豆梨辐照效应研究

用辐射剂量为10、20、30、40 Gy的60Co射线对豆梨的叶片和叶片诱导的愈伤组织进行辐射处理,研究了辐照处理对叶片愈伤组织分化率、叶片与愈伤组织的组织褐化率、芽再生分化率、分化芽的数量以及再生苗继代培养成活的影响.结果表明,60Co射线对叶片愈伤组织分化、辐照组织的褐化、分化能力均有影响.低剂量(10 Gy)促进叶片愈伤组织的形成,而高剂量则起抑制作用.随着辐照剂量的增加,叶片和愈伤组织的褐化程度均加重,而分化能力减弱,再生苗继代培养成活率降低.适宜豆梨叶片和愈伤组织辐射诱变的辐照剂量为20～30 Gy.     

辐射徐长卿愈伤组织的研究

为探讨辐射处理对徐长卿愈伤组织的影响,获得有利变异植株,采用不同剂量60 Co-γ射线处理徐长卿愈伤组织,研究了辐射处理对愈伤组织致死率和分化变异的影响,并对不定芽的分化率和变异率、变异不定芽生根及试管苗移栽和定植进行研究。结果表明:经过剂量为8、12、16和20Gy 4种处理的愈伤组织死亡率随着辐射剂量的提高而增加;经过8、12、16Gy 3种处理剂量处理的愈伤组织能使分化的不定芽发生变异,其变异率随着辐射剂量增加而提高;变异不定芽培养的试管苗生根率、平均生根数、移栽与定植的成活率随着辐射剂量增加而降低。从经8Gy辐射处理的变异试管苗中筛选出1株长势非常旺盛的有利变异试管苗,试管苗的后代生长非常旺盛,有利变异保持不变。     

三个菊花品种花器官愈伤组织辐射效应的研究

用辐射剂量为10、15、20Gy的^60Coγ射线对金莲、白矮生和矮红3个小花型夏菊品种的舌状花和管状花产生的愈伤组织进行辐射处理，研究了辐射处理对愈伤组织褐化率、分化率以及分化芽的数量的影响。结果表明：γ射线对3个品种不同来源愈伤组织的褐化、分化能力均有影响，随着辐射剂量的增加，不同来源的愈伤组织的褐化程度均加重，而分化能力则减弱。此外，不同基因型和不同来源的愈伤组织，对γ射线敏感性也有差异，矮红品种的愈伤组织最敏感，舌状花产生的愈伤组织比管状花产生的愈伤组织辐射敏感性强。     

60Coγ诱变对白桦愈伤组织再生的影响及再生植株染色体数量变异分析

以白桦(Betula platyphylla)叶片愈伤组织为材料,对诱变后的愈伤组织分化、不定芽生根情况以及染色体数量变异进行了研究:经γ射线处理后,在10~30 Gy范围内愈伤组织的不定芽分化率随着辐射剂量的增加显著降低;染色体数量变异在10~25 Gy呈上升趋势。试验确定,愈伤组织的适宜剂量为20 Gy,该剂量的愈伤组织分化率为53.2%,染色体数量变异率为80.3%。10~30Gy剂量的γ射线处理后,愈伤组织再生植株染色体数量变异率均在79.5%以上,多数产生亚二倍体变异类型。当辐射剂量超过25Gy时,再生植株基本都变成了亚二倍体,γ射线对照射后的白桦不定芽生根具有推迟和抑制作用。     

辐射山苦菜茎段愈伤组织的研究

为改良山苦菜基因型,以其茎段愈伤组织为材料,采用不同剂量60Coγ射线对其愈伤组织进行辐射处理,研究不同剂量射线对愈伤组织致死率和分化变异的影响以及对变异不定芽生根率、试管苗移栽和定植成活率的影响。结果表明,经过10,15,20 Gy这3种剂量辐射处理的愈伤组织致死率随着辐射剂量的增加而增加;10,15,20 Gy这3种处理剂量能使分化的不定芽发生变异,并且变异不定芽培养的试管苗生根率、平均生根数、移栽与定植的成活率均随着辐射剂量增加而降低,且试管苗长势较弱。从定植的变异试管苗中筛选出1株具有叶色浓绿有利性状的试管苗,且有利变异植株保持了山苦菜的所有植物学性状。对愈伤组织进行60Coγ射线处理能改变山苦菜的基因型。     

