基于SLAF-seq技术的古茶树SNP位点开发

为给古茶树遗传图谱构建、分子辅助育种和物种进化等研究提供参考,以48份贵州古茶树种质为研究对象,利用SLAF-seq技术,获取大量多态性SLAF标签,进而开发一批特异性强、稳定性高的单核苷酸多态性(SNP)位点。结果表明,利用猕猴桃参考基因组进行电子酶切预测,选择HaeIII酶进行酶切,得到237773个SLAF标签,其双端比对效率为91.40%,酶切效率为96.41%,说明SLAF建库正常。测序后各样品所获得的读长数为1279534~8460233,测序质量值Q30范围为92.61%~94.88%,均值为93.84%,测序获得的GC比例为43.52%~47.18%。共开发1656258个古茶树SLAF标签,样品的平均测序深度为24.21×,其中多态性SLAF标签有462897个,根据所获得的多态性SLAF标签来统计SNP位点信息,共得到2690638个群体SNP标记,根据完整度大于0.8且次要基因频率(MAF)大于0.05的标准进行过滤,得到283376个高一致性的群体SNP标记。     

基于SLAF-seq技术的金花茶SNP标记开发及遗传分析

为了解金花茶种质的遗传关系,利用SLAF-seq测序技术对在不同地区收集的25份金花茶种质与山茶科其他5份种质进行测序。以猕猴桃基因组为参照,对金花茶基因组DNA酶切构建SLAF-seq文库,利用SLAFseq测序技术对其进行高通量测序、SNP标记开发及其进化关系分析,在多态性SLAF标签上开发特异性SNP位点,最后根据SNP位点构建25份金花茶种质与山茶科其他5份种质的进化树。最终共开发1471113个SLAF标签,其中多态性SLAF标签有69597个;共得到443819个群体SNP位点,其中高一致性的群体SNP位点119452个。遗传分析结果表明,金花茶种群的遗传多样性水平较高,可分成2个大的类群,其中第2类群包含了全部收集的金花茶种质,其又可分为3个亚族,这3个亚族的分化有明显的地域特征。第1亚族主要是来源于越南的金花茶品系,第2亚族由2个越南的金花茶品系和5个中国的金花茶品系组成,第3亚族全部由来源于中国的金花茶品系组成。研究结果从基因组水平揭示不同地区金花茶种质之间的遗传关系,所开发的SNP位点可进一步用于金花茶种群的进化分析、重要性状的关联分析等。     

湿地松杂交后代鉴定试验研究

通过20多年来 ,对湿地松6个杂交品种和3个纯种(温地松、火炬松、马尾松) ,在广东省阳江市林科所试验地生长比较 ,结果表明 ,以湿地松(母本×加勒比松(父本)PEE×PCH具有明显的杂交优势 ,生长、干形、保存率等生态因子均优于其它 ,表现出树干圆满通直 ,抗风力强 ,分枝习性好及速生 ,皮薄等优点 ,是今后大力推广的湿地松杂交优良树种     

沙棘杂交后代的早期选择初探

通过对引进沙棘杂交苗第二年的树体、枝条、棘刺及叶片等性状的表现型值测定,统计分析杂种苗主要性状的变异,相互间相关关系.以分析结果为依据提出主要变异类型,并就类型特点探讨早期选择方法,作为沙棘杂种苗进一步培育的依据。     

油茶人工高效杂交技术

为提高油茶杂交效率,大量创制新种质,以蕾期授粉为基础,通过对原有杂交技术的改进提出一套油茶人工高效杂交技术.基本步骤为:选处于松蕾阶段的母本花蕾,剪除全部花瓣和雄蕊,然后用父本的雄蕊直接对去雄后母本进行授粉,最后套袋标记.通过试验表明,该方法适用于种内不同品种间杂交组合的规模化配制,每杂交1朵花可获得杂交种子1.29～5.13粒;同时,还可以克服种间杂交的不亲和性,本试验获得了13粒宜春白皮中子与茶梨的杂交种子.     

