高效液相色谱法测定饲料中大豆异黄酮

为了建立检测天然植物饲料添加剂中大豆异黄酮类主要成分含量的快速分析方法,采用HPLC法,分别以大豆中的大豆甙、染料木甙、大豆素、染料木素为标准品,在其紫外最大吸收峰260nm处,测定样品分离提取的样液,从而得出大豆异黄酮类各主要单体的含量。     

赤黄止痢颗粒中赤芍的薄层色谱鉴别与含量测定方法的建立

建立控制赤黄止痢颗粒中赤芍的分析方法。采用薄层色谱法(TLC)对赤黄止痢颗粒中赤芍进行定性分析,采用高效液相色谱法(HPLC)对制剂中芍药苷进行含量测定。薄层色谱结果表明,赤黄止痢颗粒中的赤芍在与对照品色谱相应的位置上,显相同的蓝紫色斑点,而阴性样品无相同特征斑点。HPLC结果表明,芍药苷在0.25~2.0 mg范围峰面积线性关系良好(R²=0.9996);芍药苷的平均回收率为99.74%,RSD为1.95%(n=9)。结果表明,研究建立的赤黄止痢颗粒中赤芍的薄层色谱鉴别方法和含量测定分析方法可操作性强,结果准确可靠,重复性好,为赤黄止痢颗粒质量标准的制定提供了方法学依据。     

高效液相色谱法测定生乳中双乙酸钠

试验旨在建立高效液相色谱（HPLC）测定生乳中双乙酸钠的方法。生乳样品经磷酸变性沉淀蛋白,并将样品中双乙酸钠酸化转化为乙酸,定容,离心取上清液,过微孔滤膜后,以磷酸二氢铵为流动相进行HPLC检测,外标法定量。在0.05~0.50 mg/mL浓度范围内,标准曲线R²=0.997,样品加标回收率在90%~110%之间,相对标准偏差1.0%~4.1%。此方法检出限为0.05 g/kg。     

大豆异黄酮对奶牛乳腺上皮细胞增殖及泌乳性能的影响

通过体外细胞培养方法研究大豆异黄酮对奶牛乳腺上皮细胞增殖及泌乳性能的影响。取对数生长期的奶牛乳腺上皮细胞,用无血清培养基培养24 h,使细胞同步化后分组试验。试验分空白对照组(0 mg/L大豆异黄酮)和添加不同浓度大豆异黄酮(1、10、100、1000 mg/L)组,培养48 h后,采用CASY 细胞计数仪检测细胞增殖能力与活力,高效液相色谱检测β-酪蛋白和乳糖,甘油三酯检测试剂盒检测甘油三酯的分泌情况。结果表明,与对照组相比,10、100、1000 mg/L大豆异黄酮组奶牛乳腺上皮细胞的增殖能力与活力显著增强(P<0.05);细胞分泌β-酪蛋白、乳糖和甘油三酯的能力也显著提高(P<0.05)。因此,添加10、100、1000 mg/L大豆异黄酮均能促进奶牛乳腺上皮细胞增殖及提高其泌乳性能,且呈一定的浓度依赖性。     

细菌发酵大豆异黄酮甙元的工艺及高效液相色谱检测

大豆异黄酮是一类存在于大豆中能对人体发挥有益作用的非营养物质。β-葡萄糖苷酶是一种能将大豆中的异黄酮由结合型糖苷向具有生理活性的游离型苷元转化的活性酶[1]。据报道,发酵大豆制品中游离型糖苷的含量远高于未发酵的大豆[2],这说明在大豆加工发酵过程中某些微生物所产β-葡萄糖苷酶使糖苷向甙元进行了转化。本文用本课题组筛选的产β-葡萄糖苷酶的菌种,对大豆黄素(大豆异黄酮甙元的一种)发酵条件进行优化,并通过HPLC(高效液相色谱)进行检测。1材料与方法1.1材料大豆(购于武汉市中百仓储超市)、细菌B.SP-4(本课题组筛选)。1.2主要…     

