洛阳地区牡丹根腐病病原菌的分离与鉴定

2016—2018年以洛阳地区不同牡丹种植地的根腐病株为试材,采用组织分离法进行根腐病病原菌的分离纯化,根据柯赫氏法则检测分离物的致病性,同时结合形态学特征和基因序列分析对具有致病性的分离物进行鉴定,以明确引起洛阳地区牡丹根腐病发病的主要病原菌种类。结果表明:从30份根腐病株中共分离获得15株病原分离物,离体致病性检测表明9株分离物具有显著致病性;根据形态学特征,初步鉴定9株致病分离物为镰刀菌属(Fusarium)真菌,rDNA-ITS序列和EF-1α基因序列分析表明其中7株致病分离物为茄病镰刀菌(Fusarium solani),2株致病分离物为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)。因此,该研究结果初步表明茄病镰刀菌和尖孢镰刀菌是引发洛阳地区牡丹根腐病的主要病原菌种类,2种病原菌复合侵染引起根腐病的发生,其中茄病镰刀菌为优势致病菌。     

西葫芦根腐病病原的鉴定

通过对所采集的西葫芦根腐病病株进行分离培养,共得到5种病原菌,分属于疫霉菌Phytophthora和镰刀菌Fusarium2个属。经致病性测定,确定引起西葫芦根腐病的主要致病菌为疫霉菌,镰刀菌对西葫芦根腐病的发生有加重作用。经鉴定该致病疫霉菌为烟草疫霉菌(Phytophthora nicotanae),主要致病镰刀菌为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)。     

新疆加工辣椒根腐病病原鉴定

以制干辣椒根腐病病样为分离对象,采用形态学和分子生物学方法对致病菌进行鉴定。结果表明:共采集根腐病样211个,从中分离获得161个分离物,其中镰刀菌Fusarium spp.121个,占总分离物的75.16%;其它菌40个,占24.84%,说明镰刀菌是新疆加工辣椒的主要致病菌。经致病性测定后,采用形态学观察结合18SrDNA-ITS、EF-1α和β?tubulin 3个序列分析,将80株有致病性的镰刀菌鉴定为尖孢镰刀菌(F.oxysporum)和茄病镰刀菌(F.solani),其中尖孢镰刀菌57株,占镰刀菌分离物的47.11%;茄病镰刀菌23株,占19.01%。     

辽宁省甜樱桃叶枯病病原鉴定北大核心

为了明确辽宁省甜樱桃叶枯病致病菌的种类,为甜樱桃叶枯病的合理化防治提供理论依据。在辽南地区采集甜樱桃叶枯病样本,采用室内致病菌组织分离法分离纯化菌株,室内回接寄主品种确定致病菌株;经柯赫氏法则验证,通过常规形态学观察,并结合真菌ITS-rDNA技术对致病菌进行分子鉴定,明确致病菌种类。从甜樱桃叶枯病样本中分离得到7株分离物,经致病性验证,菌株LNCY7对甜樱桃品种砂蜜豆、佳红、美早均具有致病性,且与田间发病症状基本一致。通过扩增、测序和序列比对分析,菌株LNCY7特异性序列与GenBank数据库中登录号为MH707085.1的层出镰刀菌(Fusarium proliferatum)的同源性为99%,且在系统发育树上聚合在一个分支。根据形态学鉴定及分子鉴定结果,将引起辽宁省甜樱桃叶枯病的致病菌鉴定为层出镰刀菌。     

镰刀菌引起的北京市草莓根腐病病原鉴定

对北京市昌平区采集的35个草莓根腐病病样进行病原鉴定,结果分离获得13个菌株,根据培养特征和形态学鉴定,确定分离到的菌株均为尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）|选取真菌通用引物ITS1/ITS4扩增菌株的rDNA-ITS序列并进行测序,通过与GenBank数据库序列比对,分子鉴定结果与形态学一致。将分离到的菌株回接到健康草莓幼苗上,植株表现出与田间发病相似的症状,重新分离能够得到相同的病原物。基于形态学、分子生物学鉴定及致病性检测,最终确定北京市昌平区草莓根腐病的病原菌为Fusarium oxysporum。     

山东牡丹黑斑病的病原菌鉴定与ITS序列分析

牡丹黑斑病的致病菌尚不明确。通过对泰安地区的牡丹病叶进行组织分离,利用分子生物学技术结合形态学方法对病原菌进行鉴定,并利用Mega5软件对链格孢属的22个种进行系统发育树分析,进一步明确其分类地位。结果表明：该病致病菌ITS序列与GenBank中登录的Alternaria alternata、A. tenuissima、A. metachromatica相似性均为100%,利用DNAMAN软件对核苷酸一致性进行比较,发现样品菌株与A. alternata的一致性最高,结合形态学方法鉴定该病致病菌为链格孢A. alternata（GenBank登录号为：KJ682317）。回接鉴定后分离得到的菌株,菌饼刺伤接种的病叶与无伤接种的病叶均发病,但刺伤叶片病斑扩展快。     

