ZD制剂对小鼠急性软组织损伤的毛细血管通透性及血液流变影响的研究

为了观察自制外用ZD制剂对小鼠急性软组织损伤的疗效,初步探讨其作用机理,分别对小鼠采用腹腔注射醋酸溶液,观察自制外用ZD制剂对小鼠毛细血管通透性的影响;对小鼠造急性软组织损伤模型,测定应用自制外用ZD制剂后小鼠血液流变学指标,确定其对血液流变学的影响。结果 ZD制剂抑制毛细血管通透性增加(P0.01);降低血液流变学指标(P0.05或P0.01)。表明ZD制剂通过抑制毛细血管通透性和降低血液流变学的指标,对急性软组织损伤修复具有良好的促进作用。     

ZD制剂对马肌肉挫伤模型的治疗

建立马肌肉挫伤模型,应用超声学方法,观察肌肉厚度、肌肉血流信号等指标,探索ZD制剂肌肉挫伤的治疗效果。将15匹蒙古马随机分为试验药物组(ZD制剂)、阳性药物组(按摩乳软膏)和阴性对照组(生理盐水),10kg重物于2m高处自由下落捶击肩部肌肉4次,制作肌肉挫伤模型。于造模后2h、1d、3d、5d、7d、10d、15d、25d、30d用超声检测造模部位肌肉厚度、肌肉回声强度、肌肉内部回声和血流信号。在15d治疗期内,ZD制剂组造模部位消肿显著优于阳性药物组和阴性对照组,其中慢性期消肿效果显著优于阳性药物组,表明ZD制剂对肌肉挫伤肿胀有着良好的治疗效果,在慢性期效果更佳;ZD制剂组造模部位的局部肌肉血流信号发展优于阳性药物组和阴性对照组,表明ZD制剂有助于损伤部位新生血管产生和血流量的增加,对肌肉挫伤的治疗有着积极作用。试验表明ZD制剂对肌肉挫伤模型损伤部位消肿、促进血液循环有着显著的促进作用。     

ZD制剂对马肢蹄软组织损伤的临床疗效观察

为观察ZD制剂治疗马匹肢蹄软组织损伤的实际疗效,试验选择马匹肢蹄急性软组织损伤病例16例,随机分成两组,即治疗组和对照组,每组8例。治疗组马匹使用ZD制剂,对照组马匹给予按摩乳,药物用法用量同治疗组一样,连续治疗15 d后对马匹疼痛、肿胀和跛行等症状评分进行计算,比较和观察两组药物的疗效。结果表明:治疗后两组马匹患处压痛、肿胀、跛行评分比较差异显著(P0.05),表明两组药物均能明显缓解马匹患处压痛、肿胀和跛行情况。治疗组马匹在患处压痛缓解、肿胀消除和跛行改善三个方面的总有效率分别为100%、87.5%、87.5%,高于对照组的75.0%、62.5%、75.0%。说明ZD制剂在改善马匹急性软组织损伤引起的患处疼痛、肿胀和跛行等方面效果优于按摩乳。     

ZD制剂对小鼠毒性试验研究

为了研究用来治疗马属动物肢蹄急性软组织损伤的复合中药制剂ZD制剂的毒性作用,试验测定了ZD制剂对小鼠的半数致死量、最大耐受剂量,并进行了皮肤刺激试验。结果表明:ZD制剂水提物灌服小鼠未能检测出药物的半数致死量、最大耐受量,提示药物进入体内是安全的,且毒性作用小;用ZD制剂刺激小鼠皮肤,试验组小鼠与对照组小鼠无显著差异,提示该制剂外敷应用安全可靠。     

