一种简便易行的栗疫病菌单孢分离方法

介绍了一种分离栗疫病菌单分生孢子的简便易行的方法。此方法可以排除菌丝段的干扰,也适用于分生孢子器中产生微小分生孢子的其他真菌。     

栗疫病菌侵染板栗枝条的显微观察

栗疫病是一种严重危害栗属植物的病害。为了明确栗疫病菌侵染板栗枝条的过程及侵染的关键时间点,本研究利用病理组织切片技术、显微镜和扫描电镜技术对栗疫病菌侵染板栗枝条的过程进行了观察。结果表明:接种栗疫病菌后0～5 h,菌丝先降解枝条表皮,进行横向营养生长的同时沿着伤口纵向侵染,为进入皮层做准备;接种后6 h病菌开始在表皮定殖,并侵入皮层;接种后9 h在皮层可观察到侵染性菌丝沿着细胞间隙向相邻细胞延伸;接种后12 h栗疫病菌侵入韧皮部,在皮层的侵染面积扩大。随着侵染程度加深,皮层、韧皮部等处细胞被菌丝降解,最终在形成层附近聚集。接菌后9 h为栗疫病菌侵染板栗枝条的关键时间点。     

单克隆抗体检测栗疫菌dsRNA的研究初报

 本文利用dsRNA特异性单克隆抗体,采用双抗体夹芯ELISA法,检测了栗疫菌中的dsRNA.结果表明,该法不仅能从栗疫菌低毒力菌株的总核酸粗提液中检测到dsRNA而不受其它核酸的干扰,而且比电泳法简便迅速,在大量筛选含dsRNA的栗疫菌低毒力菌株中具有很大的实用价值。     

栗疫病菌不同毒力菌株生物学特性的研究

 对不同毒力、含或不含dsRNA的菌株的生物学特性进行了研究。含dsRNA的弱毒力菌株的分生孢子后代,可分化出白色和桔黄色两种菌落类型,菌落白色的单孢菌株,可继续分化出白色和桔黄色两种类型的后代,桔黄色的单孢菌株保持稳定,不再发生分化。不含dsRNA的菌株,未见培养性状发生分化。对含dsRNA的弱毒力菌株的第2代两种类型的单孢菌株进行了毒力测定和dsRNA检测,桔黄色的单孢菌株的毒力水平达到或接近强毒力菌株的水平,不含dsRNA;而白色的单孢菌株的毒力很弱,且都含有dsRNA。对不同毒力菌株分生孢子的萌发率进行了比较,结果表明,孵育12h后,即有部分菌株的分生孢子开始萌发,强毒力菌株孢子的萌发最早,含dsRNA的弱毒力菌株的孢子萌发较迟;孵育24h后,各菌株孢子的萌发率均达到90%以上,差异已不太明显,但芽管的分枝程度有较大差异,强毒力菌株的芽管(菌丝)大量分枝,初步形成菌丝丛,而弱毒力菌株,不论是否含有dsRNA,芽管的分枝程度均较低。     

栗疫病菌菌株的毒性联合与毒性分离现象的初步研究

 对来自3个中国板栗居群的共18个栗疫病菌株进行单株及混合菌株的毒力评价,结果表明各单株毒力差异显著,混合菌株存在毒性联合与毒性分离现象。同一种群的组合中有64.4%为毒性联合,不同种群的组合其毒性分离率高达88%,同一种群组合的毒性联合强度比不同种群组合的毒性联合强度大,而不同种群组合的毒性分离强度比同一种群组合的毒性分离强度大。大多数组合的毒性联合或毒性分离的性状表达稳定。     

不同抗性板栗品种的防御酶系对栗疫菌Cp-毒素的响应

对照.此外,抗病品种酶活性高于中抗品种和感病品种;防御酶的活性与品种抗病性之间呈正相关,毒素作用后防御酶活性的变化可作为衡量板栗抗病性强弱的指标.     

影响水稻纹枯病菌营养体亲和性分化的因子

 为了探明影响水稻纹枯病菌营养体亲和性分化的因子,将水稻纹枯病菌菌株cx-2在不同水稻品种继代接种,并在含不同杀菌剂、具不同pH及不同温度条件的PDA平板上继代培养,用对峙法测定继代菌株与原始接种菌株的营养体亲和性。此外,对营养体亲和性分化菌株与原始菌株的AFLP指纹图谱进行比较。结果显示,在供试的30个水稻品种上连续接种4次后,从9个水稻品种中分离出与原始菌株营养体不亲和的菌株。菌株在不同pH值的PDA平板继代培养4次后,在pH偏碱性端(pH 10、pH 11)开始出现营养体亲和性分化的菌株。在不同农药和温度条件下继代培养10次的菌株中没有分离到营养体亲和性分化的菌株。营养体亲和性分化菌株与原始菌株的AFLP指纹图谱没有差异。     

利用拮抗菌防治棉铃疫病

从作物茎内和棉田土中分离纯化到１９３株细菌和９０株真菌,通过平板对峙法筛选出对棉铃疫菌具拮抗作用的细菌２６株和真菌１６株。室内离体棉铃生测表明,施用拮抗菌（芽孢杆菌ＭＢ－３、ＭＢ－７、ＭＢ－８、ＢＣ－１）２４小时后再接种棉铃疫菌比施用拮抗菌后马上接种棉铃疫菌的防治效果要好,可达６０％～８０％。田间试验结果显示,８月初仅喷施一次,ＭＢ－３和ＭＢ－７的相对防效达３４．９％和４５．４％,明显优于对照化学药剂。此外,对拮抗菌的拮抗作用机理也进行了初步讨论。     

山西省蔬菜灰霉病菌营养体亲和性及菌丝融合群的初步研究

 采用对峙培养和显微观察方法,对采自山西晋中、运城、临汾、长治、大同等5个地区的92个灰霉病菌单孢菌株进行了营养体亲和力测定。结果表明:供试的92个菌株,根据其营养体亲和性初步划分为7个不同的菌丝融合群(AG1、AG2、AG3、AG4、AG5、AG6、AG7),而且不同地区融合菌群的分布存在一定差异。晋中分布有4种类型(AG1、AG2、AG3、AG4),运城3种(AG1、AG3、AG5),临汾4种(AG1、AG2、AG3、AG6),长治4种(AG1、AG2、AG5、AG7),大同3种(AG2、AG3、AG6),其中AG2分布最广、数量最多,为山西境内分布的灰葡萄孢菌的优势菌群。     

韩国栗疫病抗病品种的遗传变异分析

为了分析韩国栗疫病的抗病品种和感病品种的遗传变异和抗病性的筛选,利用抗病性的快速检测法和RAPD(random amplified polymorphic DNA)方法对13个栗树品种进行了抗病性检测和RAPD标记分析。抗病性的快速检测选出了5个抗病品种、5个感病品种和3个中度抗病(或中度感病)品种,并且这一结果与该品种的田间表现相一致。利用筛选的12个随机引物,扩增了100个多态性RAPD片段,但未发现与抗病性或感病性相关的特异RAPD片段。聚类分析结果表明,12个品种大致分为抗病、感病和中度抗病(或中度感病)等3个大组,并与抗病性的快速检测结果基本一致。抗病品种“MANSEKI”表现出了相对于12个品种较远的亲缘关系。