茴香挥发物对三七根腐病菌的抑制活性及抑菌物质鉴定

[目的]明确茴香挥发物对三七主要根腐病菌的抑制活性及主要抑菌物质,为利用茴香与三七多样性种植防控三七根腐病提供理论依据.[方法]采用菌丝生长速率法测定茴香茎叶挥发物对3种三七根腐病菌(茄腐镰刀菌F-3、恶疫霉菌D-1和毁灭柱孢菌RS006)的抑制活性;收集茴香挥发物并通过气相色谱—质谱联用仪(GC-MS)分析挥发物成分及其相对含量;通过化合物抑菌活性测定明确挥发物中主要的抑菌物质.[结果]茴香茎叶挥发物对3种三七根腐病菌(F-3、D-1和RS006)菌丝生长的抑制活性均随着用量的增加而增强,且对D-1和RS006的抑制能力强于F-3;当用量达2.0 g/皿时,茎部挥发物对F-3、D-1和RS006的抑制率分别为14.50%、66.10%和85.90%;叶部挥发物对F-3、D-1和RS006的抑制率分别为15.20%、67.60%和79.10%.GC-MS分析表明,茴香挥发物中主要是烯烃类(39.47%)和萜烯类(25.68%)物质,主要的单体成分为1,6-二甲基-1,5环辛二烯(36.82%)、4-烯丙基苯甲醚(17.05%)、萜品油烯(9.28%)、茴香脑(7.68%)和罗勒烯(5.19%)等.挥发物单体抑菌活性测定结果表明,4-烯丙基苯甲醚的抑菌活性较强,在1200 mL/m3时对F-3和RS006的抑制率分别为48.59%和86.17%,在800 mL/m3时对D-1的抑制率已达100.00%.[结论]茴香挥发物能较好地抑制三七根腐病菌生长,主要的抑菌单体成分为4-烯丙基苯甲醚,可利用茴香与三七进行间作或套作以防控根腐病.     

9种植物提取物对三七根腐病病原菌的抑菌活性测定

以髓烂型三七根腐病病原菌为供试材料,采用二倍稀释法和生长速率法研究了苦楝子、瑞香狼毒等9种植物提取物对三七根腐病病原菌的抑菌活性,并进一步研究了苦楝子提取物对供试病原菌的毒力。结果表明,相较于其他几种植物提取物,苦楝子提取物对三七根腐病病原菌菌丝生长具有较好的抑制效果,在质量浓度为2 mg/m L时,抑制率为100%;在96 h时,对病原菌的EC_(50)为0.60 mg/m L。说明苦楝子提取物对三七根腐病病原菌具有较强的抑制作用,具有开发成新型绿色植物源抗菌剂的潜力。     

油菜内生真菌的分离及其抑菌活性的研究

[目的]探讨油菜内生真菌的抑菌活性。[方法]从油菜的不同组织内分离内生真菌,研究它们对植物病原真菌的抑制作用,并对活性菌株进行了初步鉴定。[结果]从油菜的根、茎、叶中共分离出12株内生真菌,其中2株(WG5和WJ2)对病原真菌均有不同程度的抑制作用,尤其对油菜菌核病菌和小麦黄斑叶枯病菌的抑制率最高,而且其发酵滤液经高温处理后活性不丧失,对病原真菌仍有较强的抑制作用,具有一定的生防潜能。[结论]油菜内生真菌可以产生具有抑菌活性的次生代谢产物,为新型活性物质的筛选提供新的途径。     

虎耳草精油化学成分及其抑菌活性

采用水蒸气蒸馏法提取虎耳草精油,通过气相色谱-质谱联用法(GC-MS)对精油进行成分分析。鉴定出35种化学成分,占总馏出峰面积的78.22%,主要成分为十五烷酸27.93%,(2E,5E)-3,4,5,6-四甲基-2-5-辛二烯6.28%、邻苯二甲酸丁酯辛酯5.54%、9-十六碳烯酸5.01%。生长速率法测定表明,虎耳草精油对小麦全蚀病菌和番茄早疫病菌的抑制活性较高,在500mg/L剂量下抑制率均在90%以上;对玉米大斑病菌和油菜菌核病菌在750mg/L剂量下的抑制率在80%以上,而对其他几种病菌的抑制率相对较低。     

