鸡轮状病毒的分离鉴定及特性研究

用胰蛋白酶处理发病鸡的粪便和肠内容物，接种Marcl45细胞．盲传数代后．从山东不同地区发生流行性腹泻的鸡群中分离到1株病毒，并对分离病毒的生物学特性和理化特性进行了部分研究。结果表明病毒粒子呈轮状、大小为70～80nm；其病毒基因组的电泳图谱为5：1：3：2；病毒的TCID50为10^-4-19／0．1mL，能被轮状病毒阳性血清所中和；病毒对氯仿、乙醚有抵抗力；对pH3．0处理60min稳定；50℃ 30min能使其感染力下降10^2；1mol／L MgCl2不能增强其对50℃ 60min的抵抗力。接种2周龄SPF鸡．24h后陆续发病，表现为持续性水样腹泻；剖检可见病鸡脱水、小肠内有大量的液体和气泡、肠黏膜变薄；组织学变化表现为肠绒毛坏死、脱落．绒毛平均长度减少而隐窝深度增加，固有层中淋巴细胞浸润。其临床症状及病理组织学变化与自然发病相同。因此确定发生在山东鸡流行性腹泻的病原为A群轮状病毒，该研究为轮状病毒感染的防制提供了理论依据。     

鸭坦布苏病毒山东株的分离鉴定及其特性

采用鸭胚尿囊腔接种、盲传的方法从山东某地区以瘫痪为主要特征的雏鸭脑组织中分离到1株病毒,并对分离病毒的生物学特性和理化特性进行了研究。结果显示,该病毒与OenBank上已发表的坦布苏病毒核苷酸同源性均高于98％,最高可达99．7％;病毒的ELD50为10^-3.17／0．2mL,接种9日龄鸭胚,68h左右鸭胚死亡,胚体出血,肝脏肿大出血,尿囊膜增厚;病毒对胰蛋白酶、酸、氯仿和热敏感,0．5％的胰蛋白酶、pH〈5和4．8％的氯仿条件下可将其灭活,56℃水浴20min或60℃水浴15min可将其灭活,37℃处理24h毒力由10^-3.17／0．2mL下降至10^-1.8／0．2mL;Mg2＋不能提高病毒在50℃60min的稳定性;病毒未经酸碱处理不具有凝集鸡、鸭、鸽等红细胞的特性。接种7日龄雏鸭,48h后陆续发病,表现为病毒性脑炎;剖检变化为雏鸭脑水肿,脑部毛细血管充血、肝脏出血、腺胃出血、肺出血水肿,临床表现与自然发病相同。结果表明,该病毒分离株为坦布苏病毒。     

鹅副黏病毒广西分离株生物学特性的研究

采用鸡胚接种和细胞培养的方法，从广西武鸣县某鹅场患病鹅脑、肝、脾中分离获得了2株病毒；经RT-PCR、HA和HI试验等研究，证实其为鹅副黏病毒。经测定，分离毒23-7-F3株的ELD50为10^-7.25／0．1mL。TCID50为10^-6／0．1mL，MDT为38．8h，ICPI为2。将该分离毒10倍稀释，接种鸡胚成纤维细胞，40h后出现细胞病变，证实该分离毒为强毒株。病毒能凝集鸡、番鸭、鸽、猪、山羊、兔、豚鼠、黄鳝及人O型红细胞。56℃10min、60℃10min、pH4溶液处理1h均不能使该病毒灭活，而50mL／L氯仿处理10min、60℃水浴30min能灭活该病毒。人工感染的11日龄雏鸡全部发病和死亡；感染的10日龄雏鹅60％发病，发病鹅全部死亡；感染的30日龄肉鸽发病率达83．3％(5／6)，死亡率100％。对1日龄肉鸭无致病性。     

