猪骨蛋白的碱性蛋白酶酶解工艺及其产物抗氧化活性研究

在单因素试验的基础上,采用Box-Behnken设计对碱性蛋白酶酶解猪骨蛋白工艺中的酶的浓度、温度和pH值3因素的最优化组合进行了定量研究,建立并分析了各因素与水解度关系的数学模型;同时研究了酶解物对羟基自由基的清除效果。结果表明:最佳的酶解工艺参数为酶的浓度4%、酶解温度50.6℃和pH值8.1,经试验验证在此条件下水解度为32.8%,与理论计算值33.2%基本一致,说明回归模型能较好地预测碱性蛋白酶酶解猪骨蛋白的水解度;当酶解物浓度在133～4000μg/mL范围内,其对羟基自由基的清除率为21.84%～88.16%,且都存在明显的量效关系。     

猪骨蛋白的风味蛋白酶酶解工艺及其产物抗氧化活性研究

在单因素试验的基础上建立了一个以猪骨蛋白风味蛋白酶水解度为目标值,以酶解时间、pH值和酶解温度为因素的数学模型,方差分析表明拟合较好。通过对回归方程优化计算,得到的最佳工艺条件为酶解时间3.2h、pH值7和酶解温度48.5℃。对所建立的数学模型进行了试验验证。在最优条件下,得到的水解度为20.08%,与理论值20.03%基本一致,说明回归模型能较好地预测猪骨蛋白的水解度;当浓度75～375μg/mL和120～600μg/mL的范围内,其清除DPPH自由基和羟基自由基的能力分别为14.95%～33.18%和21.74%～81.42%,且清除效果与浓度之间都存在明显的量效关系。     

酶法制备大米抗氧化肽的蛋白酶筛选

通过酶法制备进行大米抗氧化肽蛋白酶的筛选。以大米蛋白为原料、酶解液对DPPH自由基清除率为指标,从风味蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、复合蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和胃蛋白酶等7种蛋白酶中,筛选出中性蛋白酶为最佳用酶。通过试验得出最佳的酶解反应条件为：底物质量浓度1.0 g/(100mL)、加酶量8%、pH值6.0、温度60℃、酶解时间30min。酶解液稀释15倍对DPPH自由基的清除率为89.45%,酶解液清除     

了哥王总黄酮的纤维素酶提取及其抗氧化活性研究

优化纤维素酶提取了哥王总黄酮的工艺条件及研究其抗氧化活性。结果表明:了哥王总黄酮的最佳提取条件为液料比12mL/g、pH值4.4、酶浓度0.6%、酶解温度45℃和酶解时间90min,此时总黄酮得率为0.860%;在质量浓度13.14～78.82μg/mL和10.67～127.97μg/mL的范围内,其对DPPH自由基和羟基自由基的清除率分别为20.43%～70.89%和18.56%～66.05%,且清除效果与质量浓度之间都存在明显的量效关系。     

马铃薯渣蛋白抗氧化肽的酶法制备

以马铃薯渣为原料,采用酶法将薯渣中的蛋白转化为具有抗氧化活性的多肽。以酶解液对DPPH自由基清除率为酶解效果评价指标,从木瓜蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶等6种商业蛋白酶中筛选出胰蛋白酶为最佳水解用酶。通过优化试验,得出薯渣蛋白最佳酶解条件为：底物质量浓度4g/（100mL）、加酶量7%、pH值8.0、料液温度50℃、酶解时间90min。酶解液稀释20倍后对DPPH自由基的清除率为72%,酶解液清除     

