思茅松胚性愈伤组织的诱导

以思茅松成熟胚和不同发育时期的未成熟胚为外植体,在DCR、1/2LM和1/2P6培养基上分别添加不同种类及质量浓度组合的植物激素,进行胚性愈伤组织诱导试验.结果表明:一定激素质量浓度范围内的DCR和1/2LM培养基上,成熟胚可以诱导愈伤组织,但都为非胚性愈伤组织;思茅松不同发育时期的未成熟胚在含2,4-D 1.1 mg.L-1、BA 0.45 mg.L-1和KT 0.43 mg.L-1的1/2P6培养基上也可以诱导产生愈伤组织,但只有用处于顶端分生组织原基还不能明显可见时的未成熟胚为外植体进行诱导,才可以得到胚性愈伤组织,诱导率为1.8%;思茅松未成熟球果在普文林场思茅松种子园内最佳采样时期为7月下旬.     

红松成熟合子胚愈伤组织诱导的适宜培养条件

为了探索以红松成熟合子胚为外植体诱导愈伤组织的适宜培养条件,以GD、DCR、LM、MS等为基本培养基,以2,4-D和6-BA组成不同浓度激素组合,进行愈伤组织诱导试验。结果表明,1供试培养基均可诱导红松成熟合子胚产生愈伤组织,但DCR培养基上诱导的愈伤组织出现最早,出愈率显著高于其他培养基,达93.3%;2在DCR培养基中添加2,4-D与6-BA的各种组合均获得了较好的愈伤组织发生,但以2,4-D 2 mg/L+6-BA 0.5 mg/L和2,4-D6 mg/L+6-BA 1 mg/L的出愈率最高,达96.7%。综上所述,红松成熟合子胚外植体诱导愈伤组织时,适宜基本培养基为DCR,适宜激素组合为2,4-D 2 mg/L+6-BA 0.5 mg/L。     

激素对诱导湿地松成熟胚胚性愈伤组织影响的初步研究

本实验以湿地松(Pinus elliottii Engelm.)成熟合子胚为外植体在LP培养基上诱导胚性愈伤组织。研究2,4-D和6-BA对诱导胚性愈伤组织的影响。结果表明高2,4-D浓度对诱导形成胚性愈伤组织非常必要。不同激素配比对实验的结果影响较大,其中培养基组合为LP 2,4-D 12 mg.L-1 6-BA 4 mg.L-1可产生少量类似胚性愈伤组织的培养物。     

水曲柳不同外植体胚性愈伤组织诱导及植株再生

本研究以水曲柳不同外植体(无菌苗叶片和下胚轴、未成熟合子胚、成熟和未成熟合子胚子叶)为材料，在胚性愈伤组织诱导、胚性愈伤组织增殖、体胚形成、体胚萌发生根培养基上诱导分化。结果表明，附加了5.0 mg·L^-1 NAA和2.0 mg·L^-1 6-BA的激素配比的MS培养基，为诱导水曲柳胚性愈伤组织最适培养基；在5种不同的外植体中，成熟和未成熟合子胚子叶更适合作为诱导胚性愈伤组织的外植体；在诱导胚性愈伤组织中，成熟合子胚子叶诱导率为11.7%,未成熟合子胚子叶诱导率为9.7%;胚性愈伤组织在继代培养过程中，WPM为最佳基础培养基，附加0.1 mg·L^-1 6-BA和0.15 mg·L^-1 2,4-D的激素配比，胚性愈伤组织的增殖系数可达到1.54。在体胚成熟过程中，MS培养基内添加1.0 mg·L^-1 ABA时，体胚的诱导率最高，达到55%。在生根萌发的WPM基础培养基中附加1.0 mg·L^-1 IBA和1.0 mg·L^-1 IAA的激素配...     

青海云杉成熟胚胚性组织诱导研究

以青海云杉4个种源成熟胚为外植体,在4种基本培养基和含有不同激素组合的改良1/2LV培养基中进行体胚诱导,结果表明:改良1/2LV培养基为最适宜基本培养基,以此培养基为基础附加6-BA 2.25 mg·L~(-1)+2,4-D 6.60 mg·L~(-1)对1#、2#、4#种源诱导率均超过30%,分别达到38.9%、33.4%、35.4%,对3#种源诱导率也达到29.6%。在同一水平激素组合处理中,1#、4#种源诱导率高于2#、3#种源,原生种源外植体易于启动并完成脱分化过程,而人工次生种源外植体则不易被诱导。     

