应用生物素标记的NDV—cDNA探针检测感染尿囊液中DNV—RNA的初…

本文应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术从构建的新城疫病毒（ＤＮＶ）ｃＤＮＡ文库中扩增含编码Ｆ糖蛋白前体－Ｆｏ酶切位点序列的３５９ｂｐ的Ｆ蛋白基因ｃＤＮＡ片段。将此３５９ｂｐ ｃＤＮＡ片段经光敏生物素标记后，即成ＤＮＶ－ｃＤＮＡ探针。该探针能特异性地从感染的尿囊液中检测出ＤＮＶ强毒株和疫苗毒株的基因组ＲＮＡ，而不与ＩＢＤＶ－ｄｓＲＮＡ，ＡＩＢＶ－ｓｓＲＮＡ，ＥＤＳ７６－ｄｓＤＮＡ、ＭＤＶ０ｄｓＤＮＡ、Ｆ     

赤芝子实体三萜酸化学成分研究

自赤芝〔Ｇａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍ（ｌｅｙｓ．ｅｘＦｒ．）ｋａｒｓｔ〕子实体的二氯甲烷提取液中分离得到１种新的三萜酸化合物，命名为灵芝酸ＤＭ（ｇａｎｏｄｅｒｉｃａｃｉｄＤＭⅠ）。同时还分到１种已知化合物灵芝酸Ｅ（ｇａｎｏｄｅｒｉｃａｃｉｄＥⅡ）。根据各自的光谱（ＩＲ，１ＨＮＭＲ，１３ＣＮＭＲ，ＭＳ和２ＤＮＭＲ）数据分析，确定其结构为：３，７－二氧化－８，２４（Ｅ）－二稀－羊毛甾－２６－酸和３，７，１１，１５，２３－五氧化－５α－羊毛甾－８－稀－２６－酸。以上２种化合物均为首次从赤芝子实体中得到。     

不同细胞培养基细胞培养动力学比较试验

应用宜兴赛尔生物化工厂产１９９、Ｆ－１０、１６４０和ＤＭＥＭ细胞培养基与美国Ｓｉｇｍａ公司产１９９、Ｆ－１０、１６４０和ＤＭＥＭ细胞培养基分别配制细胞培养液，培养ＳＰ２／０和Ｖｅｒｏ细胞系及原代鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ），做细胞培养动力学比较试验。比较这两种来源的细胞培养基对细胞生长的形态、分裂速度及鸡马立克氏病毒（Ｍａｒｅｋ＇ｓｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓ．ＭＤＶ）疫苗毒株ＨＶＴ－ＦＣ１２６和ＲｉｓｐｅｎｓＣＶＩ９８８在ＣＥＦ单层上增殖量的差异。研究结果表明，四种国产细胞培养基与对应的四种进口培养基对细胞生长及病毒增殖的影响无显著差异     

应用生物素标记的NDV－cDNA探针检测感染尿囊液中NDV－RNA的初步研究

本文应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术从构建的新城疫病毒（ＮＤＶ）ｃＤＮＡ文库中扩增含编码Ｆ糖蛋白前体──Ｆｏ酶切位点序列的３５９ｂｐ的Ｆ蛋白基因ｃＤＮＡ片段。将此３５９ｂｐｃＤＮＡ片段经光敏生物素标记后,即成ＮＤＶ－ｃＤＮＡ探针。该探针能特异性地从感染的尿囊液中检测出ＮＤＶ强毒株和疫苗毒株的基因组ＲＮＡ,而不与ＩＢＤｖ－ｄｓＲＮＡ、ＡＩＢｖ－ｓｓＲＮＡ、ＥＤＳ７６－ｄｓＤＮＡ、ＭＤＶ－ｄｓＤＮＡ,ＦＰＶ－ｄｓＲＮＡ及ＡＩＬＶ－ｄｓＤＮＡ发生交叉杂交反应。试验结果表明：尽管该探钎含有编码Ｆｏ蛋白酶切位点序列的碱基顺序,但它还是不能把ＮＤＶ的强、弱毒株区分开。这说明ＮＤＶ强、弱毒株比区域内的碱基存在着相当大的同源性。不过,此探针对ＮＤＶ来说具有特异性,这就为ＮＤＶ的诊断技术开创了基因水平检测的新途径。     

我国北方放牧绵羊奶中碘含量的研究

我国北方放牧绵羊奶中碘含量的研究焦淑贤，高福森，刘彬，余顺祥（中国农业科学院畜牧研究所，北京１０００９４）Ｊ．ＬｉｎｄｄｓａｙＤ．Ｍａｓｔｅｒｓ（ＣＳＩＲＯＤｉｖｉｓｉｏｎｏｆＡｎｉｍａｌＰｒｏｄｕｃｔｉｏｎＵｎｄｅｒｗｏｏｄＡｖｅｎｕｅＦｌｏｒｅａ...     

