11种牛分枝杆菌抗原在牛结核病诊断中的初步评价

为筛选及评价用于牛结核病诊断的抗原,本试验将CFP-10、ESAT-6、TB10.4、TB27.4、MPT51、MPT63、MPT64、MPB70、MPB83、Rv3872和Ag85B共11种牛分枝杆菌抗原分别作为包被抗原建立间接ELISA方法,比较其对牛结核病的检出率;同时利用豚鼠和牛的皮试试验评价重组蛋白作为皮试试验刺激原的潜力。此外,将重组蛋白分别刺激结核病阳性牛和阴性牛的抗凝血24 h,检测血浆中的IFN-γ水平,评价各重组蛋白作为IFN-γ释放试验刺激原的潜力。结果显示,不同重组蛋白对结核病阳性血清的反应活性不一,MPB70总检出率最高,为59.7%;其次是Ag85B、ESAT-6和MPB83,检出率均在45%以上;MPT51的检出率最低,仅为2.2%。豚鼠和牛皮试试验均显示,单个重组蛋白作为刺激原难以产生令人满意的迟发型过敏反应（delayed type hypersensitivity,DTH）,而TB10.4、TB27.4、MPT64、MPT63或Rv3872作为补充抗原,分别与CFP-10或ESAT-6混合,均可特异性地刺激结核病阳性牛产生较强的DTH反应,且与PPD-B无显著差异（P>0.05）。重组蛋白CFP-10、ESAT-6、TB10.4和MPT51均能刺激结核病牛全血释放一定的IFN-γ,其中CFP-10、CFP-10-ESAT-6串联蛋白和MPT51刺激结核病阳性牛全血释放的IFN-γ显著高于阴性牛（P<0.05）。因此,这11种牛分枝杆菌抗原并不适合单独用于牛结核病的血清学诊断、皮试试验或IFN-γ释放试验,但以CFP-10和ESAT-6为核心,TB10.4、TB27.4、MPT64、MPT63、Rv3872或MPT51作为其补充抗原,均能提高检测敏感性,有作为皮试试验和IFN-γ释放试验特异性刺激原用于牛结核病诊断的潜力。     

四种牛分枝杆菌特异性蛋白融合表达及在牛结核病诊断中的临床应用

以原核表达的MPB70-MPB83-CFP10-ESAT-6融合蛋白作为诊断抗原,建立牛结核病抗体检测间接ELISA(iELISA)。该iELISA与导致常见牛病的非相关抗原无交叉反应。用iELISA检测90份健康牛血清,确定样本阴阳性临界值(S/P)为0.17。与商品化胶体金试剂条(ICG)平行检测150份临床奶牛血清样本,结果与ICG的符合率为93.33%(140/150)。以结核菌素皮内试验(TST)为参考方法,检测了华中地区四个奶牛场的560头中国荷斯坦奶牛和90份进口奶牛结核阴性血清,结果iELISA与TST的总符合率为87.32%(489/560)。对其中22头奶牛进行鼻拭子分菌检验,4头分菌阳性奶牛的血清抗体检测也为阳性,iELISA与细菌培养的总符合率为77.27%(17/22)。以TST为参考方法,iELISA的敏感性和特异性分别为72.37%和89.67%。     

牛结核分枝杆菌γ-干扰素在牛结核病检测中的优势

<正>牛结核病是由牛结核枝杆菌引起的一种人畜共患的慢性传染病。近年来,人结核病阳性检出率逐年上升,世界卫生组织在1993年4月宣布"全球结核病紧急状态",1998年又重申"遏制结核病的行动刻不容缓",并将每年3月24日定为"世界防治结核病日"。根报道,约有10.6%的人结核是由牛分枝杆菌引起的,牛结核病中的7%是由人结核杆菌引起。WHO同时指出,在那些还存在牛结核病的国家中,人类始终受到牛结核病的威胁,除非着手将其     