不同豆类饲料原料中大豆异黄酮含量的测定

将不同豆类饲料原料粉碎后,加入95%乙醇溶液,水浴加热后静置过夜。取其上清液稀释后,在250nm处,用紫外分光光度计法测定,以大豆异黄酮标准品作标准曲线测定含量。结果得出,不同豆类饲料原料中大豆异黄酮含量不同,大豆中大豆异黄酮含量为2004.63±92.98(μg/g),大豆粕(CP43%)中大豆异黄酮含量为2201.73±36.82(μg/g),大豆粕(CP48%)中大豆异黄酮含量为2265.54±60.07(μg/g),大豆粉中大豆异黄酮为2333.55±60.00(μg/g),膨化大豆中大豆异黄酮含量为2264.75±24.61(μg/g),赣中南小黑豆中大豆异黄酮含量为2239.44±24.8(μg/g)。并且饲料原料的加工工艺对大豆异黄酮含量的影响各有不同浸提法生产的大豆粕中大豆异黄酮含量较原料生大豆的高,但膨化法生产的膨化大豆较其原料无较大变化。大豆与赣中南小黑豆间大豆异黄酮含量差异极显著。     

肿节风三清颗粒的薄层色谱鉴别和含量测定

试验旨在建立肿节风三清颗粒的鉴别和含量测定分析方法,以期为制剂的质量标准提供方法学依据。采用薄层色谱法（TLC）对肿节风三清颗粒中的肿节风、射干、甘草进行定性分析;采用高效液相色谱法（HPLC）对制剂中的异嗪皮啶和迷迭香酸进行含量测定。薄层色谱结果表明,肿节风三清颗粒中的肿节风、射干、甘草在与其对应的标准药材或标准品的相同位置有一致的荧光斑点,而阴性样品无特征荧光斑点。HPLC结果表明,异嗪皮啶在3.795~18.975 μg/mL范围内线性关系良好（R²=0.9995）,迷迭香酸在6.035~30.175 μg/mL范围内线性关系良好（R²=0.9997）;异嗪皮啶和迷迭香酸的平均回收率分别为99.13%和100.30%,RSD分别为1.98%和0.02%（n=6）。结果表明,建立的定性及定量分析方法可操作性强,结果准确可靠,可用于肿节风三清颗粒中肿节风、射干、甘草的鉴别和指标性成分异嗪皮啶和迷迭香酸的含量测定,为肿节风三清颗粒的质量标准提供了方法学依据。     

大豆异黄酮对奶牛乳腺上皮细胞泌乳性能及抗氧化能力的影响

通过体外细胞培养的方法研究大豆异黄酮对奶牛乳腺上皮细胞泌乳性能及抗氧化能力的影响。试验分为空白对照组与不同浓度大豆异黄酮组(1mg/L、10mg/L、100mg/L、1,000mg/L、5,000mg/L),培养72h后,检测奶牛乳腺上皮细胞分泌β-酪蛋白、乳糖、甘油三酯的含量以及细胞中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量。结果表明,与空白对照组比较,添加10mg/L、100mg/L、1,000mg/L大豆异黄酮组奶牛乳腺上皮细胞分泌β-酪蛋白、乳糖和甘油三酯的能力显著提高(P<0.05);添加10mg/L、100mg/L、1,000mg/L、5,000mg/L大豆异黄酮组细胞SOD、GSH-Px和CAT活性均显著提高(P<0.05),MDA、NO含量显著降低(P<0.05)。因此,添加10mg/L、100mg/L、1,000mg/L大豆异黄酮既能显著提高奶牛乳腺上皮细胞的泌乳性能,又能显著增强其抗氧化能力,且具有一定的剂量依赖性。     

大豆异黄酮β-葡萄糖苷酶产生菌的选育及产酶条件研究

以豆豉为材料筛选产大豆异黄酮β-葡萄糖苷酶的菌株,并用京尼平甙法检测相对酶活。以相对酶活最高的野生菌为出发菌(经镜检为杆菌),通过UV和LiCl诱变育种,利用单因素和正交实验进行产酶条件研究确定最佳条件为:黄豆粉1%、酵母膏1%、麸皮2%、KH2PO40.1%、NaCl0.5%、起始pH值7.5、装液量30ml、发酵时间48h、发酵温度37℃、转速70r/min。在该条件下,用京尼平甙法测得该菌株的相对酶活为0.826,水杨苷法测得绝对酶活为5.49μg/ml。     

