成都地区宠物犬感染犬瘟热病毒和犬呼吸道冠状病毒的分子流行病学调查

为了解成都地区宠物犬犬瘟热病毒（canine distemper virus,CDV）和犬呼吸道冠状病毒（canine respiratory coronavirus,CRCoV）的感染情况,本试验应用RT-PCR对采自成都地区8家动物医院共计420份出现呼吸道症状的宠物犬鼻腔棉拭子样本进行分子检测。结果发现,从420份样本中,检出213份CDV阳性,检出率为50.71%;检出247份CRCoV阳性,检出率为58.81%;CDV和CRCoV混合感染的检出率为41.19%。表明成都地区宠物犬感染CDV和CRCoV较为严重,且二者混合感染率较高。宠物犬CDV和CRCoV的检出率与年龄、性别、品种、季节和免疫状况等因素的关系存在不同程度的差异。其中,1~3月龄幼犬检出率最高,分别为74.40%和79.20%;纯种犬的检出率较其他犬种高,分别为59.37%和62.22%;春季CDV的检出率较高,为56.19%,而冬季CRCoV的检出率较高,为67.59%;未免疫犬的检出率较高,分别为64.42%和63.46%。该研究丰富了成都地区宠物犬CDV和CRCoV的流行病学资料,为该地区宠物犬CDV和CRCoV的诊断及防控提供了基本数据。     

北京地区犬呼吸道冠状病毒感染状况的监测与分析

本研究旨在分析犬呼吸道冠状病毒(canine respiratory coronavirus, CRCoV)的感染情况和在北京地区的流行病学状况。采用RT-PCR方法,对自2015年12月—2017年3月于中国农业大学动物医院采集的487份犬咽鼻拭子进行了CRCoV检测,同时,对部分样本进行了犬副流感病毒(canine parainfluenza virus, CPIV)、犬腺病毒II型(canine adenovirus type 2,CAV-2)、犬瘟热病毒(canine distemper virus, CDV)等病毒的混合感染情况调查。结果表明：CRCoV的阳性率为21.36%(104/487);CRCoV与CPIV、CAV-2、CDV的混合感染率分别为3.43%(11/321),0%(0/156)和3.85%(6/156)。在所有呼吸道症状记录完整的455例样本中,无呼吸道症状的犬CRCoV携带率为27.19%(31/114);呈轻度呼吸道症状(鼻液、咳嗽)的犬CRCoV感染率为19.73%(59/299);呈中至重度呼吸道症状(肺炎)的犬CRCoV感染率为14.28%(6/...     

犬瘟热病毒自然感染宠物犬不同部位检出率的分析

本试验利用RT-PCR检测方法对犬瘟热病毒(CDV)自然感染宠物犬的不同部位样品进行检测,确定CDV在感染犬组织中的分布情况。对14只CDV阳性犬的血液、眼分泌物、鼻液、唾液、粪便和尿液进行检测,RT-PCR方法检出的阳性率分别为92.9%、85.7%、100%、85.7%、100%和66.7%,结果显示粪便和鼻液样品的检出率最高,检出率达100%,宜于作为检测对象取材。     

5种常见犬腹泻病毒基因芯片检测方法的建立

为建立一种简便、快速、高效的可同时区分犬腺病毒1型（canine adenovirus type 1,CAV-1）、犬腺病毒2型（canine adenovirus type 2,CAV-2）、犬冠状病毒（canine coronavirus,CCV）、犬瘟热病毒（canine distemper virus,CDV）、犬细小病毒（canine parvovirus,CPV） 5种常见犬腹泻病毒的基因芯片诊断方法,本研究以CAV-1、CAV-2、CCV、CDV、CPV 5种犬腹泻病毒为靶病毒,根据NCBI上收录的病毒基因序列在其保守区域内设计引物,在此基础上根据变异区域设计针对每种病毒的探针2~3条,优化检测体系的各反应条件,确定该检测方法的特异性与敏感性,建立可同时区分5种病毒的基因芯片检测方法。结果显示,建立的基因芯片检测方法可同时检测以上述5种犬腹泻病毒,其中PCR的退火温度为55℃、延伸时间为1 min 15 s;探针与PCR产物的杂交温度40℃、杂交时间2.5 h时,该方法对CAV-1、CAV-2、CCV、CDV和CPV 5种病毒标准品的检测限分别为0.2 fg/μL、2 fg/μL、2 fg/μL、20 pg/μL和0.02 fg/μL,具有较高的灵敏性;同时对犬副流感病毒进行特异性试验,发现无阳性信号出现,具有较强的特异性;对14份临床腹泻样品检测结果显示,基因芯片方法对CAV-1、CAV-2、CCV、CDV和CPV 5种病毒的阳性检出率分别为28.57%、50.00%、64.28%、14.28%和85.71%,并且基因芯片检测方法的敏感性较PCR要高10~100倍。以上结果表明,本研究建立的基因芯片检测方法具有特异、敏感等特点,对临床中犬类混合感染病毒检测具有一定的诊断意义。     