火炬松体细胞胚胎发生体系的优化

[目的]建立和优化火炬松体胚发生技术体系，为火炬松优良基因型体胚繁育及遗传转化体系建立提供技术支撑。[方法]以火炬松优良基因型的未成熟合子胚为材料，从基因型、球果采集期、基本培养基、植物外源激素组合及浓度等方面对胚性愈伤组织诱导条件进行优化；选取增殖效果好、具有胚性胚柄细胞团（ESM）的胚性愈伤组织开展体胚成熟的正交试验，选择发育正常的子叶胚进行萌发，8周后移栽。[结果]基因型、球果采集期、基本培养基和外源激素（PGR）组合及浓度等因子均对胚性愈伤组织诱导有不同程度的影响。火炬松6种基因型中荣山52胚性愈伤组织诱导率最高，达63.33%；处于裂生多胚期的合子胚为外植体的最佳采样期（7月20日左右）；6种基本培养基中，在DCR基本培养基上胚性愈伤组织诱导率最高，达40.00%；不同PGR组合及浓度中，以0.5 mg·L^-1 6-BA+1.0 mg·L^-1 2,4-D+2.0 mg·L^-1 NAA+5.0 mg·L^-1ABA的胚性愈伤组织诱导率最高，达50.00%。胚性愈伤组织在基本培养基MLP上培养1...     

红松成熟合子胚愈伤组织诱导的研究

以红松(Pinus koraiensis Sieb.et Zucc.)成熟合子胚为基准试验材料,对红松愈伤组织诱导的影响因素进行了初步研究。结果表明,不同的培养基对有效愈伤组织的诱导效果不同,初始诱导应选用LM培养基使外植体完全脱分化,反复继代后可以产生有效愈伤组织,供试的其他培养基继代后则极少产生有效愈伤组织;不同的激素组合和浓度配比对有效愈伤组织的诱导率影响不同,2,4-D是愈伤组织启动的不可或缺的植物生长调节剂,其作用远远大于NAA。在LM+2mg.L-1 2,4-D+0.5mg.L-16-BA的诱导培养基中加入0.5mg.L-1 KT或0.5mg.L-1 TDZ,可明显提高有效愈伤组织的诱导率(可达75.7%)。     

刺槐未成熟合子胚的体细胞胚胎发生和植株再生

以刺槐不同胚龄的未成熟合子胚为外植体,采用混合正交试验设计,研究幼胚胚龄和不同外源激素种类及质量浓度对刺槐胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚分化、萌发的影响.结果表明:开花后8周(55天左右)是胚性愈伤组织和体胚诱导的最佳外植体取材时期;MS+2,4-D 5.0 mg·L-1 +BA0.5 mg·L-1是诱导胚性愈伤组织的最佳培养基,出愈率最高为95.42％±0.02％;MS +NAA0.5 mg·L-1 +BA0.5 mg·L-1+谷氨酰胺250 mg·L-1+水解酪蛋白500 mg·L-1是体细胞胚诱导和分化的最佳培养基,直接体细胞胚发生率最高为92.40％±0.12％,通过愈伤组织诱导体细胞胚发生的频率最高为90.73％ ±0.49％.一旦形成球形胚,将培养物转接到不含任何生长调节剂的MS培养基上,体细胞胚经成熟萌发可进一步形成完整小植株.     

天山云杉体细胞胚的成熟及萌发条件

【目的】建立天山云杉体细胞胚成熟及萌发阶段的适宜培养条件,为该树种的体细胞胚大规模繁殖和工厂化生产提供基础。【方法】以天山云杉成熟合子胚为外植体所诱导形成的胚性愈伤组织为材料,通过14个株系、4种成熟培养基、接种量(100、150、200mg的新鲜胚性愈伤组织)、ABA浓度(1.9、3.8、7.6、19、38μmol·L^-1)等体细胞胚成熟培养条件,以及对不同起源(体细胞胚、合子胚和种子)的幼苗形态特征的比较,筛选出最优的天山云杉体细胞胚成熟与萌发条件。采用SPSS18.0等统计软件对体细胞胚进行统计分析。【结果】1)天山云杉14个株系诱导体细胞胚的结果表明,不同株系在同一成熟培养基上诱导体细胞胚的数量存在差异;其中4个株系及其接种量对体细胞胚形成数量影响的结果表明,不同株系及其接种量诱导体细胞胚的数量也存在差异,当接种量为100mg时,T36株系的体细胞胚诱导数量最高,为3470±546个,显著高于其他接种量和株系(P<0.05)。2)在4种不同成熟培养基上,均形成了成熟的体细胞胚,在1/2BLG+30g·L^-1麦芽糖培养基上形成的体细胞胚数量高于其他培养基,分别为2044个(T6株系)和2282个(T36株系),且与其他培养基差异显著(P<0.05)。3)不同ABA浓度对天山云杉体细胞胚诱导数量的影响无显著性差异(P>0.05),在ABA浓度为1.9~38μmol·L^-1时,其体细胞胚平均诱导数量为2850~2913个,其中以7.6μmol·L^-1ABA的浓度处理效果较好,平均获得2913个正常体细胞胚,高于其他处理。4)将不同起源(体细胞胚、合子胚和成熟种子)萌发的小植株进行对比,结果表明,体细胞胚和合子胚幼苗发育阶段基本一致,但合子胚的幼苗比体细胞胚的幼苗约大1倍,但二者间差异不显著(P>0.05);体细胞胚与合子胚子叶的平均数量一致,二者无显著差异(P>0.05),多数幼苗子叶数量为7~8个。【结论】天山云杉体细胞胚成熟阶段的适宜培养条件为胚性愈伤组织接种量100mg,1/2BLG培养基添加7.6μmol·L^-1的ABA及75%PEG4000、30g·L^-1麦芽糖,并添加750mg·L^-1的L-谷氨酰胺或50mg·L^-1L-天冬酰胺。不同株系在诱导体细胞胚的数量上存在差异。体细胞胚再生植株与合子胚植株在形态上相似。研究结果可为天山云杉体细胞胚的大规模繁殖和工厂化生产提供基础。     

