康氏木霉对向日葵菌核病菌拮抗作用研究

探讨康氏木霉对向日葵菌核病菌的拮抗效果, 为用于该类病害防治奠定基础。研究表明康氏木霉对向日葵菌核病菌具有较强的拮抗作用。同时对康氏木霉的代谢物进行了活性测定, 结果发现: 康氏木霉挥发性代谢物对向日葵菌核病菌菌丝生长的影响与对照在F0 01水平上差异显著。非挥发性代谢物对向日葵菌核病菌菌丝生长的影响也达F0 01显著水平, 但分析过滤灭菌和高压灭菌两种不同灭菌方式对抗生物质活性的影响并无显著性差异, 说明康氏木霉的非挥发性代谢物具有热稳定性。     

拟康氏木霉对蔬菜病原真菌的拮抗作用及对番茄灰霉病的防效的初步研究

通过对峙培养,测试了拟康氏木霉对灰葡萄孢霉、尖孢镰刀菌、番茄叶霉病菌、番茄早疫病菌、辣椒疫霉、辣椒炭疽菌的拮抗作用。对峙培养5d时对以上病原菌的抑制率分别为73％、62％、86％、77％、68％、91％。拮抗机制主要为竞争和抗生等。离体防治试验表明,拟康氏木霉孢子悬液对番茄灰霉病的防效显著,其浓度为106、107、108cfu／ml时,在离体茎段和叶盘上的防效分别为29．8％、53．8％、62．5％和59．1％、66．1％、70．3％;而在盆栽试验和大棚试验中的防效分别为48．3％、64．6％、68．3％和37．7％、46．2％、60．6％。浓度为107、108cfu／ml时防效在各试验中均达到甚至高于甲基托布津的防效。     

康氏木霉对棉花的增产作用

在应用康氏木霉防治棉苗立枯病的同时,我们发现它还对作物有促进生长发育作用,表现在单株结铃数增加,脱落率降低,单铃重增加等,至使产量明显提高。     

康氏木霉孢子的致死温度及存活期的试验研究

康氏木霉孢子的致死温度是７１℃／１０分钟．在不同的保存条件下，康氏木霉孢子的存活时间长短不同．埋入土壤中的孢子的存活情况还随培养料的不同而不同。     

康氏木霉固体发酵产孢子粉工艺研究

通过单因素发酵试验和正交试验,以麸皮、米糠、稻草粉、蔗渣等农副产品为固体培养基,进行了木霉固体发酵工艺优化。结果表明:最佳条件组合为麸皮50 g,葡萄糖1.0%,硫酸铵0.5%,磷酸二氢钾0.05%,发酵温度28℃,初始pH值7.0,料水比1∶1.2,发酵周期7d,经80 cm×40 cm×5 cm不锈钢浅盘固体发酵扩大培养,孢子数产量可达9.6×109cfu/g,为康氏木霉菌生防制剂生产应用提供了参考。     

康氏木霉代谢物对植物病原真菌的抗菌活性测定

本研究对康氏木霉的代谢产物的抑菌活性进行了测定,并定向测定了培养时间和通气状况对康氏木霉代谢产物活性的影响,对康氏木霉的次生代谢物进行了研究,研究结果表明,康氏木霉所产生的挥发性代谢物具抑菌作用;其所产生的具抑菌作用的非挥发性代谢物对热稳定;康氏木霉在合成培养液中产生的抑菌物质活性与培养时间呈直线正相关,并随培养时间的延长,抑菌作用逐渐增强;高通气量的摇床培养条件有利于提高康氏木霉的抗菌活性。     

康氏木霉产纤维素酶固态发酵条件的研究

以稻草和麸皮为主要原料,通过单因素试验优化康氏木霉固态发酵产纤维素酶的条件,对氮源、接种量、麸皮含量、含水量、发酵时间、发酵温度和初始pH值进行了研究.结果表明,最佳发酵条件:培养基氮源为(NH<,4>)<,2>SO<,4>、麸皮添加量为40%、含水量为200%;接种量为7%;初始pH值为5.0;发酵时间为96 h;发酵温度为30℃.     

