AB-8大孔吸附树脂分离纯化香鳞毛蕨总黄酮的研究

为提高香鳞毛蕨提取液中黄酮类化合物的纯度,利用AB-8大孔吸附树脂对香鳞毛蕨总黄酮的纯化条件进行系统的研究。以总黄酮吸附率、洗脱率以及总黄酮纯度为考察指标,考查AB-8树脂对香鳞毛蕨总黄酮的吸附能力。确定最佳上样条件为：香鳞毛蕨上样液中总黄酮的浓度为1.5 mg/mL,上样流速为1.5 mL/min。最合适的洗脱条件为：70%的乙醇,流速为1.0 mL/min(2 BV/h)。AB-8大孔吸附树脂对香鳞毛蕨黄酮有较好的吸附和解吸性能,纯化后香鳞毛蕨总黄酮纯度为38.4%。     

大孔树脂纯化柠条花中总生物碱的工艺研究

以柠条花为原料,采用大孔树脂分离纯化柠条花中总生物碱。通过对比6种不同型号大孔树脂对总生物碱吸附-解吸效果及静态动力学研究,确定AB-8大孔树脂为柠条花中总生物碱最佳纯化材料。通过单因素试验确定其对柠条花中总生物碱动态吸附-解吸最佳工艺条件为：上样液浓度为 2 mg/mL,上样pH为6.0,上样流速为2 BV/h;解吸剂为90%乙醇,解吸流速1.5 BV/h,解吸剂用量3 BV。在此条件下,柠条花中总生物碱分离纯化效果最佳,纯度为12.57%,表明AB-8大孔树脂对柠条花总生物碱具有较好的纯化效果。     

紫苏籽壳原花青素纯化及抗氧化性研究

旨在研究紫苏籽壳原花青素的纯化工艺及其体外抗氧化活性。采用大孔吸附树脂法,通过静态、动态实验,确定最佳纯化参数;采用分光光度法检测原花青素清除DPPH、ABTS自由基的能力,评价其抗氧化活性。结果表明,XDA-8是纯化紫苏籽壳原花青素的最优树脂,吸附率为63.41%,解吸率为78.98%。其最佳工艺为：上样流速4 BV/h、上样浓度4 mg/mL、洗脱剂乙醇体积分数70%、洗脱流速4 BV/h。在此条件下,原花青素纯度由5.25%提高到12.10%。紫苏籽壳原花青素纯化物对DPPH、ABTS自由基的半数抑制浓度IC50分别为2.138、0.3699 μg/mL,清除能力强于Vc。因此,XDA-8树脂纯化法简单、高效,可用于紫苏籽壳原花青素的纯化,且紫苏籽壳原花青素具有较强的体外抗氧化活性。     

甜玉米芯多酚纯化工艺研究

以甜玉米芯为原料,对多酚纯化的工艺条件及其抗氧化活性进行研究。对多酚纯化工艺条件进行单因素试验分析,以纯化后多酚纯度为指标,采用AB-8型树脂确定甜玉米芯多酚纯化的最佳工艺条件为pH值7,静态吸附5 h,静态解析5 h,洗脱体积分数60%,洗脱流速2 mL/min,进样质量浓度2.5 mg/mL,进样流速2 mL/min,在此条件下可得纯度最佳的多酚纯化液。     

大孔树脂纯化襄荷黄酮提取物及其对小鼠运动性疲劳的影响

采用大孔树脂纯化襄荷黄酮提取物,比较树脂之间静态吸附与洗脱性能的差异,确定最佳型号树脂的吸附机理后,采取动态吸附与洗脱试验确定最佳纯化工艺,另通过动物实验考查纯化后的襄荷黄酮抗疲劳活性.结果 表明,AB-8型大孔树脂为纯化襄荷黄酮的最佳树脂,饱和吸附量随上样浓度的升高逐渐增大,但随温度升高而逐渐减小,等温吸附线符合Langmuir模型特征,最佳纯化工艺条件为:60 mL上样浓度为6 mg/mL襄荷黄酮(pH 6.0),上样流速3 mL/min,洗脱流速2 mL/min,洗脱液乙醇浓度60％,洗脱液体积150 mL,产物的黄酮纯度由11.25％提高至47.52％.动物实验结果显示,中、高剂量的纯化产物可明显延长小鼠的负重游泳时间,降低运动后体内乳酸与尿素氮浓度,并提高乳酸脱氢酶的活力,因此可较好地缓解运动性疲劳.     

