亚洲百合‘穿梭’组培快繁体系的建立

以亚洲百合‘穿梭’为试材,采用植物组织培养的方法,研究了不同浓度激素对百合鳞片诱导、不定芽增殖、小鳞茎生根培养的影响,并筛选出适宜百合组培苗生长的移栽基质,以期为亚洲百合‘穿梭’的组培快繁体系的建立提供参考依据。结果表明：百合鳞片最佳诱导培养基为MS+0.5 mg·L^-1 NAA+0.5 mg·L^-1 6-BA+30 g·L^-1蔗糖+6 g·L^-1琼脂,诱导率最高可达74.44%,显著高于其他处理;最佳增殖培养基为MS+0.1 mg·L^-1 NAA+1.0 mg·L^-1 6-BA+30 g·L^-1蔗糖+6 g·L^-1琼脂,不定芽增殖数量最多,增殖系数为3.27;适合小鳞茎生根培养基为1/2MS+0.1 mg·L^-1 NAA+0.3 mg·L^-1 IBA+40 g·L^-1蔗糖+6 g·L^-1琼脂,平均生根数量为14.33,是其他...     

‘绿岭’核桃带芽茎段的组织培养和快速繁殖

以‘绿岭’核桃带芽茎段为试材，采用组织培养方法，研究了植物生长调节剂、珍珠岩对其快速繁殖、瓶内生根及移栽成活的影响，以期构建‘绿岭’核桃初代培养、继代增殖、瓶内生根和移栽驯化的完整体系，建立高效组培快繁体系。结果表明：茎段腋芽生长的最佳培养基为DKW+1.2 mg·L^-1 6-BA+0.012 mg·L^-1 K-IBA,培养30 d后初代苗高为31.48 mm;最佳继代增殖培养基为DKW+0.6 mg·L^-1 6-BA+0.010 mg·L^-1 K-IBA,增殖系数可达5.31;最佳瓶内生根培养基为1/2DKW+15 mg·L^-1 K-IBA,生根率51.85%;炼苗后移栽到培养土、珍珠岩(1∶1)+ABT 500 mg·L^-1混合基质中，成活率达33%以上。     

‘云想容’海棠茎段组织培养技术

以‘云想容’海棠当年生单芽茎段为研究对象,采用组织培养法,研究了不同消毒剂、消毒时间、不同生长素和细胞分裂素浓度对‘云想容’海棠组织培养的影响,以期建立高效快速的‘云想容’海棠组培快繁体系。结果表明:最佳的消毒方法为用75%酒精消毒30 s后,用0.1%氯化汞处理8 min,该消毒方法能明显降低外植体的污染率,对外植体造成的伤害较小,成活率高达83.3%;最佳腋芽诱导培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1,芽生长健壮且诱导率高达90%;MS+6-BA 0.5 mg·L^-1+TDZ 0.02 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1为最佳增殖培养基,增殖系数为8.63;一步生根法以培养基1/2MS+IBA 1.0 mg·L^-1较好,平均根长5.26 cm,生根率为73.3%,相比较而言,两步生根法可有效促进‘云想容’海棠的生根,生根率可达91.67%。     

不同激素对油用牡丹上胚轴萌发的影响

以‘凤丹白’胚根大于3cm的种子为试验材料,采用全因子试验方法,研究了GA3、NAA和6-BA 3种激素的不同浓度和时间对胚根种子的萌芽率、发芽指数和初萌期的影响,以期为苗木生产提供依据。结果表明:GA3500mg·L^-1处理16h,其萌芽率、发芽指数和初萌期分别为98.89%、0.28和77.00d,发芽指数显著高于对照、初萌期显著比对照提早了13.33d;NAA 100mg·L^-1和6-BA 100mg·L^-1对‘凤丹白’上胚轴萌发均没有明显的促进或抑制作用,300mg·L^-1 NAA和6-BA、500mg·L^-1 NAA和6-BA不论浸种时间长短均明显地抑制了‘凤丹白’种子的萌芽率和发芽指数;同时,500mg·L^-1NAA显著地延长了‘凤丹白’种子的初萌期,说明500mg·L^-1 NAA严重抑制了‘凤丹白’种子的生长发育。     