10种植物提取物对葡萄根腐病菌的生物活性测定

采用生长速率法测定了10种植物提取物对葡萄根腐病菌(Fusarium oxysporum)的抑制活性,并对抑菌活性较高的植物提取物进行梯度试验和毒力分析,旨在筛选出具有较高抑菌作用的植物资源,同时为葡萄根腐病的绿色防控提供一定的理论依据。结果表明,96 h后,质量浓度为2 mg/m L时,丁香、八角茴香、厚朴提取物的抑菌效果最好,抑制率均在85%以上,其EC50值分别为0.487 9,0.268 2,0.247 3 mg/m L。表明丁香、八角、厚朴提取物中含有葡萄根腐病的抑菌物质,这3种植物提取物有待进一步开发利用。     

枳壳挥发油化学成分及其抑菌活性分析

[目的]比较分析枳壳与麸炒枳壳挥发油成分及其抑菌活性差异。[方法]采用水蒸气蒸馏法提取枳壳、麸炒枳壳的挥发油,并通过GC-MS分析枳壳与麸炒枳壳挥发油的化学组成;采用滤纸片法研究枳壳与麸炒枳壳挥发油的抑菌活性。[结果]枳壳挥发油中主要化学成分相对含量高于麸炒枳壳;枳壳和麸炒枳壳挥发油对试验菌均具有抑制活性,但麸炒枳壳挥发油活性较优。[结论]枳壳与麸炒枳壳挥发油的抑菌活性可能与其主要化学成分含量差异有关。     

含笑花精油的抑菌活性及其化学成分分析

运用水蒸气蒸馏法提取含笑花精油,分别采用平板菌落法和滤纸片法检测精油对细菌和真菌的抑菌活性,并运用GC/MS法分析精油的化学成分.结果表明:含笑花精油对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌和总状毛霉抑制效果较佳,抑菌率分别达70.36%、60.24%和65.52%;对金黄色葡萄球菌、黄曲霉具有一定的抑制作用,对米根霉无抑制效果;从含...     

紫罗兰挥发物化学成分分析及促生活性物质鉴定

【目的】探明紫罗兰挥发物主要化学成分并鉴定其中的促生活性物质,为开发植物源生长调节剂提供参考。【方法】采用常温常压吹气法和气相色谱-质谱法收集和分析紫罗兰地上部分挥发物,以生菜种子为材料筛选其促生活性成分。【结果】紫罗兰挥发物中相对含量大于0.05%的化学物质共37种,包含脂类18种、萜烯类8种、醇类3种、酮类3种、酚类2种、烃类2种和醛类1种。这37种主要成分中分别有83.33%和94.44%对生菜幼苗茎生长和鲜质量有促进作用,分别有27.78%和44.44%对种子萌发和根生长有促进作用。其中,丙二酸二乙酯、丁香酚和茴香脑对生菜种子萌发的促进效果显著高于其他化学成分(P<0.05),平均化感效应指数(RI)分别为0.30、0.20和0.16;丁香酚和茴香脑对生菜幼苗茎生长、根生长和鲜质量促进效果最好(P<0.05),平均RI分别为0.79和0.76、0.74和0.80、0.56和0.56;丁香酚和茴香脑对种子萌发、茎和根生长以及鲜质量均有显著促进效果(P<0.05),综合化感效应大于0.50。【结论】紫罗兰挥发物对受体植物化感作用的方向(促进或抑制)和强弱与作用部位...     