牛结核病诊断用特异性抗原的研究进展

本文综述了牛结核病诊断中几种特异性结核蛋白的研究进展。牛结核病的诊断方法主要是基于细胞免疫的皮肤变态反应和基于抗原抗体反应的血清学方法。目前牛结核病的主要诊断试剂为牛型提纯结核菌素(PPD),由于PPD与卡介苗及环境分枝杆菌存在交叉反应,导致特异性较低。根据这一情况,各种特异性抗原不断被发现并用于诊断。     

牛分枝杆菌基因分型方法及其在牛结核病流行病学中的应用

结核病是人类已知的最古老的疾病之一,早在1901年诺贝尔奖获得者Von Behring就曾强调“牛结核病是影响农业生产最具破坏力的一种传染病”。100多年过去了,结核病依然严重威胁着人类和动物的健康,并且其每年对全球农业造成的损失达30亿美元。牛结核病(bovine tuberculosis)已被世界动物卫生组织(OIE)列为B类动物疫病,是由牛分枝杆菌(Mycobacteriumbovis,MB)和结核分枝杆菌(My-cobacterium tuberculosis,TB)所引起的一种人畜共患慢性消耗性传染病,可以通过吸入含菌气溶胶或食用受污染的乳制品而从牛传染到人,牛结核病有众多的宿主谱,几乎…     

提纯结核菌素在牛结核病诊断上的初步应用

牛结核病是由结核分枝杆菌引起的慢性消耗性传染病。通常临床症状不明显。牛结核杆菌主要使牛致病,此外尚能使猪、绵羊及山羊致病,人尤其是儿童常因喝牛奶被感染患肠结核。据报道在城市儿童结核病中由喝牛奶引起的可占30%。据巴斯德研究所的研究人员报道在有的地区结核病人中由牛型分枝杆菌引起的可高达25.9%。结核病不仅严重     

用禽型（结核）分枝杆菌平板凝集抗原诊断禽结核病的初步探讨

用禽型（结核）分枝杆菌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ血清型参考菌株制备禽型结核杆菌平板凝集抗原,对１０２只禽结核病鸡的检出率为９０．２％ ,对３２只健康鸡出现９．４％ 的假阳性反应。因其使用方便、快速,对种鸡群进行禽结核病的检测和病鸡群的净化有一定的实用价值。     

用贝叶斯模型评价两种牛结核病免疫学诊断方法

为准确检测牛结核病,降低因假阳性检测结果对牛误杀造成的经济损失,运用牛结核病比较皮内变态反应试验和γ-干扰素体外检测试验,对新疆昌吉市2个规模养殖场的540头奶牛同时进行检测,汇总交叉结果,在无金标准的情况下,采用建立的贝叶斯模型评估两种免疫学诊断方法的敏感性和特异性。结果显示:比较皮内变态反应试验的敏感性为78.0%(55.1%～93.0%),特异性为97.8%(96.6%～98.8%);γ-干扰素体外检测试验敏感性为87.1%(73.4%～95.5%),特异性为98.1%(96.9%～99.0%)。进一步证实了使用γ-干扰素体外检测试验检测牛结核病的准确性会更高。同时也提示,在实际检测工作中,还应综合考虑养殖场的牛患病率、检测成本等因素;选择最适合的检测方法。     

牛结核病诊断新技术

皮试试验是诊断牛结核病的常规方法,但由于纯蛋白质衍化结核菌素（ＰＰＤ）多次使用,会明显影响牛结核病的诊断结果。为此,英国学者利用ＥＳＡＴ－６和ＭＰＢ７０两种特异性结核病抗原建立了全血ＩＦＮ—ｒ（ｒ干扰素）试验,并评价了其诊断效果。试验采集１８０头牛血样作皮试试验检测,其中１３１头被证实患有结核病,并且１２８头来自非结核牛群。对上述血清用两种抗原建立的ＩＦＮ－ｒ试验进行检测,结果两试验具有明显的阳性相关性（Ｐ＜０．００１）。与皮试试验比较,该方法的敏感性为７６．３％,特异性为９９．２％,而皮试试验…     