新疆部分城市宠物犬肠道寄生虫感染情况调查

为了解新疆城市宠物犬肠道寄生虫感染情况,笔者采用饱和蔗糖溶液漂浮法对新疆5个城市的477份宠物犬粪便样本进行了检查。结果显示,113份样品呈肠道寄生虫虫卵/卵囊阳性,总感染率为23.7%。共检出7种(类)寄生虫虫卵或卵囊,以球虫为优势感染虫种,感染率为13.8%;蛔虫感染率次之,为9.2%;隐孢子虫,圆线虫,钩虫,鞭虫及带科绦虫感染率分别为0.6%、2.7%、0.4%、0.2%和0.2%。在宠物店内饲养犬的肠道寄生虫感染率较高,为33.2%;宠物医院及犬舍内宠物犬的肠道寄生虫感染率分别为14.7%和8.5%。雄犬感染率(26.0%)高于雌犬感染率(21.7%);6月龄以下,7～12月龄,1岁以上宠物犬的感染率分别为30.9%、20.5%和3.8%,随年龄增长呈递减趋势。调查结果表明,应进一步加强宠物犬肠道寄生虫的驱除工作和公共卫生知识宣传。     

5种常见犬腹泻病毒基因芯片检测方法的建立

为建立一种简便、快速、高效的可同时区分犬腺病毒1型(canine adenovirus type 1,CAV-1)、犬腺病毒2型(canine adenovirus type 2,CAV-2)、犬冠状病毒(canine coronavirus,CCV)、犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)、犬细小病毒(canine parvovirus,CPV) 5种常见犬腹泻病毒的基因芯片诊断方法,本研究以CAV-1、CAV-2、CCV、CDV、CPV 5种犬腹泻病毒为靶病毒,根据NCBI上收录的病毒基因序列在其保守区域内设计引物,在此基础上根据变异区域设计针对每种病毒的探针2～3条,优化检测体系的各反应条件,确定该检测方法的特异性与敏感性,建立可同时区分5种病毒的基因芯片检测方法。结果显示,建立的基因芯片检测方法可同时检测以上述5种犬腹泻病毒,其中PCR的退火温度为55℃、延伸时间为1 min 15 s;探针与PCR产物的杂交温度40℃、杂交时间2.5 h时,该方法对CAV-1、CAV-2、CCV、CDV和CPV 5种病毒标准品的检测限分别为0.2 fg/μL、2 fg/μL、2 fg/μL、20 pg/μL和0.02 fg/μL,具有较高的灵敏性;同时对犬副流感病毒进行特异性试验,发现无阳性信号出现,具有较强的特异性;对14份临床腹泻样品检测结果显示,基因芯片方法对CAV-1、CAV-2、CCV、CDV和CPV 5种病毒的阳性检出率分别为28.57%、50.00%、64.28%、14.28%和85.71%,并且基因芯片检测方法的敏感性较PCR要高10～100倍。以上结果表明,本研究建立的基因芯片检测方法具有特异、敏感等特点,对临床中犬类混合感染病毒检测具有一定的诊断意义。     

