苹果矮化砧木新品种‘冀砧2号’

苹果矮化砧木新品种‘冀砧2号’由‘SH40’实生后代中选出,嫁接亲和性好。红富士系苹果品种‘天红2号’嫁接到‘冀砧2号’中间砧上,定植翌年始花,3年生开花结果株率达90%,4年生树产量可达15 000 kg ? hm-2,成龄树株高是SH40的85%左右,枝展是SH40的75% ~ 85%,中短枝占总枝量的75%以上,产量可保持在45 000 ~ 52 500 kg ? hm-2,果实整齐度好,平均单果质量256.0 g,硬度8.7 kg ? cm-2,可溶性固形物含量14.5% ~ 16.5%,着色90%以上。适宜在河北省中南部或气候类似的区域应用。     

苹果对炭疽菌叶枯病抗性遗传的研究及其分子标记筛选

利用两个对炭疽菌叶枯病高抗的苹果品种（系）‘富士’和‘QF-2’及两个高感品种‘金冠’和‘嘎拉’为亲本配制了4个杂交群体‘富士’ב金冠’,‘金冠’ב富士’,‘嘎拉’ב富士’,‘富士’בQF-2’。以F1群体植株为试验材料,对苹果炭疽菌叶枯病的抗性进行鉴定评价和遗传分析。结果表明,4个群体中抗、感植株的分离比分别符合1︰1,1︰1,0︰1和1︰0的理论比值,初步推测苹果抗炭疽菌叶枯病性状受隐性单基因控制,抗病基因型为rr,感病基因型为RR和Rr。以‘金冠’ב富士’F1群体为试材,采用分离群体分组分析（BSA）方法,通过对均匀覆盖苹果染色体组的500对SSR引物的筛选,获得了一个与抗病性状相关的分子标记S0506206-24,该标记与抗性基因位点的连锁距离为9.8 cM。     

苹果无融合生殖砧木‘青砧 1 号’

 苹果无融合生殖砧木‘青砧1 号’是1999 年通过杂交育种获得,母本为平邑甜茶（Malus hupehensis Rehd.）,父本为柱型苹果株系CO（Malus × domestica Borkh.）。该砧木树体柱形,无融合生殖坐果率97.0% ~ 98.1%,种子繁殖,实生苗整齐,可以直接作为基砧嫁接‘嘎拉’、‘乔纳金’、‘烟富3’ 和‘烟富6’等主栽品种,表现亲和性好,成苗率高;嫁接树抗重茬病能力强,并且成花早,产量高,果实品质优,适于在环渤海湾、黄土高原等中国苹果主产区应用。     

苹果NBS-LRR1 基因的鉴定与表达分析

 NBS-LRR 蛋白是植物细胞内普遍存在的主要抗性蛋白家族,该家族的蛋白包含有NBS 结构域和LRR 结构基序,在植物抵御各种病原物的侵袭中发挥重要作用。从‘嘎啦’苹果中鉴定了一个NBS-LRR 类基因,命名为MdNBS-LRR1,（GenBank 登录号：JX126858）。该基因全长为3 116 bp,包含一个2 826 bp 的开放读码框,编码包含941 个氨基酸残基的蛋白质;其氨基酸序列含有典型的NBS-LRR类抗病基因所具有的NB-ARC 结构域。Blast 分析发现MdNBS-LRR1 与大豆NBS-LRR 类抗性蛋白具有较高的氨基酸序列一致性（60%）。RT-PCR 分析结果表明,MdNBS-LRR1 在‘嘎啦’苹果的幼叶、茎、功能叶、芽、皮和花等组织中均有表达,在幼叶中的表达量最高,茎中最低。苹果轮纹病病原菌侵染可促进MdNBS-LRR1 基因表达上调,接种后24 d 表达量最高,是对照的10.6 倍左右,另外,在‘嘎啦’苹果幼苗叶片中,SA、MeJA 和ACC 均可诱导该基因的表达,表明MdNBS-LRR1 基因的表达受到与抗病相关信号转导途径的调控。     

几种苹果矮化砧木在甘肃黄土高原的适应性

以矮化砧木M26、LS-1、SH6为试材,研究矮化砧木作为中间砧的苹果生长结果情况。结果表明,几个嫁接品种均能正常生长结果,但树体间有差异。以M26为中间砧的适应性最好,且嫁接后树体生长结果良好;以LS-1为中间砧的树体生长旺盛,直立性好;SH6能增强苹果树的抗旱性,但有小脚现象,且树体易发生黄化。黄土高原苹果矮化密植栽培的矮化砧木首选M26、LS-1,其次是SH6。     

