枯草杆菌B826的化学诱变及筛选研究

枯草杆菌Ｂ８２６（ＢａｃｉｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓＢ８２６）是一株对水稻白叶枯病菌有强烈拮抗作用的细菌．本研究测定了枯草杆菌Ｂ８２６的对数生长曲线并利用化学诱变剂硫酸二乙酯（ＤＥＳ）处理对数生长期的细胞,获得了１６０个存活的菌株,其中６个菌仍保留拮抗活性或拮抗活性有所提高,其余的均丧失拮抗活性．突变菌Ｎｏ．３５能稳定地保持高效的拮抗活性和遗传．     

水稻白叶枯病菌拮抗细菌B56菌株的拮抗活性研究

B56 菌株经30 ℃振荡培养去菌体,其上清液经2 m ol/L 硫酸铵沉淀获得对水稻白叶枯病菌有拮抗活性的初提液。该初提液具有耐热性,经一定强度热处理后仍保持强的抑菌能力;抑菌效果在pH3～9 之间无明显差异;用胰蛋白酶、蛋白酶K 等处理后拮抗活性无明显变化。利用PhenylSepharose CL-4B疏水色谱柱和DEAE-Sephacel阴离子交换柱分离B56 菌株初提液, 得到一个具有拮抗活性的洗脱峰。该洗脱峰经SDS-PAGE检测发现具有一条分子量约为36 kD 的蛋白带。质粒提取和检测发现B56菌株存在一个稳定的内源质粒。     

从稻谷上分离、筛选用于拮抗水稻白叶枯病的泛菌

从福州、闽侯、建瓯等地采集的稻谷样品中分离得到63个分离物，经生理生化测定结果表明，其中有18个为泛菌属（Pantoea）菌株，通过泛菌属种间鉴别测试，将18个泛菌菌株鉴定到种，做所有泛菌菌株对水稻白叶枯病菌（Xanthomonas oryzae pv.oryzae）的拮抗筛选，得到拮抗效果好的菌株DAT4（分散泛菌Pantoea dispersa）和FDQ4（成团泛菌Pantoea agglomerans）。     

柑橘病害生防放线菌的分离筛选及抑菌作用研究

通过稀释法对从赣南柑橘园采集的土样进行微生物分离,获得细菌、真菌和放线菌共52株,其中真菌3株、细菌27株、放线菌22株。进一步通过皿内实验筛选到1株对柑橘炭疽病菌和溃疡病菌有较强抑制作用、且效果稳定的放线菌株ML27,对其进行抑菌活性测定和抑菌机理初探。结果表明,该菌株对炭疽病菌的抑制率为72.15%,对溃疡病菌的抑菌圈为2.05 cm;其抑菌机理主要是对真菌的细胞壁产生影响,对细菌的菌体具有溶解作用。     

云南水稻白叶枯病生理小种初析及鉴别品种的筛选

 从云南省10个地州40个县市的水稻白叶枯病标本中分离纯化得到115个水稻白叶枯病菌株。利用已知抗性基因的近等基因系,在孕穗期应用剪叶法接种明确其生理小种。并筛选出一套鉴别品种IRBB1,IRBB3,IRBB4,IRBB5,IRBB7,IRBB13,IRBB14,IRBB18,IRBB21. 云南省的水稻白叶枯病菌小种组成复杂,有自身的特殊性。已鉴定出25个小种,暂定名为YN1～YN25. 优势生理小种为YN1,YN13,YN21,其中YN13分布于楚雄、玉溪、红河、丽江等4个地区共8县（市）,YN21分布于大理、红河等地区。云南的小种多样性分布可能与它的地理条件有关。     

香蕉枯萎病拮抗菌筛选试验

将从香蕉土壤中分离出的7个不同性状的芽孢杆菌菌株以及荧光假单孢菌、枯草芽孢杆菌、细黄链霉菌等分别用于测试对香蕉枯萎病生理小种4号的拮抗作用。结果表明,10个菌株中荧光假单孢菌表现出对香蕉枯萎病生理小种4号菌丝生长有良好、稳定的抑制作用;荧光假单孢菌和XP菌株混合后,其抑菌作用得到加强,抑菌效果最好。     

水稻恶苗病拮抗细菌的筛选及其生物活性测定

对水稻恶轩病拮抗细菌的筛选及其生物活性测定结果表明：（１）在分离到的约１２０个有拮抗潜力的细菌菌株中,有２１种对恶苗病菌具有很强的拮抗作用;（２）用这２１种拮抗菌株株处理种子,对恶苗病均且定的防治效果,但不同菌株之间防效差异显著,其中３１－２、２０４、Ａ－３、Ａ－２、８－１４、Ａ－５、９１－２、７２７和２３防效较高;（３）用有些拮抗菌株如９１－２、Ａ－５和Ａ－６等处理种子,对种子发芽地生活力具有促     