上海近郊宠物犬乙型脑炎流行病学调查

采集上海近郊地区宠物犬血清样品220份进行乙型脑炎的感染抗体和荧光定量PCR的病原学检测。采用乳胶凝集试验方法检出37份阳性,阳性率16.8%(37/220);荧光定量PCR方法检出2份阳性,阳性检出率为0.9%(2/220)。经分析与统计,犬乙脑在年龄与性别上的感染率均无差异(P>0.05),中等体型与人口密度高地区的犬乙脑感染率均较高(P<0.05)。     

厦门市宠物犬狂犬病的血清学调查

为掌握厦门市宠物犬狂犬病感染和免疫情况,厦门市动物疫病预防控制中心于2013年8月对厦门市宠物犬进行了狂犬病血清学调查。结果显示：抽检的145份犬血清样品中,检出疑似狂犬病阳性犬4只,同时在流浪犬中也检测到抗体阳性犬4只;在已免疫狂犬病疫苗的86只犬中,有3只是新办证免疫的宠物犬,免疫率为82.7%,免疫抗体合格率为56.6%,疫苗接种频率与抗体保护水平显著关联,免疫接种超过1次的犬只,抗体保护水平是免疫接种1次的犬只的3倍（P＜0.05）。     

桂林市犬猫弓形虫感染情况调查

本实验旨在了解弓形虫病在桂林犬猫体内的感染情况,2015年6月—2016年7月,在广西桂林市的4个动物医院以及2市场屠宰犬猫的屠宰点随机抽取犬猫血清223份,进行弓形虫病的流行病学调查。结果:223份犬猫血清中阳性8份,感染率为3.59%。其中猫血清111份,阳性5份,感染率为4.50%;犬血清112份,阳性3份,感染率为2.68%。宠物医院中调查的犬猫数量分别为65和87,阳性样本分别为1份和3份,感染率为1.54%和3.45%;市场调查的犬猫数量分别为47和24,阳性样本均为2份感染率为4.26%和8.33%。本调查结果表明,桂林部分犬猫中被弓形虫感染,土种犬猫的感染率高于宠物犬猫。     

犬瘟热病毒、犬细小病毒二重TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用

为建立一种特异、高通量检测犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)和犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)的二重TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法,本研究选取高度保守且具有型特异性的CDV H基因和CPVVP2基因序列,设计CDV和CPV特异性引物对及TaqMan MGB探针;经反应条件优化,建立了检测CDV和CPV的二重TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法,并进行了敏感性、特异性和重复性试验。结果显示,该方法检测CDV、CPV的标准曲线线性相关系数(R~2)分别为0.997和0.993,最低检出限均为10拷贝/μL,具有较高的灵敏性;对犬副流感病毒等4种病原对照和阴性对照均未出现扩增,特异性良好;CDV、CPV标准品批间试验结果显示,该方法具有很好的重复性;对48份临床疑似CDV或CPV感染样品检测结果显示,14份为CDV阳性,19份为CPV阳性,4份为CDV/CPV双阳性,与CDV H基因、CPVVP2基因测序结果符合率为100%。本研究建立的二重TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法具有灵敏、特异、高通量和可准确定量等优点,可用于临床CDV/CPV病毒感染各个时期的快速鉴别检测。     

犬支气管败血波氏杆菌的分离与鉴定

犬传染性支气管炎又称犬窝咳,是由犬支气管败血波氏杆菌(Bb)、犬腺病毒2型(CAV-2)、犬瘟热病毒(CDV)和犬副流感病毒(CPiV)中的一种或几种病原混合感染引起的。为研究Bb在窝咳犬中的阳性检出率和分离株的生物学特性,2006年10月到2008年1月,从南京和北京两地共采集了164份患有窝咳的犬鼻腔拭子,对其进行Bb的分离培养,通过形态学、生化试验、血清学及PCR鉴定,证实最终分离到了16株Bb,分离阳性率为9.8%,药敏试验结果显示16株细菌生物学特性和对多种抗生素敏感性基本相同。此外,对16份Bb阳性病料样品分别进行CAV-2、CDV、CPiV检测,结果表明:由单纯Bb引发犬窝咳病例占19%,与犬瘟热混合感染的机率最高(43%),其次为与CPiV(31%)和CAV-2(25%)混合感染。2种病原混合感染引起窝咳的比率最高,为56%;3种病原混合感染的几率为19%;4种病原混合感染的几率为6%。     

