两种染色法测定禽源性大肠杆菌分离株的外膜蛋白型

对江苏地区２５个禽源性大肠杆菌Ｏ１，Ｏ２和Ｏ７８分离株的外膜蛋白型进行测定。用Ｎ－十二烷酰肌氨酸提取其外膜蛋白，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳后，分别以考马斯亮蓝染色法和银染法测定其外膜蛋白型。８个Ｏ１分离株，９个Ｏ２分离株分属２个ＯＭＰ型，其中的１个为二者所共有，而８个Ｏ７８分离株的ＯＭＰ型亦有该型相同；两种染色法对ＯＭＰ型的测定结果一致。     

禽病原性大肠杆菌O_2和O_（78）外膜蛋白型的初步研究

从１１个禽败血症Ｏ＿２和Ｏ＿（７８）大肠杆菌分离株提取的主要外膜蛋白（ＯＭＰ＿ｓ），出现了３个ＯＭＰ型。其中６个Ｏ＿２分离株、５个Ｏ＿（７８）分离株可分别归为２个ＯＭＰ型，但有１个ＯＭＰ型为两者所共有。结果表明，从江苏地区所分离到的禽病原性大肠杆菌具有多样性的ＯＭＰ型，而且这２个血清型菌株中存在着共同的ＯＭＰ型。     

16省市区禽源性大肠杆菌O_(18)和O_(78)的外膜蛋白型

经对我国 １６ 个省、市、自治区分离到的 １１０ 个禽病原性大肠杆菌 Ｏ１ ８ 和 Ｏ７ ８ 分离株的外膜蛋白型（ Ｏ Ｍ Ｐ型）的测定，结果表明，这些分离株共产生了 ４ 个 Ｏ Ｍ Ｐ 型，５６ 个 Ｏ１ ８ 分离株可分为 ３ 个 Ｏ Ｍ Ｐ型，５４ 个 Ｏ７８ 分离株出现了 ４ 个 Ｏ Ｍ Ｐ型，其 Ｏ Ｍ Ｐ１～３ 型为二者所共有。     

禽病原性大肠杆菌O2和O78外膜蛋白型的初步研究

从１１个禽败血症Ｏ２和Ｏ７８大肠杆菌分离株提取的主要外膜蛋白（ＯＭＰ），出现了３个ＯＭＰ型。其中６个Ｏ２分离株、５个Ｏ７８分离株可分别归为２个ＯＭＰ型，但有１个ＯＭＰ型为两者所共有，结果表明，从江苏地区所分离到的禽病原性大肠杆菌具有多样性的ＯＭＰ型，而且这２个血清型菌株中存在着共同的ＯＭＰ型。     

16省市区禽源性大肠杆菌O18和O78的外膜蛋白型

经对我国１６个省,市,自治区分离到的１１０个禽病原性大肠杆菌Ｏ１８和Ｏ７８分离 外膜蛋白型（ＯＭＰ型）的测定,结果表明,这些分离株共产生了４个ＯＭＰ型,５６个Ｏ１８分离株可分为３个ＯＭＰ型,５４个Ｏ７８分离株出现４个ＯＭＰ型,其中ＯＭＰ１￣３型为二者所共有。     

蛋白质分析中SDS─PAGE银染法与考马斯亮蓝染色法敏感性的比较

蛋白质分析中ＳＤＳ─ＰＡＧＥ银染法与考马斯亮蓝染色法敏感性的比较高崧，刘秀梵，张如宽（江苏农学院动物医学系，扬州２２５００９）ＳＤＳ一ＰＡＧＥ技术，是蛋白质分析最常用的手段之一。ＳＤＳ─ＰＡＧＥ分离后的条带，通常采用考马斯亮蓝进行染色。８０年代产生了...     

用NBT还原法检测细菌无细胞溶解物中SOD活性

目的：了解不同细菌无细胞溶解物中ＳＯＤ活性。方法：采用ＮＢＴ还原法检测２株大肠杆菌和８株沙门氏菌（其中７株伤寒沙门氏菌、１株鼠伤寒沙门氏菌）无细胞溶解物中ＳＯＤ活性。结果：２株大肠杆菌ＳＯＤ活性明显低于８株沙门氏菌（Ｐ〈０．０１）;鼠伤寒沙门氏菌ＳＯＤ活性明显高于伤寒沙门氏菌（Ｐ〈０．０１）;而伤寒沙门氏菌Ｌ型返祖株ＳＯＤ活性低于其它株伤寒沙门氏菌（Ｐ〈０．０１）。结论：不同细菌的ＳＯＤ活性有差异     