ZD制剂对肌肉软组织损伤模型马血清SAA和LA含量的影响

为了研究ZD制剂的作用机制,试验选择20匹健康蒙古马,将15匹造模后随机分为三组,即试验药物组、阳性药物组和阴性对照组,每组5匹,另5匹设为空白对照组。试验药物组给予ZD制剂进行治疗,阳性药物组给予按摩乳,阴性对照组给予空白膏,药物用法用量同试验药物组,每天1次,连续用药15 d;空白对照组不做任何处理。治疗期间分别检测各组马匹血清中血清淀粉样蛋白A(SAA)和乳酸(LA)含量。结果表明:与空白对照组相比,试验药物组马匹血清中SAA含量在试验第1,3天极显著升高(P0.01);与阴性对照组相比,试验药物组马匹血清中SAA含量在试验第1,3天极显著降低(P0.01),在试验第5天显著降低(P0.05);与阳性药物组相比,试验药物组马匹血清中SAA含量在试验第3天显著降低(P0.05)。与空白对照组相比,试验药物组马匹血清中LA含量在试验第1,3天极显著升高(P0.01),在试验第5天显著升高(P0.05);与阴性对照组相比,试验药物组马匹血清中LA含量在试验第1,5,7天显著降低(P0.05),在试验第3天极显著降低(P0.01);与阳性药物组相比,试验药物组马匹血清中LA含量在试验第3,5,7天显著降低(P0.05)。说明ZD制剂可降低模型马炎症急性期血清SAA和LA的含量,减缓损伤部位的炎症反应。     

ZD制剂对肌肉软组织损伤模型马血液生理指标及抗氧化作用的影响

为了研究ZD制剂的作用机制,选择20匹健康蒙古马,将15匹造模后蒙古马随机分为三组,即试验药物组、阳性药物组和阴性对照组,每组5匹,另5匹设为空白对照组。试验药物组给予ZD制剂进行治疗,每天1次,连续用药15 d。阳性药物组给予按摩乳,阴性对照组给予空白膏,药物用法用量同试验药物组,空白对照组不做任何处理,治疗中分别检测各组马匹生理指标、血液生理指标和血清抗氧化指标。结果表明:ZD制剂可降低模型马炎症初期白细胞数目,对早期炎症反应具有抑制作用。ZD制剂可提升模型马机体抗氧化能力,抑制脂质过氧化反应,调节体内自由基代谢平衡。     

ZD制剂对急性软组织损伤小鼠损伤处caspase-3表达的影响

为了探索ZD制剂对急性软组织损伤修复中caspase-3的表达影响,试验将360只小鼠随机分为空白对照组、阳性对照组、阴性对照组、ZD高剂量组、ZD中剂量组、ZD低剂量组,每组60只,除空白对照组外其余各组采用重物砸伤法建立急性软组织损伤模型,进行组织形态学、caspase-3活性、免疫组织化学检测,观察用药后第2小时及1,3,5,7,9,11,13,15,21天组织损伤修复的情况。结果表明:建模后除空白对照组外其余各组小鼠均出现不同程度的肌纤维断裂、肿胀、出血症状,呈现典型的急性软组织损伤的病理变化,提示建模成功;各组损伤处组织匀浆中caspase-3活性在损伤后第5天达到最大值,ZD高剂量组与阴性对照组比较,第3天差异极显著(P0.01);caspase-3大量表达于受损组织中,且ZD高剂量组在第3天、第5天和第7天均出现强阳性表达。说明ZD制剂的活血化瘀作用可能与其抑制caspase-3在损伤组织中的表达有关。     

蛋氨酸锌对肢蹄病绒山羊抗氧化能力和肢蹄病相关指标及肢蹄健康的影响

选择20只舍饲肢体病辽宁绒山羊母羊,随机分成5组,其中1组为对照组,2～5组为试验组,各组每只羊依次补饲蛋氨酸锌0、342、515、686、857 mg/d(折算为锌分别是0、60、80、120、150 mg/d)。饲养60 d后,采集静脉血样测定营养代谢指标、抗氧化指标和骨关节损伤生物学标志物,试验结束时连续3 d观察试验羊肢蹄状况。结果表明:随着蛋氨酸锌补饲量的增加,血清INS和PG含量均呈现降低趋势,其中4、5组的INS和PG显著(P<0.05)低于对照组,血糖呈增加趋势,其中4、5组显著(P<0.05)高于1组。血清UA含量呈降总体低趋势;血清UN水平呈总体增加趋势,试验5组显著(P<0.05)高于对照组。血清GSH-PX、SOD、CAT、GSSG活性呈增加趋势,其中4、5组GSH-PX、CAT、GSSG显著(P<0.05)高于对照组,4、5组的SOD和CAT活性极显著(P<0.01)高于对照组;血清MDA呈降低趋势。血清COMP、CTX-Ⅱ和PⅡANP含量都呈降低趋势,其中5组COMP、CTX-Ⅱ的含量显著(P<0.05)低于对照组。经观察发现补饲蛋氨酸锌后肢蹄病羊的关节肿大、关节僵直、跛行、跪地膝行等症状得到明显改善。结论:在舍饲肢蹄病羊日粮中添加120～150 mg/d蛋氨酸锌显著提高了机体抗氧化能力,保护了关节软骨免受损害,对促进肢蹄病羊恢复具有明显作用。     