春荷鼎杂交根状茎的组培快繁的研究

摘要：【研究目的】本文采用传统品种春荷鼎与普通春兰杂交的继代根状茎为试材,对根状茎的增殖和分化进行研究。【方法】探讨不同培养基、转换培养基、6-BA与NAA、IBA对根状茎增殖、分化的影响。【结果】不同培养基对生长率有明显影响,1/2 MS为春兰根状茎的基本培养基;最适增殖培养基为1/2 MS+BA0.1+NAA0.1;根状茎的最佳分化培养基为1/2 MS+BA1.0+IBA1.0;以1/2 MS+BA1.0+IBA1.0培养基再转入B5+BA1.0+IBA1.0培养得交替培养方式,获得分化率达76%。【结论】组培快繁是培育春兰新品种的重要技术手段。     

响应面法优化桑葚多糖纯化工艺及不同产物的抗运动疲劳活性比较

为研究大孔树脂纯化桑葚粗多糖的最佳工艺,考察纯化前后桑葚多糖对运动疲劳的影响。通过静态吸附-解吸试验筛选适宜树脂后,采用单因素与响应面试验确定最佳纯化工艺,并利用动物试验比较纯化前后桑葚多糖的抗运动疲劳活性。结果表明,大孔树脂纯化桑葚粗多糖的最佳工艺为：将60 mL浓度为14.5 mg/mL的粗多糖溶液以1.0 mL/min流速上样至H103树脂后,采用130 mL纯水以1.3 mL/min流速洗脱,最终产物的脱色率为78.2%±1.4%,蛋白质脱除率为67.3%±2.2%,多糖保留率为81.5%±1.2%。与粗多糖相比,纯化后的桑葚多糖可极显著延长小鼠的力竭游泳时间（P＜0.01）,增强其乳酸脱氢酶活力（P＜0.01）,并显著降低运动生成的乳酸浓度水平（P＜0.05）,因此具有较好的抗运动疲劳活性。     

灯盏细辛多酚纯化工艺的响应面法优化及其抑菌活性研究

利用单因素与响应面试验确定大孔树脂纯化灯盏细辛多酚提取物的工艺.通过静态吸附-洗脱试验,比较6种不同类型大孔树脂对目标化合物的吸附、解吸性能后,利用动态吸附-洗脱试验确定最佳纯化工艺,同时采用滤纸片法考察纯化后的多酚化合物对大肠杆菌、枯草杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌活性.结果表明,H103型树脂对灯盏细辛多酚提取物的纯化工艺条件为:上样液质量浓度为1.9 mg/mL,pH为5.1,上样液体积为80 mL,上样流速为2 mL/min,洗脱剂乙醇体积分数为69％,体积为120 mL,洗脱流速为1 mL/min,产物的多酚纯度由11.25％提高至54.76％.纯化后的灯盏细辛多酚对3种受试菌具有不同程度的抑制活性,其中对金黄色葡萄球菌的抑制活性最强,因此可为灯盏细辛多酚的后续开发利用提供参考.     

白桦叶黄酮超声波提取及纯化工艺研究

以白桦叶为原料,采用超声波法提取其黄酮化合物,以黄酮粗提物得率为指标筛选试验条件,进而进行响应面优化试验;采用NKA-9大孔吸附树脂对白桦叶黄酮粗提物进行纯化优化试验。结果表明:在料液比1∶41(g/g),乙醇质量分数90%,超声时间44 min的工艺条件下进行提取,黄酮得率可达6.12%。NKA-9大孔吸附树脂纯化粗提物的工艺条件为:上样浓度0.8 mg/mL,上样量3 BV,上样速率1.5 mL/min,pH 3,洗脱液乙醇体积分数90%,洗脱液用量2.5 BV。在此工艺条件下所得到的纯化物黄酮含量可达68.5%。     

