猪支原体肺炎弱毒活疫苗与灭活疫苗联合免疫的免疫效果评估

为研究猪支原体肺炎(MPS)弱毒活疫苗与灭活疫苗联合免疫的免疫效果,本研究选取40头10日龄猪肺炎支原体(Mph)阴性仔猪,随机平均分为4组。A组肌肉注射灭活疫苗;B组喷鼻弱毒活疫苗;C组肌注灭活疫苗同时喷鼻弱毒活疫苗;D组为空白对照。疫苗免疫后每天观察猪群的整体状态,于免疫后3 d、30 d、90 d、180 d,分别采集鼻腔棉拭子和血液样品,进行应激相关指标以及相关疾病的抗体检测,并于免疫后180 d进行MPS病原检测。仔猪屠宰时称重,采集其完整肺脏,计算其平均增重并进行肺脏病变评分。结果显示:C组猪生长状况最好,猪群支原体感染率低、抗体水平高、平均增重高并且肺脏病变程度低,表明采用MPS灭活疫苗和弱毒活疫苗联合的免疫效果更好,并且未引起严重的应激反应。本研究对MPS疫苗的合理应用提供了实验依据。     

牛支原体(新疆株)灭活疫苗的制备及犊牛免疫保护性评价

为研发用于预防犊牛支原体肺炎及关节炎灭活油佐剂疫苗并评价其免疫效果,本研究采用牛支原体(Mycoplasma bovis,M.bovis)新疆分离株做为制苗菌株,经牛支原体专用液体扩大培养基培养后进行膜分离浓缩、甲醛灭活,加入油佐剂乳化制备牛支原体灭活疫苗,经无菌检验、实验动物安全性检验及乳化效果检测后进行犊牛免疫效果测定。结果显示,免疫组犊牛在二免后14 d,血清中M.bovis抗体达到0.465(OD_(450)),3头攻毒犊牛均保持良好的精神状态且体温变化不明显,临床症状综合评分为3,肺脏解剖学及病理组织学观察无异常,肺脏病变指数为2且肺脏中未分离回收到M.bovis;未免疫对照组犊牛同期血清M.bovis抗体为0.142(OD_(450)),3头攻毒犊牛均先后出现体温升高、轻度咳喘、脓性鼻液、明显消瘦等症状,临床症状综合评分为11,肺脏病变指数为17,肺脏尖叶、心叶及部分膈叶均表现明显肝变,2头犊牛表现胸膜与肺脏黏连,1头犊牛整个尖叶广泛分布黄白色蚕豆状大小坏死性结节,与自然感染病例相同,病理组织学观察显示肺泡腔和支气管中有大量中性粒细胞浸润,支气管管壁充血、水肿,肺脏部分坏死灶呈均质红染,为典型的化脓性及坏死性肺炎变化,从病变肺组织中均分离回收到M.bovis。结果表明,本研究制备的牛支原体灭活疫苗给犊牛免疫后能产生良好的免疫应答反应,并能抵抗M.bovis感染所致的肺脏病变作用。     

猪支原体肺炎活疫苗经肌肉注射的免疫效果评价

猪支原体肺炎活疫苗(168株)是一种以肺内注射途径免疫的弱毒活疫苗。为了拓展猪支原体肺炎活疫苗的免疫途径,评估猪支原体肺炎活疫苗(168株)配合佐剂以肌肉注射方式免疫猪群后的攻毒保护效果,选取20头7日龄猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)阴性仔猪,将其随机平均分成4组,分别为健康对照组、感染对照组、肌肉注射免疫组和肺内注射免疫组。在免疫后采集血样并检测其中的Mhp IgG抗体,在首次免疫后42 d人工感染Mhp组织毒(JS株),攻毒28 d后评估肺脏的病变情况并测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中的Mhp含量。结果显示：免疫后肌肉注射免疫组动物产生了明显的Mhp特异性血清IgG抗体,而肺内注射免疫组动物在攻毒前未见明显的血清抗体;肌肉注射免疫组和肺内注射免疫组的攻毒保护率分别平均为88.89%和75.93%,且组间无显著性差异;感染对照组的BALF中Mhp单位含量极显著高于肌肉注射免疫组和肺内注射免疫组(P<0.01),2个免疫组间无显著性差异。结果表明：猪支原体活疫苗配合佐剂后经肌肉注射免疫可产生较好的免疫攻毒保护效果。本研究为猪支原体肺炎活...     