家蚕病原性微孢子虫孢子表面蛋白的选择性分离与总蛋白比较分析

选择性分离了Ｎｏｓｅｍａｂｏｍｂｙｃｉｓ孢子表面蛋白和总蛋白，采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测发现，孢子表面蛋白由分子量不同的３种亚基（３２０００、２６０００、２４５００Ｄａ）组成，其总蛋白至少包括２５个条带。同时将从养蚕生产中收集到的两种微粒子ＭＡ－１和ＭＤ－１以及从野外昆虫收集到的微孢子虫Ｐｈａ－Ｍ和Ｈａ－Ｍ与Ｎ．ｂｏｍｂｙｃｉｓ进行了比较，发现不同微孢子虫间蛋白组成有差异。     

新城疫病毒F48E9株病毒糖蛋白的功能分析

对抗新城疫病毒（ＮＤＶ）ＨＮ和Ｆ糖蛋白的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的生物学活性，应用ＥＬＩＳＡ、ＨＩ、ＨＬＩ、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ等进行了分析，结果证明，ＮＤＶＦ４８Ｅ９株ＨＮ蛋白除有ＨＡ和ＮＡ功能区外，还有一个促进（启动）融合的功能区。此外，还筛选到４株ＮＤＶ强毒株特异性ＭｃＡｂ，为ＮＤＶ强弱毒株的鉴别打下了基础     

慢性呼吸道病的综合防治

慢性呼吸道病的综合防治富道－苏威公司技术服务部慢性呼吸道病（ｃｈｒｏｎｉｃｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｄｉｓｅａｓｅ，ＣＲＤ）是由鸡败血霉浆体（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａｇａｌｉｓｅｐｔｉｃｕｍ，ＭＧ）引起的，其特征是呼吸道罗音、咳嗽、鼻漏，并可见气囊炎。可造成...     

荒漠猫血液蛋白质和酶多态性的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对５只荒漠猫（Ｆｅｌｉｓｂｉｅｔｉ）血液中的血红蛋白（ＨＢ），运铁蛋白（ＴＦ），亲血色蛋白（Ｈｐ）以及乳酸脱氢酶（ＬＤＨ），淀粉酶（ＡＭＹ），酯酶（ＥＳ）和碱性磷酸酶（ＡＬＰ）的多态性进行了研究。结果发现，被检荒漠猫的ＴＦ，Ｈｐ，ＲＢＣ－ＬＤＨ，Ｓ－ＥＳ和Ｓ－ＡＬＰ共５个基因座存在多态性，ＨＢ，ＲＢＣ－ＡＭＹ，Ｓ－ＡＭＹ，Ｓ－ＬＤＨ，ＲＢＣ－ＥＳ和ＲＢＣ－ＡＬＰ共６个基因座为单态，表明荒漠猫的血液蛋白质和酶具有颇大的遗传变异性     

围产期奶牛及新生犊牛中性粒细胞粘着分子表达水平的检测

实验选择围产期荷斯坦奶牛８头，新生犊牛９头，运用特异性单克隆抗体，通过流式细胞光度术（ＦＣＭ）检测中性粒细胞组成成分ＣＤ１８（β２－ｉｎｔｅ－ｇｒｉｎ）和ＣＤ６２Ｌ（Ｌ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ）的表达水平。并用血小板活化因子（ＰＡＦ）体外激活中性粒细胞，以测定其对ＣＤ６２Ｌ的减量调节及ＣＤ１８的向上调节水平。对围产期奶牛及新生犊牛疾病易感性增加与白细胞计数、中性粒细胞ＣＤ１８和ＣＤ６２Ｌ表达水平变化之间的关系进行了分析。     

磷酸钙介导马立克氏病病毒DNA转染鸡胚成纤维细胞

提取马立克氏病病毒（ＭＤＶ）Ｒｉｓｐｅｎｓｅ株感染的鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）总ＤＮＡ，运用磷酸钙－ＤＮＡ沉淀转染ＣＥＦ，可以成功地得到ＭＤＶ的病变空斑。用每份沉淀含２０μｇ的ＭＤＶ和细胞总ＤＮＡ转染次代ＣＥＦ，其转染形成空斑的数量为４－２２１个，转染频率约为１－０＾－６＝１０＾－５；将磷酸钙－ＤＮＡ沉淀加入到ＣＥＦ中，于３７℃５％ＣＯ２培养箱中培养４ｈ后，室温下用１５％甘油休克２ｍｉｎ，由此可以提     

