产纤维素酶解淀粉芽胞杆菌分离株的生物学特性研究

对发酵黄芪样品中分离的1株产纤维素酶解淀粉芽胞杆菌的生物学特性进行了检测,试验结果表明,菌株在10℃~60℃环境均能生长,最适生长温度为35℃~40℃。pH5.0~8.0培养基均适宜菌株生长,其中最适pH为6.0。在37℃环境200r/min振荡培养的生长曲线在0~4h为延迟期,4h~12h为对数期,12h~24h为稳定期,24h以后为衰亡期。细菌37℃培养32h开始产生芽胞,在培养72h时芽胞形成率达到80.67%。菌株对多数抗菌药物敏感,且安全性良好。该菌株适应性强,生长条件较为宽松,这为其开发应用提供了依据。     

解淀粉芽孢杆菌SSY2颉颃霉菌物质的鉴定及其理化性质研究

试验旨在鉴定解淀粉芽孢杆菌SSY2的抗霉菌物质及其理化性质。通过活性组分分析、硫酸铵沉淀、超滤除盐等方法鉴定并提取抗菌物质;通过对抗霉菌物质产生的时间、酶活性、温度、酸碱度（pH）、稳定性及储存温度的检测初步确定其理化性质。结果表明,不同组分对霉菌的降解率不同,菌液上清液对霉菌的降解能力最强,菌液发酵液的降解能力次之,胞内液降解能力最差。因此,初步确定解淀粉芽孢杆菌SSY2的抗菌物质活性成分是一种胞外分泌物,主要存在于菌液上清液;经30%、60%、80%和100%饱和硫酸铵沉淀,确定最佳硫酸铵饱和浓度为60%;超滤纯化后得到分子质量大于3 ku的抗菌活性物质。理化性质检测结果表明,该抗菌物质能在对数期早期（24 h）开始产生;具有产蛋白酶活性,对胃蛋白酶具有一定抵抗力,但对蛋白酶K、碱性和中性蛋白酶的抵抗力较低;在60~121℃抗菌活性稳定,证明其对热不敏感;耐酸性较强,在pH 6.0~8.0环境中对霉菌的抗菌活性稳定;此外,抗菌物质具有良好的传代稳定性,可在4℃条件下长期保存。本试验结果可为后续研发霉菌生物防控制剂提供依据。     

解淀粉芽胞杆菌的安全性分析

评价对鲟源嗜水气单胞菌具有优良拮抗效果的解淀粉芽胞杆菌G1的安全性,以期推动其在水产养殖中的应用进程。通过特异PCR法检测了菌株G1的毒力基因,并采用纸片法分析了其对水产药物的耐药性,观察了其对小鼠和草鱼的毒力。结果表明,菌株G1不含有溶血素基因、肠毒素T基因、肠毒素FM基因;对诺氟沙星、恩诺沙星、新霉素、复方新诺明、甲氧嘧啶、链霉素、氧氟沙星、庆大霉素、复合磺胺等9种水产常用药物以及呋喃唑酮、环丙沙星、氯霉素、红霉素等4种水产禁用药物高度敏感;对四环素中度敏感。此外,菌株G1在105 cfu/g～109 cfu/g注射剂量下对小鼠和草鱼无致病性,对小鼠和草鱼的LD50大于109 cfu/g,为无毒菌株。     

解淀粉芽胞杆菌固态发酵当归培养基的研究

为筛选和优化解淀粉芽胞杆菌固态发酵当归培养基,以当归多糖含量为指标,采用单因素试验对当归固态发酵培养基成分筛选,采用响应面分析试验对培养基组分进行优化。结果显示,在所筛选成分中,最适宜菌株发酵的固态培养基成分为当归、黄豆粉、碳酸钙和水。优化的固态发酵培养基各组分含量分别为:当归320.914 g/L、黄豆粉109.918 g/L、碳酸钙1.532 g/L、水544.159 mL/L,37℃发酵培养72 h,固态发酵物中的多糖质量分数达24.91 mg/g。结果表明,优化的当归固态发酵培养基适宜解淀粉芽胞杆菌生长,易于多糖的释放,所筛选的发酵培养基原材料符合固态发酵产业化生产条件要求。     