发酵型金耳多糖的分离纯化及其降血糖活性

【目的】研究发酵型金耳多糖(FTAP)的分离纯化方法及其降血糖生物学活性;【方法】比较沸水煮提法和碱水热提法的差异,确定FTAP的提取工艺。Sevage法除蛋白,利用sephadex G-75凝胶柱层析进行分离纯化。采用四氧嘧啶诱导的高血糖大鼠模型,灌胃给药,监测血糖,测定脂代谢指标,对FTAP进行降血糖活性评价。【结果】沸水煮提法最大多糖得率为15.5%,碱水热提法最大多糖得率为14.9%,选择沸水煮提法为制备FTAP的方法。利用sephadex G-75凝胶柱层析得到单一对称洗脱主峰,表明得到的FTAP为均一多糖。连续口服FTAP 7天时,44mg/kg•d和264mg/kg•d剂量组小鼠与模型组空腹血糖比较降血糖作用明显,血清甘油三酯水平也显著下降。【结论】FTAP可降低高血糖模型小鼠的高血糖水平。     

猪苓多糖苯酚-硫酸法测定条件的优选

【目的】建立猪苓多糖快速定量分析方法;【方法】苯酚-硫酸法,以葡萄糖含量为指标,检测波长490nm,用L9（34）正交试验设计优选测定条件;【结果】1.0ml样液,加5%苯酚液0.8ml、硫酸5.0ml,100℃水浴保温15min结果最佳;硫酸加量对结果影响最大,水浴温度次之,苯酚量影响最小;葡萄糖含量呈线性关系范围在5.0～40.0μg/ml;精密度RSD=1.58%(n=6);测定稳定性好(3h内);平均回收率99.22％,RSD=1.87％（n=3）;实测猪苓菌丝多糖含量3.46%,RSD=2.07%(n=4)。【结论】本优选法灵敏度高、操作简便、数据稳定性好、误差小、重现性好,值得推广     

乐果液相色谱与气相色谱检测方法的比较

摘 要：【研究目的】通过应用液相色谱法（HPLC）和气相色谱法（GC）对乐果测定的参数进行比较,为乐果检测方法的选择提供参考。【方法】分别应用气相色谱和高效液相色谱法对乐果检测条件进行优化,对这两种测定方法的灵敏度、线性相关性、稳定性及添加回收率的等参数测定结果进行比较。【结果】用液相色谱法测定乐果最低检测限为0.01mg/L,比用气相色谱法（最低检测到0.1mg/L）测定时有更高的灵敏度;HPLC检测（r＝0.9990）较GC（r＝0.9937）有更好的线形相关性;在乐果浓度低于0.1mg/L时,用液相色谱法对乐果进行测定有很好的稳定性,在浓度高于0.1mg/L,两种测定方法的稳定性相当。【结论】用液相色谱法测定乐果完全可以达到农药登记残留试验准则的要求,它比气相色谱法更适合乐果的微量及常量的检测。     

大花蕙兰与春剑杂交原球茎增殖及分化研究

【研究目的】对大花蕙兰品种‘绿宝石’与春剑杂交原球茎增殖与分化进行研究。【方法】设置不同培养基、6-BA 和 NAA以及不同添加物对杂交兰原球茎增殖分化的进行探讨。【结果】KC培养基为最佳培养基;6-BA对原球茎的增殖影响不大, NAA对增殖影响较明显当浓度为0.2mg/L原球茎增殖效果最好;KC+6-BA2.0 mg/L+ NAA 0.5 mg/L对原球茎的分化效果最好;【结论】在培养基中加15mL/L香蕉汁最有利于杂交兰原球茎的增殖。     

Effects of Planting Density and Chemical control on Yield and Mineral Elements Accumulation of Cotton Direct-Seeded after Wheat

