朝天椒子叶离体培养与植株再生体系的建立

以贵州黎平朝天椒地方种为试材,取其无菌苗子叶作外植体,采用植物固体培养基组织培养法,研究了培养基激素配比、无菌苗生理年龄、子叶部位等对朝天椒子叶的离体接种、诱导愈伤、不定芽分化、芽茎伸长、诱导生根、驯化移栽、成苗等离体培养及植株再生阶段的影响。结果表明:朝天椒子叶适宜芽诱导分化的培养基为MS+6-BA 2mg/L+NAA 0.1mg/L,芽分化率达100%;适宜芽伸长的培养基为MS+KT 2mg/L,芽伸长率可达50%;适宜生根的培养基为MS无激素培养基,生根率可达44%。单个外植体平均分化含15~18个不定芽的芽丛(14~16个芽茎),出苗6~7株。从子叶外植体接种至再生苗出瓶需50~55d,再生苗移栽成活率达98%。该研究构建了贵州朝天椒的高效离体培养植株再生体系,为朝天椒的组织快繁和遗传转化奠定了重要的基础。     

秋福红树莓叶片离体再生植株研究

以红树莓品种秋福(Rubus L.cv.Autumn Bliss)离体叶片为外植体,研究适合其再生植株的叶片部位、放置方式、植物生长调节剂以及暗培养时间等条件。结果表明,叶片外植体接种于MS+TDZ2.00mg/L+IAA0.10mg/L的培养基,暗培养2～3周转移至正常光照下培养效果最好,愈伤组织形成率、不定芽再生率和外植体不定芽数分别为100.00%、95.83%和(5.57±0.27)个。将再生芽接种于1/2MS+IBA0.10mg/L的培养基中,35d后生根率达100.00%。再生植株炼苗后移栽,30d时成活率达97.30%,成功地建立了红树莓叶片的离体再生体系。     

油柿下胚轴再生植株的培养

以油柿下胚轴为材料进行了不定芽再生和再生苗生根的研究,旨在建立油柿的离体再生体系,为转基因操作奠定基础。结果表明,在所试验的所有培养基中,MS(1/2N)+IAA0.1mg/L+ZT2.0mg/L最适合油柿下胚轴培养,其不定芽再生率和外植体平均不定芽数最高,分别为81.7%和(5.3±2.1)个。再生苗接种于添加IAA和IBA各0.5mg/L的MS(1/2N)培养基上生根效果最好,生根率达100%,平均根数达(3.2±1.4)条,平均根长度为(2.4±1.0)cm,且侧根较多、植株生长迅速而健壮。再生苗生根后移栽,30d时成活率达96%。     

甜瓜品种GT-1植株再生体系的建立(英文)

为了建立高效稳定的甜瓜作物的植株再生体系,研究了甜瓜品种CT-1在16种培养基上的植株再生情况。结果显示:将从5 d龄甜瓜无菌苗上切取的子叶外植体接种在MS+6-BA1 mg／L的不定芽诱导培养基上,黑暗条件培养3 d,再转至光下继续培养,诱导出高效不定芽丛。再经过在MS+6-BA0．05mg/L伸长培养基上培养后,将无根不定苗转到不含激素的MS培养基上进行生根诱导,获得完整植株。通过这种培养程序,获得了高达100％的不定芽诱导率,平均每个外植体上诱导出14株健壮植株。这项研究为甜瓜的遗传转化打下良好的基础。     

叶用莴苣离体培养和植株再生

 以叶用莴苣( Lactuca sativa L. ) 4 个栽培品种的子叶和真叶为材料进行诱导芽分化及生根成苗试验, 从中选出较理想的品种和培养基配方, 建立了我国叶用莴苣栽培品种的快速、高频离体植株再生体系。外植体分化频率可达100 % , 平均每外植体分化不定芽5. 6 个。3 d 苗龄的子叶分化效果最佳。从子叶外植体培养至形成完整小植株仅需30～35 d。     

紫叶稠李叶片离体培养再生植株

以紫叶稠李为试材,采用组织培养方法,研究不同激素对其试管苗不定芽诱导、不定芽生根及成苗影响。结果表明:叶片切块可诱导产生大量的不定芽,MS附加0.5mg/L BA和0.01mg/L NAA的培养基不定芽诱导率为50.1%;利用植物激素0.5mg/L BA,0.5mg/LNAA,0.5mg/L KT和0.2mg/L IBA的组合,不定芽可多次继代培养增殖;不定芽在附加0.4mg/L IBA的MS培养基上生根,生根率为67%。该试验结果说明,紫叶稠李试管苗叶片可作为外植体离体培养获得再生植株,BA是主要的调控植物激素,IBA对生根有一定促进作用。     