牦牛不同年龄肌肉组织microRNA表达谱及生物信息学分析

旨在挖掘牦牛不同年龄肌肉组织中miRNA表达谱,分析其生物学特征,以探索其在牦牛肌肉发育过程中的调节模式。本研究构建0.5、2.5、4.5和7.5岁肌肉组织的4个小RNA文库,利用Solexa技术进行测序,用生物信息学方法和RT-qPCR技术对测序结果进行分析和验证。结果,获得各miRNAs分别在4个年龄段肌肉组织中的表达量,在7.5岁肌肉组织中发现58个共同与0.5、2.5、4.5岁差异表达的miRNAs,其中53个miRNAs在7.5岁肌肉组织中显著下调,5个显著上调。运用R语言进行GO富集和KEGG信号通路分析,58个miRNAs可能通过PI3K-Akt、MAPK、Ras和肌动蛋白细胞骨架调节通路(regulation of actin cytoskeleton)参与调节牦牛肌肉细胞的增殖与分化,且PI3K-Akt、MAPK、Ras 3个信号通路共同靶向53个靶基因,说明3个信号通路相互关联。随机选择8个miRNAs进行RT-qPCR验证,结果表明其中7个miRNAs的表达趋势与测序结果一致。结果表明,牦牛肌肉发育可能受到多种miRNA的调控并涉及多个信号通路,有助于构建肌肉组织中miRNA的调控网络,为进一步研究miRNA调控哺乳动物肌肉发育奠定了理论基础。     

Triiodothyronine Has No Enhancement Effect on the Osteogenic or Chondrogenic Differentiation of Equine Adipose Tissue Stem Cells

The effects of two concentrations of triiodothyronine (T3; 0.01 and 1,000 nM) on the osteogenic and chondrogenic differentiation abilities of equine adipose-derived mesenchymal stem cells (AD-MSCs) were evaluated. The osteogenic study evaluated the effect of T3 using alkaline phosphatase activity (ALP) assay; cell viability and density; and formation of mineralized nodules at Days 7, 14, and 21 in culture. The chondrogenic study tested the effect of T3 through ALP assay, mitochondrial metabolism, cell density, and periodic acid–Schiff-positive (PAS+) matrix percentage at Days 7 and 14. In both experiments, analysis of variance was used to compare averages through the Student–Newman–Keuls test. In the osteogenic study, no differences in any variable were detected between groups at Day 7. At Day 14, 0.01 nM T3 reduced cell density and the number of mineralized nodules despite the increase in ALP activity and mitochondrial metabolism (P < .05). ALP activity increased at 1,000 nM T3 concentration (P < .05). At Day 21, 0.01 nM T3 treatment increased ALP activity compared with control treatment (P < .05). At 1,000 nM concentration, T3 reduced mitochondrial metabolism and cell density (P < .05). In the chondrogenic study, the two T3 concentrations increased cell density compared with control treatment at Day 7. At Day 14, higher T3 concentration reduced mitochondrial metabolism, ALP activity, cell density, and PAS+ chondrogenic matrix percentage compared with control treatment (P < .05). Thus, T3 addition to equine AD-MSC cultures has no enhancement effect on osteogenic or chondrogenic differentiation and may, in fact, negatively affect cell density and matrix synthesis depending on hormone concentration and culture time.     