2016—2018年广西玉林市部分规模猪场猪繁殖与呼吸综合征病原检测与混合感染分析

为了解广西玉林市规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）感染情况及其与猪瘟病毒（CSFV）、猪圆环病毒2型（PCV2）和猪伪狂犬病病毒（PRV）混合感染情况,采用RT-PCR/PCR方法,对2016—2018年采集自玉林市存栏母猪300头以上规模化猪场的661份临床健康猪血清样本和896份表现呼吸道症状和繁殖障碍发病猪只的组织样本,进行PRRSV病原检测,并对检出的PRRSV病原阳性样本进行CSFV、PCV2、PRV病原检测,并对结果进行统计分析。结果显示：2016—2018年收集的血清样本中,PRRSV病原阳性率分别为6.86%、19.33%和10.17%,场阳性率分别为25.00%、46.67%和40.00%;PRRSV血清阳性样本混合感染率分别为52.38%、65.22%和62.50%,以与PCV2、PRV混合感染为主。2016—2018年收集的病料组织样本中,PRRSV病原检出率分别为46.38%、48.24%和48.81%,场阳性率分别为42.11%、35.37%、37.10%;PRRSV病料阳性样本混合感染率分别为50.00%、52.99%和52.35%,同样以与PCV2、PRV混合感染为主。结果表明,广西玉林市规模猪场中PRRSV流行广泛且呈加重趋势,与PCV2和PRV等病原的混合感染较严重。结果提示,玉林市规模猪场应制定科学的免疫程序,加强这些疫病的综合防控。     

209例宠物犬冠状病毒病流行病学调查

为了解河南省郑州地区宠物犬冠状病毒(canine coronavirus,CCoV或CCV)病流行病学情况,对2015年3月—2016年3月在郑州某大型动物医院就诊的209份疑似病例进行调查。结果发现,宠物犬CCoV病的感染率为42.31%;纯种犬感染率高于杂种犬,公犬高于母犬;CCoV病一年四季均可发生,但春季和秋季感染率最高;CCoV病主要感染90日龄以内的幼犬,随着年龄的增长感染率降低。调查结果表明,在郑州地区宠物犬对犬冠状病毒病的感染率较高,应引起足够的重视。     

2005—2014年青岛市犬类重要传染病流行的相关因素分析

<正>犬瘟热、犬细小病毒病和犬冠状病毒性腹泻是目前在城市犬群中广泛流行的3种高度接触性传染病,各个品种的犬均易感且发病率和死亡率较高,尤其是对幼犬具有极大的危害性。这3种犬类最重要的传染病分别由犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)、犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)和犬冠状病毒(canine coronavirus,CCV)引起,在临床上混合感染     

新疆乌昌地区犬布病流行病学调查

对新疆维吾尔自治区乌鲁木齐和昌吉地区(简称乌昌地区)的犬只进行随机采样,共采集368份血清,通过犬布鲁氏杆菌抗体快速诊断试纸检测发现阳性率分别为:城市宠物犬2.04%,农村宠物犬17.07%;养殖场繁殖犬11.43%;流浪犬23.73%。新疆乌昌地区流浪犬布病阳性感染严重,其次为农村宠物犬和养殖场繁殖犬。应对流浪犬进行布病监控,以免其传播给人类。     

江苏省常州地区犬冠状病毒病的流行病学调查分析

本研究采集常州地区3家宠物医院106例犬粪便和肛拭子,经胶体金和RT-PCR鉴定共检出45例犬冠状病毒（CCV）阳性病例,阳性检出率达到42.45%。对发病月份以及发病月龄进行统计学分析发现,1-3月龄幼犬属于CCV高发群体,阳性检出率可达44.44%;发病月份主要集中在冬春两季（10月～次年3月）,发病率合计86.67%。感染犬常表现肠道症状,临床主要可见以腹泻为主。未经接种疫苗或者疫苗接种程序不完全的犬感染CCV概率远高于接种完成的犬。调查结果表明,常州地区宠物犬对犬冠状病毒病的感染率较高,需引起足够的重视。     