牛结核病的诊断

牛结核病是一种人兽共患病,其传播和流行影响着养牛业的发展和人类的健康。要想控制和消灭该病,必须依赖于有效的牛结核病诊断方法。本文从病原学、分子生物学、血清学等6个方面对该病的诊断方法进行了综述。     

牛结核病的诊断

牛结核病是由牛型结核分枝杆菌引起的一种人兽共患的慢性传染病,以组织器官的结核结节性肉芽肿和干酪样、钙化的坏死病灶为特征。可经呼吸道、食物及饮水等方式传播,引起患牛贫血、消瘦、体虚、精神萎靡等临床症状。笔者对牛结核病的诊断进行了分析,为临床诊疗提供依据。     

牛结核病诊断研究进展

近年来,牛结核病的诊断方法逐渐得到完善,并且找到了很多结核分支杆菌的特异性抗原及其基因。将传统细菌检验方法、免疫学方法和分子生物学的方法相结合,加速了对牛结核病的诊断的研究。特别是分子生物学技术的发展,对于阐明牛分支杆菌和结核分支杆菌的遗传变异规律及分子进化等方面都有重要的流行病学意义。     

IP-10作为牛结核病诊断标志物的初步探究

为评价细胞因子IL-12 p40、IP-10和TNF-α转录水平与牛分枝杆菌感染之间的关系,及其在牛结核病诊断中的应用潜力。采集田间筛选的结核病阳性牛、结核病阴性牛以及牛分枝杆菌68002人工感染牛的外周血淋巴细胞,经牛结核菌素(PPDB)、重组蛋白CFP-10-ESAT-6(CE)、MPT63、PET和PBS分别刺激6 h,提取细胞总RNA,用荧光定量PCR检测IL-12 p40、IP-10、IFN-γ和TNF-α的转录水平。结果显示结核病阳性牛的外周血淋巴细胞经PPDB和CE刺激后,其IP-10的m RNA转录水平显著高于结核病阴性牛,且与IFN-γ的m RNA转录水平具有良好的相关性;初步建立牛结核病IFN-γ和IP-10的Real-time PCR检测方法,其对临床阳性样本的检出率分别为71.45%和78.57%。因此,IP-10的m RNA转录水平与牛分枝杆菌的感染相关,有作为牛结核病诊断标志物的潜力。     

牛结核病诊断技术研究进展

牛结核病(Bovine Tuberculosis, TB)是由牛结核分枝杆菌等引起的一种慢性消耗性人兽共患传染病,该病不仅会对畜牧业造成严重经济损失,还会对人类身体健康造成威胁,我国将其列为二类动物疫病,该传染病是国内外迫切需要解决的严重公共卫生安全问题之一。目前,牛结核病在世界各地均有流行,其通用的诊断方法是采用牛型结核菌素PPD皮内变态反应试验,根据测量的皮厚差进行结果判定,在基层应用较为广泛,也是国家检测牛结核病的行业标准,但该方法的缺点是试验操作时间长达72 h,要2次抓牛测量其皮厚度,对试验牛的应激反应和生产干扰较大,且检测人员的操作易对检测结果造成影响。因此,在实际生产当中应用不同诊断方法进行牛结核检测对克服试验误差具有重要意义。随着牛结核新型诊断方法和技术的不断发展,IFN-γ释放试验(IGRA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、序列扩增技术(NASBA)、全基因组测序法(WGS)以及聚合酶链式反应(PCR)法等被广泛应用于兽医临床结核病诊断,使该病检测的敏感性和特异性均得到很大提高。但现实中需要从价格、实用性等生产角度出发,选择出最佳诊断方法。在实际生产应用中,由于结核病存在细胞免疫和体液免疫分离现象,无论是牛型结核菌素PPP皮内变态反应试验、γ-干扰素体外释放试验还是聚合酶链式反应(PCR)法都难以准确无误地诊断牛结核病,因此确诊牛结核病比较理想的方法是2种或2种以上方法的联合使用。     