饲养方式对滩羊羔羊肌肉及脂肪组织中脂肪酸组成的影响

为探究饲养方式对滩羊羔羊肌肉和脂肪组织中脂肪酸组成的影响,试验选择24只健康且体重相近（14.16 kg±0.58 kg）的2月龄滩羊羔羊随机分成舍饲组和放牧组,每组12只,于4月龄屠宰取其背最长肌、股二头肌、膈肌、皮下脂肪、肾周脂肪、尾部脂肪,用气相色谱仪测定脂肪酸含量。结果表明：①在肌肉组织饱和脂肪酸中,与放牧组相比,舍饲组滩羊羔羊股二头肌丁酸、棕榈酸含量显著提高（P<0.05）,膈肌辛酸、月桂酸、肉豆蔻酸含量显著降低（P<0.05）。在肌肉组织不饱和脂肪酸中,与放牧组比较,舍饲组滩羊羔羊背最长肌棕榈油酸、花生四烯酸含量显著降低（P<0.05）,γ-亚麻酸、α-亚麻酸含量显著提高（P<0.05）,二十碳五烯酸（EPA）、n-3多不饱和脂肪酸（n-3 PUFA）极显著提高（P<0.01）;股二头肌花生四烯酸含量显著降低（P<0.05）,十七碳一烯酸、α-亚麻酸、EPA、n-3 PUFA含量极显著提高（P<0.01）;膈肌棕榈油酸含量显著降低（P<0.05）。②在脂肪组织饱和脂肪酸中,与放牧组比较,舍饲滩羊羔羊皮下脂肪十一碳酸、十五碳酸含量显著降低（P<0.05）,十三碳酸含量极显著降低（P<0.01）;肾周脂肪葵酸、肉豆蔻酸含量显著降低（P<0.05）,丁酸、硬脂酸含量极显著提高（P<0.01）;尾脂十一碳酸含量显著降低（P<0.05）。在脂肪组织不饱和脂肪酸中,与放牧组比较,舍饲滩羊羔羊皮下脂肪十八碳二烯酸含量极显著提高（P<0.01）,肉豆蔻油酸、棕榈油酸、γ-亚麻酸含量极显著降低（P<0.01）;肾周脂肪十八碳一烯酸、α-亚麻酸、n-3PUFA含量显著提高（P<0.05）,肉豆蔻油酸含量显著降低（P<0.05）,十七碳一烯酸、二十碳二烯酸、十八碳二烯酸含量极显著提高（P<0.01）;尾脂肉豆蔻油酸、棕榈油酸含量显著降低（P<0.05）,十八碳二烯酸含量极显著提高（P<0.01）。综上,不同饲养方式对滩羊羔羊肌肉和脂肪组织脂肪酸含量存在一定影响,舍饲滩羊羔羊股二头肌中饱和脂肪酸含量及肾周脂肪中不饱和脂肪酸含量显著高于放牧滩羊羔羊。     

甜菜碱对瘦素缺陷小鼠肌肉组织中脂质沉积的影响初探

为探究甜菜碱对瘦素缺陷（ob/ob）小鼠肌肉组织中脂质沉积的影响和潜在机制,本研究将12只同批次6周龄雄性、健康、体重差异不超过1 g的ob/ob小鼠随机均分为两组,分别作为试验组和对照组。其中对照组小鼠饮用纯净水,试验组小鼠饮用的纯净水中含1%甜菜碱。1个月后脱颈处死,采集肌肉样本,利用油红O染色、甘油三酯含量测定检测ob/ob小鼠肌肉组织中脂质沉积情况;利用气象色谱-质谱联用系统分析肌肉组织中脂肪酸组成及含量;利用qRT-PCR方法检测肌肉组织中基因表达的变化。结果显示：与对照组相比,1）补饲甜菜碱后ob/ob小鼠的体重增加量、肌肉组织中脂质沉积、禁饲血糖水平显著降低（P<0.05）;2）补饲甜菜碱后,ob/ob小鼠肌肉中脂肪甘油三酯脂肪酶（adipose triacylglyceride lipase,ATGL）、激素敏感性甘油三酯脂肪酶（hormone-sensitive lipase,HSL）以及葡萄糖转运蛋白4（glucose transpoter 4,GLUT4）基因的表达量极显著升高（P<0.01）;3）补饲甜菜碱后,ob/ob小鼠肌肉中饱和脂肪酸（saturated fatty acids,SFA）和多不饱和脂肪酸（polyunsaturated fatty acids,PUFA）含量显著升高（P<0.05）;4）补饲甜菜碱后,ob/ob小鼠肌肉中脂肪酸合成基因：脂肪酸合成酶（fatty acid synthetase,FAS）表达量显著降低（P<0.05）,乙酰辅酶A合成酶（acetyl-CoA synthetase,ACS）表达量无显著性变化（P>0.05）;脂肪酸氧化基因：过氧化物酶体增殖物激活受体α（peroxisome proliferator activated receptor alpha,PPARα）、酰基辅酶A氧化酶（acyl-CoA oxidase2,ACOX2）、长链酰基辅酶A脱氢酶（long chain acyl-CoA dehydrogenase,ACADL）、脂肪酸转位酶（fatty acid transposase, CD36）表达量极显著升高（P<0.01）。结果表明,ob/ob小鼠补饲甜菜碱后,肌肉组织脂肪酸合成基因表达降低、脂肪酸氧化基因表达升高,同时肌肉组织脂肪酸含量发生改变,最终导致肌肉组织脂质减少。     

