鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定

鸡传染性支气管炎是鸡的一种急性、高度接触性传染病,是严重危害中国养禽业的疫病之一。本研究通过临床表现、解剖症状、病毒干扰试验、鸡胚的特征性矮小病变、动物回归试验和RT-PCR试验等方法确认分离到的病毒是鸡传染性支气管炎病毒。     

鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定

一、实验方法1.病毒分离与增殖。从黑龙江省阿城市疑似IB发病鸡群中无菌采集肿大的肾脏、腺胃以及气管等组织样品,将病料和PBS按1:4比例加入PBS缓冲液,研磨成乳状,反复冻融3次后,8000rpm离心30min,取上清加入适量的灭菌生理盐水,上清中加入100IU/ml的青霉素和100μg/ml的链霉素,在4℃     

天津地区鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定

从天津不同地区临床表现呼吸困难、花斑肾或腺胃炎发病鸡分离到１１株病毒,通过血凝特性测定,电镜观察,动物回归试验和血清学中和试验等证实所分离病毒为传染性支气管炎病毒。     

鸡传染性支气管炎病毒的分离与鉴定

鸡传染性支气管炎对全球养鸡业带来巨大损失,虽已有商品化疫苗用于临床预防该疾病,免疫鸡群高发病率、高死亡率现象仍然常见。本试验旨在为重庆地区的传支流行毒株进行调查。通过病毒的分离培养和高变区部分序列测序,发现流行于重庆地区的鸡传染性支气管炎毒株与现有的疫苗毒株存在较大差异。某些位点的基因突变与病毒特性的改变之间是否存在联系还需要进一步的研究。     

鸡传染性支气管炎病毒的分离与鉴定

应用ＳＰＦ鸡胚盲目传代的方法，分别从陕西省西安市、扶风县、武功县和杨陵区具有传染性支气管为（ＩＢ）、临床特征的鸡群中分离到４株病毒。经电形态学观察、核酸型鉴定试验、脂溶剂敏感性试验、ＮＤＶ干扰试验、回归易感动物试验和鸡胚血清中和试验，鉴定为鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）。首次从病原学上证实陕西省确有ＩＢ流行，为省内防制该病提供了科学依据。     

鸡传染性支气管炎病毒的分离与鉴定

为对某鸡场发生的呼吸道疫病进行确诊,并对致病原进行分离和鉴定,本研究进行了发病鸡场临床诊断、病毒分离、分离毒株血凝试验、分离毒株RT-PCR检测以及序列分析等系列试验。试验结果显示,该病的临床特征疑似鸡传染性支气管炎病毒感染,临床病料样品接种鸡胚后可引起鸡胚死亡以及"侏儒胚"等典型症状,分离毒株无血凝性,分离毒株经传染性支气管炎病毒特异性引物检测为阳性,且序列分析显示RT-PCR扩增产物为鸡传染性支气管炎病毒特异性核苷酸序列,表明引起鸡场此次疫病的致病原为鸡传染性支气管炎病毒。     

一株鸡传染性支气管炎病毒的分离和鉴定

对枣庄市某养鸡场送检的疑似鸡传染性支气管炎病料进行分离和鉴定,通过发病鸡场病鸡临床症状观察,病理解剖,实验室PCR检测,鸡胚致病性试验、血凝实验,对鸡新城疫病毒的干扰试验、动物回归试验等,一系列试验结果表明,该病的临床症状和病理变化典型,实验室PCR检测为鸡传染性支气管炎阳性,病料处理接鸡胚后,24-48h鸡胚全部死亡,死亡鸡胚表现失水、蜷缩、发育小等特异性病痕,收获的鸡胚尿囊液无血凝性,分离毒对NDV感染有干扰作用;动物回归试验接种SPF雏鸡可复制出现鸡传染性支气管炎的典型症状。表明该鸡场确实发生了鸡传染性支气管炎病毒的感染,春季是该病的高发季节,应加强对该病的诊断和防控。     

一株鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定

本试验采集某养鸡场发病鸡的肾脏和肺组织病料,接种鸡胚盲传,发现从F3代开始出现侏儒胚及发育不良的鸡胚,经病毒血凝性测定、干扰NDV试验、RT-PCR鉴定,判定该病毒为鸡传染性支气管炎病毒,命名为HP-W株。对该分离株的S1基因进行扩增、测序,结果表明该毒株的S1基因长度为1 620 bp,与变异株4/91的核苷酸同源性为98.9%,氨基酸同源性为98.1%,与其他毒株核苷酸及氨基酸序列的同源性均低于80%。     

肾病型鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定

在成都大邑县，从疑似传染性支气管炎病难群中 采集样品，接鸡胚，经盲传分离出一株致鸡肾产生严重病的传染性支气管炎病毒。用该病毒经气管滴注雏鸡，复制出当地流行的疫病相同的症状和病变。     

鸡贤型传染性支气管炎病毒分离及鉴定

某鸡场暴发主要以侵害鸡肾脏的疾病，引起肾脏肿大、苍白，肾小管和输尿管有白色尿酸盐沉积，伴有下痢。产蛋鸡产蛋下降，雏鸡的死亡率达25%～90%。从感染鸡分离到1株疑为鸡肾型传染性支气管炎病毒，接种鸡胚，鸡胚出现侏儒化、卷曲等特征性病变。     