苹果矮化自根砧嫁接苗繁育技术研究

 研究了田间条件下苹果矮化砧木苗和自根砧嫁接苗繁育的农艺参数。结果表明：锯末堆埋对砧木生根效果明显好于土和废弃菌棒，砧木生根率和生产量分别为87.33%和124 854 株 · hm^-2；6 月1日和7 月1 日基质堆埋对砧木生根效果明显好于5 月1 日和8 月1 日，砧木生根率分别达到80.33%和87.33%，砧木生产量分别达到121 172 和124 854 株 · hm^-2；矮化砧木G41、M9、Pajam1 和T337 在锯末基质中表现出较强的生根能力，生根率均达到80%以上，明显好于Pajam2 和M26；栽植密度分别为75 000和90 000 株 · hm^-2 的小区，嫁接苗生产量分别为65 110 株和68 670 株 · hm^-2，显著高于栽植密度分别为60 000 株和105 000 株 · hm^-2 的小区；秋季嫁接‘富士’品种的生长量和嫁接苗生产量显著高于春季，其侧枝数、干径和生产量分别为11.44 个、13.77 mm、和68 670 株 · hm^-2。论：在苹果矮化自根砧嫁接苗繁育中，矮化砧木繁育用锯末在6 月1 日-7 月1 日堆埋，砧木品种可选G41、M9、Pajam1 和T337，苗圃中砧木栽植密度为75 000 ~ 90 000 株 · hm^-2，在栽植当年的秋季嫁接‘富士’，第2 年出圃嫁接苗生产量达到65 110 ~ 68 670 株 · hm^-2     

葡萄活性赤霉素合成关键基因VvGA3ox家族的克隆和表达分析

在植物赤霉素合成代谢中,GA3ox可将几种非活性赤霉素转化为具生理活性的赤霉素。以葡萄有核品种‘黑比诺’和无核品种‘无核白’为材料,克隆葡萄的VvGA3ox基因家族成员,分析基因结构、进行染色体定位和系统发育树构建,检测其组织器官表达特性和在胚珠（幼种子）发育过程的表达变化。结果表明,葡萄基因组VvGA3ox家族有3个成员,cDNA长度分别为1 313、1 225和1 480 bp,都包含2个外显子和1个内含子结构。组织器官特异性表达分析表明,VvGA3ox1在胚珠中的表达很低,在根中高表达;VvGA3ox2和VvGA3ox3在花和胚珠中的表达较高。在受精后胚珠（幼种子）发育过程中,VvGA3ox家族基因的表达趋势存在差异,其中VvGA3ox1在‘黑比诺’与‘无核白’中均是在盛花后30 d时上调之后下降;VvGA3ox2在‘黑比诺’中20 ~ 30 d极速上调之后下降,相应地‘无核白’中是先缓慢下降之后上升;VvGA3ox3在‘黑比诺’中逐渐下降,对应地‘无核白’中是在10 ~ 15 d先上升后在20 ~ 45 d呈下降趋势并逐渐与‘黑比诺’中的表达持平。VvGA3ox在有核和无核葡萄品种中表现较大差异表达,与葡萄无核性状有一定关系。     

梨矮化砧木新品种‘中矮3 号’

 梨矮化砧木‘中矮3号’是从‘锦香’梨实生后代中选育出的。树体矮化紧凑,株高相当于乔化型‘早酥’梨的54%。繁殖系数高。作为梨矮化砧木与基砧和嫁接品种亲和性好,促进嫁接树矮化,早果,早期丰产,果实品质优。抗梨枝干轮纹病和枝干腐烂病,病情指数分别为15和27。适宜在白梨、砂梨、西洋梨及部分秋子梨栽培区域作中间砧应用。     

苹果半矮化砧木新品种‘青矮2号’

