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相似文献
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1.
提取东北虎毛发DNA两种方法的比较研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
研究东北虎毛发DNA的水煮抽提法,并将传统的酚仿抽提法和水煮法进行比较。水煮法即通过对细胞的煮沸和冷却,使细胞破裂、蛋白质变性,从而获得用于PCR扩增的模板DNA。通过测定OD值并计算浓度和纯度,同时进行琼脂糖电泳检测、PCR扩增和PAGE电泳检测,分析2种方法提取东北虎毛发DNA的质量差异。结果表明:水煮法提取东北虎毛发中DNA是一种快捷、简便、经济、高效的方法。  相似文献   

2.
本试验以猪耳组织为试验样本,采用酚-氯仿抽提方法[1]和DNA提取试剂盒方法进行DNA提取的对比试验,并通过核酸蛋白定量仪测量了DNA浓度和纯度,并进行了PCR扩增实验。试验表明,两种提取方法都可以进行PCR扩增试验,但采用试剂盒提取方法提取DNA可以直接进行PCR扩增,而酚-氯仿提取法需放置一段时间后效果好,并且采用试剂盒提取的DNA纯度高、速度快、节省耗材、结果稳定、重复性强,适合大量DNA提取试验。  相似文献   

3.
为筛选出一种从牛凝固血中高效获得基因组DNA的方法,本研究选择64个凝固血样,分别进行匀浆破碎和手动剪碎的预处理,结合酚-氯仿抽提和试剂盒提取方法,提取基因组DNA,并选择抗凝血作为参照,对试验耗时、DNA数量和质量进行比较。结果表明:通过对牛凝血块进行匀浆破碎预处理,不仅缩短了蛋白酶K的消化时间,而且获得了高质量基因组DNA,浓度和纯度均达到抗凝血提取效果(P0.05)。酚-氯仿提取法相比试剂盒法,虽然得到更多量的DNA,但是DNA质量下降,而且试验耗时增加。本研究证实,匀浆破碎预处理后的牛凝固血样可以作为高质量基因组DNA的样本来源,并可替代抗凝血,解决生产中抗凝血不易获得和采集的问题。  相似文献   

4.
牛血凝块基因组DNA提取方法的建立   总被引:1,自引:0,他引:1  
建立了一种牛血凝块基因组DNA提取方法,其过程为机械性粉碎,高盐EDTA处理后用含蛋白酶K和SDS的细胞裂解液消化,苯酚-氯仿抽提,再以本方法抽提的DNA为模板进行PCR扩增,对PCR产物测序,测序结果与抗凝血DNA的PCR产物测序结果比较。结果表明:本方法提取的DNA成功地应用于PCR扩增。  相似文献   

5.
以4个不同禽类品种(金定鸭、长乐灰鹅、象洞鸡和闽南火鸡)为试验材料,采用4种不同方法从其全血中提取DNA,比较不同方法的DNA提取效率。结果表明:由于品种之间DNA存在差异,DNA的质量和产率也有显著差异,金定鸭全血DNA用树脂法效果最佳;长乐灰鹅和闽南火鸡全血DNA用酚-氯仿法效果最佳;而盐析法是提取象洞鸡全血DNA的最佳方法。  相似文献   

6.
两种桑树基因组DNA提取方法的比较研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
以8份广西桑树种质资源为材料,比较了改良的CTAB法和植物基因组DNA试剂盒法(离心柱)提取桑树基因组DNA的效果.结果表明:两种方法都能得到桑树样品清晰的DNA电泳条带,DNA纯度高,改良的CTAB法提取的DNA浓度在308.70μg/mL~384.30μg/mL之间,平均值是331.45μg/mL;植物基因组DNA...  相似文献   

7.
绿蝇基因组DNA提取方法比较研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
通过3种基因组DNA提取方法的试验比较,寻找一种提取效果最好的绿蝇基因组DNA提取方法.经DNA浓度检测与电泳结果分析表明,Collines法的提取效果最好,可应用于绿蝇的基因组DNA提取.  相似文献   

8.
为筛选一种高效、快捷的血液基因组DNA提取试剂盒,采集24份新鲜西藏绵羊血液样本,选用6种市售商业化试剂盒(LifeFeng柱式试剂盒DK601和非柱式试剂盒DK602,康为世纪非柱式试剂盒CW0544和柱式试剂盒CW0546,上海生工非柱式试剂盒SK8224和柱式试剂盒SK8254),比较所提DNA的浓度、纯度、得率以及对嗜吞噬细胞无形体16S rRNA进行巢式PCR扩增,综合评价不同试剂盒DNA提取效果.结果表明,应用LifeFeng柱式试剂盒DK601提取的DNA浓度和纯度均最高,得率较高,分别达到75.63 ng/μL、1.894(OD260/OD280)、18.91 ng/μL;且嗜吞噬细胞无形体16S rRNA基因的PCR扩增条带清晰度最优.因此,LifeFeng DK601可作为提取绵羊血液基因组DNA及嗜吞噬细胞无形体(Anaplasma phagocytophilum)病原鉴定的首选试剂盒.  相似文献   