红河州鸡衣原体病的研究

从采自发病或死亡小鸡的肝、脾、肺和腹水等病料中分离到４株衣原体。将分离物接种７日龄鸡胚卵黄素，能致鸡胚规律性死亡，该分离株对磺胺嘧啶具有抵抗力，碘染色不着色，鉴定为鹦鹉热衣原体；毒力测定对鸡致死毒从为１０＾－１０ＥＬＤ５０／０．４ｍｌ。用该分离株对健康小雏做人工感染试验。可发生与自然病例相同的症状和病理变化。同时对分离毒株形态特征进行了电镜观察。     

鸡轮状病毒感染的病理形态学观察

为确定鸡轮状病毒感染的病理变化特点，对自然发病和人工发病轮状病毒感染鸡进行了病理学研究。结果表明，该病特征性的病理剖检变化为肠黏膜脱落出血，呈卡他性炎症表现。特征性组织学变化为小肠绒毛显著缩短，肠腺深度增加；除肠绒毛缩短外，肠上皮还变为扁平或立方形，并伴发坏死、脱落，黏膜充血、水肿与淋巴细胞浸润。电镜观察，肠黏膜上皮细胞的线粒体肿胀，嵴变粗，排列紊乱；粗面内质网及滑面内质网均扩张呈圆形，粗面内质网表面的核糖体部分脱落，胞浆内游离的核糖体减少。     

一株猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离鉴定

从蓝耳病疑似患猪病料中分离到一株猪繁殖与呼吸综合征病毒。试验采用细胞培养、RT-PCR、免疫荧光技术等进行病毒的分离和鉴定。结果表明:Marc145细胞接种出现典型的细胞病变,毒价为5.5×105 TCID50/m L,RT-PCR扩增出特异性长度为559bp的DNA片段,用PRRSV N蛋白单克隆抗体为一抗,羊抗小鼠Ig G-FITC为二抗进行免疫荧光检测,检测到接种病毒的Marc145细胞中特异性荧光信号。说明该分离株为猪繁殖与呼吸综合征病毒。     

鸭冠状病毒的分离鉴定

鸭冠状病毒的分离目前国内外尚无报道．我们将回归发病鸭的肠粪及肠内容物处理后，经羊膜腔、尿囊腔接种１２～１４日龄鸭胚，３７℃培养４８小时后取羊水和尿囊液继代，将第５代的鸭胚羊水、尿囊液混合（称ＤＣＶ５）并对其进行系统鉴定，结果表明；该病毒在鸭胚；其ＴＣＩＤ５０为５．０，电镜负染观察多呈不规整的圆形，直径８０～１２０ｎｍ。有囊腹，病毒粒子外周有花瓣样突起。核酸型为ＲＮＡ型，对乙醚敏感、５６℃１５分钟即可使其失去感染性，在ｐＨ３条件下室温３小时仍保持一定活力，该毒接种幼鸭可引起幼鸭腹泻症状，接种幼鸡和火鸡不引起任何症状。     

鸡传染性支气管炎肾型毒株的分离与鉴定

山东某些大型鸡场近年连续暴发一种传染快、发病急、死亡率高的呼吸道疾病，主要是肾脏病变，从死亡率较高的几批雏鸡分离到两株病毒19401，H9402．接种鸡雏可使其发病、死亡。通过鸡胚接种、血凝试验、电镜形态观察，分离物为传染性支气管炎病毒。经血清中和试验鉴定这两株病毒为肾型IBV株。     

鸡新城疫强毒株的分离与鉴定

从山东某鸡场的产蛋下降而无其他典型ND症状的高抗体蛋鸡群中分离到一株病毒。经过试验鉴定．该分离株具有血凝性，且可被ND标准阳性血清所抑制和中和，不能被AI（H5亚型与H9亚型）标准阳性血清抑制；该病毒的最小致死量病毒致死鸡胚的平均时间（MDT）为50．4，1日龄SPF鸡脑内接种分离病毒致病指数（ICPI）为1．85，6周龄SPF鸡静脉接种致病指数（WPI）为2．42，回归试验鸡出现了新城疫症状和病变，该病毒株确定为新城疫病毒强毒型，并暂命名为ShD-dzh04。     