RAPD标记鉴定银白杨×新疆杨杂交后代

利用RAPD标记对银白杨(♀)×新疆杨(♂)杂交后代及其亲本进行DNA多态性鉴定。结果表明,8对引物共扩增出46条带,平均每对引物扩增出5.75条带,多态性带占扩增总带数的41.3%,扩增片段大小在300~3 000 bp之间。父母本的特异性条带在子代中出现的频率分别为51.25%和46.88%。杂交后代的带型分为叠加型、缺失型和特异型。父母本之间的遗传相似系数为0.652 2,子代8与父本遗传相似系数最高为0.913 0,子代6与母本遗传相似系数最高为0.847 8。本研究从分子水平鉴定杂交种,为开展分子标记辅助杨树杂交亲本选配和杂种子代表现预测奠定了基础。     

四倍体油茶的鉴定及变异

油茶(Camellia oleifera)是我国南方主要的经济林木,与油棕(Elaeis gunieen)、油橄榄(Olea europaea)和椰子(Cocos nucifera)并称为世界四大木本食用油料树种.茶油不饱和脂肪酸含量达90%以上,以油酸和亚油酸为主,还含有少量的亚麻酸等高价不饱和脂肪酸,具有降低血清胆固醇含量,起到预防和治疗高血压和心血管疾病的作用(雷治国等,2003).     

基于核桃参考基因组的SSR位点鉴定分析和单态性标记开发

目的 为了阐明核桃（Juglans regia L.）（2n=2x=32）全基因组不同染色体上SSR位点数量及其分布特征,开发并验证单态性SSR引物。 方法 基于核桃品种‘中牧查一’的高质量参考基因组序列图谱,使用MISA软件筛选并分析SSR位点,利用Primer 3.0进行引物设计,通过电子PCR进行引物多态性分析,筛选并合成单态性SSR引物并通过真实PCR实验验证其有效性。 结果 （1）在全基因组16条染色体上鉴定得到了共计357 629 个SSR位点,分布密度为662.28 SSRs·Mb−1,其中,10～30 bp长度的短序列占95.00%以上,优势重复单元以A/T碱基为主;不同染色体上SSR位点数量差异较大,其中,Chr1染色体上SSR位点数量最多,Chr16染色体上最少,SSR重复单元的数量及种类与染色体长度呈极显著正相关,进一步统计分析获得的644 种稀有SSR单元中六核苷酸重复基元占多数;（2）基于不同染色体上SSR重复单元的类型和数量构建分布矩阵,聚类分析发现,以遗传距离0.075为阈值可将所有染色体分为4组,其中,第4组中成员最多（11条）,而第1组中仅有Chr10染色体,总体看,Chr10染色体自成一个主枝,显示其可能经历了较为保守的进化过程;（3）利用SSR 位点侧翼的保守序列设计出SSR引物303 009对,通过电子PCR筛选并随机合成了32对单态性引物进行验证,其中,30对（93.75%）在6 个核桃品种中扩增出了清晰的目标产物,28对（87.50%）的PCR扩增结果与电子PCR评估结果一致。 结论 本研究鉴定了‘中牧查一’核桃参考基因组不同染色体序列中的SSR位点,发现其数量和重复类型变化较大,且与染色体长度呈极显著正相关,单碱基重复的SSR是最常见的类型。建立了电子PCR与传统方法联用的引物开发流程,同时验证了其有效性,为核桃SSR引物的个性化快速开发提供了有效策略。筛选获得的28对单态性引物可为分子辅助育种中杂交子代“私生检测”等研究提供科学借鉴与参考。     

月季育种过程中杂交后代性状早期筛选的初步探索

对月季杂交后代连续三年的观测结果进行分析，发现月季在花瓣数，在花径，花量等性状方面，前后观测数据间存在着很大的相关关系，在对杂交后代的筛选过程中，可以根据播种当年的观测结果来确定这些性状的表现，月季杂交后代播种当年的生长量对杂交后代日后部分性状的表现有着很大的相关性，播种当年生长量越大，日后黑班病的梁病程度就越低，播种当年主枝长越长，日后的花径越大，同时，月季杂交后代第一次越冬后，存活下来的主枝越长，日后的花径也越大，黑斑病的染病程度也越低，播种当年的残花残留天数可以用来预测月季在花上某些方面的性状表现，播种当年残花残留天数越长，日后花朵的花瓣数越多，花径越小，播种当年花瓣数多的个体，日后黑斑病染病程度较高。     