一种西葫芦根腐病病原鉴定及其致病范围

针对京郊发生的西葫芦根腐病,采用形态学和分子生物学方法鉴定病原菌,并对该病原菌的致病范围进行了测定,目的是为该病害的有效防控提供依据。结果表明,京郊发生的西葫芦根腐病病原菌为腐皮镰刀菌。致病范围试验结果表明,人工接种该病原菌后,葫芦科蔬菜都能感病,不同种类以及不同品种之间的感病性存在差异,发病率为10.00%～100.00%。其中西葫芦感病最严重,供试的4个品种发病率均为100.00%;茄科和十字花科蔬菜均不感病,供试品种的发病率均为0。建议在生产上西葫芦可以与茄科作物、十字花科作物轮作,减轻腐皮镰刀菌根腐病的危害。     

大花黄牡丹叶斑病病原鉴定及防治药剂筛选

以发病大花黄牡丹为试材,采用常规法分离培养、形态学鉴定、致病性测定等方法确定病原,并通过平皿菌丝生长抑制法筛选有效防治药剂。结果表明:大花黄牡丹叶斑病的病原菌为半知菌亚门叶点霉属斑点叶点霉(Phyllosticta commonsii)。抑制该菌菌丝生长效果较好的杀菌剂是30%嘧霉·福美双可湿性粉剂和80%嘧霉胺水分散粒剂(500倍液),抑菌率分别为82%和84%。该研究可为病害的有效控制提供前期研究基础。     

牛耳枫枯梢病病原分离与鉴定

以染病及健康的牛耳枫为试材,采用常规组织分离法对牛耳枫枯梢病病原进行分离,通过对病原菌的形态学特征、致病性测定和rDNA-ITS序列分析,对引起牛耳枫枯梢病的病原菌进行了鉴定。结果表明:牛耳枫枯梢病的病原为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum),该病原菌直接侵染牛耳枫嫩梢引起枯梢病。     

新发现葡萄害虫露尾甲的形态和分子鉴定

露尾甲是一种多食性害虫,2022年在我国西南和华南地区首次发现露尾甲为害鲜食葡萄果实。为了明确为害葡萄的露尾甲具体种类,分别从形态和分子两方面进行了鉴定。在形态方面,通过供试露尾甲成虫的前胸背板和腹部特征比较,发现其与干果露尾甲Carpophilus mutilatus相似;在分子水平方面,通过对供试露尾甲COI基因进行测序,并进行同源比对,发现该露尾甲与干果露尾甲的序列高度同源,序列相似性为99.64%。结合两方面的鉴定,确定该物种为干果露尾甲Carpophilus mutilatus。     

花椒根部腐烂病原菌的分离与鉴定

我们在江津发现九叶青花椒根部腐烂后导致果实脱落。为此,开展了该病原的分离鉴定。结果表明,该真菌属于腐皮镰刀菌[Fusarium solzni（Mart．）Szcc],引起九叶青花椒根腐。     

胡萝卜镰刀菌根腐病病原菌的鉴定

为明确内蒙古西部地区一种新病害——胡萝卜镰刀菌根腐病病原菌种类,采用组织分离法对病原菌进行分离,用胡萝卜片接种、有伤口和无伤口胡萝卜肉质根接种及盆栽接种进行致病性测定,并通过形态学和分子生物学方法对病原菌进行鉴定。结果表明,分离到的3个菌株F1、F2和F3均表现致病性。经形态学鉴定,F1菌株为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum),F2和F3为茄病镰刀菌(Fusarium solani)。进一步采用真菌通用引物ITS1/ITS4对病原菌r DNA-ITS进行PCR扩增,并将测序结果在Gen Bank中进行同源性比对分析,鉴定结果和形态学鉴定的结果一致。明确了内蒙古西部地区胡萝卜镰刀菌根腐病的病原菌种类为尖孢镰刀菌(F.oxysporum)和茄病镰刀菌(F.solani)。     

新疆甘草根腐病病原鉴定及生物学特性测定

以2020年5-7月采集的甘草根腐病植株为试材,采用组织分离法分离病原菌并结合形态特征和分子生物学技术确定甘草根腐病的病原菌种类,研究了各种培养基、光、pH、温度、碳和氮源对病原菌生物学特性的影响,以期明确危害新疆甘草生长的根腐病病原菌种类和病原菌最适培养条件.结果表明:通过组织分离法分离出的96株真菌菌株,在科赫式法则中产生了与田间一致的发病症状,明确了新疆根腐病的病原菌是尖孢镰孢菌(Fusarium oxysporum)、腐皮镰刀菌(Fusarium solani)、轮枝镰刀菌(Fusarium verticil-lioides).其最适培养条件为自然pH的PDA培养基接种,置于25～28℃光暗12 h交替恒温培养箱中培养.     