[Objective] The effects of planting density and Miantaijin treatment on yield and nitrogen, phosphorus and potassium uptake and accumulation in cotton direct-seeded after wheat in the Yangtze River basin were studied in order to clarify the high-yield cultivation techniques under this cropping system. 【Method】 In 2011 and 2012, Guoxinzao 11-1 at the experimental material, and adopted three densities (75 000, 90 000 and 105 000 plants·hm^－2) and three Miantaijin doses (0 mL·hm^－2, 1 170 mL·hm^－2 and 2 340 mL·hm^－2). 【Result】 The results showed that the highest yield was 3 551.3～3 687.5 kg·hm^－2 under 90 000～105 000 plant·hm^－2 density combined with 1 170 mL·hm^－2 Miantaijin (seedling stage: 90 mL·hm^－2, peak squaring stage: 180 mL·hm^－2, peak flowering stage: 360 mL·hm^－2, peak boll-setting stage: 540 mL·hm^－2). Under these conditions, the highest uptake of nitrogen, phosphorus and potassium was 117.8 kg·hm^－2, 77.4 kg·hm^－2, 116.4 kg·hm^－2, respectively. Among them, nitrogen uptake was the highest in the peak-squaring stage to peak-flowering stage, while the highest phosphorus and potassium uptake were both detected in the peak-flowering to boll-opening stage. The correlation analysis showed that there was a significant linear positive correlation between the yield of direct seeded cotton after wheat and the total absorption and accumulation of nitrogen, phosphorus and potassium, especially during the peak flowering to boll-opening stage. 【Conclusion】 The suitable application dose of Miantaijin under medium and high density could enhance the absorption of nitrogen, phosphorus and potassium in the whole growth period of cotton, especially in the peak flowering to boll-opening stage. and thus result in the high yield of direct-seeded cotton after wheat in the Yangtze River basin.     

东方百合快繁培养基优化与脱毒技术研究

摘 要：【研究目的】为实现百合种球的国产化,繁育大量的优质种球,笔者以东方百合的西伯利亚和索邦品种为材料,研究东方百合茎尖诱导、继代增殖和生根的最佳培养基,并比较不同的组织培养方法的脱毒效果。【方法】设置不同的激素浓度梯度筛选东方百合茎尖诱导、继代增殖和生根的最佳培养基,并比较新鲜百合球茎尖培养、冷藏处理百合球的茎尖培养、鳞片培养、鳞片扦插苗茎尖培养和试管苗茎尖培养等5种组织培养方法的脱毒效果。【结果】试验结果表明,百合茎尖诱导的适宜培养基为MS + 2.0mg/L 6-BA + 0.1mg/L NAA,芽形成的适宜培养基为MS + 1.0mg/L 6-BA + 0.5 mg/L NAA,苗形成的适宜培养基为MS + 1.0mg/L 6-BA + 0.08mg/L NAA,生根的适宜培养基为1/2MS + 0.4mg/L NAA + 4%AC (Active Charcoal)。病毒检测表明试管苗茎尖培养的脱毒效果最好,但成活率较低;冷藏处理百合球的茎尖培养的脱毒效果也较好且成活率较高。【结论】筛选的东方百合各阶段的培养基配方能满足东方百合快速扩繁的技术要求,茎尖培养在东方百合依然是较好的脱毒方法。     

瑞士乳杆菌TUST005发酵乳ACE抑制活性的检测

【研究目的】通过对四种不同发酵剂的瑞士乳杆菌（Lactobacillus helveticus）发酵乳乳清的血管紧张素转化酶（ACE）抑制活性的体外检测和先天性高血压大鼠的体内检测。【方法】ACE抑制活性的测定根据Cushman D W等的方法进行改进。利用8周龄先天性高血压大鼠（SHR）,每天使用四种发酵乳乳清灌胃SHR大鼠,每一试验样品实验期为3 d,剂量逐渐升高,对照组饮用水。用ZH-HX-Z鼠尾无创动脉测量仪测定收缩压。【结果】瑞士乳杆菌TUST005发酵乳ACE抑制活性大于其他发酵乳ACE抑制活性,并在4 ℃下后发酵3 d具有较高的ACE抑制活性,达到45.91%。当瑞士乳杆菌TUST005发酵乳剂量15 mL/kg体重与乳清剂量为20 mL/kg体重,血压的下降和上升速度相对缓慢,维持最低血压水平时间较长为6 h,降压效果最好且与对照组相比降压值为20.2 mmHg。【结论】瑞士乳杆菌TUST005发酵乳体外检测和体内检测结果一致。     

大孔树脂纯化马尾松花粉总黄酮的工艺研究

以马尾松花粉为材料,筛选对马尾松花粉总黄酮吸附和解吸性能好的大孔树脂,并对大孔树脂纯化马尾松花粉总黄酮的工艺条件进行优化。结果表明,弱极性的DM-130大孔树脂对马尾松花粉总黄酮具有较好的吸附与解吸性能,其吸附率和解吸率分别达到84.24%和93.32%。DM-130大孔树脂纯化马尾松花粉总黄酮的最佳工艺参数为:上样质量浓度0.68 mg/m L,上样流速0.67 m L/min,上样体积为5倍柱床体积,洗脱溶剂为75%乙醇,洗脱流速0.67 m L/min,洗脱剂用量为6倍柱床体积。纯化后马尾松花粉总黄酮的纯度可达到50.4%。     