9.
采用碘化钾法、酚/氯仿和试剂盒提取法直接从山羊全血中提取基因组DNA,并以碘化钾提取基因组DNA为模板,进行山羊生长激素(GH)基因片段的扩增,扩增效果良好。结果表明:碘化钾法提取基因组DNA快速、简便、经济,提取的DNA可满足后续相关研究对DNA质量的要求,值得借鉴。  相似文献   

10.
昆虫基因组DNA提取是对昆虫在分子水平上进行研究的关键,提取的DNA的纯度、浓度及完整性是进行基因工程各项研究所必须的条件。本研究主要对应用4种方法,以柞蚕蚁蚕时期组织材料为样品提取DNA后进行比较分析。结果发现,利用BIOMIGA试剂盒,置于36℃条件,经50μL蛋白酶K 70℃消化6h后,5μLRNase A酶37℃消化10min,提取的DNA质量较好。且样品易于保存,保存时间长,提取时间短的优点,对提高柞蚕研究效率具有实用价值。  相似文献   

11.
全血中DNA的5种不同提取方法比较研究   总被引:7,自引:0,他引:7  
比较几种从血液中提取DNA方法所需要的时间、样本量、提取的DNA纯度、产量以及成本等。结果表明,几种方法所提取的DNA质量都能达到分子生物学的试验要求,但在DNA的纯度、产量、试验时间和价格等方面存在差别。实验人员可根据自己的实验要求、实验室以及经济条件等选择适当的方法。  相似文献   

12.
[目的]本试验的目的是优化秦川牛瘤胃微生物DNA提取方法。[方法]针对秦川牛特有的生理及生物学特性,采取珠磨法、反复冻融法、液氮研磨法、超声波法提取微生物DNA,并获得一种提取秦川牛瘤胃胃微生物DNA的最佳方法。[结果]珠磨法、反复冻融法提取的DNA片段较完整,DNA含量较高。[结论]珠磨法和反复冻融法是较科学的提取方法。  相似文献   

13.
分别采用3种不同的方法提取基因组DNA,比较所提取的DNA的质量以及提取所需时间、费用,以期选择一种高效、简洁快速、价格合理的提取方法。结果发现这3种方法提取的质量都能达到相关分子生物学试验的要求,但在操作步骤、时间、价格等方面存在差异,具体比较结果可为分子生物学试验选择提取方法提供依据。  相似文献   

14.
利用高渗缓冲液裂解感染鸭瘟病毒的鸭胚成纤维细胞,加入核酸酶消化细胞DNA,再抽提病毒DNA的方法提取鸭瘟病毒基因组,结果证明,这种方法可以最大限度地消除细胞DNA的污染,得到纯净的病毒基因组DNA.用10种限制性内切酶对鸭瘟病毒疫苗株和分离株的基因组进行酶切分析,酶切产物电泳结果表明,Sma Ⅰ、Sal Ⅰ、Pst Ⅰ、Not Ⅰ、Hind Ⅲ、EcoR Ⅴ和BamH Ⅰ 7种限制酶产生酶切图谱二者几乎完全一致,EcoR Ⅰ和Sac Ⅰ仅有个别条带不同,BglⅡ产生的条带迁移率差别较大,但条带数量相同.  相似文献   

15.
采用4种常规DNA提取方法提取瑞氏木霉基因组DNA。结果表明:EDTA-SDS法和冷冻研磨CTAB 法更适合此真菌DNA的提取,试剂盒提取的总DNA纯度和浓度比较高,但是价格昂贵,冷冻研磨SDS法提取的 DNA浓度不高,不适合分子生物学操作的要求。  相似文献   

16.
分析比较适合大规模柑橘样品黄龙病LAMP检测的制样方法,为柑橘黄龙病的防治提供技术支持。分别采用CTAB-trion法、磁珠法、裂解法、浸提法四种制样方法提取病原菌核酸,利用LAMP和常规PCR进行扩增,并从制备步骤、简易程度、核酸质量、成本、耗时及环保等方面比较,确定最佳制样方法。CTAB-trion法和磁珠法提取的核酸质量最好,其OD260/OD280值在1.8-2.0之间,满足LAMP扩增要求,但操作步骤繁琐、困难,成本、耗时较高且CTAB-trion法需使用苯酚和氯仿试剂;裂解法提取的核酸质量虽不高,但可满足LAMP扩增,同时其操作步骤极少且易,成本低、耗时少,相对环保;浸提法提取的核酸量少、质量差,无法满足LAMP扩增要求。裂解法是柑橘黄龙病LAMP检测的最佳制样方法,与LAMP联用可建立成本小、操作简便、高效快速、环境友好、结果可视化、无需昂贵特殊仪器、适合大规模柑橘样品的黄龙病检测。  相似文献   

17.
采用一种简单、快速、安全、无污染的方法,从黑曲霉细胞中提取基因组DNA,以满足各种目的的PCR、Southern印迹的分析要求。该方法可在短时间内制备大量样品,浓度高、质量好,操作简单,实用,推广性强。  相似文献   

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