 ‘青矮2号’是由M₉自然实生后代中选育而成的苹果半矮化砧木。树冠中等,长势中庸,节间长2.3 cm。嫁接基砧（平邑甜茶）成活率88.2%,嫁接品种成活率100%。3年生矮化中间砧幼苗生长量278 cm,出圃率88.2%。作中间砧嫁接红富士,基砧/中间砧干周比为1.18,品种/中间砧干周比为0.81,接口无肿瘤,无气生根,亲和力强;嫁接红富士盛果期树,树高3.80 m,冠径3.63 m,矮化性与砧木M₇相近,属半矮化砧木;嫁接红富士树,2年生树结果株率为26.7%,7 ~ 14年生树平均产量43 140 kg · hm^-2;果实可溶性固形物为14.3%,硬度为8.1 kg · cm^-2,果形指数为0.85。适宜在山东、陕西、山西、河南、河北等苹果主产区应用。     

梨贝壳杉烯酸氧化酶基因PcKAO1 的克隆与表达分析

 以梨矮化砧木‘中矮1 号’新梢叶片为试材,根据苹果基因组中相关序列信息设计特异引 物,通过RT-PCR 的方法克隆了梨赤霉素合成过程中关键酶--贝壳杉烯酸氧化酶（KAO）基因的编码 框全长序列。该序列全长1 568 bp,开放阅读框（ORF）编码503 个氨基酸,相对分子量为57.59 kD,等 电点为9.47,氨基酸序列与其它物种已知的KAO 序列具有53.14% ~ 98.61%的相似性,且具有细胞色素 P450 家族蛋白典型的功能结构域和跨膜结构域,将该基因命名为PcKAO1,GenBank 登录号为 KC153027.1。用同样的方法克隆了对照梨品种‘早酥’（乔化）和‘锦香’（半矮化）的PcKAO1 基因, 通过比对分析发现3 个品种的PcKAO1 基因间仅有个别碱基差异,其编码的蛋白序列完全一致。RT-PCR 半定量分析表明：PcKAO1 基因在‘中矮1 号’各个检测的器官组织中均有表达,其中以种子和子房中的 表达量最高;在3 个品种的新梢叶片中,除新梢生长初期（5 月10 日）之外,其他时期矮化砧木‘中矮 1 号’均低于乔化和半矮化的对照品种‘早酥’和‘锦香’,而在这些时期‘中矮1 号’新梢生长逐渐减 缓乃至停长。     

苹果紧凑型品种和矮化砧木内源激素的变化

 以不同矮化程度的苹果品种、砧木和嫁接植株为试材, 研究了春梢旺长期茎尖和春梢停长期叶片的内源激素变化。结果表明, 与普通型品种相比, 紧凑型品种茎尖和叶片中的赤霉素(GA₁₊₃) 含量显著降低而细胞分裂素(CTKs) 含量显著升高, 紧凑型品种的CTKs/ GA₁₊₃约是普通型品种的4. 78～6. 24 倍。不同矮化程度的砧木间相比, 春梢停长期叶片中, M9 的IAA 含量比平邑甜茶降低了53. 7 %。以M26作中间砧, 显著降低了接穗叶片和基砧新根中的IAA 含量; 但以新红星作中间砧则影响较小。将M26中间砧与紧凑型品种组合, 与乔砧普通型植株相比, 春梢停长期叶片和新根中IAA 含量分别下降了46. 1 %和33. 3 %,CTKs/ GA₁₊₃是其2. 8～3. 6 倍, 其变化幅度大于单一应用矮化砧、紧凑型品种的植株。因此, 紧凑型、矮化砧具有不同的激素调节机制, GA、CTK在紧凑型品种矮化中起重要作用, 而矮砧的矮化可能与IAA 密切相关。     

苹果SUPERMAN家族基因的组织特异表达及MdSUP3的功能分析

通过半定量RT-PCR分析SUPERMAN家族基因在‘富士’苹果（Malus × domestica Borkh.‘Fuji’）叶芽、幼叶、花芽、花蕾、花、皮部组织和幼果中的表达模式,通过MdSUP3自主启动子驱动的GUS基因表达和MdSUP3异位表达分析其功能。结果表明,MdSUP3、MdSUP11和MdSUP9a在所检测的组织器官中均有表达,MdSUP9b主要在营养器官中表达,MdSUP5a、MdSUP1b主要在生殖器官中表达。MdSUP3启动子驱动GUS基因在植株根尖、幼叶、幼茎和花等器官中表达。超表达MdSUP3的转基因烟草植株矮化、节间缩短、叶片卷缩、花器官颜色改变和部分花器官形态异常;与对照相比,转基因烟草中ABA合成酶基因NtNCED3-2,花青素合成途径的NtDFR2和NtANS1基因表达显著上升,细胞分裂素氧化酶基因NtCKX和赤霉素氧化酶基因NtGA2ox4表达显著下降。异位过量表达删除C端DLELRL基序的MdSUP3基因不影响转基因烟草的生长发育,证明DLELRL是基因必不可少的功能域。     