bcl-2在鸡马立氏克氏病肿瘤中的表达

用来克亨 Ｓ Ｐ Ｆ鸡复制马立克氏病（ Ｍａｒｅｋ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ， Ｍ Ｄ）肿瘤模型，取肿瘤和相应正常组织，液氮保存。 Ａ Ｇ Ｐ Ｃ（ Ａｃｉｄ Ｇｕａｎｉｄｉｎｉｕｍ Ｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ Ｐｈｅｎｏｌ Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ ）法提取组织总 Ｒ Ｎ Ａ（ Ｔ Ｒ Ｎ Ａ），紫外测定其浓度，甲醛变性胶电泳观察其纯度。将一个含鸡 ｂｃｌ２ １．２ ｋｂ 片段的质粒（ Ｐ Ｔ Ｔ Ｂ Ｃ１），经转化扩增，提取质粒 Ｄ Ｎ Ａ，限制性内切酶（ Ｒ Ｅ）消化，回收纯化ｂｃｌ２片段，放射性 α３２ Ｐ标记，制成探针。通过 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 分子交杂检测 Ｍ Ｄ 肿瘤组织中ｂｃｌ２ 的表达，并与相应的正常组织比较。结果：①鸡 Ｍ Ｄ 肿瘤组织和相应正常组织中均有 ｂｃｌ２ 的表达；② Ｍ Ｄ 肿瘤组织中ｂｃｌ２ 的表达显著高于相应的正常组织。结合已进行的凋亡研究表明，ｂｃｌ２ 表达产物通过阻遏细胞凋亡促进 Ｍ Ｄ 淋巴瘤的形成。     

围产期奶牛及新生犊头中性粒细胞粘着分子表达水平的检测

实验选择围产期荷斯担遥牛８头，新生犊牛９头，运用特异性单克隆抗体，通过流式细胞光度术（ＦＣＭ）检测中性料细胞组成成分ＣＤ１８（β２－ｉｎｔｅｇｒｉｎ和ＣＤ６２Ｌ（Ｌ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ）的表达水平。并用血小板活化因子（ＰＡＦ）体外激活中性粒细胞，以测定其对ＣＤ６２Ｌ的减量调节及ＣＤ１８的向上调节水平。对围产期奶牛及新生犊牛疾病易感性增加与白细胞计数、中性粒细胞ＣＤ１８和ＣＤ６２Ｌ表达水平变化之间的关     

有无内生真菌的苇状羊茅对三叶草萌发和幼草生长的毒素抑制 …

有关苇状羊茅与三叶草属植物间毒素抑制现象已有报道结果并不一致，许多苇状羊茅的植株侵染内生真菌（Ａｃｒｅｍｏｎｉｕｍ ｃｏｅｎｐｈｉａｌｕｍ Ｍｏｒｇａｎ－Ｊｏｎｅｓ ＆ Ｇａｍｓ），这可能是造成研究结果不一致的部分原因。在研究无内生真菌的苇状羊茅（ＴＦ－Ｅ）和有内生真菌的苇状羊茅（ＴＦ＋Ｅ）的种子浸出液对５种三叶草种（Ｔｒｉｆｏｌｉｕｍ）的种子萌发和幼苗生长（包括枝条、枝和根毛的密度）的影响，这５     

常用中草药：细辛 荆芥 白芷

１细辛本品为马兜铃科植物北细辛Ａｓａｒｕｍｈｅ－ｔｅｒｏｔｒｏｐｏｉｄｅｓＦｒ．Ｓｃｈｍｉｄｔｖａｒ．ｍａｎｄｓｈｕｒｉｃｕｍ（Ｍａｘ－ｉｍ．）Ｋｉｔａｇ．、汉城细辛ＡｓａｒｕｍｓｉｅｂｏｌｄｉＭｉｑ．ｖａｒ．ｓｅｏｕｌｅｎｓｅＮａｋａｉ及华细辛Ａｓ...     

抗传染性法氏囊病病毒单克隆抗体的特性研究

应用杂交瘤技术获得了１３ 株抗传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ） 的单克隆抗体（ ＭｃＡｂ） ,经过检测其中有９ 株ＭｃＡｂｓ 为ＩｇＧ 类, ４ 株为Ｉｇ Ｍ , 这些ＭｃＡｂｓ 与新城疫病毒（ＮＤＶ） 、传染性支气管炎病毒 （ＩＢＶ） 和马立克氏病病毒（ ＭＤＶ） 均无交叉反应, 病毒中和试验表明, 有５株ＭｃＡｂｓ 具有中和活性,Ｗｅｓｔｅｒｎ － ｂｌｏｔｔｉｎｇ 试验表明, 这５ 株有中和活性的ＭｃＡｂｓ 识别的抗原位点在ＶＰ２ 。传染性法氏囊病最早于１９５７ 年发现于美国东部特拉华州的甘博罗（Ｇｕ ｍ ｂｏｒｏ） 地区,１９６２ 年由Ｃｏｓｇｒｏｖｅ 首次报道, 此后该病相继在全世界许多国家和地区广泛流行。本试验对通过淋巴细胞杂交瘤获得的１３ 株单克隆抗体进行了生物学特性鉴定, 以期应用于对ＩＢＤ 的研究, 现将试验情况报告如下。     

