茶树内源激素研究进展

本文对茶树内源激素基本提取，测定方法及内源激素对茶树等植物生长发育，抗性，同化物的分配等的影响作了较为全面的综述，对植物内源激素应用于茶树栽培，育种等领域的研究前景进行了分析。     

生长调节物质对茶树内源激素变化的影响

研究了茶树喷施生长调节物质后4种内源激素的变化规律，分析了生长调节物质通过影响内源激素的变化来调控茶树生长发育。     

茶树年生育过程内源激素含量变化研究

本文研究了茶树年生育过程中内源激素IAA、GA3、ZT和ABA含量的变化规律及其与新梢生育的关系，结果表明．GA1和ABA在越冬期间含量最高，后随新梢的萌发生长而下降；IAA、ZT含量则在越冬期最低，春梢萌发初期含量迅速上升。此后，ABA在新梢生长初期和盛期含量较低，GA3与IAA则维持在一定含量的水平上，而ZT含量均呈上升趋势；在茶树新梢生长趋缓和休止期，ABA含量则最高，GA3、IAA含量也较生长期高。4种激素6～12月的变化趋势基本相似。GA3／ABA、IAA／ABA在越冬期最低，后随春梢萌动而上升。整个生育过程中，新梢生长旺盛时比值较高，反之则较低。ZT／IAA值反映出茶树地上部与地下部生长的关系，在茶树根系活动微弱时，比值较高，随根系活动旺盛逐渐下降。ZT／GA3、ZT／IAA值可反映茶树营养生长与生殖生长的相互关系，比值大时，茶树趋向生殖生长；相反，则营养生长相对旺盛。     

茶树成花前后内源激素含量的变化研究

茶树芽叶中IAA、GA3含量在花芽分化期较高，花芽分化后下降，至夏季休眠期又升到最高，ZT值在花芽分化前后的4-8月呈逐步上升趋势，以后有所下降，11月有一高峰值。ABA在花芽分化期处于较低水平，在夏季高温和秋冬之交达到最高。ZT/GA3和ZT/IAA值在花芽分化时达到最高，GA3/ABA、GA3/IAA值在花芽分化进入高峰前维持较高水平，花芽分化后降至最低。提出喷施外源激素控制生殖生长以GA3、IAA、NAA等为主配方，添加氮素及微量元素，在5月前后施用。     

茶树新梢生育的内源激素水平及其调控机理（第三版）：干旱胁迫对茶树内源激素的影响

以耐旱性不同的福鼎白毫和紫笋茶树品种为对象，研究了不同干旱胁迫强度对茶树叶片含水量与内源激素水平的影响。结果表明：随干旱胁迫持续，叶片失水递增，叶片含水量福鼎白毫＞紫笋；胁迫过程中茶树叶片IAA和ABA含量不断增加，Zeatin含量不断下降，ABA含量变化与叶片含水量呈线性负相关，与叶片IAA含量呈线性正相关，IAA／ABA比值随干旱胁迫的持续而下降，耐旱性较强的福鼎白毫下降幅度较紫笋大，ABA／ZT比值在胁迫过程中不断上升，其比值福鼎白毫＞紫笋，这与茶树品种的耐旱强弱相一致，ABA／ZT比值的变化与叶片含水量呈线性负相关。     

低温胁迫对稻茬小麦根系抗氧化酶活性及内源激素含量的影响

为探索低温对小麦根系的伤害机理,在分蘖期和拔节期模拟低温,研究低温胁迫对稻茬不同小麦品种(烟农19,抗寒性较强;郑麦9023,抗寒性较差)根系抗氧化酶活性及内源激素含量的影响。结果表明,低温胁迫对小麦根系中抗氧化酶活性和内源激素含量的影响均达到显著水平(P0.05)。2个小麦品种受到低温胁迫后,根系中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性均显著增强,丙二醛含量(MDA)显著下降,且拔节期低温处理小麦的抗氧化酶活性增强幅度更大,MDA含量下降幅度更小。抗寒性较强的小麦品种(烟农19)根系中脱落酸(ABA)、赤霉素(GA3)和生长素(IAA)含量在低温胁迫后均表现为上升趋势。抗寒性较差的品种(郑麦9023)根系中GA3含量在低温胁迫后增加;ABA含量在低温胁迫后下降;IAA含量在分蘖期低温胁迫后表现为增加,拔节期表现为下降。以上结果表明,分蘖期和拔节期遭受低温后,不同品种稻茬小麦根系中抗氧化酶活性及激素含量受影响的程度不同,抗寒性差的品种根系受低温影响较大,且以拔节期影响更为严重。     