猪肺炎支原体与猪支气管败血波氏杆菌在猪体液免疫和生长性能上的协同作用

试验选用10日龄成华×大约克杂交猪36头,随机分成四组(1、2、3、4),每组9头.其中1、2组用猪肺炎支原体全菌抗原免疫后再分别用猪肺炎支原体和猪支气管败血波氏杆菌进行攻毒,3、4组注射生理盐水作为对照,并与前两组同时分别用猪肺炎支原体和猪支气管败血波氏杆菌进行攻毒.采用间接ELISA、组织切片等方法对猪血清中的抗体水平、肺脏的病理变化及生长性能进行测定.试验表明:用猪肺炎支原体全菌抗原接种猪后,在血清中能检测到较高的抗体水平(25).猪肺炎支原体攻毒后2周,免疫猪和对照猪血清中猪肺炎支原体抗体的滴度分别为23.8与22.4(P＜0.05),且免疫猪的生长性能比对照猪好.在猪支气管败血波氏杆菌攻毒组,攻毒2周和4周后免疫猪血清中的猪支气管败血波氏杆菌抗体水平与对照猪相比分别提高了26.67%和30.00%(P＞0.05),6周后免疫猪和对照猪血清中的猪支气管败血波氏杆菌抗体分别为21.7和20.3(P＜0.05),且在攻毒后4～6周,免疫猪的生长性能有了显著的改善.组织切片显示,无论是用猪肺炎支原体攻毒还是用猪支气管败血波氏杆菌攻毒,免疫猪的肺脏病变程度都较对照猪轻.     

猪肺炎支原体疫苗对沂蒙黑猪和杜洛克猪免疫效果的差异

本试验旨在探究猪肺炎支原体疫苗对沂蒙黑猪和杜洛克猪免疫效果的差异。试验分别选取山东省临沂市某沂蒙黑猪养殖场和杜洛克猪养殖场各11头抗猪支原体抗体阴性母猪所产的132头仔猪为研究对象,施以相同的免疫处理,比较血液抗猪支原体抗体水平及攻毒后猪肺病变指数情况。结果:沂蒙黑猪试验组的血液抗猪支原体肺炎抗体阳性率显著高于杜洛克猪试验组,差异有统计学意义(P0.05);攻毒实验后猪肺部病变指数减少率显著高于杜洛克猪试验组,差异有统计学意义(P0.05)。因此,与杜洛克猪相比,沂蒙黑猪对猪肺炎支原体疫苗的敏感性更高,免疫效果更好。     

绵羊肺炎支原体灭活疫苗的研制

绵羊肺炎支原体引起绵羊及山羊非典型肺炎,分布广泛,危害严重。本试验旨在研制绵羊肺炎支原体灭活疫苗。采用改良Thiaucourt's培养基对绵羊肺炎支原体临床分离株SC02进行培养,收集生长滴度达10⁹ CCU/mL的培养物,浓缩20倍后灭活,制备油佐剂疫苗。选择绵羊肺炎支原体抗体阴性的6月龄健康山羊经颈部皮下接种该疫苗5.0 mL/只(2×10¹⁰ CCU/mL),免疫后21 d,试验组与对照组山羊经气管接种绵羊肺炎支原体强毒Y98株5.0 mL/只(≥2×10¹⁰ CCU/mL),测量体温、观察临床症状,并于攻毒后30 d剖检,观察肺脏病理变化。结果表明,试验组5只山羊均获得免疫保护,全部精神状况良好,临诊和剖检均未见异常;对照组5只山羊出现咳嗽、发热、流鼻涕等症状,剖杀后见肺脏组织有典型的肺炎病理变化。本研究结果表明,该疫苗对山羊有良好的免疫保护作用。     

