松乳菇菌株的分离鉴定及其与马尾松的互作效应

【目的】开展松乳菇的分离鉴定及松乳菇与马尾松的共培养研究,以期通过与马尾松共培养实现松乳菇的规模栽培。【方法】试材松乳菇子实体采自湖北恩施天然马尾松次生林,使用组织分离法获得松乳菇菌株,采用r DNA ITS分子鉴定分离菌株的种属,利用One-way ANOVA分析松乳菇接种对马尾松菌根侵染率、苗木生长及氮（N）、磷（P）、钾（K）含量的影响,并利用Duncan法分析马尾松菌根侵染率与松乳菇子实体生长指标的相关性。【结果】r DNA ITS分子鉴定3株真菌均为松乳菇,其在松木屑、棉籽壳等基质上能实现菌丝体的良好生长,属于兼性腐生菌根真菌。松乳菇与马尾松共培养结果显示,3株松乳菇均与马尾松形成外生菌根,在共培养11个月后,马尾松的菌根侵染率均在95%以上,外源接种松乳菇显著增加马尾松的干重、株高、地径、主根长和侧根数（P<0.05,下同）,与CK相比,接种处理马尾松干重增加5.41%～19.25%,株高增加11.15%～20.59%,主根长增加12.58%～28.90%,侧根数增加34.88%～46.42%,地径增加幅度最大,比CK增加52.63%～68.42%;外源接种松乳菇显著...     

马尾松外生菌根真菌一松乳菇的研究

采用栽培种培养基培养马尾松外生菌根真菌松乳菇分离物,获得了松乳菇接种物。并利用此接种物进行了马尾松圃地育苗接种试验,比较了接种处理与对照马尾松幼苗的生长情况,菌根侵染率和氮磷钾含量的差异。结果表明,松乳菇对马尾松幼苗的生长及氮磷钾养分的吸收有明显的促进作用,菌根感染率超过65％以上。     

松乳菇菌种分离及菌丝生长特性的研究

采用5种培养基配方,对2种不同颜色6个不同来源的松乳菇子实体的不同部位进行组织分离,发现分离松乳菇较好的培养基是PDA培养基,筛选出8株生长较好菌株。对菌株A1进行生长特性研究表明:菌株A1碳源利用范围广,蔗糖最好,葡萄糖次之,果糖最差;对氮源的利用,有机氮单一氮源优于复合氮源,其中尿素不能利用;无机氮源铵态氮优于硝态氮,以硫酸铵效果最好,亚硝酸盐不能利用;对盐浓度适应能力很强,在盐浓度为14g·L-1条件下也具有生长能力,适宜生长的盐浓度范围为0～6g·L-1。生长温度范围为7～37℃,适宜的生长温度是15～30℃,最佳生长温度是27℃。喜中性偏酸性环境,适宜生长的pH值为5～7,最适pH值为6 5。图2表4参7     

松乳菇人工驯化栽培

松乳菇属红菇科乳菇属,又名美味松乳菇、松树蘑、松菌,是一种深受欢迎的美味食用菌。该菇人工栽培难度大。笔者通过多年潜心研究,摸索出一套人工驯化栽培方法。1.形态特征松乳菇菌盖宽4～10厘米,扁半球形,中央脐肚,伸展后往下凹,边缘起初内卷后平展。湿时沾、无毛、虾仁色、胡萝卜黄色。伤变绿色,特别是菌盖边缘部分变绿显著。菌肉初带白色,后变胡萝卜黄色,乳汁桔红至酱红色,后变绿色。味道稍辛辣,气味好闻,菌褶与菌盖同色。菌褶直生或稍延生,较密,近柄外分叉,褶间有横脉相连,伤或老后变绿色。柄长2～5厘米,粗1～2厘米,近圆柱形中空。孢子椭…     

松乳菇人工驯化栽培

松乳菇属红菇科乳菇属,又名美味松乳菇、松树蘑、松菌,是一种深受欢迎的美味食用菌.该菇人工栽培难度大.笔者通过多年潜心研究,摸索出一套人工驯化栽培方法.     

松乳菇菌丝培养基的筛选

[目的]筛选松乳菇菌丝培养最佳培养基配方。[方法]以松乳菇菌种(编号NZ1)为供试菌株,设计2组不同的培养基配方进行菌丝培养的比较试验。[结果]松乳菇菌丝培养的最佳培养基配方为新西兰进口PDA培养基。[结论]该研究可为更好地进行松乳菇人工培养提供科学依据。     

野生松乳菇菌丝在不同培养基上的分离试验

以野生松乳菇的子实体作为分离材料,取子实体的柄基进行组织分离,分别接入不同配方的培养基上进行培养试验,结果表明,葡萄糖20g、酵母1g、MgSO4.7H2O 0.5g、琼脂20g、松根液100mL(100g松根+500mL水煮沸过滤)、腐殖土水100mL(100g腐殖土+500mL水煮沸过滤),加水至1 000mL的培养基上菌丝生长最好。     

松乳菇酸奶发酵条件优化研究

采用L9(34)设计,以保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌为发酵剂、以松乳菇发酵液和鲜牛奶为原料进行乳酸发酵。结果表明,松乳菇菌丝体发酵液25%、鲜牛乳75%、蔗糖9%、接种量3%,采用酸奶制作工艺,42℃条件发酵4h,生产的松乳菇酸奶菇味清香、酸甜适口、凝乳均匀、色泽淡黄。     

