小麦花药培养的基因型和培养基效应研究

小麦花药培养的基因型和培养基效应研究葛台明余毓君（华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室，武汉４３００７０）ＥＦＦＥＣＴＳＯＦＧＥＮＯＴＹＰＥＳＡＮＤＭＥＤＩＡＯＮＷＨＥＡＴＡＮＴＨＥＲＣＵＬＴＵＲＥＧｅＴａｉｍｉｎｇＹｕＹｕｊｕｎ（Ｈｕａｚｈｏｎｇ...     

粳稻花药培养几种培养基试验报告

我们在1990～1991年作了两年的诱导培养基和分化培养基的对比试验。结果表明,N_6基本培养基附加NAA的N_6-1诱导培养基和附加NAA和2,4-D的N_6-2诱导培养基的愈伤组织诱导率分别为30.3％和25.3％,它比附加2,4-D的常用的N_6。诱导培养基(愈伤组织诱导率为20.5％)高出47.8％和23.4％。NAA和2,4-D混用的N_6-2去分化培养基所诱导出的愈伤组织的器官分化率为最高,其绿苗分化率为57.4％,它比常用的N_5培养基(绿苗分化率为44.8％)高出28.0％。器官分化率最低的是单用NAA的N_6-1培养基,其绿苗分化率为36.4％,比N_6培养基低18.7％。附加NAA的N_6-1和N_6-2培养基的出愈速度和器官分化速度明显快于附加2,4-D的N_5培养基。N_6-1培养基和N_6-2培养基花药接种后18天就能看到愈伤组织,出愈速度要比N_5培养基提早3～5天。在N_6培养基上的形成的愈伤组织转移后10天只有部分绿苗出现,但N_4-1和N_6-2培养基上形成的愈伤组织转移后10天,可分化出1/3的绿苗,甚至转移后3天可以看到不少绿点分化。分化培养基来看,MS培养基的植物体分化效率明显高于N_6培养基,其绿苗率提高到2.5倍。     

基因型对春小麦花药培养力的影响

为促进春小麦花培育种亲本选择,对6组同一母本和6组同一父本的F_1组合的4个花药培养力性状进行分析。结果表明:单一亲本相同条件下,各基因型间绿苗产率与愈伤诱导率变化趋势相同,基因型间差异达显著水平;各基因型的绿苗分化率普遍高于白苗分化率,但祁30342/龙15-5814组合和克14-509/龙10-0629//龙10-1017组合的白苗分化率高于绿苗分化率。春小麦花药培养力存在基因依赖性。筛选出以龙35、龙春15-428为母本和龙35、龙13-3550为父本的F_1杂交组合,是花培材料的理想组合。     

不同培养基对辣椒花药培养的影响

以6个辣椒品种为试材,采用正交试验,研究不同培养基,添加不同浓度的NAA、6-BA,采取不同低温处理时间对辣椒花药培养愈伤组织诱导率的影响。结果表明,甜椒类型愈伤组织诱导率较辣椒类高,MS培养基添加0.50 mg/L NAA及0.50 mg/L 6-BA、低温处理48 h的诱导效果最为显著。     

晚播对不同基因型小麦花药培养中绿苗诱导率的影响

为了探讨提高小麦花药离体培养中绿苗诱导率的途径,本研究将66份小麦杂交组合材料分成花培组合、常规组合、复交组合3种不同的基因型组合,将其播种期推迟24 d,在小麦抽穗期取其花药进行室内愈伤组织诱导和绿苗分化培养。结果表明,经过晚播处理的小麦花培组合、常规组合、复交组合的绿苗诱导率分别为2.6％、1.5％、1.2％,分别比对照（正常播种期）提高1.8、1.0、0.6个百分点;愈伤诱导率分别为10.7％、9.1％、7.7％,分别比对照提高3.8、－2.8、－5.4个百分点。     

磁场预处理对花椰菜花药培养的影响

采用磁场强度300，500，700mT预处理大部分花粉发育处于单核中期和单核靠边期的花蕾，以提高花椰菜花药培养的愈伤组织诱导率和绿苗分化率，结果表明，磁场预处理可以明显提高愈伤组织诱导率，以均匀磁场预处理30min、磁场强度为300mT的效果较好，提高诱导率28.87%；经过磁场预处理，两种不同培养基的愈伤组织诱导率的差异比对照间差异明显缩小，即经磁场预处理的材料对培养基的选择性降低；在同一种诱导出的愈伤组织绿苗分化率的差异更明显，M2培养基上诱导出的愈伤组织绿苗分化率比M1培养基上的愈伤组织平均高13.2%-26.2%。     