猪支原体肺炎灭活疫苗临床应用效果评价

为了评估一针型水性佐剂猪支原体肺炎灭活疫苗(HN0613株)的临床应用效果,本研究从疫苗安全性、免疫效力和生长性能等方面进行评价。安全性评价结果显示,仔猪免疫后的体温、精神和饮食均正常,注射部位未见红肿、结痂和化脓等炎症反应,表明该疫苗安全性良好。用该疫苗免疫一次进行免疫攻毒效果评价,结果表明研制的疫苗效果确实,攻毒保护效果优于进口疫苗。通过比较免疫组与空白对照组断奶至出栏时平均日增重,评价疫苗对猪群生长性能的影响,结果表明该疫苗能够显著提升猪群的生长性能。综上所述,说明研制的猪支原体肺炎灭活疫苗在实际生产条件中具有良好的安全性,免疫一次即可达到较好的免疫保护效果。     

猪乙型脑炎病毒灭活疫苗(A6株)的制备及免疫保护研究

为了制备猪乙型脑炎病毒(A6株)灭活疫苗,并研究其免疫保护效果,试验将猪乙型脑炎病毒(A6株)在Vero细胞上培养增殖,用β-丙内酯灭活,将检验合格的抗原与206疫苗佐剂乳化制备成猪乙型脑炎病毒灭活疫苗(A6株)。将制备的猪乙型脑炎病毒灭活疫苗(A6株)用PBS稀释成1∶5、1∶50、1∶500 3个稀释度免疫小鼠后攻毒,后备母猪肌肉注射猪乙型脑炎病毒灭活疫苗(A6株)后间隔14 d后加强免疫1次,对免疫后备母猪及所产仔猪的中和抗体效价进行测定。同时,进行后备母猪免疫攻毒试验,分为疫苗免疫组和攻毒对照组,母猪妊娠30 d后用猪乙型脑炎病毒(A6株)进行攻毒,攻毒后记录各组母猪临床症状及所产仔猪的健康状况,发病仔猪剖检,观察病变。结果表明：猪乙型脑炎病毒灭活疫苗(A6株)1∶50倍稀释免疫小鼠进行攻毒,保护率可达到80%。后备母猪间隔14 d免疫两次可以产生高水平的中和抗体,而且所产仔猪的中和抗体效价可以维持到30日龄。对妊娠30 d母猪进行攻毒,疫苗免疫组妊娠母猪均正常产仔,仔猪全部健活,全部保护;攻毒对照组妊娠母猪发生流产,产出死胎、木乃伊胎和弱胎,全部发病。发病胎儿剖检,可见脑积水...     

猪流行性腹泻灭活疫苗佐剂筛选

为探究不同佐剂对猪流行性腹泻灭活疫苗免疫效果的影响,选用水包油佐剂A(O/W)、油包水佐剂B(W/O)和双相佐剂C(W/O/W)3种不同佐剂配制疫苗,分别接种3～5日龄仔猪后攻毒,综合评价不同佐剂的免疫效果。结果显示：A、B佐剂组疫苗免疫猪的抗体水平低于C佐剂组;攻毒后进行猪流行性腹泻病毒检测发现,仅C佐剂组试验猪全部呈阴性;剖检所有疫苗免疫组试验猪均未发现脏器病变。结果说明：双相佐剂制备的灭活疫苗免疫效果明显优于水包油和油包水佐剂疫苗,且安全性较高,可优先选择双相佐剂制备猪流行性腹泻灭活疫苗。本研究为猪流行性腹泻疫苗制备、生产提供了技术支撑。     

