紫花芸豆胰蛋白酶抑制剂的分离和纯化

[目的]从紫花芸豆中分离纯化胰蛋白酶抑制剂。[方法]以紫花芸豆为材料,采用脱脂、酸抽提、热变性、硫酸铵分级沉淀及离子交换层析和凝胶过滤层析等方法,分离纯化胰蛋白酶抑制剂。[结果]胰蛋白酶抑制剂经PAGE和IEF电泳显示单一条带。凝胶过滤法测定其表观分子量约为59kD。SDS电泳结果显示它有3个亚基,分子量分别为34、16、15kD。等电聚焦法测定其等电点为5．25。动力学的方法检测PVTT与胰蛋白酶发生不可逆抑制作用。[结论]离子交换层析和凝胶过滤层析法能快速地分离纯化紫花芸豆中的胰蛋白酶抑制剂。     

紫花芸豆胰蛋白酶抑制剂部分性质研究

[目的]研究紫花芸豆（Phaseolus vulgaris）胰蛋白酶抑制剂（PVTI）的部分性质。[方法]探索了不同温度、不同还原剂和变性剂处理对PVTI抑制活性和蛋白构象的影响。[结果]PVTI是一种对热稳定蛋白;部分二硫键对活性中心有重要贡献;经尿素处理,PVTI的荧光光谱没有明显变化,但残留了较少的抑制活性,推测亚基的解离影响了抑制活性而每个亚基的内部结构未受到影响;经盐酸胍处理,Trp残基完全暴露于极性环境中,整个蛋白质分子处于一种松散伸展的状态,PVTI活性全部丧失。[结论]该研究可为PVTI的功能研究及其进一步应用奠定基础。     

苦荞胰蛋白酶抑制剂纯化方法的研究

以苦荞种子为材料,经热变性、硫酸铵盐析后制成苦荞胰蛋白酶抑制剂(TBTI)粗品,然后用离子交换层析及亲和层析的不同洗脱体系对其进行纯化。结果发现:亲和层析法操作简单、纯化效率高。十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示为一条带。分子量约为12 kDa～15 kDa。     

山合欢种子胰蛋白酶抑制剂纯化及部分性质研究

采用去离子水抽提、硫酸铵分步盐析、亲和层析和分子筛层析等方法,从山合欢种子中得到一种胰蛋白酶抑制剂.SDS-PAGE结果表明,该抑制剂由2条多肽链构成,分子量分别为14.5和5.5 kDa.MALDI-TOF测定该抑制剂的精确分子量为19768.23 Da.该抑制剂能与胰蛋白酶形成1∶1的复合物,并且它们的结合不受SDS的影响.该抑制剂的肽指纹图谱中有7个主要的信号簇.通过串联质谱测定该抑制剂的部分氨基酸序列,比对发现与其他Kunitz蛋白酶抑制剂有较高的同源性.     

胰蛋白酶抑制剂在不同领域的研究概况

胰蛋白酶抑制剂是一类具有胰蛋白酶抑制作用的物质 ,该类物质的来源不同 ,其活性和作用的方式也不同。对其在医药领域、植物抗病虫害、饲料工业方面的应用及有关的研究进展进行综述     

章鱼内脏胰蛋白酶抑制剂的分离纯化与性质研究

通过热处理、硫酸铵盐析、膜超滤及SP-Sepharose离子交换层析,从章鱼内脏中纯化得到一种胰蛋白酶抑制剂（Octopus Trypsin Inhibitor,OTI）.Tricine-SDS-PAGE电泳结果显示,OTI的分子质量约为6500 u.性质分析结果表明：OTI在pH=1.0～11.0缓冲液中孵育30 min,抑制活性稳定;在100℃下加热1 h、2 h后仍分别具有90%和65%的抑制活性,具有良好的pH值稳定性和热稳定性;OTI能够显著抑制胰蛋白酶的活性,对胰凝乳蛋白酶、胃蛋白酶和木瓜蛋白酶几乎无抑制活性;OTI能够有效抑制蓝圆鲹肌肉中肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶（MBSP）引起的肌球蛋白降解.     