枯草芽孢杆菌Czk1挥发物混合活性组分对橡胶灵芝菌的抑菌机理

红根病是我国分布广、发病率高、危害较为严重的橡胶树根部病害.为明确枯草芽孢杆菌Czk1菌株产生的挥发性物质对橡胶红根病原菌橡胶灵芝菌(Ganoderma pseudoferreum)的抑菌作用,以挥发性物质的主要成分苯甲醛、3,5-二.甲氧基苯乙酮、2,6-二叔丁基对甲酚为研究对象,分析其对橡胶灵芝菌的糖、蛋白、DNA...     

邻菲啰啉及其配合物对人参锈腐病菌的抑菌活性

采用生长速率法测定0.01 mol/L邻菲啰啉及其配合物对人参锈腐病菌室内抑菌活性的结果,对人参锈腐病菌均有抑菌活性,其中Phen、Pr-P-S、Nd-P-S的抑菌率最高,达到100%,说明这3种药剂对人参锈腐病菌菌丝生长具有很强的抑制作用;其次为Tb-P-S和Y-P-S,其抑菌率达到60%.选取抑菌效果好的Phen、Pr-P-S、Nd-P-S进行室内毒力试验,3种药剂抑制人参锈腐病菌菌丝生长和孢子萌发的EC50值均较小,说明这3种药剂在较低浓度下对人参锈腐病菌菌丝生长和孢子萌发具有很强的抑制活性.     

砷钼杂多酸分光光度法测定三七中总砷含量

[目的]获得快速检测三七中总砷的方法。[方法]采用砷钼杂多酸分光光度法测定人工种植三七中的总砷含量,并优化其显色条件。[结果]最佳显色条件：显色剂用量为5.0 ml,显色温度为40℃,显色时间为30 min;AsⅢ标准溶液在浓度为0～0.04μg/ml时,与吸光度呈良好的线性关系（r=0.996 6）;样品中未检测到As。[结论]该方法精密度高,稳定性好,可作为三七中砷含量的检测方法。     

Experiment on planting Panax notoginseng (Burk.) F.H.Chen in low elevation forests of Wuzhou

[目的]探讨梧州低海拔林下种植三七的可行性,为扩大梧州乃至广西三七种植规模提供理论依据.[方法]采用林下田间栽培法,调查记录梧州低海拔林下三七的出苗、现蕾、开花、病虫害发生率、产量、质量、重金属含量及农药残留量等.[结果]梧州林下三七的出苗率、现蕾率及开花率分别高达96％、88％和90％,发病率及虫害率分别不高于0.57％和0.72％,平均产量为2526 kg/ha,质量指标达到2010年版《中华人民共和国药典》标准要求,重金属限量和农药残留量均符合《药用植物及制剂外经贸绿色行业标准(WM/T 2-2004)》的规定.[结论]梧州低海拔林下种植三七具有可行性,可在广西低海拔地区推广.     

三七总皂苷提取工艺研究

目的 研究三七中总皂苷的提取工艺。方法 采用均匀设计法安排试验进行优选，以分光光度法测得的总皂苷的含量为指标进行评价，利用多元回归分析，确定最佳提取工艺参数。结果 将三七粉碎，称取10g，分别用10、8、6倍量水回流提取3次，每次3．5h，滤过，合并滤液，通过大孔吸附树脂柱（树脂用量为药材量的0．25倍），先用水洗2个保留体积，然后用95％乙醇洗脱4个保留体积，收集乙醇洗脱液，回收乙醇、减压干燥、粉碎，即得三七总皂苷提取物。结论 利用最佳工艺条件能充分、有效地提取三七药材中的总皂苷。     

3年生三七吸肥规律研究

目的 掌握3年生三七对氮、磷、钾肥的吸收利用规律.方法 采用田间试验与室内检测相结合的方法,设定不同肥料用量田间试验,定期采样进行植株养分含量测定.结果 肥料用量对植株养分吸收及产、质量均有一定影响.结论 三七养分吸收的高峰期为6月和11月,较利于实现三七优质、适产栽培的肥料用量为纯氮450 kg/hm2、P2O5 337.5kg/hm2、K2O 900 kg/hm2.     