猪喘气病综合防治技术研究

四川蒲江××规模化养猪场,1996年因从外地购进病猪,致使全场猪只 出现咳嗽、喘气等症状,病猪生长缓慢,饲料利用率降低,经济损失严重,经鉴定确诊为猪支原体肺炎,发病率达90%以上,为使本病在该场达到控制和净化,在该场采用监测、免疫、隔离、治疗、淘汰、消毒等综合防制技术,对全场有猪支原体肺炎症状的猪只及可疑病猪进行了隔离治疗,治愈后的猪经与易感猪同居感染不发病,分离猪肺炎支原体为阴性,试验表明治俞后的猪不带菌,对全场种猪和后备健康猪群进行猪支原体肺炎疫苗的免疫接种,经抗体监测和攻毒试验,免疫后240天猪支原体肺炎的IHA抗体仍可达到1：10,保护率达90%以上,试验表明猪群接5种疫苗后获得了对猪支原体肺炎坚强而持久的免疫力。三年来通过综合防制技术在该场的贯彻实施,经临床检查和X线胸透,全场猪只无猪支原体肺炎。各猪后裔的连续2代仔猪不感染健康猪,X线胸透,剖检肺脏均无眼观病变,猪肺炎支原体分离为阴性,对屠宰的肥育猪进行抽检已未分离到该病原,上述检查表明,该场的猪支原体肺炎（喘气病）已达到基本净化。     

猪支原体肺炎疫苗的免疫原理及应用效果概述

猪支原体肺炎灭活疫苗和弱毒活疫苗的临床应用均有很好的效果。简述了猪支原体肺炎灭活疫苗以体液免疫为主、弱毒活疫苗以细胞免疫和粘膜免疫为主的不同免疫学特性,分析认为占位效应可能是猪支原体肺炎弱毒活疫苗独特的免疫原理之一,提出了灭活疫苗可能的改良方向及保证弱毒疫苗高效免疫的三项措施,以期为猪支原体肺炎防控提供参考。     

不同猪支原体肺炎灭活疫苗免疫效果评价及比较

为研究不同猪支原体肺炎灭活疫苗免疫效果,通过对猪群的料肉比、平均日增重、转栏单头均重、死淘率、咳嗽频率、单头药苗费、肺部病变评分和猪血清抗体水平等指标测定,对常见不同菌株的3种疫苗（A、B、C）效果进行了综合评价。将规模化猪场800头1日龄健康仔猪均匀地随机分为3个试验组和1个空白对照组。在7、21日龄对试验组仔猪按疫苗说明书进行免疫接种,空白组仔猪不注射疫苗。所有猪只于21、48、80、140日龄采血及分离血清,采用ELISA方法检测血清中猪肺炎支原体抗体水平。结果显示,接种疫苗A后猪血清抗体水平和阳性率最高,保育阶段和育肥阶段A组料肉比较空白组分别降低了10.8%和13.8%,平均日增重分别提高了19.3%和7.9%,死淘率分别降低了2.64%和1.88%,咳嗽频率分别降低了6.38%和6.00%,单头药苗成本分别降低了2.2和1.9元/头,免疫效果和经济效益均为最好;其次是疫苗B,疫苗C使用效果最弱。结果表明,用不同疫苗免疫接种试验猪后产生的抗体水平和免疫效果存在差异。本试验为猪支原体肺炎灭活疫苗的临床合理应用提供了数据支持。     

猪流感(H3N2亚型)油乳剂灭活疫苗的免疫及攻毒试验

用不同剂量的猪流感H3N2亚型油乳剂灭活疫苗免疫15头断奶仔猪,每组5头,四周后二免。另外3头为非免疫攻毒对照组。首免后第10周用同源病毒攻毒,分别在免疫前及免疫后2、3、4、6、8、10、11周采血,分离血清,用HI试验检测其抗体滴度。攻毒后通过免疫猪和非免疫攻毒对照猪临床、病理变化及病毒分离等方面的比较,评价疫苗的保护效果。结果中、高剂量组的抗体滴度明显高于低剂量组;免疫组和对照组攻毒前后体温无显著差异(P>0.05),免疫组病理保护明显好于非免疫攻毒对照组;鼻液和肺中的病毒分离率比较,免疫组明显低于非免疫攻毒对照组。本研究表明,用该疫苗免疫后猪对同亚型的病毒攻击有一定的保护作用。     

