大苞鞘石斛组织培养快繁研究

为筛选出大苞鞘石斛组培快繁体系各阶段最适培养基配方,以大苞鞘石斛无菌苗茎段为外植体,通过正交试验研究不同因素对大苞鞘石斛植株再生的影响。结果表明:拟原球茎诱导最适培养基为1/2MS+2,4-D0.2 mg/L+蔗糖30 g/L,诱导出的拟原球茎直径1.5 mm时将其从茎段上剥离,并接入原培养基继续诱导15~20 d;拟原球茎增殖最适培养基为1/2MS+NAA 1 mg/L+蔗糖30 g/L+椰乳10%,继代周期25~30 d;拟原球茎分化最适培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L+椰乳10%,分化培养需40 d;将分化的无菌苗继代于花宝2号3 g/L+蛋白胨2 g/L+IBA 1 mg/L+蔗糖30 g/L+椰乳10%生根诱导效果最好,培养45 d;生根壮苗最佳培养基为花宝1号3 g/L+蛋白胨2 g/L+蔗糖30 g/L+活性炭1 g/L,培养50 d。     

不同有机添加物对叶底红生根壮苗的影响

以叶底红试管苗为材料,以1/2MS+IBA0.5 mg/L+蔗糖30 g/L+活性炭1 g/L为基础培养基,对根系、颜色、株高及最大叶的长和宽等不同形态指标进行加权分析,研究香蕉、椰汁、马铃薯、蛋白胨等4种培养基添加物对试管苗生根壮苗的影响。结果表明:4种有机添加物对生根壮苗的促进作用由大到小依次为椰汁、香蕉、蛋白胨、马铃薯。     

苦瓜双色平脐蠕孢叶斑病病原菌的生物学特性及其抑菌药剂筛选

为了明确苦瓜双色平脐蠕孢叶斑病菌（Bipolaris bicolor）的生物学特性及其对杀菌剂的敏感性,研究了不同培养条件对该病原菌菌丝生长的影响,并测定了10种杀菌剂对该病原菌的抑制作用。结果表明：该病原菌菌丝生长最适温度为25~30 ℃,最适pH范围为6~7,适宜培养基为马铃薯蔗糖培养基（PSA）和玉米粉培养基（CMA）,持续黑暗和光暗交替有利于菌丝生长;不同碳源和氮源对菌丝生长的影响差异显著,其中葡萄糖和蛋白胨分别为最适碳源和氮源,菌丝生长致死温度为45 ℃。250 g/L苯醚甲环唑乳油毒力最强,EC₅₀为0.0233 mg/L,其次为250 g/L吡唑醚菌酯悬浮剂、20%抑霉唑水乳剂和50%嘧菌环胺水分散粒剂。     

花叶玉簪的组培快繁技术研究

对花叶玉簪的组织培养进行研究,结果表明:MS为最适基本培养基,以MS+6-BA5.0mg/L+NAA1.0mg/L+蔗糖30g/L为诱导培养基可得到最多的萌发芽;在正交试验中,增殖系数影响因子对增殖的影响由大到小为6-BA>NAA>蔗糖,其最适继代增殖培养基为MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖30g/L;最适生根培养基为1/2MS+IAA0.7mg/L+蔗糖15g/L;移栽成活率可达80%～90%以上。     

人参内生菌B69菌株抑菌活性物质产生条件的优化

目的探索人参内生菌B69菌株对根腐病的抑制作用,优化人参病害拮抗菌株B69的发酵条件,提高发酵液的活菌含量和抗菌活性。方法以B69发酵液对病原菌根腐病的抑制作用为活性指标,采用正交试验和单因素试验方法对菌株的最适发酵培养基成分及发酵条件进行优化。结果在最佳发酵培养基和培养条件下,经检测发酵液的活菌数含量为8.25×108 cfu/m L,较优化前的活菌含量1.82×108cfu/m L增幅达到了显著差异(P0.05),此含量达到了农业部微生物肥料的技术标准(有效活菌数≥2.0亿/m L)。发酵液对人参根腐病的抑菌圈也由优化前的18mm增加到35mm。结论最佳培养基配方为蔗糖2.0%、淀粉1.0%、牛肉浸膏0.5%、酵母粉0.5%、蛋白胨0.2%和Na Cl0.5%;初始p H7.0;最适装液量为100 m L/250 m L;培养条件为35℃、170r/min振荡培养;接种量5%,发酵时间为48h。     