松乳菇固体培养条件的研究

采用固体培养的方法,研究不同碳源、氮源和无机盐营养因子对松乳菇菌丝的影响。通过观察菌丝密度和计算菌丝生长指数筛选出最适合松乳菇菌丝生长的培养基配方。结果表明：松乳菇的最适碳、氮源分别为葡萄糖与蛋白胨;MgSO4、CuSO4、VB2促进菌丝生长,FeSO4、CoCl2则有较明显的抑制作用。正交试验,确定松乳菇菌丝生长的最佳培养基配方为：葡萄糖20 g/L,蛋白胨1 g/L,KH2PO40.3 g/L,MgSO40.3 g/L,VB22 mg/L,琼脂20 g/L, pH自然。经过优化以后,在28℃下培养,菌丝生长指数为4055.9。     

对4个不同产地松乳菇子实体的分子鉴定

提取4个不同产地松乳菇子实体的基因组DNA,扩增其ITS序列,测序后通过和GenBank中相似度较高的序列比对,构建系统发育树,经分析,鉴定出所采集到的子实体均为松乳菇的子实体。     

松乳菇子实体两个发育时期的转录组分析

以松乳菇子实体为研究材料,采用de novo测序对松乳菇子实体进行测序与生物信息学分析,探究松乳菇子实体生长发育过程中幼菇期(LDG-1)和成熟期(LDG-2)基因表达的差异,并探寻影响松乳菇生长发育相关的主要基因和代谢通路。测序结果显示,共获得7.44G(LDG-1)和7.21G(LDG-2)的分析数据(clean reads)。KOG功能注释结果显示,松乳菇在幼菇期(LDG-1)和成熟期(LDG-2)具有全面而复杂的基因功能类别。GO富集结果提示,松乳菇在不同生长阶段(LDG-1和LDG-2)的生物代谢功能存在一定的差异。基因表达水平与聚类分析显示,ATP酶、多功能伴侣蛋白等家族基因为LDG-1和LDG-2主要高表达基因,在能量代谢与参与调控细胞周期中起重要作用。分析差异表达基因发现,相较于LDG-1期,LDG-2期有16 789个差异表达基因,其中7 635个基因上调,9 154个基因下调。差异表达基因KEGG富集通路分析结果显示,氧化磷酸化途径是松乳菇幼菇期生长发育过程中能量代谢的关键途径。进一步分析显示,MAPK信号通路是影响松乳菇子实体发育的关键信号通路,在促进松乳菇子实体进行有性生殖和调控菌丝体的极性生长中起重要作用。     

松乳菇固态发酵棉粕脱毒条件的研究

[目的]对松乳菇固态发酵棉粕脱毒的发酵条件进行优化,以期获得最佳的发酵工艺参数。[方法]采用单因素单因子法研究了碳源、氮源、无机盐含量以及温度、起始pH、料液比、接种量等因素对游离棉酚降解率的影响,在此基础上,采用响应面法评价了发酵温度、起始pH、料液比、接种量及其交互作用对游离棉酚降解率的影响,用Design-Expert 8.0.5b软件分析试验数据,建立了松乳菇固体发酵棉粕发酵条件的数学模型。[结果]研究表明,适宜的发酵培养基组成为:棉粕与麦麸的比例6∶4,(NH4)2SO40.75%,KH2PO40.15%,MgSO4·7H2O 0.05%;适宜的发酵条件为:温度28℃,初始pH 6.6,料液比1∶1.4 g/ml,接种量10%。优化后的发酵条件为:温度28℃,初始pH 6.6,固水比1∶1.38 g/ml,接种量10.38%。在此条件下,游离棉酚的降解率达到87.702 3%。[结论]研究可为棉籽饼粕的深度开发和生产棉籽蛋白提供参考依据。     

红汁乳菇、半血红乳菇及橙色乳菇的rDNA ITS序列分析

从分子角度对红汁乳菇(Lactarius hatsudake)、半血红乳菇(Lactarius semisangui fluus)及橙色乳菇(Lactarius akahatsu)的分类地位进行了阐述。利用真菌通用引物对湖南衡阳的红汁乳菇rDNA的转录间隔区(ITS)进行扩增、测序。所得序列与GenBank中的半血红乳菇及橙色乳菇的ITS序列比较,最后得出Lactarius semisanguifluus和Lactarius hatsudake是同物异名,而Lactarius semisanguifluus和Lactarius akahatsu则不是同种的结论;试验中还发现GenBank中的AF096988 Lactarius semisanguifluus是错误的命名种,应该是乳菇属中的松乳菇。     

绒白乳菇菌丝体多糖成分及抑菌活性分析

以热水法提取绒白乳菇菌丝体多糖,其粗多糖中多糖质量分数为3.92%,还原糖质量分数为1.11%;纯化后,多糖质量分数为84.12%,纯度提高了约21倍,还原糖质量分数为1.59%。初步判断绒白乳菇菌丝体多糖中含有葡萄糖、甘露糖、果糖。绒白乳菇菌丝体多糖液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌有一定抑制作用;对啤酒酵母、白色念球菌有微弱抑制作用;对绿色木霉、黑根霉、黑曲霉、杨树烂皮病菌、杨树叶枯病菌均无抑制作用;对细菌抑制能力强于真菌。     

红汁乳菇液态培养条件的筛选

为了研究红汁乳菇菌丝体的液态培养条件,通过单因子试验和响应曲面法对红汁乳菇菌丝体的液态培养条件进行了研究.结果表明,当培养基初始pH为5.0,接种菌龄3 d,接种量6%,培养温度27℃,摇瓶装液量为60 mL,摇床转数在140 r/min时,菌丝体干重达到最大值,其理论值为0.813 3 g/100 mL,比单纯用优化培养基的理论预测值(0.763 3 g/100 m)提高了6.55%.