东方百合高效转基因体系构建及EPSP基因的导入

以东方百合‘西伯利亚’无菌鳞茎超薄切片(0.5～1.0 mm)为试材，通过PIC和2,4-D不同浓度筛选愈伤诱导培养条件，采用超薄鳞片直接分化及愈伤分化2种转化方式，测试对Cef、Kan及Hgy的耐受性，分析不同干燥预处理以及MES、AS对转化效果的影响，并通过EPSP基因的导入，验证基因转化阳性率及转化效果，以期优化百合遗传转化的技术参数，建立高效遗传转化体系并进行EPSP基因的导入。结果表明：PIC对百合愈伤诱导有良好效果，MS+1 mg·L^-1 PIC+0.3 mg·L^-1 NAA为最佳愈伤诱导培养基；抗生素敏感性测试发现，培养基添加75 mg·L^-1 Kan或20 mg·L^-1 Hyg结合250 mg·L^-1 Cef适宜抗性筛选；超薄鳞片及愈伤在60 min和30 min的干燥预培养下，阳性率均显著提高；MS+10 mmol·L^-1 MES+200μmol·L^-1 AS为重悬液处理，超薄鳞片获得48.3%的高效转化率，优于愈伤...     

赏食兼用百合京鹤高效组培再生体系的优化

百合是重要的高档蔬菜和观赏花卉,基于鳞片的高效组织培养再生体系是百合种球规模化生产繁育的基础。本试验首次使用草甘膦为诱导分化剂,优化赏食兼用百合品种京鹤鳞片外植体的组培再生体系。结果表明：京鹤鳞片不定芽最佳诱导培养基为MS + 1.0 mg · L^-16-BA + 0.1 mg · L^-1 NAA + 2.5 mg · L^-1草甘膦 + 30 g · L^-1蔗糖,诱导系数为6.46,显著高于常规诱导培养;最佳继代增殖培养基为MS + 0.5 mg · L^-16-BA + 0.1 mg · L^-1 NAA + 30 g · L^-1蔗糖,增殖系数为4.01;最佳鳞茎膨大培养基为MS + 90 g · L^-1蔗糖;最佳生根培养基为1/2MS + 0.3 mg · L^-1 NAA + 30 g · L^-1蔗糖,生根系数为23.59。     

‘唐半夏’无菌繁殖体系建立

以‘唐半夏’块茎为试材,采用组织培养的方法,研究了不同种类及浓度的植物生长调节剂对不定芽诱导、增殖、生根的影响以及电流刺激对不定芽增殖的影响,以期为‘唐半夏’无性快速繁殖体系的建立提供参考依据。结果表明：最适不定芽诱导培养基为MS+1.5 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 NAA,平均每个外植体诱导的不定芽数最多(9.38个)且诱导率为93.75%;采用电流刺激不仅提高不定芽的增殖倍数,且对‘唐半夏’植株的生长产生明显的促进作用。特别是20 mA、5 min处理下,不定芽增殖倍数最大(13.31倍),组培苗生长健壮且出现生根的现象。最适生根诱导培养基为1/2 MS+0.2 mg·L^-1 NAA,生根率为100%,生根数为23.75条。     

不同植物生长调节剂对'阳光玫瑰'果实品质的影响

以五年生葡萄品种‘阳光玫瑰’为试材,采用赤霉素（GA₃）和氯吡脲（CPPU）搭配不同植物生长刺激物复合施用,研究了不同浓度处理对‘阳光玫瑰’果实品质的影响,以期筛选出适合‘阳光玫瑰’使用的植物生长调节剂组合配方。结果表明：GA₃ 25 mg·L^-1+CPPU 2.5 mg·L^-1处理可明显提高果实香味;GA₃ 25 mg·L^-1+CPPU 5.0 mg·L^-1处理果实无核率达到90%,显著提高果实的可溶性固形物及还原糖含量,但同时也伴随着果实空心现象增多;GA₃ 25 mg·L^-1+CPPU 5.0 mg·L^-1+壳寡糖800倍处理的果实无核化效果最好,并且空心率也较低。综合各指标,GA₃ 25 mg·L^-1+CPPU 5.0 mg·L^-1+壳寡糖800倍处理效果最好。     