不同培养基和激素对辣椒花药培养的影响

选用试验前期筛选出的易产生愈伤组织和胚状体的8个不同基因型辣椒进行花药培养,对基本培养基成分、激素种类和浓度、材料基因型等影响花药培养的因素进行研究.结果表明:1)NTH培养基为适宜于辣椒花药培养的最佳培养基,MS和B5培养基次之.2)以NTH为基本培养基培养红艳花药,0.5 mg/L NAA +1.0 mg/L KT + 0.3 mg/L BA +1.0 mg/L 2,4-D是花药愈伤组织诱导培养最适宜的激素组合;0.3 mg/L NAA +1.0 mg/L KT + 0.1 mg/L BA是花药胚状体诱导培养最适宜的激素组合.3)在相同条件下,不同基因型辣椒花药培养后的愈伤组织诱导率和产胚率均不同,愈伤组织诱导率为8.0% ~ 23.5%,胚状体诱导率最高为2%,最低为零.     

基因型对小麦花药培养的影响研究

为研究基因型如何影响小麦花药培养力,对几组单一亲本相同的组合F1基因型花药培养力进行了比较.结果表明:各组单一亲本相同的组合中,另一亲本的不同对愈伤诱导率、绿苗产率、绿苗分化率及白苗分化率均有很大影响.有的组配愈伤诱导率较低甚至为0,但相同亲本的其他组配却具有较高的愈伤诱导率;绿苗产率与愈伤诱导率基本具有相同的趋势,但有的组配愈伤诱导率较高,绿苗产率则相对较低,说明愈伤诱导率与绿苗产率之间没有显著的规律性.各组组合中,多数组合绿苗分化率高于白苗分化率,也有的组合具有较高的白苗分化率而绿苗分化能力很弱,说明不同组合分化绿苗和白苗的能力有所不同.因此,在花药培养时,应尽量选择绿苗分化率较高、白苗分化率较低的组配.     

不同培养基对苜蓿花药愈伤组织继代和分化的影响

将7种苜蓿品种(品系)(MT-2、MT-146、MT-328、MT-335、新牧1号、新疆大叶和KS220-97)的混合花药接种于N6大量元素+MS微量元素+MS铁盐+B5有机物+2,4-D 2mg/L+6-BA 0.5 mg/L的固液双层培养基上,诱导出愈伤组织,再转接到不同成分及添加物的培养基中培养,观察培养效果.结果表明:①在含MS、SH、N6的大量元素的培养基上的初代培养, MS或SH的效果好于N6,愈伤组织第5～9次继代培养中,N6大量元素培养基的继代培养效果最好.②花药愈伤组织继代培养基中添加AC、LH、PVP-40对愈伤组织的生长和防止褐变有明显作用.③继代培养中期,添加NAA超过0.5 mg/L时易褐化.④在N6大量元素培养基上的愈伤分化、生长表现好于其它培养基,1/2MS大量元素次之.⑤在分化培养的后期不加激素,有利于愈伤组织的生长.     

3个籼粳杂交F1的花药培养初探

选用以IRBB60为父本的3个水稻籼粳杂交F1为试验材料,研究不同基本培养基与不同激素配比使用对其花药培养的影响。结果表明:(1)M8基本培养基适合于T475/IRBB60和Hu7/IRBB60的花药培养,而沈农15/IRBB60更适合在SK3基本培养基上培养;(2)添加有2 mg/L 2,4-D、4 mg/L NAA和0.5 mg/L KT的诱导培养基的出愈率比添加2 mg/L 2,4-D和2 mg/L NAA的培养基高0.09～2.68个百分点,并且其对进一步诱导芽的再分化有较好的影响;(3)添加激素组合为1 mg/L 6-BA、1 mg/L NAA和2 mg/L KT的MS-2分化培养基对沈农15/IRBB60的绿芽分化率最高,可达31.34%。     

不同培养基及采花期对辣椒花药培养的影响

以5种辣椒为试材,研究不同培养基、采花期和基因型对辣椒花药培养的影响。结果表明：辣椒花药培养中,MS 培养基中花药褐化率、污染率均最低,膨大率最高,分别为33·2％、17·5％和39·4％;花药在3种培养基中反应不同,愈伤组织诱导率大小表现为 B5＝CP＞MS,胚状体诱导率大小为 MS＞CP＞B5。以 MS 为基本培养基诱导5种辣椒材料的单倍体,均能诱导出愈伤组织,国塔106愈伤组织诱导率最高,为1·18％,单身如意最低,仅为0·24％,杂6、8024和辛香8号诱导率为0·52％～1·03％。其中,只有杂6、8024和辛香8号3种材料诱导出胚状体,胚状体诱导率分别为0·06％、1·25％和0·05％,单身如意和国塔106均未诱导出胚状体。说明在相同的诱导条件下,不同基因型辣椒的单倍体诱导率存在很大差异。在盛花期采样,辣椒花药培养胚状体和愈伤组织诱导率最高,分别为1·482％和1·840％。     