口蹄疫灭活二联苗的免疫研究

将口蹄疫（ＦＭＤ）灭活细胞毒（Ｏ．Ａｓｉａ－Ｉ）按一定比例配成的ＦＭＤ灭活二联苗免疫豚鼠制备的阳性血清，经常量细胞中和试验，能完全抑制细胞病变的发生．联苗免疫后２６天，豚鼠获得了对病毒感染的抵抗力，能有效地抵抗Ｏ．Ａｓｉａ－Ｉ的单独感染和两型毒的同时混合感染．     

传染性支气管炎病毒中国地方分离株RFLP基因分型的研究

为初步确定我国不同地区流行的传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）的基因分型，对分离自国内８个不同地域疫区的ＩＢＶＱＤ、ＧＺ、ＺＺ、ＴＪ、ＤＬ、ＹＣ、ＪＳ１和ＪＳ２及参考株Ｍ４１、Ｈ５２和Ｔ的Ｓ１基因ＲＴ－ＰＣＲ扩增ｃＤＮＡ进行ＨａｅⅢ的ＲＦＬＰ分析。结果，ＱＤ与ＭＤ４１、Ｈ５２同属Ｍａｓｓａｃｈｕｓｓｅｔｅ基因型，ＧＺ、ＺＺ、ＹＣ与Ｔ的基因型相同，ＤＬ、ＪＳ１和ＪＳ２则表现为各自独立的基因型，而ＴＪ则为ＤＬ和Ｔ２种基因型毒株的混合感染，表明我国的广大地域内存在着Ｍａｓｓ基因型、Ｔ基因型和可能的变异株ＩＢＶ的流行。     

新城疫病毒融合蛋白裂解位点基因的分离克隆及在原核细胞中的表达

用ＳＰＦ鸡胚繁殖新城疫病毒（ＮＤＶ）Ｆ４６Ｅ９株（强毒）、ＬａＳｏｔａＥ４株（弱毒），对病毒进行纯化，抽提ＲＮＡ。用１对均为２７个碱基的引物进行ＲＴ－ＰＣＲ，扩增出了２个毒株的融合蛋白裂解位点（Ｆｃ）基因。将Ｆｃ基因定向克隆入ｐＵＣ１８的ＥｃｏＲＩ和ＳａｌⅠ位点之间，获得２个毒株Ｆｃ基因克隆ｐＵＣＦ４６Ｆｃ和ｐＵＣＬａＦｃ，用ＥｃｏＲＩ／ＳａｌⅠ双酶切法、ＰｓｔⅠ单酶切法、ＰＣＲ法和核酸探针法对其进行了鉴定。将鉴定好的ＬａＳｏｔａＥ４Ｆｃ基因定向导入表达载体质粒ｐＢＶ２２１，获得重组子ｐＢＶＬａＦｃ。ＰＣＲ和内切酶酶切法鉴定表明，Ｆｃ插入的位置和方向都正确无误。用Ｅ．ｃｏｌｉＤＨ５α通过热诱导法进行了表达。用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ法检测了表达产物。结果表明，有１条能够与ＮＤＶ多抗反应的特异条带，分子量约１５７００，与预期大小一致，说明是Ｆｃ基因的表达产物     

生长肥育猪蛋氨酸需要量研究

以玉米、麦麸、花生粕、羽毛粉基础，研究在亚热带条件下服育猪蛋氨酸Ｍｃｔ需要量，生长猪基础饲粮（ＤＥ１２．９７ＭＪ／Ｋｇ，ＣＰ１４．４％，Ｃｙｓ０．３１）含Ｍｃｔ０．２０％，肥育猪基础饲粮（ＤＥ１３．１１ＭＪ／ｋｇ，ＣＰ１２．５％Ｃｙｓ０．２１％）含ｃｔ０．１８％。两种饲粮均以０．０４％的梯度添加ＤＬ－Ｍｅｔ共得５个Ｍｃｔ水平，参试猪为三元杂变猪生长期每个Ｍｃｔ３个重复（栏），每个重复４头猪；肥育期