果进行比较.结果表明,热硼酸法效果最佳,其次是CTAB法和SDS法,而Trizol法、试剂盒提取效果不理想.采用热硼酸法提取...     

番茄叶片及果实总RNA提取方法的比较

以番茄品种Moneymaker(MM)为材料,比较了试剂盒法、Trizol法和Trizol改良法3种方法对番茄叶片及果实不同时期总RNA的提取效果,分别采用核酸蛋白检测仪及琼脂糖凝胶电泳,测定了提取样本总RNA的浓度、纯度及完整性.结果表明,就番茄叶片而言,3种方法提取的总RNA纯度均较好;其中Trizol改良法是提取...     

大白菜叶片总RNA提取方法的研究

利用不同浓度的水杨酸溶液处理苗龄为7 d的大白菜植株,在处理12 h后提取粗酶液并测定酶活.分别采用Trizol试剂法、改良SDS法、异硫氰酸胍法等方法对酶活力最高试验组的叶片提取RNA进行RT-PCR反应.结果表明,0.6 mmol·L-1水杨酸浓度诱导试验组效果最佳,几丁质酶的活力达到最大值;改良SDS法提取的大白菜叶片总RNA完整性好、纯度高, 提取的RNA可用于RT-PCR及RACE等实验操作.     

适于cDNA-AFLP的黄瓜幼叶总RNA快速高效提取方法

为了快速高效地提取黄瓜幼叶总RNA,满足于cDNA-AFLP实验的要求。对Trizol试剂提取总RNA的方法进行了改进,所提RNA经琼脂糖电泳检测,其28S、18S、5S 3条带清晰,完整性好,每0.1g幼叶可获得RNA 100~150μg,产率高;经反转录、双链cDNA合成和cDNA-AFLP检测,证实提取的RNA能满足反转录和cDNA-AFLP对RNA质量和数量的要求。     

雷公藤叶片总RNA提取方法初探

以3年生雷公藤实生苗幼嫩叶片及雷公藤组培苗为提取材料,采用CTAB、CTAB-LiCl、CTAB-Trizol、Trizol、天根试剂盒以及百泰克试剂盒等6种方法,提取雷公藤叶片总RNA。结果表明,CTAB法及CTAB-LiCl法经纯化、浓缩后得到的RNA完整性较好且纯度较高,可以用于后续研究。     

一种改进的苹果总RNA高效提取方法

在改进的CTAB提取法基础上,结合总RNA的LiCl沉淀法,摸索出了一套适合苹果组织总RNA提取和纯化的方法。该方法得到的苹果总RNA完整性好,纯度和得率高,且成本低,容易操作。解决了RNA易降解以及木本植物组织中多酚和多糖含量高导致的在提取过程中RNA被氧化和共沉淀从而导致RNA产率低的问题。     

大白菜总RNA快速有效的提取方法

采用改良的TE-3D法提取大白菜根、茎、叶的RNA,用phenol-TE-3D溶液裂解细胞,用体积比24∶1的氯仿/异戊醇溶液萃取RNA,6 mol.L-1氯化锂沉淀RNA。提取的RNA完整、无降解,成功地进行了反转录和PCR扩增试验。     

小白菜线粒体DNA提取体系的建立

为了建立小白菜线粒体DNA(mtDNA)提取体系,以小白菜黄化苗为材料,研究了不同提取方法、材料选择等因素对线粒体DNA提取的影响。结果表明,经冰浴研磨小白菜黄化苗,通过简易的密度梯度离心技术快速抽提大量高纯度的线粒体,蛋白酶K裂解线粒体及有机溶剂抽提去除蛋白质,可获得纯度较高的mtDNA,能用于RAPD分析。     

不结球白菜线粒体DNA的提取及分析

采用SDS-蛋白酶K法提取了不结球白菜黄化苗的线粒体DNA,经琼脂糖电泳及紫外分光光度分析表明,所提取的DNA纯度高,足以进行后续的研究工作.以所提取的线粒体DNA为PCR进行RAPD扩增,获得了清晰的扩增图谱.     