鸡传染性支气管炎S株病毒的分离与鉴定

一九七八年我们在松江县种禽场从临床呈现呼吸道罗音症状的白洛克病鸡中分离获得一株病毒,通过病毒特征性试验并与美国的M株、荷兰的H_(120)、H_(52)株病毒对照鉴定,确定为传染性支气管炎病毒(IBV)定名为S株。现将试验结果报导如下:     

鸡传染性支气管炎病毒上海株的分离与鉴定

本研究对分离自上海某养鸡场的疑似鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)进行了分离和鉴定.所采用的方法有:鸡胚致病性试验、对鸡新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)的干扰试验、动物回归试验以及RT-PCR鉴定等.试验结果表明,该病原接种鸡胚后,48 h可引起鸡胚死亡,胚体呈侏儒样变化,对NDV感染有明显干扰作用;用分离的病毒接种SPF雏鸡可产生明显呼吸道症状,肾脏表现肿大和大量尿酸盐沉积等病理变化;用IBV特异性引物可以从分离物中扩增出IBV的N基因序列,测序结果表明,该毒株属于肾型IBV.综上所述,本研究在上海流行区域成功分离到一株IBV,将其命名为SH11株.     

肾型鸡传染性支气管炎病毒的分离与鉴定

从我省某鸡场有一过性呼吸道症状及剖检肾肿的病鸡中分离到一株病毒，该病毒接种易感鸡可在２４～４８小时出现呼吸道症状，病鸡多数肾肿大、苍白，可致死部分鸡胚和产生侏儒胚，能在鸡胚中干扰鸡新城疫病毒ＬａＳｏｔａ株的生长，但不能凝集鸡红细胞．电镜观察见直径约１３０ｎｍ的圆形颗粒病毒。初步鉴定分离株是鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）。     

鸡传染性支气管炎病毒宁夏株的分离与鉴定

为了研究宁夏地区流行的鸡传染性支气管炎病毒生物学特性及流行疾病的特点,试验对分离株进行了病毒血凝特性试验、病毒干扰试验、鸡胚致病性试验、动物回归试验,随后采用RT-PCR技术对病毒的S1蛋白基因进行扩增和序列分析,并将病毒在传代Vero、BHK-21细胞系上盲传6代,同时提取细胞基因组RNA,采用RT-PCR扩增S1蛋白基因。结果表明:分离的病毒为鸡传染性支气管炎病毒,不能在传代细胞上进行适应培养,该地区流行的病毒株与H120同源性极高。     

肾型鸡传染性支气管炎病毒的分离与鉴定

从我省某鸡场有一定性呼吸道症状及剖检肾肿的病鸡中分离到一株病毒，该病毒接种易感鸡可在２４－４８小时出现呼吸道症状，病鸡多数肾肿大、苍白，可致死部分鸡胚和产生侏儒胚，能在鸡胚中干扰鸡新城疫病毒ＬａｓＯＴａ株的生长；但不能凝集鸡红细胞，电镜观察见直径约１３０ｎｍ的圆形颗粒病毒，初步鉴定分离株是鸡传染性支气管炎病毒。     

鸡传染性支气管炎病毒BJ0903株的分离鉴定

从北京某养鸡场疑似肾型传染性支气管炎病死鸡的肾脏和肺脏组织中分离到一株病毒,经SPF鸡胚连续传代、血凝试验、鸡胚矮小试验、干扰新城疫病毒复制试验、PCR鉴定和动物回归试验,初步确定该病毒为鸡传染性支气管炎病毒,命名为BJ0903株。     

鸡传染性支气管炎肠型病毒的分离与鉴定

本文报道鸡传染性支气管炎肠型病毒的首次分离与鉴定,其血清型不同于以前报道的ＩＢ病毒其他血清型。     

鸡传染性支气管炎病毒SC0812株的分离鉴定

通过鸡胚矮小试验、血凝性试验、鸡胚气管环组织培养试验、干扰新城疫病毒复制试验、RT-PCR和动物回归试验,将四川隆生分离的病毒鉴定为鸡传染性支气管炎病毒(IBV),并命名为SC0812株。     

腺胃病变型鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定

从１９９７年在辽宁省大连市某鸡场发生的一种以腺胃肿大为特征的鸡的传染病病例中收集腺胃组织（Ｄ９７１）接种ＳＰＦ鸡胚,传至１３代,具有规律性死亡和典型胚胎病变特征,ＥＩＤ５０为１０－６．４８／０．２ｍｌ。Ｄ９７１毒株感染ＳＰＦ鸡胚尿囊液经负染电镜观察,可见直径为８０～１２０ｎｍ,有囊膜和纤突的冠状病毒粒子。Ｄ９７１毒株经卵磷脂酶Ｃ处理后能凝集鸡红细胞,并能特异的被Ｄ９７１多抗所抑制。用反转录聚合酶链反应获得了Ｄ９７１毒株免原（Ｓ１）基因ｃＤＮＡ,经１％琼脂糖凝胶电泳可见１．７ｋｂ的特征性条带。用Ｄ９７１毒株接种ＳＰＦ鸡,能引起与自然病例相似的病理变化,并分离到病毒。用Ｄ９７１毒株可直接感染ＳＰＦ鸡胚成纤维细胞。结果证实从腺胃病变型ＩＢ鸡群中分离的Ｄ９７１毒株是冠状病毒科ＩＢＶ成员。