康氏木霉固态发酵生产纤维素酶条件的研究

以麸皮和玉米芯为主要原料,采用康氏木霉(Trichoderma koningn)固态发酵生产纤维素酶,并对 影响纤维素酶活性的碳源和氮源配比、外加氮源、培养基初始pH值、培养时间和表面活性剂等因素进行了研究。结 果表明,培养基碳源和氮源配比以麸皮:玉米芯为3:2时最适合;外加氮源以质量分数0．8％硝酸铵产纤维素酶 活性最高;培养基初始pH值为3．0时,纤维素酶活力最高,是对照的1．37倍;表面活性剂以质量分数0．50％“奇 强”洗洁精对提高纤维素酶活性的作用最显著,较对照提高12．4％;培养时间为72 h时,纤维素酶活性最高。     

康氏木霉HEX1蛋白的原核表达及纯化

【目的】对康氏木霉HEX1蛋白进行原核表达和纯化,为进行抗体制备及深入研究HEX1功能奠定基础。【方法】采用RT-PCR方法扩增康氏木霉hex1基因,构建pMD19-T-hex1重组克隆质粒,在此基础上构建pET28a-hex1表达载体,转化E.coli BL21(DE3)细胞。通过IPTG诱导表达,对重组HEX1蛋白进行可溶性分析、纯化及鉴定。【结果】成功克隆了长660bp的hex1基因并构建了融合表达载体,HEX1蛋白在IPTG诱导下得到表达。融合蛋白主要以包涵体形式存在,能与抗His标签的兔多克隆抗体发生特异性反应,并纯化出了融合表达蛋白。【结论】康氏木霉HEX1蛋白在原核细胞中得到成功表达及纯化,获得了分子质量约为25ku的重组蛋白。     

木霉菌对五种植物病原真菌的重寄生作用

研究了哈茨木霉（Trichoderma harzianum)T88菌株和深绿木霉（T.atroviride）T95菌株对立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）、杨树料皮病菌（Valsa sordida）、杨树水泡溃疡病菌（Botryosphaeria ribis）、苹果树腐烂病菌（V.ceratosperma）、贝伦格葡萄座腔菌梨生专化型（B.berengeriana f.sp.piricola）的重寄生作用。对峙培养的结果可观察到，多数情况下，接种后2d内木霉与病原菌接触，随后覆盖或侵入病菌菌落，抑制其生长。光学显微镜和扫描电镜观察结果表明，木霉对不同的植物病原真菌重寄生作用方法不同。可观察到木霉菌缠绕病原菌的菌丝，或沿着病原菌的菌丝平行或波浪式生长，或产生铯状分枝、吸器或附着胞吸附于病原菌的菌丝上，或穿透病原菌的菌丝，最终使病原菌的菌丝细胞原生质浓缩，菌丝断裂等现象。     

油菜花上真菌种类及其对菌核菌拮抗作用的研究

于油菜初花期与盛花期采取油菜不同部位花瓣和花药进行真菌分离.除菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)外,还以不同的频率分离到葡萄孢菌(Botrytis spp.),交链孢菌(Alternaria spp.),芽枝霉菌(Cladosporium spp.),叶点霉菌(Phyllosticta sp.),附球孢菌(Epicoccum sp.),镰刀菌(Fusarium spp.).其中葡萄孢菌、交链孢菌、芽枝霉菌出现较早,为初花期主要真菌群;盛花期还分离到叶点霉菌和附球孢菌,以镰刀菌出现最迟.1991年从分离真菌中选择101个菌株.通过培养皿法和花瓣法测定对菌核菌的拮抗作用,初步筛选出A_3,A_(25),A_(26),B_(10),B_(13),B_(11),B_(26),B_(31),B_(3(?)),C_8,E_1和E_2 12个对菌核菌拮抗作用较强的菌株.用以上拮抗菌和菌核菌的孢子悬液于24h 时内在实验室条件下先后喷雾接种开花的油菜植株,所有拮抗菌占领花朵百分率为63%～96%不等,而菌核菌不能定殖其上.1992年从151个分离菌株中,筛选出59个对核盘菌具有拮抗作用的真菌菌株,其中葡萄孢菌41个占69.49%,交链孢菌5个占8.47%,芽枝霉菌1个占1.69%,镰刀菌12个占20.34%.     