四倍体大白菜“多维462”与6个二倍体品种的比较

以津冠70、中白70、津青75、秋绿75、津秋1号和南韩秋霸6个生产中主栽的二倍体品种为对照,从产品的植物学性状、产量表现和抗病性3个方面,对四倍体大白菜品种“多维462”进行了研究。结果表明：多维462综合性状表现最好,四倍体大白菜存在抗性增强的特性,可以大面积应用于生产。     

白菜常见病害的识别与防治

大白菜是人们生活中不可缺少的一种重要蔬菜,味道鲜美,营养丰富,栽培措施简单,产量高,效益好。大白菜霜霉病、软腐病和病毒病是白菜生产上的三大病害,对白菜的产量影响很大,病害发生时,轻则减产20%-30%,重则达50%以上,因此搞好大白菜常见病的识别与防治非常重要。     

适于双向电泳分析的水稻纹枯病菌菌体蛋白提取方法的比较

为建立水稻纹枯病菌菌体蛋白的双向电泳技术,获得分辨度高、重复性好的双向电泳图谱.采用了酚抽提法、TCA/丙酮沉淀法和丙酮沉淀法进行水稻纹枯病菌菌体蛋白质的提取,利用17cm、pH 5 ～8的IPG胶条对样品进行双向电泳,用PDQuest 8.0软件对电泳图谱进行分析,确定电泳的最佳参数.结果显示:采用17cm、pH 5 ～8的IPG胶条能得到较好的双向电泳图谱;同一样品的三种不同蛋白提取方法(酚抽提法、TCA/丙酮沉淀法和丙酮沉淀法)分别得到1278、885、827个蛋白质点.酚抽提法能有效去除样品中的盐分和小分子的干扰,得到背景清晰的蛋白图谱;TCA/丙酮沉淀法和丙酮沉淀法所得图谱有一定的杂质干扰,同时TCA/丙酮沉淀法和丙酮沉淀法有蛋白点缺失,尤其在碱性端存在明显缺失现泉.研究结果建立了一套适于水稻纹枯病菌菌体蛋白的可靠提取方法和双向电泳体系,为进一步研究其蛋白质组学奠定了基础.     

菜心小白菜的主要病虫害及防治方法

菜心、小白菜是广西省梧州市主要的秋菜,是梧州市冬春半年的主食蔬菜,但菜心、小白菜在生长期间常因病虫为害每年减产15%左右,严重年份甚至达50%上。菜心、小白菜的主要病虫害有霜霉病、炭疽病、软腐病、病毒病、丝菌核、菜青虫、小菜蛾和菜蚜等。菜心、小白菜苗期最容易感染病毒病,发病后植株抗病力减弱,后期易感染霜霉病、软腐病等,严重影响产量,所以加强苗期管理,及时消灭传毒蚜虫,搞好苗期病毒病的防治是十分重要的。     

菜心叶绿素测定方法比较研究

[目的]探讨研磨法和浸提法测定菜心叶片叶绿素含量的优劣及快速测定的步骤。[方法]以菜心为试材,浸提法设5个处理:95%乙醇、80%丙酮、丙酮∶乙醇=1∶1、丙酮∶乙醇=1∶2和丙酮∶乙醇=2∶1,Arnon研磨法作为对照,研究不同提取液对菜心叶片叶绿素提取效果和叶绿素稳定性的影响。[结果]浸提法要优于Arnon研磨法;浸提法中,混合液浸提法的提取率和提取液的稳定性都优于单一溶剂浸提法,其中菜心叶绿素提取效果最好的是丙酮与乙醇体积比为2∶1,单一的丙酮或乙醇浸提法效果较差。[结论]丙酮与乙醇体积比为2∶1的混合液浸提法直接浸提菜心叶片叶绿素的优点是步骤简单,操作方便,节省时间,稳定性好,可以快速测定大批量样品的叶绿素含量。     

普通白菜中4种常用农药残留及风险评估

采集安徽部分地区批发市场258组普通白菜样品,运用风险评估模型,对普通白菜中啶虫脒、阿维菌素、克百威和毒死蜱4种常用农药残留进行风险评估。结果表明,在参试的258组普通白菜中,203组(占比78.7%)样品中检出农药残留,2组样品中啶虫脒超标,1组样品中毒死蜱超标。在检出的4种常用农药中啶虫脒的检出率最高,达到54.6%;阿维菌素检出率为12.4%;克百威和毒死蜱检出率均低于10%;4种农药残留的均值依次为啶虫脒(0.099 0 mg/kg)>阿维菌素(0.0034 mg/kg)>毒死蜱(0.002 9 mg/kg)>克百威(0.001 2 mg/kg)。72.2%的样品中含有1种农药;4.2%的样品中检测含有2种农药;2.4%的样品中含有3种农药,普通白菜的IFS<1。综上所述,普通白菜的啶虫脒检出率较高,99.2%的样品农药残留量低于最大残留量,检测的农药残留处于风险程度范围内,不存在安全风险。