茶树新梢生育的内源激素水平及其调控机理*(第四报)外源激素对茶树内源激素的影响及其与新梢生长的关系

以外源NAA、GA3和催发素溶液喷布茶树，研究其对新梢内源激素含量水平的影响及其与新梢生长的关系。结果表明：NAA处理显著提高新梢生育初期内源ABA和IAA的含量，新梢生长一度受抑，但随后zeatin含量上升，生长加速；GA3处理后新梢内源ABA含量下降，IAA含量减少，GA3和zeatin含量提高，新梢生长量加大，生长速率加快；催发素处理后新梢内源IAA含量下降，促进新梢萌发与生长，提高鲜叶产量。     

茶树新梢生育的内源激素水平及其调控机理（第二报）茶树休眠与内源激素的关

本文研究了不同茶树品种新梢夏季生长休止、冬季休眠与内源激素水平的关系。结果表明,内源激素水平差异及激素间的比值变化与新梢生长和休止密切相关,高含量IAA及高IAA／zeatin与IAA／GA3比值,导致夏季生长休止;高含量ABA及高BAB／GA3与ABA／zeatin比值,是诱发冬季休眠的主要原因。     

茶树新梢生育的内源激素水平及其调控机理(第二报)茶树休眠与内源激素的关系

本文研究了不同茶树品种新梢夏季生长休止、冬季休眠与内源激素水平的关系.结果表明,内源激素水平差异及激素间的比值变化与新梢生长和休止密切相关,高含量IAA及高IAA/zeatin与IAA/GA3比值,导致夏季生长休止;高含量ABA及高ABA/GA3与ABA/zeatin比值,是诱发冬季休眠的主要原因.     

茶树新梢内源激素的HPLC分析及日变化

研究了茶树新梢内源赤霉酸（ＧＡ３）、吲哚乙酸（ＩＡＡ）、吲哚乙醛（ＩＡＡＤ）、脱落酸（ＡＢＡ）和玉米素（Ｚｅａｔｉｎ）等激素的ＨＰＬＣ分析方法。在ＯＤＳ（Ｃ１８）反相柱上，ＧＡ３、ＩＡＡ、ＩＡＡＤ和ＡＢＡ用甲醇—乙腈—ＫＨ２ＰＯ４缓冲液系统为流动相、Ｚｅａｔｉｎ用甲醇—乙腈—磷酸缓冲液系统为流动相得到满意的分离，它们与相邻峰间的峰高分离度均在０．６５以上。在紫外波长λＧＡ３＝２１０ｎｍ，λＩＡＡ、ＩＡＡＤ、ＡＢＡ＝２８０ｎｍ和λＺｅａｔｉｎ＝２５４ｎｍ、灵敏度０．００３ａｕｆｓ（ＧＡ３）和０．００１ａｕｆｓ（ＩＡＡ、ＩＡＡＤ、ＡＢＡ和Ｚｅａｔｉｎ）条件下，各种激素得到定量。ＧＡ３、ＩＡＡ、ＩＡＡＤ、ＡＢＡ和Ｚｅａｔｉｎ的平均标样添加回收率分别为７６．２４％，８９．６９％，８４．３３％，９０．９６％和８２．０９％。茶树新梢内源激素含量在一天内有明显的变化，其高峰值均出现在１３时左右。一天内以１０—１６时取样进行内源激素测定较适宜     

茶树白化变异研究进展

白化现象在植物界普遍存在,茶叶作为一种叶用植物,白化变异植株中关键化学成分如叶绿素、类胡萝卜素、儿茶素类、氨基酸类、黄酮类等物质含量发生了显著变化,这些变化对茶树生长发育、抗逆性、茶叶制作工艺、口感等有重要影响。叶色变异作为一种突变性状对于茶树新品种选育有着重要的应用价值,对研究茶树光合作用机制、叶色调控机理、叶片发育调控等也有重要理论价值。本文综述了国内近几年关于茶树白化突变体化学成分叶绿素、类胡萝卜素、氨基酸、儿茶素的研究及茶树白化突变分子机制的研究进展,旨在为茶树白化突变体分子机制的深入研究提供参考。     

茶树花青素还原酶的酶学特性研究

茶树花青素还原酶(CsANR)作为原花青素生物合成途径中的关键酶,催化花青素为相应的2,3-顺式-黄烷-3-醇。为了研究该酶的酶学特性,本文采用原核表达及钴离子亲和柱纯化技术,表达并纯化出目的蛋白;重点对CsANR1酶学特性进行研究分析。结果表明,CsANR1的最适反应温度为40℃,最适pH值为6.5;对底物矢车菊色素的亲和力高于飞燕草色素。Cu2+、Co2+、Fe2+、Mn2+、Zn2+和Hg2+等金属离子对酶有抑制作用,存放15d后酶活下降50%。     