云南松成熟合子胚的胚性愈伤组织诱导条件探究

利用DCR培养基,采用正交设计,诱导云南松(Pinus yunnanensis)成熟合子胚的愈伤组织,并根据实验进展,进一步精确激素浓度配比.结果表明,用5%的次氯酸钠溶液消毒,在DCR培养基中添加10 mg/L 2,4-D与1.5 mgrL6-BA为最佳诱导激素浓度配比,用此方法较可以高效地诱导出云南松成熟合子胚的胚性愈伤组织.     

花曲柳体胚发生和植株再生

以花曲柳合子胚的单片子叶为外植体成功诱导出体胚并获得再生植株。未成熟合子胚的子叶在添加400mg·L-1水解酪蛋白、0.25mg·L-16-BA、1.5mg·L-1NAA、70g.L-1蔗糖和6g·L-1琼脂的MS1/2培养基上可以成功诱导产生体胚,诱导率达到34.7%,每个外植体上体胚数量为2～9个。成熟合子胚的子叶在添加0.25mg·L-16-BA、2mg·L-1NAA的MS1/2培养基(其他成分同上)上可以成功诱导产生体胚,诱导率为10.0%。体胚在MS1/2培养基上经过成熟培养后可以正常萌发,萌发率87.6%。萌发的体胚植株在MS1/2+0.01mg·L-1NAA培养基上生长较好,具备实生幼苗的外观特征。经炼苗后的体胚苗移植到栽培基质(草炭土:蛭石:珍珠岩体积比为5:4:1)中可以正常生长,成活率为75.0%。     

钟花樱组织培养繁殖研究

以钟花樱(Cerasus campanulata)的嫩枝作外植体进行组织培养技术研究。结果表明：适合不定芽诱导的培养基为 MS+6-BA 1.0 mg · L-1+NAA 0.1 mg · L-1+蔗糖30 g · L-1+卡拉胶6.5 g · L-1,诱导率为44.44%,适合增殖培养的培养基为 MS+6-BA 1.0 mg · L-1+NAA 0.05 mg · L-1+GA30.5 mg · L-1+蔗糖30 g · L-1+卡拉胶6.5 g · L-1,增殖倍数为3.70,适合生根培养的培养基为1/2 MS+IBA 1.5 mg · L-1+NAA 0.1 mg · L-1+蔗糖30 g · L-1+卡拉胶6.5 g · L-1+活性碳0.5 g · L-1,生根率为82.23%。     

阔叶十大功劳叶柄愈伤组织诱导及试管苗培养的研究

以大连市引种的阔叶十大功劳嫩叶柄为外植体,采用组织培养方法研究其快繁技术,结果表明:愈伤组织诱导的初代和继代理想培养基是MS+KT 0.6 mg·L-1+2,4-D 2.5 mg·L-1;不定芽分化的理想培养基是1/4MS+ZT0.4 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1;不定芽生根的理想培养基是1/3MS+IAA0.5mg·L-1;试管苗生根继代培养形成的试管苗生长旺盛,生根率为94.6%,生根数为7.2条,每代的繁殖系数为2.8。试管苗移栽平均成活率为89.8%,生长旺盛,在大连地区可正常越冬,翌年即可开花。     

大岩桐组培育苗试验

以大岩桐幼嫩叶片、老叶、带腋芽的茎段为外植体,进行试管诱导,并进行继代、生根、移栽试验.结果表明:大岩桐诱导外植体以带腋芽的茎段效果最好;适宜的启动培养基、增殖培养基和生根培养基分别为MS+6-BA 1.0mg· L-1+NAA0.2mg·L-1、MS+6-BA0.5 mg·L-1 +NAA0.1 mg·L-1和1/2...     