响应面法优化绿色木霉H06产孢发酵培养基

采用响应面法对绿色木霉H06菌株产孢发酵培养基进行了优化。首先利用Plackett-Burman实验设计筛选出影响产孢的3个主要因素:玉米粉、大豆粕和KH2PO4。在此基础上运用最陡爬坡路径法逼近最大响应值区域,最后利用响应面分析法确定主要因子之间的交互作用及最佳条件。结果表明,蔗糖10 g/L、玉米粉12.75 g/L、NH4NO32 g/L、大豆粕4.65 g/L、MgSO4·7H2O 1 g/L、KH2PO43.32 g/L、H06最大理论孢子含量为3.29×109个/mL。经3次平行实验验证,实际平均孢子含量与预测孢子含量相近,比之前的孢子含量提高了197%。     

防治眼菌蚊Bt.菌株的筛选与培养条件优化

通过11株Bt.菌株对平菇厉眼蕈蚊3龄幼虫的室内毒力测定试验,得出91019菌株对平菇厉眼蕈蚊3龄幼虫有较高的毒力效果,其发酵原液和250倍稀释液对平菇厉眼蕈蚊3龄幼虫的校正死亡率分别达到93.10%和82.76%。通过正交试验对91019菌株的各培养条件进行优化,得出理论最佳培养基组分及培养条件为:玉米粉1.0%、黄豆饼粉2.5%、酵母粉2.0%、鱼粉2.0%、蛋白胨0.4%,KH2PO4 0.5 g/L,CaCO3 4.0 g/L,MgSO4.7H2O0.5 g/L,ZnSO4.7H2O 0.02 g/L;接种量2.0%、pH7.0、装液量25 mL、培养温度25℃。     

解淀粉芽孢杆菌TWC2发酵条件的优化

为了提高解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens TWC2菌株活性代谢物质的产量,以菌体生物量和发酵液拮抗甘蔗赤腐病菌(Colletotrichum falcatum Went.)活性为指标,采用单因素和正交试验的方法对TWC2菌株发酵培养基成分和发酵条件进行优化。结果表明,TWC2菌株最佳发酵培养基组成为:5 g/L麦芽糖,10 g/L果糖,10 g/L蛋白胨,10 g/L酵母浸出粉,1 g/L CaCl_2。最适发酵条件为:培养温度34℃,摇床转速200 r/min,发酵起始pH 6.0~6.5,接种量7%,装液量40 mL/250 mL,发酵时间为48 h。在最佳发酵培养基和培养条件下,发酵液抑制甘蔗赤腐病菌的能力较优化前提高了39.91%。     

响应面法优化银耳芽孢高密度发酵培养基

研究银耳菌株Tr0040液体深层发酵工艺条件。以单因子试验为基础，确定了在液体发酵培养基关键因子葡萄糖、蛋白胨、MgS04．7H20、VBl浓度对芽孢产量影响的最适区，在此基础上通过响应面法对其进行优化得到最佳配方：1L培养基中葡萄糖33．91g：蛋白胨8．29g，MgS04．7H202-812，VB114．43m2，KH，PO,0．5g。     

尾叶桉U6遗传转化再生体系的建立

以桉树品种尾叶桉U6叶盘为外植体,选用MS培养基为基本培养基,附加激素6-BA,IAA,IBA,NAAA,通过研究不同激素浓度组合对外植体愈伤诱导及不定芽分化的影响,建立了较好的遗传转化再生体系.结果表明,尾叶桉U6叶盘最适分化培养基为MS 6-BA 2.0 mg/L 2,4-D 1 mg/L IAA 0.2 mg/L 蔗糖30 g/L 琼脂粉5 g/L;小苗的最佳生根培养基为MS NAA 0.2 mg/L mA 0.5 m/L 蔗糖30 g/L 琼脂粉5 g,L.40mg/L卡那霉素可以抑制叶盘的分化;20 mg/L卡那霉素可以抑制再生植株的生根.2种抑菌抗生素中,头孢霉素对叶片再生影响较大;而250 mg/L的羧苄青霉素能有效地抑制农杆菌菌株EHA105的生长,却对尾叶桉叶盘的芽分化影响不大,为适宜的抑菌抗生素.3种农杆菌LBA4404,EHA105,GV3101的菌液浸染桉树叶盘,统计其愈伤组织GUS染色率,以EHA105对外植体的浸染能力最强,达83.3%.     