梧州低海拔林下三七种植试验

[目的]探讨梧州低海拔林下种植三七的可行性,为扩大梧州乃至广西三七种植规模提供理论依据.[方法]采用林下田间栽培法,调查记录梧州低海拔林下三七的出苗、现蕾、开花、病虫害发生率、产量、质量、重金属含量及农药残留量等.[结果]梧州林下三七的出苗率、现蕾率及开花率分别高达96%、88%和90%,发病率及虫害率分别不高于0.57%和0.72%,平均产量为2526 kg/ha,质量指标达到2010年版《中华人民共和国药典》标准要求,重金属限量和农药残留量均符合《药用植物及制剂外经贸绿色行业标准(WM/T 2-2004)》的规定.[结论]梧州低海拔林下种植三七具有可行性,可在广西低海拔地区推广.     

三七根际土壤中皂苷类自毒物质降解拮抗细菌的分离筛选

[目的]筛选出既可降解三七皂苷类自毒物质又能拮抗三七锈腐病菌的细菌菌株,为防治三七病害及克服连作障碍提供生防资源.[方法]利用连续稀释法从健康三七根际土壤中分离可培养细菌,测定细菌菌株在以粗皂苷为唯一碳源培养基上的生长情况,以对峙培养法测定细菌菌株对三七锈腐病菌毁灭柱孢菌(Cylindrocarpon destruc-tans)RS006的拮抗活性;结合16S rDNA测序和形态学特征对活性菌株进行分类鉴定,并通过HPLC测定活性菌株在不同时间内对主要皂苷类自毒物质(R1、Rg1、Re、Rb1和Rd)的降解能力.[结果]从三七根际土壤中分离获得91株细菌分离物,其中17株分离物能在以粗皂苷为唯一碳源的培养基上生长、14株分离物对菌株RS006具有拮抗活性;菌株41既能以三七粗皂为唯一碳源生长,又对菌株RS006具有较强抑制活性.综合菌株41的形态特征和16S rDNA分子鉴定结果,将菌株41鉴定为蒙氏假单胞菌(Pseudomonas monteilii),编号为PM-41.菌株PM-41对三七主要皂苷类自毒物质R1、Rg1、Re、Rb1和Rd均存在较明显的降解效果.[结论]蒙氏假单胞菌PM-41既能拮抗毁灭柱孢菌又能有效降解三七皂苷类自毒物质,具有防治三七锈腐病和缓解三七连作障碍的生防潜力.     

温度胁迫对三七光合特性及生理指标的影响

[目的]研究三七对温度胁迫的生理响应,揭示三七的耐寒和耐热机制,为三七抗逆品种的选育、区域化种植和栽培管理提供理论依据.[方法]以盆栽生长第2年的三七植株为试验材料,利用人工气候培养箱进行5、10、25(对照)和35℃温度处理,持续处理48 h后测定三七叶片的光合特性及叶绿素含量、保护酶活性等生理指标,并分析其变化规律.[结果]在5~25℃的温度条件下,三七叶片的叶绿素a(Chla)、叶绿素b(Chlb)和总叶绿素[Chl(a+b)]含量呈先升后降的变化趋势,与25 ℃处理相比,5 ℃处理分别降低21.91%、23.30%和22.78%,10 ℃处理分别提高51.69%、52.43%和51.96%,差异均达显著水平(P<0.05,下同);与25℃处理相比,35℃高温条件下,Chla、Chlb和Chl(a+b)含量及Chl(a/b)分别降低14.61%、6.80%、11.74%和8.10%,差异均达显著水平.低温胁迫下,三七叶片的最大净光合速率(Pmax)、表观量子效率(a)、光饱和点(LSP)、净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)和蒸腾速率(Tr)均显著下降,胞间二氧化碳浓度(Ci)显著升高,光补偿点(LCP)呈先升后降的变化趋势;高温胁迫下,三七叶片的Pmax、LSP、Pn、Gs和Tr均显著下降,Ci、a和LCP则呈上升趋势.在低、高温胁迫条件下,三七叶片的过氧化氢酶(CAT)活性显著降低,过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)活性总体上显著升高;丙二醛(MDA)含量变化不明显.低温胁迫下三七叶片的可溶性蛋白含量显著升高.[结论]低、高温胁迫均显著抑制三七的光合能力.低温胁迫下,三七主要通过提高POD和SOD活性,增加可溶性蛋白和叶绿素含量来增强其抗冷性;高温胁迫下,三七主要通过提高POD和SOD活性来增强其抗热性.     