防腐生肌膏对创伤组织中VEGF及bFGF mRNA表达水平的影响

试验以Wistar大鼠为研究对象,通过对皮肤缺损模型大鼠创面组织中VEGF及bFGF mRNA表达水平等指标的检测,初步揭示防腐生肌膏促进创伤愈合的作用机制。试验结果表明,防腐生肌膏能提高创面组织VEGF和bFGF mRNA表达水平,从而可以促进血管内皮细胞和成纤维细胞的增殖和分化,促进创伤愈合。     

蒙古斑点马黑、白毛色区域皮肤中相关基因的表达研究

本试验以蒙古斑点马为研究对象,分别对蒙古斑点马体躯白色区域和黑色区域皮肤的表型和差异表达基因进行分析并验证,试图解析蒙古斑点马毛色形成的分子机制,为今后保护和开发利用蒙古斑点马奠定基础.选择蒙古斑点马体躯白色和黑色区域皮肤制作组织切片,HE染色后在显微镜下观察其表型差异;对白色和黑色区域皮肤组织进行转录组测序,比较差异...     

钼暴露对雌性小鼠肾脏脂质过氧化损伤及 Smac蛋白表达的影响

试验旨在观察钼暴露对雌性小鼠肾脏脂质过氧化损伤及Smac蛋白表达的影响。选用60只35日龄健康雌性昆明小鼠,随机分成3组(对照组、补钼Ⅰ组、补钼Ⅱ组),分别饮用含钼浓度为0、200、400 mg/L的去离子水,连续染毒90 d后取样检测肾脏组织SOD活性和MDA含量,免疫组化法检测肾脏组织Smac蛋白表达。与对照组比较,补钼Ⅰ组SOD活性显著降低(P＜0.05),补钼Ⅱ组SOD活性极显著降低(P＜0.01);补钼Ⅱ组MDA含量较对照组显著升高(P＜0.05)。补钼Ⅰ组、补钼Ⅱ组小鼠肾皮质Smac蛋白表达极显著高于对照组(P＜0.01)。结果表明,钼暴露对小鼠肾脏能产生脂质过氧化损伤,钼可以通过上调线粒体促凋亡蛋白Smac蛋白表达参与肾脏的损伤过程。     

不同卵黄成分、大豆卵磷脂及β-环糊精胆固醇对马精子冷冻效果的影响

本研究旨在比较添加不同浓度的卵黄成分（全卵黄（EY）、卵黄浆蛋白（EYP）、低密度脂蛋白（LDL）及水溶性卵黄蛋白（livetin））、大豆卵磷脂（SL）及β-环糊精胆固醇（CLC）对马精子冷冻效果的影响。选择4匹成年英纯血种公马进行采精,试验1：以INRA82+3.5%的混合抗冻剂作为基础冷冻液,添加0、2%、4%和8%浓度的EY、LDL、EYP或水溶性卵黄蛋白;试验2：以4%全卵黄组为对照,添加1%、2%和4% SL;试验3：在INRA82+3.5%的混合抗冻剂+4% EY基础液中添加0、0.75、1.5和3 mg/mL浓度的CLC。结果显示,EYP、LDL及水溶性卵黄蛋白3种卵黄组分均对马精子冷冻具有显著保护作用（P<0.05）,但不同卵黄组分之间及与EY组相比保护效果无显著差异（P>0.05）;添加低浓度（1%）的SL精子冻融后活力与对照组（4% EY组）相比无显著差异（P>0.05）,但添加高浓度SL组（2%和4%）冻融后精子TM、PM及RAP值均显著低于对照组（P<0.05）;添加不同浓度的CLC解冻后精子活力与未添加组无显著差异（P>0.05）。研究结果表明,卵黄中EYP、LDL和水溶性卵黄蛋白均对精子保护有效,保护效果与EY无显著差异;1% SL可获得与卵黄相似的保护效果;在含有卵黄的基础冷冻液中添加CLC未能提高精子冻后活力。