史密斯桉组织培养技术研究

本文探讨了史密斯桉组织培养技术。试验表明,经HgCl2消毒后用1%的氯化钙浸洗处理,能有效控制外植体褐化的发生,褐化死亡率仅为12.5%;始芽萌动以及初期继代培养阶段,采用F＋6-BA 0.5 mg.L-1＋IBA 0.3mg.L-1培养基,有利于外植体的不定芽诱导以及初期的继代扩大培养,增殖系数达3.7;在增殖与伸长生长阶段,采用改良H＋6-BA 0.125～0.25 mg.L-1＋IBA 0.25 mg.L-1＋VC 20 mg.L-1＋VB210 mg.L-1培养基,在保证较高增值系数的情况下,有利于芽的伸长生长;以1/3 MS为基本培养基,添加0.25 mg.L-1IBA对史密斯桉的根系诱导较为有效,生根率达37.8%。     

刺五加体细胞胚状体发生及成苗的研究

以刺五加试管苗叶片为试材,将叶片接种于含有不同种类和浓度激素的培养基上进行培养,研究不同激素对刺五加胚性愈伤组织诱导、胚状体发生及生根的影响。结果表明：诱导叶片胚性愈伤组织发生的最适培养基为MS＋6-BA 1.5 mg.L-1＋2,4-D 1.0 mg.L-1,胚状体生长发育的最适培养基为MS＋6-BA1.0 mg.L-1＋IBA0.5 mg.L-1,生根的最适培养基为1/2MS＋NAA0.4 mg.L-1。     

巨桉无性系EG5叶片高效再生体系的建立

以巨桉栽培无性系EG5无菌苗的叶片为外植体进行愈伤组织诱导与植株再生研究。结果表明:愈伤组织高效诱导和不定芽分化的最适培养基为改良MS+0.12 mg·L-1TDZ+0.25 mg·L-1NAA;硝酸铵对EG5叶片愈伤组织生长及植株分化的影响较大,最适宜质量浓度为0.412 5 g·L-1;最佳伸长培养基配方为改良MS+0.3 mg·L-16BA+0.05 mg·L-1IBA+0.3 mg·L-1IAA;暗培养10 d能促进不定芽分化,延缓愈伤组织老化和褐变速度。生根培养基为改良MS+0.4 mg·L-1NAA时生根率最高,为65.47%,移植成活率为90%以上。     

银中杨茎段离体培养再生植株研究

以银中杨茎段为外植体,建立组织培养系统.试验结果表明,MS为最适基本培养基;各激素对诱导不定芽的作用大小为TDZ＞6-BA＞KT,诱导不定芽的最佳培养基为MS+0.1 mg·L-1TDZ+蔗糖20 g·L-1+琼脂0.7%;诱导不定芽再生的最佳光质为白光或黄光;生根培养基以1/2MS+0.5 mg·L-1IBA+蔗糖2...     

文冠果离体培养技术研究

以文冠果带芽茎段为外植体,以MS配方为基本培养基,采用不同激素组合对其进行离体培养试验,结果表明:6-BA1.00 mg·L-1+NAA0.20 mg·L-1和6-BA1.00 mg·L-1+NAA0.50 mg·L-1的激素组合适宜诱导芽和增殖培养,分化率分别为90.4%和89.3%;苗高分别为1.96 cm和1.9...     

三种枸杞组培快繁技术的研究

以枸杞、新疆枸杞、宁夏枸杞的种子为外植体进行组培快繁技术的研究,结果表明,通过组培法获得的外植体污染率低,而水培法获得的外植体污染率高。枸杞最适宜的初代培养基为MS+6BA 1.5mg.L-1+IBA0.2 mg.L-1,宁夏枸杞和新疆枸杞最适宜的初代培养基为MS+6BA 2.5 mg.L-1+IBA0.2 mg.L-1;三种枸杞最佳的继代培养基均为MS+6BA 0.5 mg.L-1+IBA1.0 mg.L-1,分化诱导率分别为60%、40%、44%,增殖倍数分别为4.5倍、3.0倍、3.0倍;在MS+6BA 0.5 mg.L-1+IBA0.1 mg.L-1培养基上三种枸杞的幼苗生长均表现为粗壮;生根培养基以1/2MS+IBA0.1 mg.L-1效果最佳。以腐殖土1∶蛭石1∶河沙1等量混合配制的移栽基质效果最佳,移栽成活率为96%。