低分子量骨胶原肽酶解制备工艺优化和特性分析

酶解工艺参数不仅会影响畜禽骨蛋白的酶解效率,而且会改变骨胶原肽产物的肽分子量分布、氨基酸组成和微结构性能,从而影响其高值高效化利用。以制备均一性低分子量骨胶原肽为目的,以牛骨粉为研究对象,以水解度为主要评价指标,考察碱性蛋白酶、中性蛋白酶、复合蛋白酶和风味蛋白酶对牛骨粉的酶解效果,探究双酶分步酶解工艺、脂肪酶预处理的单独与组合应用对酶解效果的提升作用,选定最优的低分子量骨胶原肽制备工艺;结合酶解过程中各项指标的变化、产物表征分析和Person相关系数法分析不同复合酶解工艺对产物特性的影响及作用机制。研究发现：经脂肪酶预处理-碱性蛋白酶-复合蛋白酶酶解工艺制备的骨胶原肽产物具有最佳的理化性质,优化的工艺参数为：底物质量浓度为0.09 g/mL、初始pH值7.5的牛骨粉溶液加入碱性脂肪酶（加酶量0.08%）在40℃下反应4 h,再加入碱性蛋白酶（加酶量0.36 U/g）在60℃下反应5 h后,最后加入复合蛋白酶（加酶量0.36 U/g）在55℃下反应5 h,此时,水解度可达16.12%,总游离氨基酸含量可达171.571 mg/g,其M_w、M_w/...     

响应面法优化改性玉米粉的复合酶法制备工艺

本试验采用复合酶法制备改性玉米粉,以改性玉米粉的综合感官评分作为评价指标对复合酶法制备工艺进行优化。运用SAS软件及响应面法得到最佳工艺参数:恒定试验底物质量浓度0.5g/mL、中性蛋白酶质量分数0.12%和pH值6.5,将中性蛋白酶和一定质量分数的α-淀粉酶同时加入溶液,浸泡温度59.9℃、α-淀粉酶质量分数0.043%和酶解时间1.18h。     

紫茄子皮色素的纤维素酶提取及其抗氧化研究

采用纤维素酶提取紫茄子皮色素,并研究其抗氧化活性。试验结果表明:纤维素酶提取的工艺条件为液料比30∶1、酶浓度0.8%、酶解温度45℃和酶解时间90min,在此工艺条件下,得到的最大吸光度可达0.742。在5～30μg/mL的浓度范围内,随着反应液中紫茄子皮色素和VC浓度的增加,对DPPH自由基的清除率呈现明显的上升趋势,但色素对DPPH自由基的清除作用明显不如VC的清除作用。当紫茄子皮色素的浓度和VC的浓度都超过30μg/mL时,清除率随着浓度的增大几乎不变。在10～28μg/mL的浓度范围内,随着反应液中紫茄子皮色素和VC浓度的增加,对亚硝基的清除率呈现明显的上升趋势,但色素对亚硝基的清除作用明显不如VC对它的清除作用。继续增加浓度,色素对亚硝基的清除曲线与VC对亚硝基的清除曲线有一交点,在此交点处它们对亚硝基的清除率相等,随后随浓度的增加色素对亚硝基的清除率明显大于VC对它的清除率。     

微波法中性蛋白酶酶解大豆分离蛋白的条件研究

中性蛋白酶酶解大豆分离蛋白,利用微波法缩短水解时间,测定酶解液中氨基氮的含量判断酶解效率。通过单因素和优化酶解条件正交试验,分析酶用量、pH值、底物浓度、温度和反应时间对酶解的影响,筛选出中性蛋白酶的最适酶解条件:在温度50℃、pH值7.0、酶用量12%、底物浓度5%和酶解时间20min,氨基氮含量为42.98mmol/L。     

碱性蛋白酶酶解虾下脚料的工艺

研究了碱性蛋白酶水解虾下脚料的工艺。结果表明:酶解前对虾下脚料进行超声处理可以提高水解度。通过单因素和正交试验对酶解工艺参数进行优化,确定碱性蛋白酶水解虾下脚料的最佳条件为温度60℃、加酶量0.4%(g/g,酶/虾下脚料)和酶解时间4.5h。     