甜瓜子叶组织培养与植株再生体系建立的研究

以厚皮甜瓜WT-1的子叶为外植体,对离体培养和植株再生进行了研究。结果表明:4 d苗龄的子叶诱导不定芽效果最佳;子叶近轴端不定芽诱导率为96.7%,明显高于远轴端;不同激素配比中添加6-BA 1.0 mg/L的MS培养基诱导率高达91.7%,转接MS培养基上进行再生芽的伸长培养后,在1/2MS+IAA 1.0 mg/L的培养基中诱导生根,试验建立了甜瓜遗传转化和快繁的子叶再生体系。     

红将军苹果离体叶片高频再生体系研究

以中熟红富士品种红将军组培苗的叶片为试材,研究了离体叶片诱导再生不定芽过程中不同激素种类与组合、暗处理时间、取叶部位等因素对再生率的影响。结果表明,试管苗继代培养3～4代,当代培养25～30d,取顶部嫩叶3～4枚,剪除叶片边缘,将剪切的叶片中部以近轴面接触在最佳诱导分化培养基上:MS+TDZ1.0mg/L+IAA0.5mg/L+蔗糖30g/L,培养基pH值5.8,黑暗培养10d后,转入光照培养条件下,再生频率达100%,再生芽数平均4.6个。叶片再生不定芽分化后15～20d转接到苹果继代培养基MS+BA0.5mg/L+IBA0.1mg/L上,当不定芽长度约2cm时再转接到1/2MS+IBA0.5mg/L+NAA0.5mg/L+Ac0.5g/L+蔗糖2%的生根培养基上,光培养15d后,生根率可达86.0%。     

利用枣离体叶片直接再生完整植株

以冬枣组培苗叶片为材料进行离体再生培养, 通过对再生条件的系统研究, 实现了离体叶片直接再生不定芽并获得完整植株。试验结果表明: 麦芽糖为离体叶片直接再生的适宜碳源; AgNO3可显著提高叶片不定芽再生率和出芽数, 在TDZ 1.0 mg·L - 1 +AgNO3 1.0 mg·L - 1的条件下, 不定芽直接再生率高达97.3% , 出芽数达14.4个。但麦芽糖不适宜继续作为不定芽伸长培养的碳源, 再生的不定芽需在MS+ 蔗糖40 g·L - 1 + 琼脂4 g·L - 1 +BA 1.0 mg·L - 1 + IBA 0.5 mg·L - 1的培养基上进行增殖, 增殖系数为3.2。在IBA1.0 mg·L - 1条件下, 生根率达87.3%。     

草莓主栽品种再生和转化的研究

 建立草莓主栽品种高效、稳定的离体再生体系和遗传转化体系, 获得了转基因植株。‘弗吉尼亚’和‘森嘎拉’的叶片离体再生芽频率达到100 %。试管苗叶片与农杆菌菌株EHA105 共培养3 d。共培养后的叶片在附加卡那霉素40 mg/L 的再生培养基上选择培养4周后, 外植体再生出转化芽, 弗吉尼亚的转化芽再生频率可达6. 8 %。采用组织化学染色法对随机选取的10 个GUS 基因转化植株进行基因表达测定, 结果5 个植株强烈表达GUS 活性。转bar 基因植株在附加除草剂草丁膦10 mg/L 的培养基上能够正常分化, 在田间对草丁膦表现出强烈抗性。转基因植株开花、结果正常。     

‘艾西丝’南瓜子叶的离体培养

用‘艾西丝’南瓜子叶作外植体离体培养,成功地建立了一套子叶高频率诱导再生芽的程序。在ＭＳ＋ＢＡ ４．０ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ０．４ｍｇ／Ｌ的培养基上,以４ｄ苗龄子叶基部切块为外植体,其不定芽的诱导率最高,达５０％,在ＭＳ＋ＢＡ０．２５－０．５ｍｇ／Ｌ的培养基上继代,增殖培养效果较好,在无激素的１／２ＭＳ培养基上最易生根。     

大白菜高频再生体系的建立及策略

 就北方大白菜14个基因型进行组织培养再生比较, 以筛选出的较高再生率的基因型为试材,在含不同配比的6-BA、TDZ、NAA及AgNO₃、GA₃、ABA的培养基中进行再生比较, 分别建立了含有6-BA和TDZ的大白菜组织培养再生最佳培养基: MS + 6-BA 5 mg/L +NAA 0.5 mg/L +AgNO₃ 2 mg/L和MS + TDZ0.1 mg/L + 6-BA 5 mg/L +NAA 0.5 mg/L +AgNO₃ 2 mg/L +ABA 0.25 mg/L, 大白菜再生频率最高可以达到90.6% , 建立了大白菜高频再生体系, 讨论分析了影响大白菜再生的主导因素并提出建立大白菜高频再生体系的可行策略。     