绿僵菌在3种不同培养基上培养时产孢量的影响因素

分析了绿僵菌菌株在3种不同培养基上培养时其产孢量的2个影响因素(初始接种浓度和相对湿度),得出菌株在3种不同培养基上培养时须分别配以适宜的接种浓度和相对湿度,以获取最大产孢量(燕麦培养基:1×107cfu/mL,65%;PPDA培养基:1×106cfu/mL,85%;玉米粉酵母浸膏培养基:1×108cfu/mL,75%)。另外,随继代培养代数增加,菌株在这3种培养基上前五代的产孢量比较稳定,第七代及之后的产孢量明显下降。根据3种培养基不同的功能,在PPDA培养基上培养菌株时要着重注意不同继代培养代数对产孢量的影响,其它2种培养基培养菌株一般不超过五代,产孢量比较稳定。     

淡紫拟青霉E7菌株固体放大发酵产孢培养基和工艺条件研究

为探讨淡紫拟青霉E7菌株固体放大发酵因子间的关系以获得大量孢子用于田间试验,通过正交试验设计优化固体发酵培养基成分和培养条件组合,并测定外加碳源、氮源、无机盐和装料方式对产孢量的影响。结果表明：以玉米粉+甘蔗渣+麸皮+壳聚糖组成的正交2号配方为最佳复合培养基质,分生孢子产量达7.13×109个/g,以发酵液pH+液相发酵终点+温度+初始含水量组成的正交4号配方为优适培养条件,分生孢子产量达8.97×109个/g;该菌株在优化后的培养基配方中添加0.4％蔗糖、0.2％蛋白胨、0.002％硫酸锰,以双层纱布袋装料按优化后的培养条件放大培养,产孢量最高可达到8.22×1010个/g。优化后的E7菌株发酵产孢培养基基质用量少,发酵成本低,适合于固体放大发酵生产淡紫拟青霉孢子。     

Paddy Husk as Support for Solid State Fermentation to Produce Xylanase from Bacillus pumilus

To optimize culture conditions for xylanase production by solid state fermentation (SSF) using Bacillus pumilus, with paddy husk as support, solid medium contained 200 g of paddy husk with 800 mL of liquid fermentation medium [xylan, 20.0 g/L; peptone, 2.0 g/L; yeast extract, 2.5 g/L; K2HPO4 , 2.5 g/L; KH2PO4 , 1.0 g/L; NaCl, 0.1 g/L; (NH4)2SO4 , 2.0 g/L, CaCl2 ·2H2O, 0.005 g/L; MgCl2 ·6H2O, 0.005 g/L; and FeCl 3 , 0.005 g/L] at pH 9.0 was applied. The highest xylanase activity (142.0 ±0.47 U/g DM] was obta...     

小麦全蚀病生防芽孢杆菌产芽孢培养基的响应面法优化

为了优化小麦全蚀病生防芽孢杆菌Z-14菌株产芽孢培养基,通过Plackett-Burman实验分析影响芽孢产量的主要碳源、氮源和无机盐,用最陡爬坡路径逼近最大响应区域,利用Box-Behnken实验设计及响应面分析法筛选主要影响因素的最佳水平。结果表明,Z-14菌株生产芽孢最适碳源、无机盐和氮源分别为玉米粉、MnSO4·H2O和酵母粉。优化培养基组合为玉米粉1.17%、酵母粉3.31%、MnSO4·H2O 0.072%、NaH2PO4·2H2O 0.2%、Na2HPO4·2H2O 0.4%,优化后芽孢产量达到1.85×109 cfu·mL-1,与理论值基本相符。     

海洋青霉HN89菌株次生代谢产物抗菌活性的研究

海洋青霉HN89菌株次生代谢产物的抗菌活性与发酵条件对抗生素产量影响的研究结果表明:海洋青霉HN89菌株的次生代谢产物对细菌、酵母、霉菌均有抑制作用;摇瓶发酵产生抗生素(HN89A)的最佳培养基成分为:玉米淀粉20g/L,黄豆粉2g/L,K2HPO41g/L,NaCl0.5g/L,MgSO4 0.5g/L,FeSO4·7H2O0.01g/L,蛋白胨1g/L,用海水配制的海带汁(W/V,2%)1L,最佳发酵条件为28℃下振荡培养(200r/min)96~108h。合适的温度刺激能促进HN89A的合成。      