拮抗犬小孢子菌芽胞杆菌的筛选和鉴定

为了寻找能够拮抗犬小孢子菌的细菌,本试验从健康犬、猫和貉粪便中筛选了抗犬小孢子菌的芽胞杆菌,经培养、染色特性和16S rDNA序列分析对其中抑菌谱最广的芽胞杆菌进行鉴定,采用平板对峙法测定所筛选芽胞杆菌对犬小孢子菌的抑制效果,用碘化丙啶对芽胞杆菌发酵上清处理的犬小孢子菌菌丝进行染色以初步分析抑菌机理。结果显示,共筛选到12株拮抗犬小孢子菌的芽胞杆菌,其中F-15株对犬小孢子菌的抑制率为64.28%,也可抑制金黄色葡萄球菌和沙门菌;F-15株的16S rDNA序列与HSB1株贝莱斯芽胞杆菌的16S rDNA序列相似度为100%;F-15株发酵上清处理的犬小孢子菌菌丝染色后,在荧光显微镜下可见红色荧光,表明其损伤了犬小孢子菌菌丝的细胞膜。本试验为贝莱斯芽胞杆菌及其代谢产物在防控犬小孢子菌等真菌危害中的应用提供了参考。     

1株降解黄曲霉毒素B1的解淀粉芽胞杆菌的分离鉴定及其体外脱毒效果

旨在筛选出能够高效降解黄曲霉毒素B1 (AFB1)的菌株,并对其脱毒活性组分的脱毒效果进行研究,本研究以香豆素为唯一碳源对目标细菌进行初筛,以对AFB1的降解率为指标进行复筛,并从形态学、生理生化试验和16S rDNA序列分析对筛选菌株进行鉴定;通过测定该菌株不同发酵组分对AFB1的降解率,来定位其脱毒活性组分,同时采...     

高寒草甸牧草内生解淀粉芽胞杆菌261MY6发酵工艺优化

为提高生防菌株解淀粉芽胞杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）261MY6的生物量,本试验对高寒草地内生细菌解淀粉芽胞杆菌261MY6生长温度、pH和生长周期等进行测定,并结合单因素试验和正交设计试验对其发酵培养基和发酵条件进行优化。结果表明,菌株261MY6最高生长温度为56℃、最低温度为4℃、致死温度为95℃和最适温度为28~36℃,最适pH值为5~7,在5 h进入对数生长期,在10 h时进入稳定生长期。最优发酵培养基为：牛肉膏3 g,乳糖25 g,MgSO₄ 3 g,酵母膏7 g,水1000 mL。最优发酵条件为：温度32℃,接种量14%,装液量40 mL·（150 mL）^-1,摇床转速210 rpm,pH 7。最优条件下,发酵261MY6,最佳放罐时间为30 h,活菌数达2.37×10¹² CFU·mL^-1。该结果为菌株261MY6开发为微生物菌剂奠定了基础。     

鱼粉中蜡状芽胞杆菌的分离鉴定及其致病性研究

本文在国内首次报道了由蜡状芽胞杆菌引起的腹泻病。某鸡场鸡群因饲喂了某批鱼粉而引致发病, 经检查证明鱼粉中含有蜡状芽胞杆菌, 经计数为６０ ×１０６ 个／ｇ , 远远超出鱼粉的卫生标准。文中对该菌的致病性进行了初步研究, 结果可致死小鼠, 药敏试验结果表明该菌对蒽诺沙星、环丙沙星敏感。该研究表明, 对饲料尤为鱼粉的卫生问题, 即饲料源性疾病问题应引起畜牧及兽医工作者的密切注意。     