猪瘟E2亚单位疫苗攻毒保护效力研究

猪瘟E2亚单位疫苗是一种用杆状病毒载体系统表达的猪瘟病毒E2重组蛋白,与油佐剂按比例混合、乳化制成的新型灭活疫苗,可区分感染和接种疫苗动物,有助于猪场的猪瘟净化。为评价该疫苗免疫效力,本研究用猪瘟E2亚单位疫苗与猪瘟兔化弱毒疫苗(传代细胞源)分别免疫靶动物,二免后2 w用强毒人工感染试验动物,连续测温16 d,并记录试验猪临床症状,结合病理剖检、组织器官病毒含量测定结果,比较不同疫苗保护力。结果显示:对照组猪攻毒后体温高热稽留,表现出典型猪瘟症状,攻毒后11 d内5/5发病死亡,尸检剖检呈典型猪瘟病理解剖学变化;免疫猪全部健活,未表现任何猪瘟症状,组织器官剖检无病变。结果表明,猪瘟E2亚单位疫苗与活疫苗保护效力相当,可为靶动物提供可靠的免疫保护效力。     

猪肺炎支原体灭活疫苗的实验室效力研究

为了探究自主研制的猪肺炎支原体灭活疫苗的实验室免疫效力,为临床应用提供科学依据,试验分别用2.0 mL/头、1.0 mL/头、0.5 mL/头和0.25 mL/头4种剂量的试验疫苗两次免疫7～14日龄健康仔猪,通过测定免疫期间猪只生长情况、抗体水平变化情况及肺脏病变指数等,以确定该疫苗的最小免疫剂量及其安全性.结果表明...     

肺炎支原体疫苗的三种不同免疫方案对上市猪的肺部保护效果的评估报告

一、引言和试验目的猪的肺炎支原体感染在世界各地普遍存在,而且对养猪业引起持续的经济损失。支原体肺炎最典型的症状是:咳嗽、日增重减少、猪群整齐度差等。最常见的病理变化是肺组织出现肉变,眼观呈现红色或紫色,局部淋巴结肿大,这些病变大都出现在肺双侧的心叶和尖叶。当支原体肺炎继发其它感染时,肺部就会出现坏死或脓肿。屠宰线上病变组织的检查是一种最重要的评估疫苗免疫方案的手段。本试验中我们使用两种疫苗设计三套免疫程序,并对三种免疫程序免疫的效果进行了评估。二、材料与方法本研究是在墨西哥中部一个1000头母猪的猪场进行…     

不同猪繁殖与呼吸综合征减毒活疫苗在猪体内的动态学及临床免疫效果比较

为了比较国内不同猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)弱毒疫苗的安全性和有效性,本研究将17头PRRSV抗原和抗体双阴性的28日龄仔猪随机分为4组,TJM-F92株弱毒疫苗组,JXA1-R株弱毒疫苗组,经典株弱毒疫苗(VR2332来源)组和注射生理盐水对照组。免疫后7,14,21,28d分别采血,ELISA抗体检测试剂盒检测PRRSV抗体,结果从免疫后14d起PRRSV抗体开始转阳,但各试验组的抗体水平无明显差异。对免疫后14d所采血样进行病毒分离,TJM-F92株免疫组未分离到PRRSV疫苗毒,JXA1-R株免疫组2头猪分离到PRRSV疫苗毒,经典株免疫组只1头猪分离到PRRSV疫苗毒。免疫后28d,所有猪接种PRRSV强毒株TJ株进行攻毒试验,观察各组猪的体温、临床症状;攻毒后21d,所有猪安乐死,剖检观察肺部病理变化。结果显示,TJM-F92株和JXA1-R株免疫组均未出现临床发病猪,经典株免疫组2头猪出现临床发病,对照组全部临床发病,死亡1头。经典株免疫组临床发病猪出现典型PRRSV感染肺部病理变化,而TJM-F92株和JXA1-R株免疫组均未发现典型PRRSV感染肺部病理变化。本研究证实TJM-F92株和JXA1-R株对高致病性PRRSV的免疫效果优于经典株弱毒疫苗,TJM-F92疫苗株与JXA1-R疫苗株相比,疫苗毒在体内带毒时间更短,安全性更高。     