基于4300 DNA分析系统的茶树SSR发掘方法优化与建立

简单序列重复（Simple sequence repeats, SSR）在茶树遗传与育种研究中具有重要的作用,基于4300 DNA分析系统的SSR发掘具有通量高、准确和灵敏等特点,已被用于许多物种的分子标记研究,但在茶树的相关研究中尚未见报道。本研究应用单因素试验和L₉(3⁴)正交设计试验对影响茶树SSR-PCR的主要参数进行优化,建立了适合于4300 DNA分析系统的茶树SSR-PCR反应体系：1.0 μL DNA（25 ng·μL^-1）,0.2 μL M13F-F、0.2 μL R和0.4 μL IR-M13F,0.8 μL dNTPs（25 mmol·L^-1）,1.0 μL 10×Buffer（含Mg²⁺）,0.1 μL Ex-Taq聚合酶（5 U·μL^-1）,无菌水定容至10 μL。所有引物浓度均为1 μmol·L^-1。同时,本研究还证明,可以以自行配制的6.5%聚丙烯酰胺凝胶溶液（acry:bis=29:1）替代4300 DNA分析系统指定凝胶溶液,检测SSR位点。     

低温胁迫对茶树抗氧化酶活性的影响

以白鸡冠F1代新品系（0306I、0306F、0306D）及黄旦的扦插苗为试验材料,测定低温（0℃）胁迫下茶树抗氧化酶活性的变化。结果表明,低温下各品种（系）叶片电导率、过氧化氢及丙二醛含量都显著增加,其中0306F与0306D增加幅度明显大于黄旦与0306I;谷胱甘肽还原酶（GR）、抗坏血酸过氧化物酶（APX）、过氧化物酶（POD）与超氧化物岐化酶（SOD）活性都显著增加,其中黄旦与0306I低温下GR、APX、POD、SOD增加幅度远大于品系0306D与0306F。低温下单脱氢抗坏血酸还原酶（MDAR）、脱氢抗坏血酸还原酶（DHAR）、过氧化氢酶（CAT）、抗坏血酸（ASC）与谷胱甘肽（GSH）活性显著下降,其中0306F与0306D品系叶片的MDAR与CAT低温下下降幅度远大于黄旦与0306I。回归分析发现,叶片双氧水含量与APX（y=601.8-59.1x）及CAT（y=5.45-0.77x）活性呈负相关,电导率与ASC（y=7.45-10.35x）也呈负线性相关。以上结果表明,茶树品种（系）0306F与0306D抗寒性弱于0306I与黄旦。     

43份茶树品种资源遗传多样性的SSR研究

采用SSR分子标记技术对43个茶树品种(系)进行了遗传多态性分析。用37对可扩增引物对43个茶树品种(系)扩增,经8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,其中有34对引物产生多态性,不同引物扩增带数分布在1～11条之间,扩增片段大小介于150～350bp。应用DPS软件,进行遗传距离和相似性系数计算,43份材料遗传距离的变化范围在0.059～0.820之间,说明供试茶树资源间的遗传变异十分宽广。根据UPGMA法构建聚类树状图,在平均遗传距离水平上,可将43份材料划分为7个类群。     

茶树中植物激素研究进展

植物激素在植物生长发育中具有重要的调控作用。本文综述了植物激素对茶树生长发育和逆境反应的调控,及植物激素在茶树外植体繁殖中的应用,并概述了当前植物激素研究的方向和重点。针对茶树中激素研究现状并结合目前分子生物学的发展,提出茶树基因组测序完成后,植物激素对茶树茶芽萌发、抗逆等调控机理的研究将成为茶叶科学研究中一个新的热点。     

茶树花青素还原酶基因在大肠杆菌中的表达及优化

茶树花青素还原酶是催化非酯型儿茶素EC和EGC合成的关键酶。采用RT-PCR技术,获得了茶树花青素还原酶基因的开放阅读框,它编码含337个氨基酸的蛋白质,推测分子量为37kD,等电点为6.54;成功地将该基因重组到表达载体pET32a(+)上,并在大肠杆菌rosetta中进行原核表达;优化了原核表达中诱导时间、诱导温度、IPTG浓度、氨苄青霉素浓度,纯化出目的蛋白。HPLC检测表明,目的蛋白具有ANR酶活性。     

茶树中提纯总RNA的研究

在克氏一步法分离总RNA的基础上 ,根据茶树叶片生化成分特点 ,做了部分修改 ,并研究了不同浓度的L -半胱氨酸和可溶性聚乙烯吡咯烷酮 (PVP)、不溶性PVP对提取的RNA纯度、回收率和完整性的影响。分光光度计检测和变性琼脂糖凝胶电泳结果证明 :使用本方法并加入 5- 10mmol LL -半胱氨酸或 4 % - 6 %可溶性PVP能提高RNA纯度和 (或 )回收率 ,研磨时加入5% - 10 %不溶性PVP对提高RNA完整性有较好的效果     

不同品种茶树氮素效率差异研究

比较了6个茶树品种的氮素效率差异。结果表明,在4种施氮条件下,生物量增加值、新梢生长量、氮素吸收效率、氮素生理利用效率、氮素经济效率和总的氮素效率存在着显著的品种间差异。氮素效率的两个子性状—吸收效率和生理利用效率对其贡献大小不同,吸收效率是决定不同品种茶树氮素效率差异的主要因素。