杏鲍菇蛋白的中性蛋白酶酶解工艺优化

采用响应曲面法对杏鲍菇蛋白的中性蛋白酶酶解工艺进行优化。在单因素试验的基础上,选择酶浓度、pH值和酶解温度进行三因素三水平的Box-Behnken试验设计,采用响应曲面法(RSM)分析3个因素对响应值的影响。结果表明:最佳酶解工艺参数为酶浓度1%、pH值7.4和酶解温度54℃,在此条件下水解度为66.44%。     

巴旦木肽的酶法制备工艺及其性质研究

利用蛋白酶水解巴旦木蛋白制备巴旦木肽。比较碱性蛋白酶、中性蛋白酶、风味酶、木瓜蛋白酶和植物蛋白酶水解巴旦木蛋白的进程曲线,结果显示碱性蛋白酶的水解效果最好,正交试验表明其较佳作用条件为:底物浓度20%、酶浓度4%、pH值9.5和酶解温度60℃,在此条件下水解度为36.6%。巴旦木肽具有溶解性较好和黏度较低的特性,可以在食品中广泛应用。     

鱼皮胶原蛋白肽脱腥脱色工艺研究

本实验以鲤鱼皮为原料,通过蒸煮法制备明胶,选用水解度高的胰蛋白酶和中性蛋白酶对明胶进行酶解,研究了D4006、D3520、X-5、AB-8四种吸附树脂对鲤鱼皮明胶水解液脱腥、脱色的效果;测定吸附后产物的蛋白损失率,并进行感官评价,筛选出树脂类型。通过测定,胰蛋白酶水解度为19.19%,中性蛋白酶为15.25%;D4006树脂对中性蛋白酶的明胶水解液脱腥、脱色的效果最佳,此时条件为树脂与酶解液之比为5g∶100ml,脱腥、脱色时间为3h,温度为25℃。     

酶法提取花生多糖及其抗氧化活性研究

本文以花生粕为原料,采用酶法提取花生多糖,探讨了酶种类、双酶组合、酶解时间、pH值和固液比等对提取率的影响,通过正交试验优化工艺条件,并对其抗氧化活性进行研究。结果表明:花生多糖提取的最佳工艺条件为pH值5.0、酶解时间6h、固液比1∶20及加酶量为酸性蛋白酶10%+木瓜蛋白酶8%,花生多糖提取率为10.06%。花生多糖对·OH、·O2-自由基表现出较强的清除能力,其IC50分别为0.81mg/mL和0.17mg/mL。从花生粕中提取的多糖具有良好的抗氧化性,可作为功能性食品原料添加到饮料和面包等食品中,既增加了产品的保健功能,同时又提高了花生粕的附加值,为花生粕的综合开发利用提供技术参考。     

紫菜降压肽酶膜耦合反应制备工艺RBF神经网络优化

以条斑紫菜为原料,利用建立的酶膜反应器制备紫菜降压肽,为获得最大蛋白转化率,采用径向基人工神经网络模型(RBF-ANN)对该工艺进行优化,并采用交互验证的方法优化并建立最优模型。通过模型的模拟及优化,得到间歇式酶膜耦合制备紫菜降压肽的最佳工艺条件：底物质量浓度1.0 g/mL、加酶量4%、反应温度50℃、pH值9.0、循环泵转速300r/min的条件下反应60min。其蛋白转化率为55.67%,多肽得率为22.27%,单位酶产肽量为13.91,IC50质量浓度为0.492 mg/mL。在优化工艺条件基础上进行连续酶膜耦合研究,结果表明：与传统酶解反应相比,蛋白转化率提高21.98%,多肽得率提高8.79%,单位酶肽产量比间歇反应提高     

响应面法优化中性蛋白酶酶解谷朊粉工艺研究

本文采用Box-Behnken设计和响应面分析法(RSM),以谷朊粉为原料,用中性蛋白酶制备小麦肽,对其水解工艺进行优化。以水解度为响应值,设计了4因素(加酶量、底物浓度、加酶时间、加酶温度)3水平的中心组合响应面试验。通过优化组合得到最佳水解条件为:加酶量6985.77U/g、底物浓度为6.99%、酶解时间3.44h、酶解温度45.65℃。水解条件经优化后,水解度为10.43%,而实测水解度平均为10.40%,试验值与预测值基本相符。     