有性三倍体杂交兰‘黄荷兰’的快速繁殖

以‘黄荷兰’试管苗为试材,采用组织培养快速繁殖方法,研究了影响有性三倍体杂交兰‘黄荷兰’根状茎诱导、增殖、分化、生根壮苗和试管苗移栽的因素,以期建立‘黄荷兰’种苗工厂化生产技术体系。结果表明:横切茎尖的起始脱分化时间早于纵切,诱导率高于纵切。切割长度、外源激素、光照强度和有机附加物对根状茎的增殖影响显著,将根状茎切割成长0.50 cm接种到MS+6-BA 1.00 mg·L^-1+NAA 0.20 mg·L^-1+土豆80.00 g·L^-1+蔗糖30.00 g·L^-1+卡拉粉7.00 g·L^-1+AC 0.30 g·L^-1培养基中培养40 d,根状茎增殖系数为3.18。外源激素对根状茎的分化影响显著,将根状茎掰成长1.00 cm接入MS+6-BA 1.00 mg·L^-1+NAA 0.20 mg·L^-1+蔗糖20.00 g·L^-1+卡拉粉7.00 g·L^-1+AC 0.02 g·L^-1培养基中培养40 d,芽分化率和苗分化率分别为60.00%和57.50%。将4 cm高的苗转入1/2MS+6-BA 0.10 mg·L^-1+NAA 0.50 mg·L^-1+蔗糖20.00 g·L^-1+卡拉粉7.00 g·L^-1+AC 0.50 g·L^-1中培养50 d,平均株高和根数分别为7.32 cm和3.56条。4月和10月用水草移栽,试管苗成活率分别为98.67%和99.67%。上述研究结果说明,利用组织培养快速繁殖技术工厂化生产‘黄荷兰’种苗是可行的。     

太行菊组织培养技术研究

以太行菊叶片、叶柄、茎尖和茎段为试材,采用MS培养基,在其中添加不同的激素对太行菊的不同外植体进行培养,研究了濒临灭绝的太行菊再生植株的方法。结果表明:太行菊的叶片、叶柄作为外植体诱导出愈伤组织的诱导率分别为44.44%和44.11%,所需时间较长,而茎尖、茎段作为外植体诱导愈伤组织诱导率分别为48.44%和68.75%,培养时间较短。茎段最适合作为诱导愈伤组织的繁殖材料。为了使茎段能更好的诱导出愈伤组织,课题组又对诱导茎段愈伤组织的激素浓度组合进行了研究,A组:MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1,B组:MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 1.0 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1,C组:MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1,D组:MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 1.0 mg·L^-1+2,4-D 0.1 mg·L^-1。试验表明,C组激素浓度组合最适合太行菊茎段的愈伤组织诱导。35 d后愈伤组织不再增加后进行继代培养,45 d后将植株转移至生根培养基1/2MS+NAA 0.12 mg·L^-1中进行生根培养。     

大花蕙兰+豆瓣兰F1代原球茎和根状茎培养研究

以大花蕙兰‘大凤’(Cymbidium hybridium‘Dafeng’)与豆瓣兰‘太极圣梅’(C.serratum var.Goeringii‘Taijishengmei’)F₁代原球茎、根状茎为试材,采用在1/2MS培养基中添加不同植物激素的方法,研究了不同植物激素对大花蕙兰‘大凤’与豆瓣兰‘太极圣梅’F₁代原球茎与根状茎增殖和分化的影响,以期为兰属植物高效繁育提供参考依据。结果表明：以1/2MS+香蕉80.0 g·L^-1+碳粉0.5 g·L^-1为基本培养基,加入TDZ 1.0 mg·L^-1和NAA 0.2 mg·L^-1最有利于根状茎增殖,增殖率达到343.33%;基本培养基加6-BA 2.0 mg·L^-1和NAA 0.3 mg·L^-1有利于根状茎分化,分化率达到83.33%。原球茎的增殖最佳配方为基本培养基加TDZ 1.0 mg·L^-1和NAA 0.2 mg·L^-1     

