香蕉枯萎病内生生防菌H4-3抑菌蛋白提取及抑菌活性研究

铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa H4-3菌株是福建省农科院农业生物资源研究所微生物研究中心从香蕉植株中分离到的一株内生菌,该菌株对香蕉枯萎病病原菌具有很强的抑菌活性,初步判断其活性物质为大分子蛋白.采用硫酸铵沉淀方法提取H4-3菌株的抑菌蛋白,研究不同硫酸铵浓度对H4-3菌株抑菌活性的影响,结果表明：随着硫酸铵浓度的提高,H4-3菌株抑菌蛋白粗提液的抑菌活性逐步提高,其盐析后的上清液抑菌活性则逐步降低,70％饱和度的硫酸铵处理即可完全沉淀.     

盐析法快速分离鸡蛋清卵白蛋白

鸡蛋清原液用pH值9.0的Tris-HCl缓冲液稀释5倍,4℃下静置至少6h,采用30％～ 80％不同饱和度的硫酸铵分离卵白蛋白,采用Bradford法测定盐析后蛋白含量,SDS-PAGE检测其纯度,结果表明,60％饱和度的硫酸铵分离鸡蛋清卵白蛋白效果较好.     

枯草芽孢杆菌菌株A抗菌蛋白的分离纯化及抗真菌机理

[目的]揭示生防菌枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)菌株A产生的抗真菌蛋白的性质及作用机理.[方法]采用硫酸铵沉淀菌株A发酵液获粗蛋白;采用DE52离子交换层析技术对粗蛋白进行分离纯化;对具抗真菌活性的纯化组分采用MALDI-TOF-MS进行结构分析;以玉米小斑病菌(Bipolaris maydis)为...     

2步盐析法纯化螺旋藻中藻蓝蛋白

为了提高藻蓝蛋白的纯度,研究采用两步盐析法(1步除杂,2步沉淀)对螺旋藻中的藻蓝蛋白的纯化方法进行考察。从盐析时间、硫酸铵饱和度和p H 3个因素考察,对两步盐析工艺进行优化。结果表明,除杂最优工艺为:硫酸铵饱和度20%,p H为6. 8,盐析时间20 min,沉淀最优工艺为:硫酸铵饱和度40%,p H6. 8,盐析时间15 min,最终得到纯度为2. 77的藻蓝蛋白。     

枯草芽孢杆菌QM3对番茄早疫病菌的拮抗机制初探

枯草芽孢杆菌QM3是从青海牦牛粪中分离筛选的一株高效桔抗菌株,尤其对番茄早疫病菌有显著的抑菌效果,为了揭示其抑茵机理,采用杯碟对峙生长和透明圈的方法可知．QM3菌株可以产生抗菌物质和胞外水解酶,此外,还有竞争生长空间和营养物质的趋势。经显微直接观察发现,QM3菌株对病原茵丝有明显的抑制生长和致畸作用。利用玻片微室培养法研究了QM3发酵液对病原茵孢子和芽管的影响．结果显示其对病原茵孢子的萌发和牙管伸长均有极显著的抑制作用（p〈0．01）。这一结果揭示了QM3菌株是通过多种抗茵机制的协同作用有效抑制番茄早疫病菌的．这为QM3菌株进一步的生防应用提供理论依据。     

嗜热脂肪芽孢杆菌中普鲁兰酶的分离纯化

嗜热脂肪芽孢杆菌经细胞破碎机破壁后,采用硫酸铵盐析法除杂蛋白,DEAE-32阴离子交换纤维素纯化胞内普鲁兰酶,并通过L9(34)正交试验优化盐析除杂蛋白工艺条件.结果表明:菌体与缓冲液比1:3、硫酸铵饱和度40％、pH值7.0分离效果最佳,其中,pH值对分离效果的影响差异性显著(F＞F0.05);纯化后的普鲁兰酶比活力...     

枯草芽孢杆菌抗菌蛋白的性质及对魔芋软腐病菌的抑制作用

以枯草芽孢杆菌为试验材料,以魔芋软腐病致病菌胡萝卜软腐欧文氏杆菌属胡萝卜软腐菌亚种(Erwinia carotovora var.carotovora,简称软腐菌)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aure,简称金葡菌)作指示菌,采用抑菌圈法,利用不同浓度硫酸铵盐析分离抗菌蛋白.结果表明,30%硫酸铵处理盐析的蛋白对软腐菌的抑菌活性最高;抗菌蛋白对软腐菌的抗菌活性在室温至60℃处理10 min时无明显影响,70℃处理10min,其活性仅下降17.1%;在pH值5.5～10.0的范围内抗菌蛋白活性无明显变化;经过氯仿处理后抗菌蛋白活性保持最好;胃蛋白酶可降解部分抗菌蛋白.     

苹果霉心病生防菌株抗菌蛋白的提纯与部分初报

对苹果霉心病具有优良防治效果的枯草芽孢杆菌ＸＭ１６菌株,是作者从七阳农学院农场苹果树上分离得到的一种拮抗菌株。ＸＭ１６菌株培养液经硫酸铵分级盐析和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００及ＤＥ３２柱层析后,分离纯化得到一种抗菌蛋白,该抗菌蛋白通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析测定的分子量为６００００,等电点约为５．５,偏酸性;ＸＭ１６菌株抗菌蛋白对１００℃以上高温稳定。ＸＭ１６蓖株抗菌蛋白对１０种测定的病原真菌,均具有良     

一株产α-淀粉酶菌株的分离、鉴定及酶学特性分析

【目的】筛选α-淀粉酶高产菌株,并对其酶学性质进行研究.【方法】从富含淀粉的土壤中筛选出1株高产淀粉酶的菌株,命名为LZ-1.通过观察菌落形态、表征生理生化特性、测定16SrDNA序列及构建系统发育进化树对其进行鉴定.采用硫酸铵盐析、DEAE-52阴离子交换法纯化蛋白,SDS-PAGE检测蛋白相对分子质量.【结果】LZ-1鉴定为土生拉乌尔菌(Raoultella terrigena),所产淀粉酶最大酶活力为40.6U/mL,纯化后的淀粉酶比活力为121.3U/mg,纯化倍数为6.4,回收率为69.3%,相对分子质量为43ku.菌株LZ-1所产淀粉酶最适温度为50℃,在50~70℃其稳定性较高;最适pH值为7.0,在pH 5.0~7.0的条件下稳定性较高;Ca~(2+)、Mg~(2+)、Na~+、K~+对淀粉酶有激活作用;EDTA、Fe~(2+)、Zn~(2+)对淀粉酶有抑制作用.【结论】该菌株所产α-淀粉酶稳定性较高,具有一定的应用前景.     

香蕉枯萎病内生生防菌H4-3抑菌蛋白稳定性研究

铜绿假单胞菌H4-3菌株是福建省农科院农业生物资源研究所微生物研究中心从香蕉植株中分离到的内生菌,该菌株对香蕉枯萎病原菌具有很强的抑菌活性,其活性物质为大分子蛋白.研究测定了H4-3菌株抑菌蛋白的稳定性,结果表明：H4-3菌株的抑菌蛋白耐高温、强酸、强碱和高浓度蛋白酶,紫外线和反复冻融对H4-3菌株抑菌蛋白活性无显著影响.