上海市闵行区宠物犬体表蜱及蜱传病原体初步调查

为调查上海市闵行区宠物犬媒介蜱及蜱传病原体情况,闵行区宠物医院就诊犬2763只,其中57只犬体表检获183只,根据形态学鉴定蜱种类;采用PCR方法筛查采集的蜱类样本和保留的392份犬血液样本,以发现可能的蜱传病原体。研究结果表明,宠物犬带蜱率为2.06%,带蜱指数为0.066,犬体表寄生的蜱宠物种为血红扇头蜱(Rhipicephalus sanguineus,R.sanguineus);病原学检测发现宠物犬携带犬埃立克体(Ehrlichia canis,E.canis),其在蜱和血液样品检出率分别为0.5%和2.29%,其他病原体如螺旋体(Borrelia.spp)和嗜吞噬细胞无浆体(Anaplasma phagocytophilum,A.phagocytophilum)均未有检出。调查结果提示我们闵行区部分宠物犬体表存在血红扇头蜱和蜱传病原体感染,应加强媒介蜱及蜱传病原体的监测与防控。     

北京市某宠物医院犬皮肤病流行病学调查

为了解北京海淀区宠物犬皮肤病发病情况,对2016年8—9月北京地区某动物医院就诊的37份疑似病例进行调查。结果发现:犬皮肤病发病年龄主要在3岁以内,占51.35%;真菌和细菌混合感染性皮肤病居多,为54.05%,真菌、细菌和疥螨混合感染性皮肤病与真菌、细菌和蠕形螨混合感染性皮肤病占其次,分别为16.22%和10.81%,细菌和疥螨混合感染占总数的5.41%,真菌和疥螨混合感染以及单纯真菌感染均占总数的2.70%,而其他因素引起的皮肤病仅占总数的8.11%;泰迪犬和中华田园犬患病率高于其他品种,公犬多于母犬。说明3岁以内的宠物犬对真菌性和细菌性皮肤病的感染率较高,应引起足够的重视。     

北京地区犬猫弓形虫和新孢子虫感染的检测与分析

了解犬、猫弓形虫和新孢子虫感染情况,应用SPA-ELISA和ICT对2008-2011年间收集的北京地区137份流浪猫、186份宠物猫和763份宠物犬及其他部分省市的57份乡村犬进行血清抗体检测;同时,提取猫及部分犬的血样DNA,分别扩增弓形虫和新孢子虫特异性基因片段。结果显示,流浪猫和宠物猫弓形虫抗体阳性率分别为24.1%(33/137)和13.4%(25/186),宠物犬和乡村犬分别为14.5%(111/763)和24.6%(14/57),不同来源的犬或猫抗体阳性率差异显著(P0.05);流浪猫和宠物猫的新孢子虫抗体阳性率分别为7.30%(10/137)和6.45%(12/186),宠物犬和乡村犬分别为6.06%(8/132)和10.5%(6/57),差异均不显著(P0.05)。宠物猫和流浪猫基因检测的阳性率分别为3.65%和2.15%,差异不显著(χ2=0.22,P0.05);132份宠物犬和29份乡村犬基因检测阳性率分别为18.2%和6.90%,差异显著(P0.05)。血液中虫体特异性基因检出率低于血清抗体检出率。宠物犬和宠物猫弓形虫和新孢子虫感染随着年龄增加呈上升趋势,但各年龄段差异不显著(P0.05)。     

昆明市某地区奶牛消化道寄生虫感染情况调查

本调查对昆明某地区4个奶牛养殖场(养殖小区)随机采集了44份粪样,同时采用漂浮法和沉淀法进行寄生虫虫卵的检测。结果显示,检出阳性样本24份,检出率为54.5%,其中牛场1的检出率最高为72.7%,某养殖小区63.6%,牛场2、牛场3较低,分别为36.4%和45.5%;4个场均有混合感染现象,平均混合感染率达到36.4%;球虫的检出率为34.1%,线虫检出率为15.9%,蛔虫检出率为25%,吸虫检出率为6.8%。因此,昆明市某地区奶牛场应采取综合的防控对策,加强环境卫生管理和灭蝇工作,有效控制奶牛寄生虫病。