梅花鹿蜡状芽胞杆菌的分离鉴定

某鹿场梅花仔鹿突然发病,出现排血便等,症状后24小时内死亡,死后腹部迅速膨大,显著的病理剖检变化为肠道内严重出血,发病12只,全部死亡,致死率为100%。为澄清病因,采集病料,进行病原分离鉴定,报告如下。     

鹑梭状芽胞杆菌的分离鉴定

用色氨酸磷酸琼脂培养基,采用厌氧培养的方法,对从泰安、菏泽、聊城等地送检的疑似鸡溃生肠炎的病死鸡进行了鹑梭状芽胞杆菌的分离,并对谝菌的培养特性、生化特性、对药物的敏感性、致病性等进行了测定。     

解淀粉芽孢杆菌SSY1株的安全性试验

为评估1株产纤维素酶的解淀粉芽孢杆菌SSY1株的安全性,本试验对其进行了急性毒性、慢性毒性、细菌易位、代谢产物及药敏等安全性试验。急性毒性试验分为高剂量组（1.30×10¹⁰ CFU/mL）、中剂量组（0.90×10¹⁰ CFU/mL）、低剂量组（0.65×10¹⁰ CFU/mL）和生理盐水对照组,一次性灌服后观察14 d,处死存活小鼠,剖检。慢性毒性试验分为高剂量组（0.65×10¹⁰ CFU/mL）、中剂量组（0.65×10⁹ CFU/mL）、低剂量组（0.65×10⁸ CFU/mL）和生理盐水对照组,各组灌服1次/d,连续灌服30 d。结果表明,急性毒性试验小鼠的精神、食欲、行为、粪便等均未见异常,试验鼠全部存活,剖检未见病理变化;慢性毒性试验小鼠均无异常临床变化,剖检小鼠也未见病变,高、中、低剂量组及对照组间小鼠增重、饲料利用率、血液学指标、血液生化指标及脏器系数均差异不显著（P>0.05）;解淀粉芽孢杆菌SSY1菌株在小鼠体内未发生易位,氨基脱羧酶、吲哚试验均为阴性,在测定的24种常用药物中,除林可霉素耐药外,菌株对其余23种药物均敏感。试验证实,解淀粉芽孢杆菌SSY1株的安全性良好。     

鹅源栗褐芽胞杆菌的分离和鉴定

为了鉴定从狮头鹅心血中分离到的芽胞杆菌.本研究进行了一系列生理生化试验和动物致病性试验,根据试验结果可鉴定该芽胞杆菌为栗褐芽胞杆茵.同时,提取了该芽胞杆菌的基因组DNA,用细菌16SrRNA基因的通用引物,经PCR方法成功扩增出其部分16S rRNA基因,克隆后测序表明其全长1 516 bp,G+C含量为55%.该序列GenBank登录号为EU717967.BLAST在线分析显示其与栗褐芽胞杆菌的16S rRNA基因序列一致性>99.5%,从分子水平进一步证实了该菌为栗褐芽胞杆菌.将其回归动物试验结果表明:以1×10~8CFU/只的接种剂量对鹧鸪、鹌鹑的致死率为60%,对狮头鹅的致死率70%.     

鹑梭状芽胞杆菌外毒素的分离与特性研究

用色氨酸磷酸液体培养基厌氧培养, 蔡氏滤器过滤, 以饱和硫酸铵沉淀, 制备了鹑梭状芽胞杆菌外毒素, 经检测该毒素的稳定性较差, ６０ ℃１０ 分钟即可破坏, 经 Ｓ Ｄ Ｓ聚丙烯酰胺凝胶电泳分析证明, 该毒素至少有１１种蛋白成分, 分子量在３００００ ～６７０００ 之间, 静脉注射小鼠０２ ｍ ｇ 可引起死亡, 经口灌服雏鸡, 可出现肝脏坏死和肠粘膜溃疡。     