一株拮抗水稻条斑病菌的蜡样芽孢杆菌的分离和鉴定

水稻条斑病菌(Xanthomolias oryzae pv.oryzicola,Xoc)侵染水稻,引起细菌性条斑病(bacterial leaf streak,简称BLS),严重威胁水稻的安全生产。为筛选防治BLS的生防细菌,以Xoc的模式菌株RS105为靶标菌,采用平板稀释和抑菌圈法,从大白菜根际土壤中分离筛选到具有拮抗活性的细菌菌株512。通过形态学、生理生化特征以及16S rDNA和gyrB序列分析,鉴定菌株512为蜡样芽孢杆菌,命名为Bacillus cereus 512。抑菌试验显示,B.cereus 512对黄单胞菌属不同种细菌的拮抗活性存在较大差异,其中对水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,简称Xoo)的拮抗效果最强。发酵液的稳定性试验表明,抑菌活性物质对高温和蛋白酶不敏感,耐强碱不耐强酸。在原丰早水稻品种上,针对水稻条斑病防治的初步试验结果显示,B.cereus 512对Xoc在水稻叶片上引起的水渍症状的扩展具有明显的抑制作用。综上所述,B.cereus 512能够拮抗Xoc和Xoo,在BLS的生物防治中将具有较大的应用潜力。     

枯草杆菌AS1.398制备中性蛋白酶的研究

本文研究了枯草杆菌ＡＳ１．３９８发酵培养制备中性蛋白酶。对发酵培养基配比，培养条件，金属离子的影响等进行了摇瓶试验。制备的ＡＳ１．３９８中性蛋白酶有如下性质：最适ｐＨ７．２－７．４，在ｐＨ６．５－８．０稳定。最适温度４２￣４４℃，３５℃下处理２小时能保持约８５％酶活力６０℃下１０分钟酶完全失活，此酶被ＥＤＴＡ和Ｃｕ＾２＋所抑制。     

物理与化学诱变筛选产石杉碱甲高产菌株的研究

以千层塔内生真菌SHB为出发菌株,采用微波、紫外线、Co60射线、亚硝酸和硫酸二乙酯对内生真菌孢子进行诱变。诱变孢子悬液通过在PDA平板继代培养2次,把单菌落孢子转接至PD培养液中进行发酵培养,利用高效液相色谱检测发酵液,筛选出一株遗传稳定,产石杉碱甲能力较高的高产菌株wB3。其发酵产物中石杉碱甲为原始菌株的3．04倍。     

马铃薯青枯病拮抗菌株的筛选

 从多种植株根际土壤中分离到300个细菌分离物,通过含菌平板培养筛选出X2,B3,1J',2e'等近40株 ,对青枯病菌(马铃薯和烟草)具有较强的拮抗力,室内测定对病原菌抑菌圈达0.8～3.0 cm.挑选出1j',2e',X2和B3进一步进行室内抗菌机理、菌株鉴定和温室盆栽防病试验。结果表明,菌株初步鉴定为芽胞杆菌(Bacillus spp.)和假单胞杆菌(Pseudomonas spp.)。其代谢产物蛋白质粗提物对青枯菌的生长有明显抑制作用。温室控病效果在45.06％～82.35%,可用于有效地控制马铃薯青枯病的发生危害,具有广阔的应用前景。     

香蕉枯萎病菌拮抗菌株的筛选

从香蕉健株根际土壤中分离到130个菌株,采用平板对峙生长法,筛选出对香蕉枯萎病菌4号生理小种有拮抗作用的菌株35个。经室内复筛试验有16个菌株对枯萎病菌抑菌带的宽度达6～11 mm,拮抗系数大于2.0,其中有7个菌株拮抗作用稳定。盆栽试验结果表明：拮抗菌FB5、T2WF、W10、WDWS和FB2培养液在接种病菌液后50 d的防治效果可达81％以上；拮抗菌FB5、T2WF、T2WC和W10培养液对香蕉苗生长有一定的促进作用。     

水稻白叶枯病菌的胞外酶与毒力关系的初步研究

研究了水稻白叶枯病菌60个菌株所产生的胞外蛋白酶、纤维素酶(Cx)和果胶酶的活力及其产生胞外粘多糖的能力。从总体看,蛋白酶活力与菌株毒力成正相关,而纤维素酶活力与菌株毒力相关不显著。但来自华南地区的一些菌株的毒力与纤维素酶活力显著相关,而与蛋白酶没有显著的相关性。蛋白酶和纤维素酶的产生都受培养基中氮源成分的影响。尚未发现果胶酶活力及粘多糖产生能力与毒力有任何关系。     

新疆枣果黑斑病拮抗细菌的筛选及鉴定

通过常规组织分离法从带病枣果中分离得到32株细菌菌株,采用平板对峙法筛选出对枣果黑斑病（Al-ternaria alternata）病原菌抑菌率达86% 的拮抗细菌菌株xj063-1.通过对菌株的形态学观察,生理生化测定结合分子生物学方法,将拮抗菌株xj063G1鉴定为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）.通过致畸菌丝的形态观察,发现抑制机理主要为抑制病原菌孢子产生和萌发,使得菌丝畸形.