山东省肉仔鸡新城疫流行病学调查

采用鸡胚接种法从山东省的潍坊、烟台、青岛、淄博、滨州、东营、聊城、济宁、临沂、日照、德州等地分离到32株有血凝性的病毒，经HA、HI试验及血清中和接种鸡胚试验，27株被确定为新城疫病毒，其中25株来自于发病鸡群．2株来自从发病鸡场中捕捉的麻雀。参照国际上规定的新城疫病毒毒力判定标准及其方法，测定27株新城疫病毒的鸡胚最小致死量平均死亡时间(MDT)为37．6～56．8h；1日龄雏鸡脑内接种致病指数(ICPI)为1．74～1．92；6周龄鸡静脉注射致病指数(IVPI)为2．11～2．70。测定结果表明：27株新城疫病毒为新城疫强毒。用27株分离的新城疫病毒接种14日龄新城疫非免疫鸡，其发病率为100％，病死率为70％～90％。调查统计发生鸡新城疫的肉仔鸡群的有关情况。调查结果表明：鸡新城疫在山东省的潍坊、烟台、青岛、淄博、滨州、东营、聊城、济宁、临沂、日照、德州等地存在不同程度的流行，且一年四季均可出现，其中冬天出现的频率最高(12／25)。多种日龄的鸡均可发生鸡新城疫，其主要的发病日龄为20～40日龄，10日龄以内的雏鸡亦可发病，死亡率有时超过70％。而且发病鸡的发病日龄越小，死亡率越高。     

H9N2亚型禽流感病毒传播途径特性的比较及其表面基因序列分析

选择中国大陆最早分离的H9N2亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)A/Chicken/Guangdong/SS/94(H9N2)(缩写为SS株)和1998年大流行时期分离的H9N2亚型AIVA/Chicken/Shanghai/F/98(H9N2)(缩写为F株)为研究对象,对其在SPF鸡体内的复制能力和传播途径特性比较后发现,F株在4周龄SPF鸡气管中的复制能力高于SS株,F株可以经气溶胶传播途径传播,SS株不能经气溶胶传播途径传播;利用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法获取F株和SS株的HA和NA基因的cDNA,序列分析得知,F株和SS株的HA和NA基因的同源性分别是96.6%和98.1%;HA基因的裂解位点氨基酸序列都是PARSSR↓GL,但有5个氨基酸的差异,即166位N(F)→D(SS)、198位A(F)→V(SS)、217位V(F)→I(SS)、335位G(F)→R(SS)、504位L(F)→S(SS);2株病毒的NA基因在63~65位都存在氨基酸缺失,但在NA基因红细胞吸附位点的氨基酸序列不同,分别是IKKDSRSG(F)和IKEDLRSG(SS)。F株和SS株的传播特性差异是否与其表面基因序列有关,有待进一步研究。     

乡土灌草青贮与牛羊健康饲喂研究进展与展望

本文系统地回顾了近60年以来国内外乡土灌草青贮利用与牛羊健康饲喂的研究现状与进展。通过对已有研究文献的年度分布、研究内容与研究区域进行分析,结合饲草青贮技术领域、草食畜牧业领域以及社会发展的背景,将乡土灌草青贮与牛羊健康饲喂划分为3个阶段,20世纪50年代到80年代末期为萌芽阶段、20世纪80年代末期到21世纪初期为缓慢增长阶段、21世纪初期至今为快速增长阶段。其次,根据研究内容从理论研究、监测评价、技术示范、技术研发4个方面进行归纳总结,分析了各分支领域的主要成果与关键问题,提出下阶段应重点研究的内容,应加强对乡土灌草饲料生产与牛羊健康饲喂的研究,综合提高饲料能量与蛋白质的利用率,尽可能改善牛羊的能氮平衡,促进畜牧业和饲料加工业的发展。     