烟台地区草莓根腐病病原鉴定及致病性测定

草莓根腐病是草莓上严重发生的一种病害。近年来,在全世界范围内严重发生,并有逐年加重的趋势。2010年6～7月间,对烟台某草莓种植基地的草莓根腐病进行了调查,并在室内用组织分离法对病原菌进行了分离、鉴定及致病性测定。结果表明:引起草莓根腐病的病原物有尖孢镰孢菌(Fusarium oxysporum)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)和/或疫霉菌(Phytoph-thorasp.),其中尖孢镰孢菌和立枯丝核菌最为普遍,疫霉菌次之。根据病原菌生物学特性及发生发展规律,提出了该病的综合防治措施。     

红掌根腐病病原鉴定及其PCR 检测方法

 利用真菌通用引物ITS1 和ITS4 扩增红掌根腐病菌转录间隔区并进行序列测定,通过序列 比较,设计了1 对红掌根腐病菌的特异引物SF1/SR2,对30 个红掌根腐病病原菌、8 种其它真菌和2 种 细菌基因组DNA 进行PCR 扩增。结果表明,只有红掌根腐病菌获得572 bp 的特异带。使用引物SF1/SR2 对华丽腐霉进行PCR 扩增,其检测灵敏度在DNA 水平上可达1 pg。运用设计的引物从红掌根腐病菌基 因组DNA 以及人工接种和自然发病的红掌植株中扩增到572 bp 的特异片段,实现了对红掌根腐病菌的快 速可靠的检测。     

大樱桃根茎腐烂致病菌的分离鉴定

以感根茎腐烂病的樱桃树为试材,对其病原菌进行分离纯化、致病性检测和r-DNA-ITS序列分析,研究了pH和温度对病原菌菌丝生长的影响.结果表明:分离到的4株病原菌中仅1株引起了根茎腐烂病,经r-DNA-ITS序列分析鉴定,该菌为撕裂蜡孔菌;该菌在pH 4.0～7.0生长较快,最适宜pH为6.0;最适生长温度为32～34℃,最高生长温度38℃,致死温度42℃.     

番茄颈腐根腐病病原菌鉴定与抗病种质材料的筛选

2014年在山东寿光农户种植番茄的日光温室内采集典型颈腐根腐病症状的发病植株进行病原分离、纯化,结合形态学观察及rDNA-ITS序列分析,确定病原菌为尖孢镰刀菌番茄颈腐根腐病专化型（Fusarium oxysporum f. sp. radicis-lycopersici）。利用源自秘鲁番茄颈腐根腐病抗性基因Frl的共显性标记C2-25,对田间未表现典型颈腐根腐病症状的25份种质材料进行鉴定,鉴定出19份纯合抗病材料,2份杂合抗病材料,4份纯合感病材料,此结果与人工接种病原菌鉴定方法相一致。     

双孢蘑菇褐腐病病原菌的分离及分子鉴定

对引起双孢蘑菇(Agaricus bisporus)褐腐病的病原菌进行分离和分子鉴定.分离培养褐腐病病原菌,采用CTAB法抽提其基因组总DNA,利用真菌通用引物ITS1和ITS4扩增菌株rDNA ITS区序列,扩增产物纯化后克隆转化至大肠杆菌,挑选克隆成功的菌株进行测序.测序结果在GenBank中进行同源性搜索,并下载部分具有代表性种的ITS序列,利用软件MEGA4 构建分子系统发育树,通过序列分析,鉴定出引起双孢蘑菇褐腐病的病原菌为Mycogone perniciosa.     

西瓜根腐病菌的生物学特性

对西瓜根腐病病原菌的生物学特性进行了研究,结果表明:西瓜根腐病病原菌生长温度范围是10～40℃,适宜生长温度为25～30℃;pH4～10范围内都能生长,适宜pH范围为7～10,最适pH为8;能够很好地利用多种碳源;适宜的氮源是硝态氮,而铵态氮不利于其生长。该病原菌的分生孢子在相对湿度达到90%的条件下,才有可能萌发,萌发的最适相对湿度是100%;分生孢子适宜萌发温度为25～30℃;分生孢子的最低致死温度为58℃,5min。