蜂胶HPLC指纹图谱真伪鉴别初探

从蜂胶的功效成分—黄酮类化合物着手,测定了真品蜂胶、杨树胶和搀假蜂胶的HPLC指纹图谱。结果发现:真品蜂胶含有19个特征峰中的18个特征峰,缺6号峰;杨树胶含有19个特征峰中的17个特征峰,缺7号和11号峰;搀了杨树胶的搀假蜂胶,含有6号峰,而7号峰和11号峰的峰面积显著降低。通过上述HPLC指纹图谱可以对蜂胶的真伪进行初步鉴别。     

奥尼罗非鱼日粮中酶解大豆蛋白部分替代鱼粉的研究

在奥尼罗非鱼（Oreochromis niloticus ♀×O．aureus ♂）日粮中分别添加0、2．5％、5％、7．5％、10％的酶解大豆蛋白．相应等氮替代0、21．89％、43．77％、65。66％、87。54％鱼粉．观察对奥尼罗非鱼生长性能的影响。试验发现,随着替代鱼粉比例的逐渐增加,奥尼罗非鱼的平均日采食量逐渐下降,差异显著（P〈0．05）,相对体重增长率、特定生长率逐渐下降,差异不显著（P〉0．05）,肝体比呈逐渐下降趋势,对肥满度无显著影响（P〉0．05）,存活率呈逐渐上升趋势：蛋白质效率、饲料系数、单位增重成本在添加2．5％大豆蛋白,均出现拐点,蛋白质效率此时达到最高,之后逐渐下降,饲料系数、单位增重成本在此拐点值最低,之后逐渐升高,但差异均不显著（P〉0．05）。     

六味地黄散中牡丹皮的薄层鉴别及含量测定研究

对《中国兽药典》2005年版二部收载品种六味地黄散组方中牡丹皮进行了薄层色谱法鉴别和有效成分丹皮酚含量测定研究。用薄层色谱法鉴别组方中牡丹皮的有效成分丹皮酚,分离效果较好（Rf=0.648）,斑点显色清晰且无干扰;用高效液相色谱法测定牡丹皮中丹皮酚在0.005-0.08 mg/mL峰面积与浓度呈良好线性关系,γ=1,回收率为99.1%,完善了六味地黄散质量标准的质量控制。     

HPLC同时测定安痛定注射液中氨基比林和安替比林的含量

建立了测定安痛定注射液中氨基比林和安替比林含量的高效液相色谱法。采用W aters公司Symmetry C18（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱;以甲醇-水（40∶60）为流动相;检测波长为260 nm;流速为1.0 mL/m in;柱温25℃。结果表明：氨基比林在20-200μg/mL的浓度范围内呈线性关系,r=0.999 8,平均回收率为100.4%;安替比林在10-60μg/mL的浓度范围内呈线性关系,r=0.999 7,平均回收率为100.2%。该法简便、准确可靠,可应用于安痛定注射液的质量控制。     

高效液相色谱法检测饲料中6种游离氨基酸

本实验通过高效液相色谱法对饲料中6种游离氨基酸含量进行测定.采用0.1 mol/L盐酸溶液提取样品中的6种游离氨基酸,与1％2,4-二硝基氟苯(DNFB)溶液衍生后经高效液相色谱仪测定.结果 表明:饲料中6种游离氨基酸平均回收率为97.52％,检出限≥0.006％(信噪比S/N=3),定量限≥0.021％(信噪比S/N...     

三氮脒含量测定的高效液相色谱法研究

建立了HPLC法测定注射用三氮脒中三氮脒含量的方法。采用C18色谱柱,以0.05 mol/L磷酸溶液-乙腈(95∶5,V/V)为流动相,流速为1.0 m L/min,检测波长为370 nm,柱温为30℃。结果三氮脒在1~100μg/m L浓度范围内线性关系良好,相关系数r=0.9998。建立的方法操作简便、准确、可靠,可用于三氮脒的质量控制。