紫菜降压肽酶膜耦合反应制备工艺RBF神经网络优化

以条斑紫菜为原料,利用建立的酶膜反应器制备紫菜降压肽,为获得最大蛋白转化率,采用径向基人工神经网络模型(RBF-ANN)对该工艺进行优化,并采用交互验证的方法优化并建立最优模型.通过模型的模拟及优化,得到间歇式酶膜耦合制备紫菜降压肽的最佳工艺条件:底物质量浓度1.0 g/mL、加酶量4%、反应温度50℃、pH值9.0、循环泵转速300 r/min的条件下反应60 min.其蛋白转化率为55.67%,多肽得率为22.27%,单位酶产肽量为13.91,IC50质量浓度为0.492 mg/mL.在优化工艺条件基础上进行连续酶膜耦合研究,结果表明:与传统酶解反应相比,蛋白转化率提高21.98%,多肽得率提高8.79%,单位酶肽产量比间歇反应提高4.7倍.     

响应面法优化酶法提取芡实蛋白工艺

采用响应面法优化酶法提取芡实蛋白工艺。考察了料液比、酶解时间、酶添加量、酶解温度和酶解pH值5个单因素对芡实蛋白提取率的影响,在单因素试验基础上,采用响应面法优化酶法提取芡实蛋白工艺参数。结果表明,影响芡实蛋白提取率的主次因素顺序为酶解pH＞酶添加量＞酶解温度;在料液比1∶20（gmL）,酶解时间2 h,pH值5.0,酶添加量0.35%,酶解温度49 ℃的优化条件下,芡实蛋白平均提取率达80.38%。      

酶种类对生物解离大豆蛋白酶解物功能性和苦味的影响

在生物解离提取大豆油脂过程中会伴随产生丰富的水解液,水解液主要成分为大豆蛋白酶解物。以不同种类蛋白酶(碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、风味蛋白酶、复合蛋白酶和胰蛋白酶)对挤压膨化大豆粉进行酶解,将得到的不同蛋白酶解物作为研究对象,采用水解度、SDS-PAGE凝胶电泳、氨基酸组成分析、傅里叶红外光谱对大豆蛋白酶解物结构进行表征,利用乳化活性和乳化稳定性、溶解性及感官评价等表征大豆蛋白酶解物功能性和苦味。结果显示:采用碱性蛋白酶进行生物解离时,提油率最高,为91.23%;碱性蛋白酶解物溶解性为91.12%,但是酶解产物的苦味值大大增加,乳化性也不理想。采用风味蛋白酶处理时,尽管提油率不是最高,为87.73%,但是酶解产物苦味值为1.5,溶解性为87.12%,乳化活性和乳化稳定性效果最优。     

鲢鱼皮胶原蛋白酶解工艺的优化及产物抗氧化活性的研究

首先采用单因素试验对包括酶浓度、pH值、酶解时间和酶解温度4个因素对中性蛋白酶解鲢鱼皮胶原蛋白水解度的影响进行考察。其后采用Box-Behnken设计对影响水解度的3个因素酶解时间、酶解温度和pH值的最优化组合进行了定量研究,建立了各因子与水解度关系的数学模型,并对酶解产物清除羟基自由基和DPPH自由基的活性进行了研究。结果表明:最佳的酶解工艺参数为pH值6.9、酶解时间3.4h和酶解温度48.9℃,在此条件下得到的水解度为37.02%,与理论计算值37.12%基本一致。最后对酶解产物清除自由基的试验证明,以VC为对照,鲢鱼皮胶原蛋白酶解产物具有较强的清除羟基自由基和DPPH自由基的活性。