60Co-γ辐射对番茄离体子叶再生及不定芽分化的影响

用0～100 Gy的60Co-γ射线对番茄品种'1479'的组培无菌苗子叶进行辐射,研究60Co-γ辐射对番茄组织培养中外植体分化的辐射效应.结果表明:60Co-γ射线辐射'1479'子叶后.其出愈率、胚性愈伤诱导率和胚性愈伤的分化情况受到显著的影响.高辐射剂量(>50 Gy)显著抑制了子叶外植体的出愈率和胚性愈伤组织的形成.并对胚性愈伤中芽的分化产生了显著的影响,但对胚性愈伤不定根的诱导影响较小.番茄子叶外植体半致死剂量为50 Gy左右.     

水稻成熟胚培养及辐射愈伤组织对诱苗率的影响

水稻成熟胚培养不同基因型间的诱愈率有明显差异。利用Ｃｏ＾６０－γ射线辐照愈伤组织，不同剂量对愈伤组织的影响各异。当剂量为１０００－２０００ｒａｄ时辐照地愈伤组织的分化有促进作用，可使诱苗率提高０．２－１．０倍；而低吸收剂量左右和高吸收剂量对愈伤组织的诱苗均有抑制作用。由此可见，采用Ｃｏ＾６０－γ射线适宜剂量辐射处理愈伤组织可提高诱苗率。     

60Co-γ辐射对马铃薯耐盐愈伤组织诱导的影响

[目的]为马铃薯辐射诱变育种研究提供科学依据。[方法]测定不同剂量60Co-γ辐射与不同浓度NaCl对马铃薯愈伤组织生长的影响,并在组织培养过程中定向筛选耐盐变异体。[结果]在辐射处理与盐胁迫的双重作用下,马铃薯的愈伤组织发生了一定程度的变异,使得愈伤组织对盐胁迫的耐受力有了大幅度的提高。[结论]当辐射剂量为40J/kg,NaCl浓度为2.0%时,对马铃薯愈伤组织的诱导效果最好。     

高粱幼穗再生体系建立的研究

高粱是重要的杂粮作物之一,其组织培养研究对高粱再生体系建立以及高粱转基因育种具有重要意义。以6个基因型的高粱幼穗为外植体,研究光照、激素、基本培养基以及基因型对幼穗愈伤组织诱导和分化的影响。结果表明:对于高粱幼穗愈伤组织的诱导培养,光照有利于幼穗愈伤组织的诱导;2,4-D和KT混合使用的效果比2,4-D单独使用好;3种基本培养基对幼穗愈伤诱导影响差异不显著;不同基因型对幼穗愈伤诱导影响差异显著,且5种不同基因型材料的愈伤诱导能力大小为M81-E07-27BJ-285=考利罗马。对于高粱幼穗愈伤组织的分化培养,3种培养基中只有MS培养基和NB培养基分化出再生苗;6种基因型中只有忻粱52分化出绿苗,分化率为11.49%。     

高粱幼嫩叶段愈伤诱导与植株再生

[目的]为了建立以幼嫩叶段为外植体的高粱组培技术。[方法]选用育种上常用的8个高粱恢复系材料,进行愈伤组织诱导与分化再生,研究2,4-D浓度对初级愈伤组织诱导的影响,分别对8个材料的诱导率和分化率进行统计,并观察愈伤组织形态。[结果]结果表明,2,4-D是幼嫩叶段诱导愈伤的关键因素,未添加2,4-D的培养基中不能产生愈伤,适宜的2,4-D浓度为2 mg/L。基因型对愈伤组织的质量和形态有很大的影响,不同基因型材料的诱导率和分化率存在很大差异。[结论]通过比较,筛选出了3个诱导率高、愈伤形态优良且分化率较高的基因型三尺三、R111、8643变。     