油茶炭疽病菌对油茶花果的侵染及早期防治研究

炭疽病菌侵染油茶花器的现象极为普遍。病花芽中的部分病菌可直接侵染花,某些花上的病菌又可直接侵染幼果,形成一个花芽和花以及花和幼果之间的连续侵染,这是冬前果实上最早发生的侵染之一。秋末受到侵染的幼果一般不表现症状,病菌在其内部潜伏越冬,至次年5、6月份有一部分开始发病,有相当数量的带菌果直至7、8月份果实进入增长后期才表现症状,病菌潜伏时期可达数月之久。病菌侵染果实的时期,除冬前外,从5月份前后至7、8月份皆可造成大量侵染,数量多少依侵染条件而定。果实发病的时期,大部分集中在8月份。通过套袋隔离方法,区分了不同时期侵染在发病过程中的作用。冬前的侵染数量较大,引致中后期果实发病的数量也大,而且还增加早春的落果率和中后期发病的菌源,在病害周年发生的过程中起重要作用;5——6月份的侵染,对病害的发展起加速作用,对后期的发病程度也有重要影响;7月中旬以后的侵染对发病的影响不大。油茶果实的抗病性存在着明显的阶段性差异。在离体接种情况下,幼嫩果实无伤接种的发病率高于后期;当刺伤接种时,前后期发病都很高。这表明前后期果实抗病性的差异可能与表皮结构是否抗侵入有关,而自然界中,果实集中于后期发病的原因,可能与生理生化因子是否抗扩展有关。三年来在秋末和春季,用内吸杀菌剂进行防治,能有效地减少幼果中潜伏病菌的越冬基数,也能减少病枝等部位上的菌源,推迟发病始期达一个月左右,对最终病情的防治效果,一般在70％左右。用内吸杀菌剂进行早期药剂防治,较之原提倡的在发病前后多次喷洒波尔多液等保护性药剂,要省药省工,而且效果比较稳定,可推广试用。     

利用蜜蜂提高油茶结实率及开发油茶蜜源的研究

<正> 长期以来,油茶林的一个突出问题是花多、果少,单产普遍很低,平均亩产茶油5-6斤,严重挫伤群众进一步发展油茶和管理好现有油茶林的积极性。造成油茶低产的原因是多方面的,如种质低劣混杂,经营管理水平不高等,但关键是油     

谈谈油茶早期衰老及其控制

衰老死亡,这是一切生物的必然规律。油茶和其它植物一样,当外界生态因子如光、土壤养分、水分等不能满足植物本身生长发育需要时,内部营养物质的积累就要起变化,引起生理失调;外部形态上表现出枝枯、叶黄、落叶、花果不生等症状。这种症状的发生,就是油茶已经进入衰老期。衰老分自然衰老和早期     

油茶苗圃炭疽病原菌鉴定及抗药性

【目的】探讨中国油茶苗圃炭疽病原菌种类,揭示油茶苗圃炭疽病菌抗药性,为其防治提供依据和指导。【方法】分离油茶苗圃炭疽病菌,并对分离菌株的ApMat基因进行PCR扩增和测序,通过对序列系统发育分析鉴定炭疽病原菌种类;采用区分剂量法测定所有菌株对杀菌剂多菌灵、乙霉威、戊唑醇和咪鲜胺的抗药性。【结果】湖南、江西、海南和广东4个省份分离的95株的油茶苗圃炭疽病病原菌主要是果生炭疽菌(Colletotrichum fructicola)、暹罗炭疽菌(C.siamense)、山茶炭疽菌(C.camelliae)和胶胞炭疽菌(C.gloeosporioides)4个种,其中炭疽病菌分布范围最广、分离数量最多(83株,占总分离菌株的87.4%)。抗药性测定结果表明,对多菌灵产生抗性的菌株有31个,占总分离菌株的32.6%;对戊唑醇产生了抗性的菌株有31株,占总分离菌株的32.6%。其中对多菌灵和戊唑醇这2种杀菌剂均具有抗性的菌株有6株,占总分离菌株的6.3%;对多菌灵、乙霉威和戊唑醇3种杀菌剂均有抗性的菌株有2株,占所有分离菌株的2.1%。但所有95个菌株对咪鲜胺敏感,说明目前苗圃油茶炭疽病菌尚未对咪鲜胺产生抗药性。29个高抗多菌灵而对乙霉威敏感菌株第198位氨基酸由谷氨酸(Glu)突变为丙氨酸(Ala),2株对多菌灵和乙霉威具有双重抗药性的菌株第200位氨基酸由苯丙氨酸(Phe)突变为酪氨酸(Tyr)。【结论】我国油茶苗圃炭疽病菌已对多菌灵/乙霉威和戊唑醇产生严重的抗药性,但对咪鲜胺尚未检测到抗药性。     