喷施植物生长延缓剂对北美冬青春梢生长的影响

以三年生盆栽‘奥斯特’北美冬青(Ilex verticillata‘Oosterwijk’)为试材,采用叶面喷施的方法,以喷施清水为对照(CK),研究不同喷施次数下多效唑(PP333)、烯效唑(S3307)、矮壮素(CCC)对北美冬青盆栽苗春梢生长的影响,以期为培育高品质、观赏性好的盆栽苗提供参考依据。结果表明：PP333、S3307、CCC均对北美冬青春梢生长量、叶长、叶宽、叶面积有不同程度的抑制作用,均对北美冬青春梢增粗有一定促进作用。其中3 mg·L^-1 S3307喷施5次对北美冬青春梢生长量的抑制效果最好,春梢生长量比CK减小85.04%;200 mg·L^-1CCC喷施3次处理对春梢茎粗的促进作用最大,茎粗比CK增大15.67%;250 mg·L^-1 PP333、6 mg·L^-1 S3307、1 200 mg·L^-1 CCC均对叶长、叶宽、叶面积的抑制作用显著。植物生长延缓剂处理下各生长指标间的相关性分析表明,北美冬青春梢粗度与生长量、叶长、叶宽、叶面积间均呈负相关关系...     

矮生山茶‘恨天高’GA20ox1的克隆及其对转基因烟草株形的影响

根据山茶（Camellia japonica）同源序列设计特异性引物,利用同源克隆和3′,5′-RACE技术,从云南山茶（C. reticulata）矮生品种‘恨天高’茎尖组织中克隆出GA20–氧化酶（GA20-oxidase,GA20ox）基因,命名为CrGA20ox1（GenBank登录号：KP635268）,基因全长1 178 bp,开放阅读框1 146 bp,编码381个氨基酸。实时荧光定量PCR分析发现,GA20ox1在4种不同的山茶中均得到表达,其中乔木类的浙江红山茶（C. chekiangoleosa）GA20ox1表达量最高,其次是岳麓连蕊茶（C. handelii）及金花茶（C. nitidissima）,表达量最低的为矮生品种‘恨天高’。结果表明该基因的表达量高低与测试物种的株高有关。GA20ox1在4个物种不同组织中的表达模式基本一致,且在茎尖组织中的表达量均高于叶片。CrGA20ox1转基因烟草分析结果表明,过表达CrGA20ox1烟草株高约为野生型的3.6倍,而沉默表达 CrGA20ox1烟草株高约为野生型的一半。     

兔眼蓝莓‘提夫蓝’组培快繁

以兔眼蓝莓‘提夫蓝’的幼嫩枝条为试材，采用不同浓度和种类的药剂、培养基及生长素进行组培的方法，研究了杀菌剂、培养基、生长激素对外植体灭菌、丛生芽诱发、组培苗继代繁殖、组培苗生根和组培苗移植的影响，以期为构建全面、高效的蓝莓快繁系统提供参考依据。结果表明：外植体最佳灭菌方法为10%NaClO溶液消毒15 min,污染量减少至17.34%,萌芽数为9.71个；蓝莓茎段中诱发形成丛生芽的最适宜培养基为1/2WPM+1.5 mg·L^-1ZT+0.2 mg·L^-1IBA,诱发成功率为68.36%;组培苗最适宜继代生长培养基为1/2WPM+0.1 mg·L^-1 NAA+1.5 mg·L^-1ZT,增殖倍数为5.53,平均株高达5.15 cm;而组培苗最适生根培养基为1/2WPM+0.5 mg·L^-1IBA+200 mg·L^-1活性炭（AC）,其生根率、有效生根率、根长和生根数量分别为87.16%、87.16%、4.39 cm和6.32条；组培苗最适移栽基质是苔藓，移栽成...     