怎样去除大豆中胰蛋白酶抑制剂

弄清胰蛋白酶抑制剂在大豆中的分布和毒理,找到有效的处理方法．对大豆在实际生产中的正确运用具有极其重要的现实意义。     

青鱼胰蛋白酶的分离纯化及部分性质研究

[目的]为青鱼的养殖和综合利用提供试验依据。[方法]对青鱼胰蛋白酶进行分离纯化,测定青鱼胰蛋白酶的分子量、热稳定性和酸碱稳定性,探讨pH值、温度、金属离子和EDTA对青鱼胰蛋白酶活力的影响。[结果]经SDS-PAGE和凝胶过滤,测得青鱼胰蛋白酶的分子量分别为44和43.5 kD。青鱼胰蛋白酶具有一定碱性耐受性,在pH值为8～10时活性较高,其最适pH值约为9,最适反应温度为50℃。以酪蛋白为底物,在pH值8.5、37℃时测得该酶Km值为4.6×103 mg/L。Mg2+对该酶有明显促进作用,而Cu2+、Mn2+、Pb2+和EDTA对青鱼胰蛋白酶的抑制作用很大。[结论]EDTA能抑制青鱼胰蛋白酶的作用,说明该酶可能为金属蛋白酶。     

红肉菠萝蜜种子胰蛋白酶抑制剂的分离纯化及其特性

采用阴离子交换层析和凝胶过滤层析方法,从海南红肉菠萝蜜种子中分离纯化得到胰蛋白酶抑制剂,命名为AHTI.结果表明:该蛋白有抑制胰蛋白酶水解小肽底物的活性作用,由相对分子质量分别约为28.8 kD和16.4 kD的亚基组成的多聚体.AHTI具有稳定的胰蛋白酶抑制活性,对胰蛋白酶的抑制活性与其浓度成正比,AHTI对温度、pH的耐受性较强,2种因素对其胰蛋白酶抑制活性影响较小.     

亚硫酸钠对大豆胰蛋白酶抑制剂钝化作用研究

探索大豆中胰蛋白酶抑制剂有效、快速的钝化方法.通过正交试验设计研究温度、时间、亚硫酸钠浓度对抑制因子的钝化影响,采用酚红法和国家标准法(GB/T8622-2006)对钝化后大豆中脲酶活性进行定性、定量检测.最优钝化工艺条件为:温度75℃、时间60 min、No2SO3浓度0.03 mol·L-1.亚硫酸钠法是一种简便、...     

油豆角种子发芽试验研究

分别采用不同浓度的IAA、NAA、6-BA处理油豆角种子,结果表明:5mg/LIAA、5mg/LNAA和1㎎/L6-BA不仅可缩短油豆角种子的发芽时间,而且可提高其发芽率、发芽势及活力指数。其中,5㎎/LIAA处理的效果最明显,对油豆角种子发芽及幼苗早期生长都有良好的促进作用。     

紫茎泽兰水提物中化感物质的热稳定性初探

用超声波水浴法提取紫茎泽兰的地上部分,获得水提物,并用高温进行处理;用紫茎泽兰地上部分水提物处理小麦和绿豆的种子,采用烧杯-滤纸法进行培养,测定了2种作物种子的最终发芽率、根长、根数和苗高等生长指标。研究结果表明:紫茎泽兰地上部分水提物对小麦、绿豆均有化感抑制作用,但在相同浓度条件下,紫茎泽兰地上部分水提物对单子叶植物小麦的化感作用比对双子叶植物绿豆的化感作用更强;紫茎泽兰水提物对小麦种子的抑制作用随浓度升高而增强,对绿豆种子则表现为低浓度下促进而高浓度下抑制;紫茎泽兰地上部分水提物经高温处理后仍具有抑制作用,但其抑制活性与常温水提物相比有所下降,且水提物的浓度越高,其抑制活性下降越显著。因此,紫茎泽兰地上部分水提物能抑制小麦和绿豆的生长,且提取物中的化感活性成分具有热稳定性。     