油茶开发的对策

油茶是我市主要的食用油料树种，资源丰富，分布很广，栽培历史悠久，在国民经济和人民生活中占有重要的地位。市委、市政府把发展油茶生产作为新的经济增长点，给予高度重视，已初见成效。但是，目前总体水平还很低，发展极不平衡，离目标要求还有较大的差距。不少油茶林...     

基于单核苷酸多态性位点的土沉香物种鉴定

对土沉香Aquilaria sinensis,云南沉香A. yunnanensis和马来沉香A. malaccensis 3种沉香属Aquilaria植物的ITS序列进行PCR扩增和测序,并通过DNAMAN软件筛选出单核苷酸多态性(SNP)位点,土沉香序列第236位上的碱基为C,而云南沉香和马来沉香为T,设计出土沉香特异性引物AS-F,AS-R和探针AS-P。实时荧光定量PCR实验表明,该引物探针能特异性扩增土沉香,且检测灵敏度可以达到0.01ng·μL~(-1),是一种快速、灵敏的鉴定方法。     

油茶杂交组合的灰色关联度分析

为给油茶定向育种提供理论依据,运用灰色关联度分析法对32个油茶杂交组合进行综合评判,分析了各品种的综合表现及各性状的作用关系。结果表明,各油茶杂交组合的加权关联度大小顺序依次为:XLH58,XLH63,XLH66,XLH68,XLH64,XLH76,XLH53,XLH65,XLH82,XLH77,XLH72,XLH79,XLH70,XLH57,XLH81,XLH80,XLH69,XLH75,XLH54,XLH78,XLH55,XLH51,XLH71,XLH59,XLH74,XLH61,XLH56,XLH73,XLH67,XLH60,XLH52,XLH62。各经济性状与产油量关系密切程度的顺序依次为:干籽含油率,鲜果出籽率,抗病性,果形指数,冠幅面积,总叶片数,单果质量,单株产果量。     

松材线虫与拟松材线虫杂交及后代的致病性

收集松材线虫5虫株与拟松材线虫1虫株进行生物学杂交,结果显示:松材线虫各虫株均能与拟松材线虫杂交且杂交率均较高,但杂交后代中普遍存在线虫死亡率较高的现象.用杂交后代线虫与未杂交亲本线虫分别接种2年生马尾松苗,结果表明杂交后代线虫对接种松苗的致病性小于其未杂交亲本线虫,从接种后萎蔫的松苗中再分离线虫,杂交后代线虫再分离数远少于亲本线虫数.     

蝴蝶兰杂交后代的快速繁殖体系研究

对蝴蝶兰杂交种子进行了无菌播种,获得实生苗,开花后选择优良单株,以单株的花梗为外植体进行快速繁殖,获得分生苗,结果表明:蝴蝶兰胚培养的最佳培养基为Hyponex1号3.0g/L 香蕉泥50.0g/L;0.1%HgCl2 8 min消毒对嫩花梗节适宜,10min消毒生理年龄较老的花梗节;以无菌花梗苗为增殖材料,增殖最佳培养基为1/2MS 6-BA5.0mg/L NAA0.5mg/L 椰子汁10%;Hyponex1号3.0g/L;香蕉泥100.0g/L 活性炭1.5g/L有利于壮苗生根。     

油茶品种类型的鉴定分析

油茶的品种和类型是在长期的选择过程中逐步形成的。而油茶品种类型的调查整理工作乃是集团选择的一个重要环节。遵照毛主席“有了优良品种,即不增加劳动力、肥料,也可获得较多的收成”的教导,我们从一九六○年起,对湘、浙、赣、黔、粤、桂、皖、苏