不同浓度调环酸钙对大葱幼苗生长的影响

以东森寒葱2号为试验材料,通过测定大葱苗期喷施调环酸钙(200、400、600、800 mg·L^-1)处理的形态指标、叶绿素和根系活力等指标,探究不同浓度调环酸钙对大葱种苗质量的影响。结果表明,调环酸钙能有效增加大葱幼苗的假茎粗、假茎长度和叶片叶绿素含量,提高根系活力、促进根系生长,且其适宜浓度为600 mg·L^-1。处理后21 d,与清水对照相比,600 mg·L^-1调环酸钙处理的假茎粗、假茎长和根系活力分别提高了22.0%、66.9%和65.7%;根系、假茎、叶片和全株干质量分别增加38.5%、48.4%、34.6%和37.9%。与200 mg·L^-1矮壮素处理相比,600 mg·L^-1调环酸钙处理的根冠比、壮苗指数和总叶绿素含量分别上升23.0%、37.0%和19.4%。综上,叶面喷施600 mg·L^-1的调环酸钙能有效提高大葱种苗质量。     

外源硒对葡萄叶片活性氧代谢及果实贮藏品质的影响

以六年生露地栽培葡萄‘夏黑’为试材,分别用0(CK)、100、200、300、400 mg·L^-1的亚硒酸钠溶液于果实转色期进行叶面喷施处理,研究硒处理对葡萄叶片活性氧代谢的调控,同时评价其对葡萄果实贮藏保鲜效果的影响,结合主成分分析筛选最佳的硒处理浓度,以期为外源硒在延缓和预防葡萄叶片早衰及葡萄果实保鲜中的应用提供参考依据。结果表明：与CK相比,300 mg·L^-1的硒处理显著提高了叶片中叶绿素含量、可溶性蛋白质含量、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性,降低了丙二醛(MDA)和过氧化氢(H₂O₂)含量。200 mg·L^-1的硒处理有效抑制了果实贮藏期间失重率的升高,延缓了硬度、维生素C、可溶性固形物和可滴定酸含量的下降,维持了较高的好果率。主成分分析表明,不同浓度硒处理对葡萄叶片活性氧代谢的调控和果实常温贮藏保鲜效果排名分别为300 mg·L^-1>200 mg·L^-1>100 mg·L^-1     

烯效唑对番茄幼苗嫁接愈合的促进作用及其机理研究

烯效唑(Uniconazole,S3307)作为赤霉素抑制剂，常用于调控植物生长发育，但是否影响嫁接愈合，目前尚不清楚。以番茄‘硬粉8号’为接穗材料，以‘砧爱1号’为砧木材料，于播种后15和21 d分两次叶面喷施0.25 mg·L^-1烯效唑，结果发现烯效唑处理抑制了接穗和砧木幼苗生长，至播种后27 d嫁接时，株高分别较去离子水处理的对照降低了20.58%和12.75%；嫁接后12～72 h，烯效唑处理降低了嫁接接合部GA15和GA8含量，促进了GA3、IAA、MEIAA、ICAld、TRP和iP7G积累；增加了接合部上方与下方IAA1相对表达量的差异，上调了接合部上方GA20ox1、IAA1和ARR17的相对表达量，下调了接合部下方GA20ox1和ARR17相对表达量。嫁接后6～168 h，烯效唑处理提高了嫁接接合部TMO6和CyclinB1;2的相对表达量，以及接合部上方WIND1、WOX4和VND7的表达量；使嫁接接合部上方与下方IAA1、ARR17、WIND1、TMO6、WOX4和VND7的表达更早趋于一致，木质部和韧皮部连接提前。另外，烯效唑处理的幼苗嫁接...     