蜡样芽胞杆菌生长特性的研究

将蜡样芽胞杆菌菌种作１０＾－１～１０＾－４稀释,吸取不同浓度的菌液,分别接种到甘露醇卵黄多粘菌素平板培养基（ｍｙｐ）上,３７℃培养２０h发现,１００倍稀释的皿中 ,菌落、脂肪晕及培养基均呈深红色,ｐＨ８．２～８．５;１０００倍稀释的车中,菌落呈白色或淡红色,脂肪晕及培养基呈粉红色,ｐＨ６．８～７．０;而１００００倍稀释的皿中,菌落微红或微黄,淡红色培养基衬托着８淡红色晕,ＰＨ６．５。     

产乳酸芽胞杆菌分离以及生物学特性研究

一、材料和方法 1．土样。采自金华种猪场土样3份。2．培养基。（1）改良MRS培养基：α-甲基葡萄糖苷10．0克．酵母提取物5．0克．际胨10．0克．肉浸膏5．0克．乙酸钠5．0克．柠檬酸铵2．0克．磷酸氢二钠2．0克．山梨酸钾1．0克．硫酸镁0．1克．溴甲酚绿0．0224克．硫酸锰0．05克．蒸馏水1000毫升．pH5．5。     

蜡样芽胞杆菌BC983的鉴定及生态效应的研究

从健康鹿的粪便中分离到一株需氧的产芽胞革兰氏阳性大杆菌,经生理生化鉴定确定为蜡样芽胞杆菌（Ｂａｃｉｌｕｓｃｅｒｅｕｓ）。小鼠腹腔感染２５亿菌不致死。给育成鹿口服１０亿菌无异常反应。该菌的芽胞能耐受１００℃３０分钟煮沸。实验确定该菌在７％的氯化钠、４０％的牛胆汁中生长,生物夺氧试验表明,该菌能争夺环境中的氧,促进厌氧菌生长,用８亿活菌给育成鹿口服治疗大肠杆菌腹泻,治愈率为９１６％,据此,该菌可作为生态菌用于预防和治疗动物的细菌性腹泻病。     

解淀粉芽孢杆菌的分离鉴定及其对嗜水气单胞菌抑制作用研究

本试验从鲫鱼肠道中分离到1株芽孢杆菌,经生物学特性测定及16S rRNA测序分析,鉴定该分离菌株为高产蛋白酶的解淀粉芽孢杆菌(命名为JX001).对该分离菌进行嗜水气单胞菌体外抑菌试验,结果发现有明显的抑菌圈和抑菌带,说明该分离菌对嗜水气单胞菌具有较强的抑制作用,在养殖水中加入分离菌JX001可防止嗜水气单胞菌的暴发;同时分离菌JX001在生长代谢过程中产生大量的蛋白酶,可有效地促进蛋白质水解,用于蛋白质饲料的降解.     

解淀粉芽孢杆菌SC06对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠免疫功能的影响

通过连续3 d腹腔注射免疫抑制剂环磷酰胺(CTX)建立BALB/c小鼠免疫抑制模型,研究解淀粉芽孢杆菌SC06对其体液和细胞免疫功能的影响。结果表明:相比对照组,CTX会显著降低小鼠血清抗体滴度、溶血空斑数、吞噬细胞呼吸爆发活性及单核巨噬系统廓清指数K(P0.01),降低其体液和细胞免疫功能;同时显著提高小鼠脾脏CD3+、CD4+细胞数和CD4/CD8(P0.01),降低Th1和Tc1细胞数(P0.01),抑制细胞免疫反应,但对NK细胞杀伤活性和淋巴细胞增殖功能无影响(P0.05);解淀粉芽孢杆菌SC06能显著提高CTX降低的吞噬细胞呼吸爆发活性及单核巨噬系统廓清指数K(P0.01),其他体液和细胞免疫指标相比CTX组无显著差异(P0.05)。以上结果说明,解淀粉芽孢杆菌SC06对免疫抑制小鼠的体液及细胞免疫功能起到部分恢复和增强功能。