NaCl及γ射线对小麦愈伤组织某些生理指标的影响

利用鲁麦10号小麦品种幼穗作为外植体诱导愈伤组织。研究了NaCl及γ射线对小麦愈伤组织的生长、脯氨酸含量及细胞形态大小的影响。结果如下:1.γ射线及NaCl都明显的抑制愈伤组织的生长。0.3%的NaCl和5KR的照射量是愈伤组织生长的临界值;30KR是致死的起始照射量:2.NaCl对愈伤组织的脯氨酸含量也有显著的影响,二者呈抛物线相关。γ射线使脯氨酸含量升高,但超过5KR,脯氨酸含量又呈下降的趋势:3.γ射线处理愈伤组织能使细胞的长及宽都增大,并产生巨型细胞,加速愈伤组织的老化。NaCl对愈伤组织细胞大小无显著影响,但能引起细胞大小变异系数的增加。     

甜高粱种子为外植体离体再生体系构建

甜高粱是最具优势的生物质能源作物之一,为提高甜高粱转基因育种效率,以甜高粱成熟种子为外植体,分析了影响愈伤组织生成以及离体再生的相关因素,建立了一套利用甜高粱成熟种子离体再生甜高粱的技术体系。结果表明:用0.1%升汞处理甜高粱种子10 min,具有较低的污染率(低于20%)和较高的发芽率(76.7%)。雅津4184的成熟种子,接种在添加3.0 mg/L的2,4-D和0.3 mg/L的6BA的MSB5基本培养基上培养3周后,可以获得最高的出愈率(81.7%)。愈伤组织在添加0.2 mg/L NAA和1.6 mg/L KT的B5培养基上培养4周后出芽率最高,为93.3%。不定芽在添加2.0 mg/L的IBA的1×MS培养基上培养3周后,具有最大的生根率(96.7%)。建立的甜高粱高频、高效离体培养再生体系,将为利用转基因技术改良甜高粱遗传性状提供便利的方法,加速甜高粱高育种进程。     

抗生素对高粱愈伤组织诱导和生长的影响

用羧苄青霉素等抗生素进行抑菌试验,以羧苄青霉素和头孢霉素的抑菌效果较好.头孢霉素对高梁愈伤组织的毒性表现出比羧苄青霉素大.浓度低于500 mg/L羧苄青霉素对高梁愈伤组织的生长起促进作用;而分化率随着羧苄青霉素浓度的提高而下降.在农杆菌介导高梁遗传转化时,选用羧苄青霉素是合适的,浓度以250 mg/L为宜.高梁愈伤组织对潮霉素的反应比卡那霉素更敏感,高梁不同基因型愈伤组织对卡那霉素和潮霉素的反应在褐化(死亡)率上表现不同.在以潮霉素作为抗性筛选标记时,选择压以50～75 mg/L为宜.     

不同基因型甜高粱愈伤组织与丛生芽诱导条件优化

【目的】探讨不同培养基类型和激素配比对不同基因型甜高粱的愈伤组织和丛生芽诱导的影响,为建立高效稳定的甜高粱遗传转化体系奠定基础。【方法】以不同基因型甜高粱辽甜三号和北甜三号的成熟种子为外植体,在MS培养基中添加不同浓度2,4-D及2,4-D与NAA、6-BA或KT配比组合,对愈伤组织和丛生芽进行诱导;分别在B5、N6、MS和1/2MS培养基中添加不同2,4-D、NAA、6-BA组合,对愈伤组织进行诱导。【结果】适宜北甜三号愈伤组织和胚性愈伤组织诱导的最佳培养基为MS＋2.0mg/L2,4-D＋0.1mg/LNAA,辽甜三号为MS＋2.0mg/L2,4-D＋0.2mg/LNAA,可获得质量较好的愈伤组织,愈伤组织块大且色泽鲜艳。适于两个基因型甜高粱丛生芽诱导的最佳基本培养基为MS＋1.0mg/L6-BA＋0.2mg/LNAA＋0.5mg/L2,4-D,但不同基因型的诱导率有明显差异,以辽甜三号的诱导效果较好。【结论】不同浓度2,4-D与其他激素配比对两个基因型甜高粱的愈伤组织诱导有明显影响,以对辽甜三号的诱导效果较好;在MS、B5、N6、1/2MS基本培养基中,MS可作为愈伤组织诱导的最佳基本培养基。     