不同砧木苹果树细根周转动态的研究

为了分析不同砧木苹果树细根的发生和周转动态,连续4年通过微根管技术研究不同砧木的5年生‘富士’苹果砧穗组合细根中的活根根长密度与死根根长密度的动态变化,以及细根年周转率和季节周转率。结果表明,乔砧树富士/八棱海棠的活根根长密度最大,矮化中间砧富士/M9/八棱海棠和富士/SH40/八棱海棠次之,矮化自根砧富士/M9、富士/SH40和富士/小金海棠最小,所有砧穗组合的活根根长密度随着树龄的增加而逐年减小。所有砧穗组合在夏秋季出现细根发生和死亡高峰期,乔砧树富士/八棱海棠的细根发生高峰期的活根根长密度和死根根长密度均最大。细根年周转率和季节周转率年度间差异大,矮化自根砧树细根的年周转率高于乔砧树。矮化自根砧和矮化中间砧树体ARLD低于乔砧树体可能与其致矮性相关。     

矮生山茶‘恨天高’GA20ox1的克隆及其对转基因烟草株形的影响

根据山茶（Camellia japonica）同源序列设计特异性引物,利用同源克隆和3′,5′-RACE技术,从云南山茶（C. reticulata）矮生品种‘恨天高’茎尖组织中克隆出GA20–氧化酶（GA20-oxidase,GA20ox）基因,命名为CrGA20ox1（GenBank登录号：KP635268）,基因全长1 178 bp,开放阅读框1 146 bp,编码381个氨基酸。实时荧光定量PCR分析发现,GA20ox1在4种不同的山茶中均得到表达,其中乔木类的浙江红山茶（C. chekiangoleosa）GA20ox1表达量最高,其次是岳麓连蕊茶（C. handelii）及金花茶（C. nitidissima）,表达量最低的为矮生品种‘恨天高’。结果表明该基因的表达量高低与测试物种的株高有关。GA20ox1在4个物种不同组织中的表达模式基本一致,且在茎尖组织中的表达量均高于叶片。CrGA20ox1转基因烟草分析结果表明,过表达CrGA20ox1烟草株高约为野生型的3.6倍,而沉默表达 CrGA20ox1烟草株高约为野生型的一半。     

苹果赤霉素氧化酶基因GA2ox、GA3ox和GA20ox家族全基因组鉴定及表达分析

通过生物信息学方法对苹果赤霉素氧化酶基因GA2ox、GA3ox和GA20ox的结构、化学性质、染色体分布、进化关系、启动子顺式作用元件和组织特异性表达进行分析,并通过实时荧光定量PCR对苹果花芽诱导过程中的表达水平进行测定。从苹果基因组里鉴定出41个赤霉素氧化酶基因,其中GA2ox类20个,GA3ox类14个,GA20ox类7个,除4号染色体外,其他染色体均有分布;其蛋白质分子量在13.15 ~ 60.17 kD之间,等电点预测值在5.50 ~ 9.81之间;通过聚类分析将这41个赤霉素氧化酶基因分为5个亚家族;基因结构和保守结构域分析发现这41个赤霉素氧化酶基因的外显子数1 ~ 5不等,且保守基序Motif 1、5、6、7、10为大部分基因所共有;根据苹果表达量数据库组织特异性分析发现这3类基因在不同品种、不同组织部位的表达量不同,其中在花和果实中表达量相对较高。通过‘长富2号’花芽诱导过程的转录组数据,挑选出8个基因（MdGA2ox4、MdGA2ox6、MdGA2ox9、MdGA2ox12、MdGA3ox5、MdGA3ox12、MdGA20ox1和MdGA20ox5）进行实时荧光定量PCR分析,结果发现,GA₃处理后,花后不同时期GA20ox类氧化酶基因表达量均下调,GA2ox类氧化酶基因表达量均上调,GA3ox类氧化酶基因表达量则出现相对波动的现象。     

苹果半矮化砧木新品种‘青矮 3 号’