水稻花培一次成苗的研究──Ⅱ．影响水稻花培一次成苗各主要因素的探讨

影响水稻花培一次成苗的主要因素为：（１）基本培养基、激素配比和基因型对一次成苗有重要作用．基本培养基以Ｎ′６的为最好；激素配比以２，４—Ｄ０．０２＋ＮＡＡ２．５０＋ＫＴ４－６ｍｇ／Ｌ为佳；３种基因型一次培养的绿苗率大小顺序为粳型品种Ｃ５７＞籼粳交（早香１７×Ｃ５７）杂种Ｆ１＞籼型品种早香１７．（２）培养基保持ｐＨ值５．８、蔗糖浓度８．５％，并添加丝氨酸、脯氨酸、精氨酸、天冬氨酸、丙氨酸各４０ｍｇ／Ｌ和谷氨酰胺４００ｍｇ／Ｌ，所获一次培养的绿苗率最高；添加０．１％活性炭的有抑制作用．（３）低温（９－１０℃）预处理对一次成苗有重要作用．早香１７以预处理５－１０ｄ的为宜，Ｃ５７以１０—１６ｄ的较好．恒温处理优于变温处理的．高温（３０℃）预培养的作用不大．接种后进行暗培养对一次成苗有利．     

籼稻材料特性和激素配比对花药培养效率的影响

以5个籼稻杂交组合F。的花药为材料,探讨诱导培养基和分化培养基中不同植物激素配比等因素对花药培养效果的影响。结果表明,诱导培养基中,激素浓度处理对籼稻花药的愈伤诱导率的影响有显著差异,最佳的诱导培养基激素组合为：2,4-D2．0＋KT1．0＋NAA3．0;愈伤诱导率达21．21％;分化培养基中,激素6-BA浓度为0．5mg·L^-1KT浓度为2．0mg·L^-1时,籼稻花药的愈伤平均绿苗分化率达到最大,为28．80％;不同的材料其愈伤诱导率和绿苗分化率存在显著差异。     

小白菜花药培养胚诱导和植株再生

以10个小白菜杂交种为试材,采用花药培养方法,研究胚状体发生及其再生植株的诱导方法.结果表明,不同基因型的小孢子胚状体发生频率有明显差异.有10个基因型诱导得到胚状体.最高的出胚率达到18.31%;适宜浓度的活性炭可以促进胚状体的诱导,培养基中添加谷胺酰氨可以提高胚状体的诱导率;1.0%的琼脂浓度为胚状体继代培养最适宜的浓度,MS 1.0%琼脂为小白菜小孢子植株再生最适宜的培养基.不同透性的封口膜对小白菜生根有很大的影响.     

影响小麦花药培养愈伤组织诱导率的几个因素

本文分析了影响小麦花药培养愈伤组织诱导率的几个因素。试验结果表明,不同杂交组合和不同培养基对花粉愈伤组织诱导频率的影响很大,同时材料对培养基有选择效应;冬、春杂交材料比冬小麦之间和春小麦之间杂交材料更易诱导愈伤组织;接种后的离体花药冷处理48小时能明显提高花粉愈伤组织诱导频率。     

基因型及外源因子对小麦花药培养一步成苗的影响

研究了不同基因型及几种外源因子在小麦花药培养一步成苗中的效应。结果表明 ,花药培养一步成苗的愈伤组织诱导率、绿苗分化率、白苗分化率及绿苗产量存在基因型间的差异。高蔗糖浓度有利于获得高频率的花药愈伤组织 ,但同时又提高了花药培养中白化苗频率。动力精 (KT)对花药愈伤组织诱导率影响的差异不大 ,但对绿苗分化率、绿苗产量及绿苗 /白苗 (G/ W)均有显著影响。在试验浓度范围内 ,随 KT浓度的增大 ,绿苗产量提高 ,绿苗分化率明显增加 ,而白苗分化率下降 ,因而 G/ W值明显增大。说明 KT主要是通过提高绿苗分化率和降低白苗分化率 ,增大 G/ W而提高花培一步成苗效率的。在与 KT的配合使用中 ,2 ,4 - D比 NAA更有利于提高小麦花药培养中的愈伤组织诱导率和苗分化频率     

四种培养基对小麦花药愈伤组织诱导率的影响

不同培养基对小麦(Triticum aestivum Linn.)花药愈伤组织诱导和分化的效果不同,以小麦花药为材料,对MS、N6、C17和K 4种培养基在小麦花药离体培养中愈伤组织的诱导作用进行了比较。结果表明,小麦花药在4种培养基中愈伤组织诱导率大小顺序为KC17N6MS。