聚(丙烯酸-co-丙烯酰胺)/膨胀蛭石/腐殖酸钠复合 高吸水性树脂的溶胀和缓释性能研究

【研究目的】以丙烯酸(AA)、丙烯酰胺(AM)、腐殖酸钠(SH)和膨胀蛭石(EVMT)为原料,在水溶液中通过共聚反应合成聚(丙烯酸-co-丙烯酰胺)/膨胀蛭石/腐殖酸钠复合高吸水性树脂(P(AA-AM)/EVMT/SH);【方法】考察在不同种类盐溶液中的溶胀行为、反复吸水性能、在土壤中的实际保水效果和SH的缓释性能;【结果】在EVMT含量为30%和SH含量为10%时,树脂在蒸馏水和生理盐水中的吸水倍率分别达到426和45g/g;树脂的吸水能力随着外界盐溶液浓度的增大而降低,在相同的浓度下,对吸水倍率的影响趋势是PO43->Cl->SO42-和Na+> Ca2+> Fe3+;含有1.0%树脂的土壤在20天后含水量仍有最初的24.6%。【结论】与P(AA-AM)/EVMT相比,引入SH制备的P(AA-AM)/EVMT/SH不仅具有更好的反复吸水性能,而且还具有缓释腐殖酸钠的功能。     

猪LFA-1和CTLA-4实时荧光定量PCR检测方法的建立

摘要：【研究目的】建立猪LFA-1和CTLA-4实时荧光定量PCR检测方法。【方法】根据GenBank中核苷酸序列设计猪淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)和细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)的特异性引物,经RT-PCR扩增、目的片段与载体连接转化以及重组质粒的鉴定,并对重组质粒标准品和样品cDNA进行检测,构建LFA-1和CTLA-4荧光定量RT-PCR标准曲线。【结果】以1×109~1×102拷贝/μL不同稀释水平的标准品进行荧光定量PCR扩增后,统计学分析显示标准品浓度的对数与Ct值之间存在良好的线性关系（LFA-1：RSq =0.992;CTLA-4：RSq =0.994）;样品检测显示LFA-1与CTLA-4引物的扩增曲线图和熔解曲线图的特异性。【结论】所构建的质粒标准品具有线性关系好、重复性好、敏感性高等特点,以及其引物在样品检测中的可应用性,为分析猪免疫细胞在感染病毒前后LFA-1和CTLA-4表达的变化以及评估猪体免疫功能,提供必要的技术平台。     

甜瓜叶斑病病原鉴定及室内药剂筛选

【目的】明确近年来引起甘肃大棚甜瓜叶斑病的病原,为该病害的有效防治提供参考依据。【方法】本试验分别采用组织分离法、单孢分离法和生长速率法,对甜瓜叶斑病病原菌及其物学特性和室内药剂筛选进行了研究。【结果】将引起甜瓜叶斑病病原菌病原菌鉴定为多隔链格孢(Alternaira peponicola( Rabenhorst ) simmous)和瓜链格孢(Alternaria cucumerina(Ell.et Ev.)Elliott.);这两种链格孢生长的最适温度为30℃、光照、适宜培养基分别为完全光照、甜瓜煎汁培养基和完全黑暗、PDA;室内药剂筛选发现不同药剂对不同病原菌抑菌率不同,其中10%苯醚甲环唑、40%氟硅唑、50%福美双、70%代森锰锌对多隔链格孢菌抑菌率均在84%以上,分别为96.66%、94.46%、90.82%、84.37%,其EC₅₀分别为17.89μg/mL、3.41μg/mL、44.27μg/mL、42.34μg/mL;50%醚菌酯、43%戊唑醇、40%腈菌唑对瓜链格孢抑菌作用较好,抑菌率均在85%以上,分别为98.20%、90.82%、85.43%,其EC₅₀分别为3.45μg/mL、21.35μg/mL、5.21μg/mL。【结论】研究结果为甜瓜叶斑病的有效防治提供了依据。