雏鸡大肠杆菌病及其免疫防制初报

甘肃省兰州市及其近郊６个鸡场时有疑似大肠杆菌病病例发生，Ｌ鸡场的一批雏鸡１月龄时死亡率高达３６％。近年来分离的２７９株肠道杆菌，其中２／３为大肠埃希氏菌。Ｌ鸡场分离的５３株大肠埃希氏菌中，Ｏ＿１型占１５．０９％，Ｏ＿２型占３７．７４％，Ｏ＿（７８）型占２２．６４％；５只雏鸡分离到两种血清型。一些菌株对小鼠和小公鸡有较强的致病力。制备的铝胶灭活苗对控制本病有较好的效果。     

烷基聚氧乙烯基醚硫酸钠和阳离子表面活性剂混合体系的表面活性

辛基苯基聚氧乙烯醚硫酸钠Ｃ＿８Ｈ＿（１７）Ｃ＿６Ｈ＿４（ＯＣ＿２Ｈ＿４）＿（ｌ０）ＳＯ＿４Ｎａ（Ｃ＿８Ｅ＿（１０）Ｓ）和十二烷基７聚氧乙烯基醚硫酸钠Ｃ＿（１２）Ｈ＿（２５）（ＯＣ＿２Ｈ＿４）＿７ＳＯ＿４Ｎａ（Ｃ＿（１２）Ｅ＿７Ｓ）与溴化十二烷基三甲铵Ｃ＿（１２）Ｈ＿（２５）（ＣＨ＿３）＿３Ｂｒ（Ｃ＿（１２）ＮＭ＿３），不仅能在水溶液中形成透明的均匀溶液，而且混合体系的临界胶团浓度和γｃｍｃ比单一组分的低。Ｃ＿（１２）Ｅ＿７Ｓ－Ｃ＿（１２）ＮＭ＿３和Ｃ＿８Ｅ＿（１０）Ｓ－Ｃ＿（１２）ＮＭ＿３对极性物的加溶，随混合比的变化呈“Ｖ”型，而对非极性物的加溶呈“”型。混合比改变时，Ｃ＿（１２）Ｅ＿７Ｓ－Ｃ＿（１２）ＮＭ＿３和Ｃ＿８Ｅ＿（１０）Ｓ－Ｃ＿（１２）ＮＭ＿３溶液的粘度出现１个极大值（在１：１附近）。在Ｃ＿８Ｅ＿（１０）Ｓ中引入Ｃ＿（１２）ＮＭ＿３的量小于１０％时，Ｃ＿８Ｅ＿（１０）Ｓ－Ｃ＿（１２）ＮＭ＿３的润湿能力不变；大于１０％时，润湿能力增加，超过２０％时，润湿能力下降。混合比改变时，Ｃ＿８Ｅ＿（１０）Ｓ－Ｃ＿（１２）ＮＭ＿３对煤油的乳化能力出现两个极大值和１个极小值。     

用NBT还原法检测细菌无细胞溶解物中SOD活性

目的：了解不同细菌无细胞溶解物中ＳＯＤ活性。方法：采用ＮＢＴ还原法检测２株大肠杆菌和８株沙门氏菌（其中７株伤寒沙门氏菌、１株鼠伤寒沙门氏菌）无细胞溶解物中ＳＯＤ活性。结果：２株大肠杆菌ＳＯＤ活性明显低于８株沙门氏菌（Ｐ＜０．０１）;鼠伤寒沙门氏菌ＳＯＤ活性明显高于伤寒沙门氏菌（Ｐ＜０．０１）;而伤寒沙门氏菌Ｌ型返祖株ＳＯＤ活性低于其它株伤寒沙门氏菌（Ｐ＜０．０１）。结论：不同细菌的ＳＯＤ活性有差异;伤寒沙门氏菌Ｌ型返祖株细胞壁的缺陷可能是导致其ＳＯＤ活性降低的原因之一     

猪胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白型的研究

对猪传染性胸膜肺炎放线杆菌（APP）12个血清的外膜蛋白型进行了测定。用N-十二烷酰肌氨酸法提取其主要外膜蛋白（OMPs）,经SDS-PAGE电泳后,用考马斯亮兰法进行染色,结果APP 12个血清型的OMP可以分为6个OMP型,表明APP的OMP具有多样性。     

临床分离鸡源性大肠杆菌外膜蛋白型的研究

[目的]了解禽致病性大肠杆菌分离株的遗传相关性。[方法]对分离自保定、秦皇岛和北京3个地区规模化养鸡场的病死鸡体内的38株大肠杆菌,采用超声波裂解和N-十二烷基肌胺酸钠进行外膜蛋白(Omp)提取,利用SDS-PAGE进行Omp分型。[结果]38株大肠杆菌共有3个Omp型,其中Omp-1型为O78、O88、O2、O18、O93、O766个血清型分离株所共有,Omp-Ⅱ型多为O76血清型分离株,Omp-Ⅲ型为O93、O78、O88、O2分离株所共有。这表明同一血清型的菌株可能属于完全不同的Omp型,而血清学上毫不相关的分离株之间却可具有相同的Omp型。[结论]该研究证实了同一血清型的分离株之间可发生遗传分化,而不同血清型的分离株之间也可具有不同程度的遗传相关性。     