不同基因型甜高粱愈伤组织与丛生芽诱导条件优化

【目的】探讨不同培养基类型和激素配比对不同基因型甜高粱的愈伤组织和丛生芽诱导的影响,为建立高效稳定的甜高粱遗传转化体系奠定基础。【方法】以不同基因型甜高粱辽甜三号和北甜三号的成熟种子为外植体,在MS培养基中添加不同浓度2,4-D及2,4-D与NAA、6-BA或KT配比组合,对愈伤组织和丛生芽进行诱导;分别在B5、N6、MS和1/2MS培养基中添加不同2,4-D、NAA、6-BA组合,对愈伤组织进行诱导。【结果】适宜北甜三号愈伤组织和胚性愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2.0 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L NAA,辽甜三号为MS+2.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L NAA,可获得质量较好的愈伤组织,愈伤组织块大且色泽鲜艳。适于两个基因型甜高粱丛生芽诱导的最佳基本培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+0.5 mg/L 2,4-D,但不同基因型的诱导率有明显差异,以辽甜三号的诱导效果较好。【结论】不同浓度2,4-D与其他激素配比对两个基因型甜高粱的愈伤组织诱导有明显影响,以对辽甜三号的诱导效果较好;在MS、B5、N6、1/2MS基本培养基中,MS可作为愈伤组织诱导的最佳基本培养基。     

不同的激素配比及培养基类型对苏丹草185愈伤组织诱导率的影响

以苏丹草185的成熟种子为外植体，就不同培养基和激素配比对愈伤组织的诱导率进行研究，筛选出了适合苏丹草185愈伤诱导的培养基。研究中发现，对于苏丹草185种子在相同激素配比条件下，采用MS基本培养基的诱导率高于N6培养基。在相同的基本培养基培养条件下，采用不同激素配比，84个处理组合的诱导率有较大差别。在MS培养基中，2,4-D浓度为2．0 mg／L、KT浓度为0．1mg／L时的诱导效果最好：而在N6培养基中，2,4-D浓度为4．0mg／L、KT浓度为0．5mg／L时的诱导效果最好，较易形成胚性愈伤。     

雪菊的组织培养研究

以雪菊带芽茎段、茎尖、叶片为外植体以MS为培养基添加不同浓度6BA和NAA进行组织培养实验,结果表明适合带芽茎段愈伤组织诱导的培养基为MS＋6BA1.0mg/L＋XAA0.3mg/L;适合茎尖愈伤组织诱导的培养基为MS＋6BA1.0mg/L＋XAA0.1mg/L;适合叶片愈伤组织诱导的培养基为MS＋6BA3.0mg/L＋NAA0.3mg/L,适合雪菊愈伤组织增殖和不定芽诱导的培养基为MS＋6BA2.0mg/L＋NAA0.3mg/L;适合雪菊试管苗生根的培养基为1/2MS＋6BA0.3mg/L＋XAA0.03mg/L,蔗糖减半,以雪菊无菌苗的带芽茎段、茎尖和叶片为外植体成功地诱导出了愈伤组织,其中带芽茎段愈伤组织诱导率最高时间最短效果最好茎尖次之叶片最差.     

高粱幼穗离体培养再生体系的建立

6个基因型的高粱幼穗接种于YD10、L2、YLMDS和MS1诱导培养基,结果在MS1培养基上6个基因型的幼穗都诱导出愈伤组织,05DL15A诱导率最高为96.0%,四杂40诱导率最低为27.5%。获得的淡黄色颗粒状愈伤组织分化出不定芽,不定芽高8cm左右转入生根培养基再生植株。     

甜玉米和糯玉米幼胚离体培养试验

以N1、N28、T5、1＇6等4个玉米（Zea mays L．）自交系为材料,进行幼胚离体培养．通过愈伤组织的诱导、继代、分化和植株再生等试验,对影响玉米幼胚愈伤组织诱导率和胚性率的因素进行了分析．结果表明,甜、糯玉米幼胚诱导出愈伤组织的能力较为普遍,但诱导率及胚性率因基因型不同、所选用培养基不同而不同,基因型是影响玉米幼胚愈伤组织诱导和幼苗再生的一个重要因素;选择大小为1～2mm的幼胚作为外植体有利于诱导出理想的胚性愈伤组织;2,4-D是愈伤组织诱导和继代不可缺少的植物激素,在愈伤组织诱导及继代过程中2,4-D含量以2．0mg／L为宜;AgNO3有利于胚性愈伤组织的诱导和生长,最佳含量为10mg／L,比对照高27．15％．