表达猪源GM-CSF重组PRRSV疫苗对同源高致病性毒株的免疫保护效力评价

为研究表达猪源粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在动物体内的免疫调节特性及对其的保护效力评价,本研究将15头30日龄仔猪随机分成4组,空白对照组(DMEM)4头、疫苗对照组(HuN4-F112株)4头、疫苗组(rPRRSV-GM-CSF株)3头和攻毒对照组(DMEM+HuN4株)4头。疫苗对照组肌注免疫HuN4-F112株10⁵ TCID₅₀/头、疫苗组肌注免疫rPRRSV-GM-CSF株10⁵ TCID₅₀/头,实验空白组和攻毒对照组肌注DMEM 2 mL/头,免疫后28 d,疫苗组、疫苗对照组和攻毒对照组肌注HuN4株(10₅ TCID₅₀/头)。攻毒后的试验结果表明,免疫rPRRSV-GM-CSF重组病毒组和疫苗株HuN4-F112组获得完全保护,阴性对照组全部死亡;通过IDEXX试剂盒检测仔猪血清中PRRSV抗体水平可知,在免疫14 d后,疫苗组抗体水平显著高于疫苗对照组(P<0.05);由...     

猪伪狂犬病基因缺失灭活疫苗(JS-2012-△gI/gE株)最小免疫剂量测定

为了确定猪伪狂犬病基因缺失灭活疫苗(PRV JS-2012-△g I/g E株)的最小免疫剂量,本研究将25头14日龄仔猪(猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒2型病原抗体均为阴性)随机分成5组,每组5头。第1~4组分别接种猪伪狂犬病灭活疫苗(PRV JS-2012-△g I/g E株)0.5、1、2、3 m L/头,免疫28 d后各组参照第1次免疫的剂量分别加强免疫1次,第5组实验猪不做处理作为阴性对照。免疫后,每周采集各组猪血清检测抗体水平。待第2次免疫28 d后,5组实验猪均滴鼻接种PRV JS-2012株第5代强毒2 m L,含病毒105.0TCID50/头。结果表明:第1次免疫后14 d,第2~4组猪PRV g B抗体全部转为阳性,而第1组猪在第1次免疫后21 d全部转阳。攻毒后,第1组有1头猪发病,表现精神沉郁、厌食和轻微神经症状,其余4头猪有一过性的发热,无任何其他异常临床表现,保护率为80%;第2~4组,实验猪只有一过性的发热,无任何其他异常临床表现,保护率为100%;第5组猪在攻毒后48 h,体温迅速上升到41℃以上,并表现为明显的精神沉郁、厌食和神经症状,发病率为100%,死亡率为40%。由此确定猪伪狂犬病灭活疫苗(JS-2012-△g I/g E株)最小免疫剂量为1 m L/头。     

间接免疫荧光抗体法在APP疫苗保护效果评价中的初步应用

应用间接免疫荧光抗体法对免疫攻毒后小鼠肺脏中的APP抗原进行了定位,比较了灭活疫苗和重组亚单位疫苗对小鼠肺脏中APP抗原的清除能力,同时与各组小鼠的存活率及其肺脏的病理学变化进行相关性比较。结果表明,灭活疫苗组和重组亚单位疫苗组小鼠肺脏的荧光强度、数量均明显弱于对照组,而重组亚单位疫苗组又明显弱于灭活疫苗组。说明两种疫苗均对APP抗原有一定的清除和中和作用,且重组亚单位疫苗的作用强于灭活疫苗。该结果与各组小鼠的存活率和肺脏病理学损伤的结果一致。说明通过间接免疫荧光定位免疫攻毒后小鼠肺脏中的APP抗原作为疫苗保护效果的一种评价方法是可行的。