木霉（TR－5）对病原真菌的拮抗机制和防病效果研究

从土壤中分离获得一株木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｓｐ．）菌株（ＴＲ－５），用对峙法和系列稀释法测定其对立枯丝核菌（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａｓｏｌａｎｉ），禾谷丝核菌（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａｃｅｒｅａｌｉｓ），西瓜枯萎病菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍｏｘｙｓｐｏｒｕｍ∫ｎｉｖｅｕｍ），油菜菌核病菌（Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ），昆明腐霉（Ｐｙｈｔｉｕｍｋｕｎｍｉｎｇｅｎｓ）和寄生疫霉（ＰｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａＰａｒａｓｉｔｉｃａ）的拮抗作问。结果表明，ＴＲ－５菌株对６种病原真菌都具有极强的拮抗作用，主要表现为缠绕、附着在病原真菌菌丝上，同时产生吸器侵入病原真菌的菌丝，使菌丝断裂。还能分泌有毒或抗生物质抑制其生长，并具有很强的生长竞争能力。ＴＲ－５菌株对立枯丝核菌，禾谷丝核菌和西瓜枯萎病菌的有效抑制浓度为１０６～１０７个孢子／ｍｌ；对油菜菌核病菌和昆明腐霉菌为１０４～１０５个孢子／ｍｌ；而对寄生疫霉为１０５～１０６个孢子／ｍｌ。用ＴＲ－５木霉的分生孢子制剂在温室条件下对黄瓜猝倒病（Ｐｙｔｈｉｕｍａｐｈａｎｉｄｅｒｍａｔｕｍ）和黄瓜疫病（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｄｒｅｃｈｓｌｅｒｉ）进行防治试验，效果分别     

桔梗根腐病发生原因及防治措施研究

经病原菌形态学及病害症状观测,桔梗根腐病病原菌为腐皮镰孢Fusarium solani(Mart)Sacc.et Wollen..移栽时沟施木霉菌T25,发病初期浇灌50%福美双WP 500倍液,隔15 d再浇灌一次,显蕾初期喷15%多效唑3000倍液等,防效可达64%以上,单株肉质根增重16.8%.     

食用菌线虫病害发生规律与防治研究

侵染食用菌的线虫主要来源于各种培养料、复土和污水,从食用菌床及菌体中分离到的线虫有Aphelenchoides composticola,Ditylenchus myceliophagus,Paraphelenchus myceliophthorus和3种杆型线Rhabditida、app.在蘑菇栽培期的9月中旬至10日上旬和翌年的4月下旬至5月上、中旬发生危害最重,各有一次发生高峰。用克线磷和甲醛处理培养料,蘑菇可分别平均增产2.4％～31.0％。     

苹果霉心病的研究Ⅰ致病菌种类的调查鉴定

自苹果花期至贮藏期定期从花器、幼果、成熟果实和贮藏过程中的果实分离获得菌株。用孢子悬浮液经果实的萼筒注射接种红星苹果的成熟果实，发病后分离获得病原菌纯培养物。根据培养性状、子实体和孢子的形态共鉴定出１１属的１２种及８个类型的致病真菌。     

木霉菌形态学分类检索与分子生物学鉴定

木霉菌(Trichodermaspp.)为世界性分布,广泛存在与土壤、腐烂的木材及蔬菜基质中。某些菌株是重要的工业酶和抗生素的产生菌,并作为生防因子用于防治多种作物病害。近些年来,木霉的分类和鉴定主要参考形态学特征(Gams和Bissett)和核酸序列分析。本文就这两个方面进行了总结整理,以期对国内木霉菌的分类和鉴定工作提供便利和帮助。