大白菜子叶离体培养再生植株

 探讨了植物激素、AgNO₃ 和琼脂浓度对大白菜子叶培养芽再生和植株再生的影响。结果表明:优化培养基条件为MS 培养基中加入5 mg / L BA、0. 5 mg/ L NAA、2 mg/ L AgNO₃ 和1. 2%~ 1. 6 %琼脂。培养过程中, 子叶的乙烯释放量对芽再生起很重要的作用, 具有高芽再生率的基因型或高浓度琼脂的培养条件下, 子叶产生的乙烯量较少。培养基中有AgNO₃ 存在时, 尽管子叶的乙烯释放量增加, 芽再生率也有提高。对子叶的乙烯释放量和不定芽再生的关系进行了讨论。     

金花梨子叶不定梢再生研究

以金花梨花后65 d的成熟胚子叶为外植体,研究了不同培养基、BA浓度、暗培养条件及AgNO3浓度对子叶不定梢再生的影响。结果表明:梨成熟胚子叶在适宜培养条件下能发生大量不定梢,培养15 d为初发生期,25~30d为高峰期,40 d后结束发生。暗培养预处理有利于提高子叶再生频率、再生不定梢数和不定梢质量。在NN69+BA3.0mg/L+NAA 0.2mg／L培养基上,暗培养3周后转光下培养获得了85.2％不定梢再生率,平均再生不定梢4.4个。培养基中加入0~4mg／LAgNO3对梨子叶不定梢再生有促进作用,但浓度大于4mg/L时抑制子叶不定梢再生。     

香榧茎段离体培养再生植株的研究

对香榧茎段不定芽诱导研究的结果表明,不定芽诱导的最佳培养条件为:培养基为B5+KT0.1mg/L+IBA0.5mg/L+0.08%活性炭+2%葡萄糖,培养温度为20℃,光强不高于400lx,该条件下的不定芽诱导率可达55%。将不定芽培养在1/2B5+IBA0.1mg/L+0.08%活性炭+2%葡萄糖的生根培养基上,生根率最高达到40%。通过器官发生途径国内外首次建立了香榧离体再生体系和快繁体系,并获得了完整的再生植株,为今后开展香榧的遗传转化和品种改良奠定了基础。     

不同培养条件对幸香草莓离体叶片再生的影响

以草莓品种幸香叶片为外植体,研究了叶龄、暗培养、不同颜色的滤光膜、AgNO3、不同激素配比等对叶片再生不定芽的影响,建立了高效再生体系。结果表明,5周的叶龄、暗培养5￣6周、附加AgNO31.0￣4.0mg/L利于不定芽的分化;不同颜色滤光膜对草莓分化不定芽的效应不同,红膜、黄膜、绿膜能显著提高再生频率,红膜处理能滤去紫外光、蓝紫光、绿光,再生频率达最大,蓝膜对再生频率无影响,紫膜对再生频率起显著抑制作用;MS+TDZ4.0mg/L+NAA0.1mg/L暗培养6周最适于不定芽分化,再生频率达98.9%,平均再生不定芽3.8个。     

红龙草叶片的组织培养及其植株再生

 建立了红龙草叶片再生体系。叶片外植体在培养基MS + 6-BA 1.0 mg/L + 4-PU 1.0 mg/L +NAA 0.1 mg/L上形成浅绿色愈伤组织, 20 d后愈伤组织诱导率达100%。约45.31%的愈伤组织在添加6-BA 1.0 mg/L和NAA 0.4 mg/L的MS培养基上分化出紫红色的不定芽, 约6%的愈伤组织在该培养基上产生出细小叶片和绿色变异幼芽。所产生的紫红色不定芽在1/2MS +NAA 0.4 mg/L的培养基上可全部生根,长成完整植株。再生植株的移栽成活率达85%以上。     

不同生长调节物质对迎红杜鹃组培快繁的影响

以枝条新发的幼梢为外植体,Read为基本培养基,研究不同生长调节物质对迎红杜鹃组织培养过程中增殖系数的影响。结果表明:继代培养中诱导丛生芽最佳培养基为Read+ZT5.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L+GA30.5 mg/L,不定芽再生率100%,增殖倍数为9.53;采用Read+ZT 1.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L+GA30.5 mg/L进行壮苗培养,效果良好。在添加0.5 mg/L IBA和0.5 mg/L GA3的Read基本培养基上,ZT浓度是促进迎红杜鹃不定芽增殖的关键影响因子,只有当ZT浓度达到3 mg/L,才能诱导迎红杜鹃的不定芽分化。     

魔芋茎尖组织培养及快速繁殖技术研究

以魔芋茎尖为外植体,进行愈伤组织诱导、芽分化及植株再生的研究。研究结果表明,最佳茎尖剥取材料是无菌试管苗。刚剥离的茎尖需要预培养30d,然后将膨大的茎尖四周给予伤口后再转接到MS 6-BA 0.6 mg/L NAA 0.1 mg/L上进行愈伤组织诱导;芽分化最适培养基是MS 6-BA 2.0 mg/L NAA 0.5 mg/L;切割后的芽在生根培养基1/2 MS NAA 0.1 mg/L上能100%形成完整植株。