广西田七病害及其与生态因子关系调查

【目的】进行广西田七病害调查,为今后广西田七病害防治工作提供参考依据。【方法】2014~2015年于田七病害发生高峰期,采用平行线取样法在广西百色市不同海拔、不同遮光率、不同荫棚类型及不同七龄的田七园开展田七病害种类、分布和为害程度等调查,统计各调查点发病株数,计算发病率和病情指数;同时观察并记录各观测点的海拔、遮荫棚透光率、荫棚类型及七龄等生态因子情况。【结果】广西田七主要真菌性病害7种,分别为圆斑病、黑斑病、根腐病、炭疽病、灰霉病、白粉病和疫病。在广西百色市,田七圆斑病和黑斑病在高海拔区域发生严重;根腐病在低海拔区域发生严重;荫棚透光率越大,叶部病害越严重;避雨荫棚田七叶部病害比普通荫棚轻。【结论】圆斑病、黑斑病和根腐病是目前广西田七生产上危害最严重的病害。通过避免在地势低洼、排水不畅的地方建园,设计避雨荫棚,保持园内通风,可极大降低田七病害的发生程度。     

有机覆盖三七对土壤养分及微生物多样性的影响

为研究有机覆盖物对三七土壤养分以及微生物丰富度和多样性的影响,采用完全随机区组小区试验,将有机覆盖物覆盖于播种三七种子的土壤表面,设置黄花蒿覆盖（HHH）、万寿菊覆盖（WSJ）、金荞麦覆盖（JQM）、松针覆盖（SZ）和无覆盖（CK）共5个处理。覆盖生长10个月后采集土壤样品,利用化学分析和高通量测序检测土壤养分含量及进行微生物物种丰富度和多样性分析。结果显示：①覆盖10个月后,处理HHH和SZ检测的土壤有机质含量显著高于CK,HHH的全氮和水解性氮含量显著高于CK,SZ处理的有效磷和速效钾含量显著高于CK。②全氮含量与水解性氮存在显著正相关（P<0.05）。③对细菌的高通量测序共获得27门64纲131目263科444属。变形菌门（Proteobacteria）、放线菌门（Actinobacteria）和拟杆菌门（Bacteroidetes）是主要共有优势菌门,Acidibacter、芽单胞菌属（Gemmatimonas）、黄杆菌属（Flavobacterium）为主要优势菌属。处理WSJ、JQM、SZ的细菌丰富度和多样性高于CK,HHH细菌丰富度和多样性低于CK。④对真菌的高通量测序共获得12门40纲115目246科510属。子囊菌门（Ascomycota）、担子菌门（Basidiomycota）与接合菌门（Zygomycota）为共有优势菌门,锥盖伞属（Conocybe）、镰刀菌属（Fusarium）、被孢霉属（Mortierella）为主要优势菌属。覆盖处理的真菌丰富度和多样性均低于无覆盖处理。说明黄花蒿和松针覆盖为三七的生长提供了养分,有机覆盖物均能提高三七的抗病原菌能力,SZ覆盖对减轻三七根腐病的发生和解决三七种植过程中的连作障碍有一定作用,结果为三七覆盖种植提供理论依据和配套栽培技术支持。