牛结核病的诊断研究进展

牛结核病是由结核分支杆菌引起的牛的一种慢性消耗性传染病,不仅严重危害养牛业的发展,也对人的身体健康造成威胁。做好牛结核病的诊断,是实现该病净化的一种重要手段和前提。本文从病原学、血清学、分子生物学等方面对该病的诊断进行了阐述。     

牛结核病诊断方法研究进展

牛结核病是一种严重的人畜共患病。给奶牛业造成了巨大的损失,还与人们的生命安全息息相关。结核病的早期诊断仍然是控制疫情的重要因素。近年来随着分子生物学和免疫技术的快速发展,在改善原有诊断技术的基础上也引入了多种新的结核病的诊断技术。新型培养技术缩短了细菌学检查和结核菌药敏试验的时间;分子生物技术的应用（比如PCR）使得快速诊断成为可能;血清学方法的改善以及噬茵体测定、γ-干扰素试验等新技术的引入给临床诊断带来了新的希望。本文就结核病的诊断技术进行综述。     

牛结核病诊断方法研究进展

<正>牛结核病(Bovinetuberculosis)是由牛分枝杆菌(Mycobacterium bovis)引起的一种人畜共患的慢性消耗性传染病。牛结核病被世界动物卫生组织(OIE)列为必须报告的动物疫病,我国将其列为二类动物疫病。牛结核病的检测方法可归为2大类:一类是细菌学、分子生物学等直接检测法,另一类是免疫学、噬菌体测定等间接检测法。现有的研究结果显示,仅靠单一的检测方法很难筛选出牛群中所有结核感染牛,因此在临床可以综合应用一种以上的检测方法,提高检测的敏感性     

牛结核病诊断方法研究

牛结核病主要是由牛分支杆菌引起的一种人畜共患传染病,近年来该病发病率有所上升,给奶牛养殖业造成了巨大的危害。目前,牛结核病的诊断仍然以传统的迟发性变态反应试验为主,其他诊断方法有根据临床症状和病理变化诊断、抗酸染色法、PCR法、血清学等方法。为了净化该病,必须提高诊断方法的敏感性和特异     

牛结核病免疫学诊断研究进展

牛结核病是一种严重危害养牛业、食品安全和公共卫生的人兽共患传染病。由于检疫和扑杀是目前控制牛结核病的基本策略,检测技术成为影响牛结核病控制效果的重要因素。理想的检测方法应具有准确、简便、高效、成本低、对动物干扰小、结果可追溯等特点。当前的法定检疫方法为结核菌素皮内变态反应,该方法具有受环境分枝杆菌干扰、诊断特异性低、费时费力、对动物干扰大、结果判断主观性强、不可回溯等缺陷。一些牛结核实验室诊断技术克服了以上缺点,可与皮试法联用或单独使用。新型诊断抗原仍在不断被发掘,新型材料也被不断用于牛结核病诊断技术中。现对相关进展进行了归纳和综述,以期为牛结核病免疫学诊断的合理应用及深入研究提供参考。     

牛结核病诊断技术研究进展

牛结核病是严重危害人类健康和畜牧业发展的人兽共患传染病,尚无有效的疫苗预防。快速、准确诊断对于控制该病、保护人类健康和促进畜牧业稳定发展具有重要意义。近年来,随着牛结核病新型诊断方法和技术的不断涌现,使该病检测的敏感性和特异性得到提高。文章主要针对结核菌素皮肤试验(TST)、γ-干扰素释放试验(IGRA)、酶联免疫吸附试验(ELASE)、序列扩增技术、全基因组测序法(WGS)等牛结核病诊断技术的研究进展进行综述,以期为牛结核病的临床检测提供科学依据。