报春石斛组培快繁技术体系的建立

以报春石斛蒴果为外植体,通过对种子无菌萌发和原球茎诱导、原球茎增殖及丛生芽诱导、生根壮苗以及移栽驯化的研究,以期建立报春石斛的组培快繁技术体系。结果表明:培养基MS+6-BA 1.0mg·L^-1+NAA 0.1mg·L^-1+蔗糖20g·L^-1最适报春石斛种子无菌萌发和原球茎的诱导;原球茎增殖及丛生芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg·L^-1+NAA 0.1mg·L^-1+香蕉泥100g·L^-1+蔗糖20g·L^-1,继代培养45d,增殖系数达8.2;最佳生根壮苗培养基为MS+6-BA 1.0mg·L^-1+KT 0.5mg·L^-1+NAA 0.2mg·L^-1+香蕉泥100g·L^-1+蔗糖30g·L^-1+活性碳1.0g·L^-1,培养3个月,生根率达100%,根系较长,苗壮;3—4月是桂林地区移栽报春石斛组培苗的最佳季节,生根苗在栽培基质Ⅰ(树皮∶水苔∶珍珠岩∶蛭石=10∶2∶1∶1,体积比)的长势好于栽培基质Ⅱ(树皮∶珍珠岩∶蛭石=10∶1∶1,体积比),成活率为92.3%。     

‘黄金梨’缺铁黄化叶片受GA3诱导复绿的机理研究

以‘黄金梨’缺铁黄化植株与正常植株为试材,于生长期黄化植株叶面喷施50、100、200和400 mg·L^-1 GA₃溶液,测定叶片中Fe、GA₃、GA₄、IAA和JA含量,对叶绿体进行了电镜显微结构观察,并运用荧光定量PCR技术分析了Fe代谢与GA信号转导相关基因的表达量。结果表明,外源GA₃处理后9 d,黄化叶均有不同程度复绿,叶脉复绿明显,叶身部分复绿,其中400 mg·L^-1 GA₃处理后12 d黄化叶复绿最明显。处理后9和12 d缺铁黄化叶片Fe含量显著高于清水处理对照。外源GA₃能诱导黄化叶片内FER1、FER2、FER3、FRO2、IRT1和FD1的表达,其中12 d各处理FER2和IRT1基因的表达量分别是对照10倍和40倍以上,说明外源GA₃促进了叶片内铁的贮藏、还原与转运相关基因的表达。外源GA₃处理显著提高了叶片中内源GA₃和GA₄含量,迅速诱导GID11和GID13基因的表达,其中50 mg·L^-1 GA₃处理,GID11表达量在3 d是对照的76.45倍。400 mg·L^-1 GA₃处理后12 d的叶片类囊体基粒片层较黄化叶片清晰,断裂片层少。试验结果初步揭示了GA₃诱导‘黄金梨’黄化叶复绿的机理。     

北美红杉组培快繁体系的建立与优化

以北美红杉1年生带芽茎段为外植体,通过基本培养基筛选和不同植物生长调节剂水平对比试验得到北美红杉组织培养的不定芽诱导、增殖、生根等生长阶段的优化配比培养基,以期建立北美红杉高效的快繁体系。结果表明:确定最佳消毒方法为75%乙醇消毒30 s,无菌水冲洗2次,再用0.1%氯化汞消毒处理10 min,无菌水冲洗4次;最佳不定芽诱导培养基配方为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.10 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂6 g·L^-1,不定芽诱导效果最好,诱导芽率高达2 153.3%,且芽生长健壮;最佳不定芽增殖培养基配方为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.10 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂6 g·L^-1,增殖系数高达15.8;最佳生根培养基配方为1/2MS+KT 1.5 mg·L^-1+IBA 1.0 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂6 g·L^-1,其生根率达90.0%,根多且粗长,植株高大健壮;最佳移栽基质为V_炉渣∶V_原土∶V_腐殖土=1∶1∶1,植株成活率达91.7%。