 ‘青矮3号’是1978年从苹果矮化砧木M₉的自然实生苗中选育而成的半矮化砧木新品种。其树冠中等,长势中庸;作中间砧嫁接红富士树,3年生树全部结果,7 ~ 14年生树平均产量42 270 kg · hm^-2（M₂₆嫁接树为34 785 kg · hm^-2）,丰产性强;嫁接树的果实着色好,品质优,果形指数、果实硬度和可溶性固形物分别为0.87、7.8 kg · cm^-2、14.3%,与M₂₆嫁接树相当。嫁接红富士的盛果期树,树高3.83 m,冠径3.57 m,为M₂₆嫁接树的130%,属半矮化砧木;干性强,可不设立柱栽培;适宜在山东、河北、山西、陕西等苹果主产区应用。     

苹果砧木矮化性状评价研究

试验以12种苹果砧木为材料,测定其矮化性状相关的生理生化指标,对苹果砧木的矮化性状进行评价,并对矮化性评价指标相关性进行分析。结果表明,青砧1号和三叶海棠砧木年生长量比较小,矮化性状比较明显,苹果砧木细根根皮率与植株生长量呈显著正相关,枝皮率与植株生长量呈极显著负相关,这2项指标可以作为评价苹果砧木生长量的有效指标。     

嫁接辣椒光合特性及其对产量和品质的影响

 以‘卫士’（WS）、‘部野丁’（BYD）辣椒为砧木,以‘新丰2 号’（XF）辣椒为接穗进行 嫁接。以‘新丰2 号’自根嫁接辣椒为对照,研究了嫁接对辣椒的光合特性、产量和品质的影响。结果 表明：嫁接辣椒叶片的色素含量和净光合速率（Pn）多明显高于自根;‘卫士’为砧木（XF/WS）和‘部 野丁’为砧木（XF/BYD）的嫁接辣椒光补偿点分别为38.1 和50.9 μmo1 · m^-2 · s^-1,均低于自根对照,光 饱和点分别为981.0 和903.0 μmo1 · m^-2 · s^-1,均高于对照;嫁接与自根辣椒的表观量子效率（AQY）、CO2 补偿点和饱和点差异不显著,但XF/WS 的羧化效率（CE）显著高于对照;与对照相比,XF/WS 和XF/BYD 的产量分别提高了14.9%和8.5%,其果实的大小、形状、颜色及蛋白质、氨基酸、维生素C 和辣椒素含 量等变化不显著,XF/WS 的干物质与可溶性糖含量分别升高了7.1%和9.7%。‘卫士’和‘部野丁’作为 砧木具有较高的应用和推广价值。     

苹果矮化砧和矮化中间砧‘宫藤富士’在北京的抗寒性及矮化中间砧对‘宫藤富士’生长结果的影响

以25个矮化砧木苹果树和17个矮化中间砧嫁接‘宫藤富士’苹果树为试材,研究了不同类型矮化砧木1年生枝条和不同矮化中间砧‘宫藤富士’1年生枝条的半致死温度,以及17个矮化中间砧对‘宫藤富士’树体生长和产量的影响。结果表明:SH系矮化砧木抗寒性最强,同系内砧木半致死温度相近,‘SH8’‘SH9’‘SH12’‘SH28’与其他砧木差异明显,M系和MM系砧木抗寒能力最差;17个矮化中间砧嫁接的‘宫藤富士’1年生枝条半致死温度的差异与其中间砧枝条有相似的趋势,中间砧影响栽培品种的抗寒性。不同矮化中间砧嫁接‘宫藤富士’,7年生树高度、干径、覆盖率和总枝量等差异较大,以‘GX’和‘MM106’为中间砧的树最高,以‘MM106’和‘SH3’为中间砧的树体覆盖率最大,以‘M7’为中间砧的总枝量最大,以‘SH40’和‘SH6’为中间砧的平均株产最高,以‘SH18’和‘SH6’为中间砧的大果率最高。     

不同矮化中间砧对金冠苹果树体及根系生长的影响

本试验以嫁接不同矮化中间砧的2年生盆栽金冠苹果树为试材,研究不同矮化砧木对金冠树体及根系生长发育的影响。结果表明,不同矮化中间砧影响金冠苹果树体及根系的生长发育。中间砧为GM256的金冠苹果,树体高度及新梢生长量最大,除根系直径外,其余根系形态指标均最大,树体矮化效果最差;SH1树体矮化效果最好;SH6矮化中间砧木与接穗亲和性最好,辽砧2号组合的亲和性最差;d≤0.5mm根径级的毛细根为金冠苹果幼树根系中的主要组成部分。