紫茎泽兰水提物中化感物质的热稳定性初探

用超声波水浴法提取紫茎泽兰的地上部分,获得水提物,并用高温进行处理;用紫茎泽兰地上部分水提物处理小麦和绿豆的种子,采用烧杯-滤纸法进行培养,测定了2种作物种子的最终发芽率、根长、根数和苗高等生长指标。研究结果表明:紫茎泽兰地上部分水提物对小麦、绿豆均有化感抑制作用,但在相同浓度条件下,紫茎泽兰地上部分水提物对单子叶植物小麦的化感作用比对双子叶植物绿豆的化感作用更强;紫茎泽兰水提物对小麦种子的抑制作用随浓度升高而增强,对绿豆种子则表现为低浓度下促进而高浓度下抑制;紫茎泽兰地上部分水提物经高温处理后仍具有抑制作用,但其抑制活性与常温水提物相比有所下降,且水提物的浓度越高,其抑制活性下降越显著。因此,紫茎泽兰地上部分水提物能抑制小麦和绿豆的生长,且提取物中的化感活性成分具有热稳定性。     

种植密度对粒用芸豆品质的影响研究

芸豆作为山西省出口创汇的主要农产品之一,芸豆品质是提升其在国际市场上竞争力的重要因素,而品质在较大程度上受到种植密度的影响。采用方差分析、曲线拟合等数据分析方法研究不同种植密度对粒用芸豆商品品质与营养品质等方面的影响。结果表明,在同一地点不同种植密度下籽粒品质差异显著。籽粒商品率、籽粒密度与种植密度呈负相关;籽粒蛋白含量随种植密度增加而增加,而脂肪含量出现随密度增加而下降的变化趋势。当地粒用芸豆最适宜的种植密度为22万株·hm~(-2);同一地区,籽粒品质确实会因种植密度的改变而不同,考察芸豆籽粒品质的密度效应时应注意分析其它生态因素的影响。     

大豆中胰蛋白酶抑制剂的钝化方法研究

[目的]对大豆中胰蛋白酶抑制剂进行钝化处理,降低其活性,提高大豆饲料的营养价值。[方法]采用正交试验设计对大豆中胰蛋白酶抑制剂的化学钝化法（亚硫酸钠法）和物理钝化法（微波法和超声波法）进行比较,确定最优钝化工艺条件。[结果]大豆中胰蛋白酶抑制剂的化学法钝化最优工艺条件为：Na2SO3浓度为0.03 mol/L,温度75℃,钝化时间60 min;物理微波法钝化最优工艺条件为：微波功率240 W,时间90 s,粉碎度为过60目筛;物理超声波钝化法最优工艺条件为：加水量30 ml,时间30 min,粉碎度为过60目筛。[结论]3种钝化方法处理后,大豆中胰蛋白酶抑制剂活性均明显降低。     

鸡脾脏和肝脏粗提物的抗菌活性

为获得具有抗菌作用的物质,本研究对鸡脾脏和肝脏的粗提物进行了制备,并通过抑菌试验检测了粗提物对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的抑菌活性。结果表明,鸡脾脏和肝脏的粗提物中存在着抗菌活性物质,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均具有较好的抑菌活性。     

铁在菜豆体内再转移效果的研究

用水培方法研究了遮光和铵态氮、硝态氮处理对菜豆铁再转移能力的影响.结果表明,遮光有利于铁从缺铁植物的其他部位向植物的新叶转移;NH_4~+-N 供应可改善菜豆新叶的铁营养状况;NO_2~--N 供应则增加根部铁的累积,影响铁向地上部分转移.