Chemical and Physical Culture Conditions Significantly Influence the Cell Mass and Docosahexaenoic Acid Content of Aurantiochytrium limacinum Strain PKU#SW8

Thraustochytrids are well-known unicellular heterotrophic marine protists because of their promising ability to accumulate docosahexaenoic acid (DHA). However, the implications of their unique genomic and metabolic features on DHA production remain poorly understood. Here, the effects of chemical and physical culture conditions on the cell mass and DHA production were investigated for a unique thraustochytrid strain, PKU#SW8, isolated from the seawater of Pearl River Estuary. All the tested fermentation parameters showed a significant influence on the cell mass and concentration and yield of DHA. The addition of monosaccharides (fructose, mannose, glucose, or galactose) or glycerol to the culture medium yielded much higher cell mass and DHA concentrations than that of disaccharides and starch. Similarly, organic nitrogen sources (peptone, yeast extract, tryptone, and sodium glutamate) proved to be beneficial in achieving a higher cell mass and DHA concentration. PKU#SW8 was found to grow and accumulate a considerable amount of DHA over wide ranges of KH₂PO₄ (0.125–1.0 g/L), salinity (0–140% seawater), pH (3–9), temperature (16–36 °C), and agitation (140–230 rpm). With the optimal culture conditions (glycerol, 20 g/L; peptone, 2.5 g/L; 80% seawater; pH 4.0; 28 °C; and 200 rpm) determined based on the shake-flask experiments, the cell mass and concentration and yield of DHA were improved up to 7.5 ± 0.05 g/L, 2.14 ± 0.03 g/L, and 282.9 ± 3.0 mg/g, respectively, on a 5-L scale fermentation. This study provides valuable information about the fermentation conditions of the PKU#SW8 strain and its unique physiological features, which could be beneficial for strain development and large-scale DHA production.     

玉米弯孢菌叶斑病拮抗放线菌BPS2发酵条件的初步探索

通过单因子和正交试验对玉米弯孢菌叶斑病[Curvularialunata(Waker)]拮抗放线菌BPS2进行了发酵条件的研究,包括发酵液的初步筛选、碳源、氮源、初始pH值、装液量、发酵时间等。结果表明,最佳培养基和培养条件为1000mL培养基中蔗糖2.0%、玉米粉2.0%、黄豆饼粉3.0%、蛋白胨0.6%、硫酸铵0.3%、磷酸二氢钾0.1%、氯化钠0.1%、碳酸钙0.3%,培养初始pH值为6,250mL三角瓶装液量为30mL,发酵周期为60h。     

金龟子绿僵菌液体深层培养研究

研究结果表明:金龟子绿僵菌液生分生孢子的形成与培养基组成密切相关,不同的碳、氮源对液生分生孢子形成具有显著影响。蔗糖是液体深层培养液生分生孢子的理想碳源,而花生饼粉、豆饼粉则是较理想的氮源,且液生分生孢子的产量与培养基氮源的性质有关,复杂的氮源比简单的氮源更有利于液生分生孢子的形成。在供试的8种碳源和6种氮源相互组配的培养液中,以蔗糖+花生饼粉的组合最佳,液生分生孢子产量达14.13×10~9个/L。同时试验结果还表明,液生分生孢子的产出率与培养液的碳氮比、温度、pH有关,在培养温度为28℃、培养液碳氮比为3:1、pH为6.8的条件下,可获得最大的液生分生孢子产量。     

山东茶园土壤高活性解钾细菌的筛选鉴定及肥效研究

为了筛选到适合山东茶园土壤环境的解钾菌株,以提高土壤钾素的高效转化效率,本研究经过菌株富集、分离、纯化等步骤,从山东茶园土壤中分离出9株解钾细菌。通过有效钾含量比较和菌株分类,筛选出1株活性最强菌株K2,经鉴定K2菌株为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。发酵试验表明,菌株K2最适宜生长的条件为pH值6.0,温度35℃,以麦芽糖、淀粉、玉米粉为碳源,酵母膏为氮源。施用该菌剂后土壤速效钾和速效磷含量比对照最大分别提高28.40%和28.49%。茶叶产量最大提高36.30%,同时茶叶中氨基酸含量显著增加,酚氨比值降低,有利于茶叶品质的提升。菌株K2可能是一株茶园土壤高效解钾细菌,可作为后续进一步研究茶园专用微生物菌剂的参考。