Antimicrobial Susceptibility and Characterization of Outer Membrane Proteins of Aeromonas hydrophila Isolated in China

Aeromonas hydrophila isolates from clinical cases （n=43） were tested against 8 antimicrobial agents and typed by outer membrane protein （OMP） pattern by using sodium dodecyl sulfate gel electrophoresis. All isolates were resistant to ampicillin （MICs, ≥16 μg mL-1） and sulfamonomethoxine （MICs≥64 μg mLl）, but susceptible to norfloxacin （MICs,≤0.5 μg mL-1）. There was a high incidence of resistance to erythromycin （90.70%） and tylosin （93.02%）, while a low incidences of resistance to ciprofloxacin （2.33%）, enrofloxacin （2.33%） and florfenicol （4.65%）. Six different outer membrane protein patterns were found among 34 isolates by analyzing proteins in the range of 22 to 50 kDa, other than 9 isolates with their respective profiles. The strains with the similar OMP profiles had similar resistances. Compared with the other strains from the same OMP patterns, NB-1, A.Pun and MR-1 had lacked the proteins in the range of 30 to 45 kDa and their resistance to florfenicol substantially increased. It is speculated that the outer membrane protein changes might correlate with decreased susceptibility to florfenicol in the three strains. Some strains which showed completely identical OMP types had a little difference in their resistance to fluoroquinolones, indicating that there might be other factors that were involved in the antimicrobial resistance of A. hydrophila.     

禽大肠杆菌O2、O78菌株外膜蛋白A基因扩增及序列分析

根据Genbank中大肠杆菌K-12外膜蛋白A基因的核苷酸序列设计引物,从禽大肠杆菌O为O2、O78及它们的融合株O2．78(Chl^rNor^r)中分别扩增得到外膜蛋白A基因(ompA),进行序列测定及分析发现3个菌株的ompA均由2276nt组成,核苷酸序列完全相同,只有一个大的开放性阅读框(ORF),长1041bp,编码由346个氨基酸组成的前外膜蛋白A(pro-OmpA),前21个氨基酸残基组成信号肽,成熟的OmpA由325个氨基酸残基组成,相对分子质量为37000．其氨基酸序列也完全相同．从基因水平上证明了禽大肠杆菌O2和O78菌株存在相同的外膜蛋白A抗原。     

双向电泳中4种常用染色方法的灵敏度比较

采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,比较分析双向电泳常用4种染色方法的灵敏度,以筛选适合蛋白质组学研究所使用的染色方法。结果表明：银染GE法的灵敏度在5 ng的水平,对于BSA为0.5 ng;银染Blum法的灵敏度在10 ng的水平,对于BSA为0.1 ng;银染Schevchenko法的灵敏度在50 ng级的水平,对于BSA为5 ng;普通考染法的灵敏度在0.25μg的水平,对于BSA为0.025μg。根据结果比较,提出适合一般蛋白质组研究分析的快速灵敏的蛋白质染色方法。     

鸡大肠杆菌病的病原分离鉴定与药敏试验研究

从河南7个县市的不同鸡群中采集鸡大肠杆菌病典型病料,经细菌学检验,分离出35株鸡大肠杆菌．动物试验结果表明：全部菌株对动物均具有很强的致病作用,多数菌株可使动物死亡率达100％．O因子血清鉴定发现8个血清型,分别为O78,O54,O119,O26,O14,O9,O8,O5,其中O78型分离率为25／35,占总数的71．4％,主要分布于许昌、项城、荥阳等地,其它血清型各占1株,此外尚有3株暂未定型．药敏试验结果表明,各地分离菌株对14种药物的敏感性不同,但所有菌株对头孢唑啉、阿米卡星、卡那霉素等敏感．     

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳4种染色方法的比较研究

[目的]比较SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)中蛋白质的染色方法,建立美洲大蠊抗肿瘤活性部位SDS-PAGE后更为合适的染色方法。[方法]以牛血清白蛋白(BSA)为标准品,采用考马斯亮蓝染色法、氯化钾染色法、钙染色法和银染色法进行比较,在此基础上,将样品美洲大蠊抗肿瘤活性部位进行SDS-PAGE电泳和染色。[结果]结果表明银染法能够准确、快速、简便的对美洲大蠊抗肿瘤活性部位的SDS-PAGE进行染色。[结论]为美洲大蠊药用价值的研究奠定了基础。