猪葡萄球菌EXHC、SHETA基因的克隆、序列分析及蛋白结构预测

为分析猪葡萄球菌脱落毒素EXHC和SHETA基因结构并预测其所编码蛋白的结构和功能,本试验根据GenBank已报道的猪葡萄球菌脱落毒素EXHC和SHETA基因序列分别设计了1对特异性引物,从猪葡萄球菌GDZC株中扩增获得EXHC和SHETA基因片段,大小分别为1007和971 bp。序列分析结果表明,EXHC基因与猪葡萄球菌丹麦分离株(GenBank登录号:AF515455)及猪源松鼠葡萄球菌河北分离株(GenBank登录号:JF755400)的核苷酸序列、氨基酸序列同源性均为100.0%,而与其他葡萄球菌脱落毒素基因的核苷酸、氨基酸序列同源性分别为3.3%~53.9%和7.9%~44.2%。SHETA基因与日本分离株(GenBank登录号:AB036768)的核苷酸序列同源性为96.2%,氨基酸序列同源性为98.4%,在保守区共有31个碱基发生突变。利用DNAStar软件对EXHC和SHETA蛋白结构进行分析,结果显示EXHC基因编码的蛋白为亲水性蛋白,SHETA基因编码蛋白为疏水性蛋白,抗原性较差。本研究从猪葡萄球菌GDZC株中成功扩增获得EXHC和SHETA基因片段并对其编码的蛋白结构进行了预测,证实了中国分离的猪葡萄球菌同时携带有EXHC和SHETA 2种毒素基因,为进一步研究猪葡萄球菌的致病机理及毒素之间的相互作用提供了理论依据。     

狐貉自咬症疾病行为观察及防治技术试验

通过观察狐貂自咬症疾病行为特点,分析发病原因,传播途径,及时诊断治疗,以提高狐,貉养殖的经济效益。     

秦川牛种质资源保护利用、存在问题及对策建议

秦川牛因原产于陕西八百里秦川而得名,具有体躯高大、遗传稳定、适应性强、肉用性能好等特点,是我国著名的地方品种和国家级资源保护品种,是肉牛新品种培育和产业化发展的基础.文章介绍了秦川牛种质资源保护利用情况和取得的成效,并针对当前存在的问题提出了相应的对策和建议,以期对秦川牛种质资源的保护和开发提供科学指导,推动肉牛产业的健康发展.     

果洛州草地鼠虫害情况及防治措施

１９９６年的调查，果洛州草地鼠虫害面积约为２４７．６万ｈｍ２，因鼠害每年损失牧草约１５９８．７万ｔ，相当少养１０９５．０１万羊单位。近１０年来使用Ｃ型肉毒梭菌毒素灭治取得很大成绩，累计灭治面积达到１８３．１万ｈｍ２。     

蓝舌病病毒基因和蛋白的特点及利用

蓝舌病病毒是引起绵羊、牛蓝舌病的病原.该病毒是一种结构复杂的RNA病毒,对其分子生物学特性的研究,可以阐明其致病机制和遗传学规律,有助于蓝舌病预防治疗的研究.国内对该病毒的研究起步较晚,本文简述了蓝舌病病毒基因结构和蛋白特点及对其的利用,为预防及治疗提供参考.     

蟾蜍产品的医药价值及其资源的开发利用

本文主要介绍蛤蟆（蟾蜍）的生物学特性，饲养蟾蜍取药材的技术要点及蟾蜍产品的医药价值和开发应用前景。     

呕吐毒素和玉米赤霉烯酮的理化及毒理特性分析

由于谷物中含有真菌的有毒次生代谢物霉菌毒素,其对动物的健康、生产性能及动物源性食品的质量可能有负面影响,这对动物营养是一个永久性的挑战。因此,本文综述了霉菌毒素在动物营养中存在的问题、对易感动物的影响以及应对谷物感染毒素污染的管理策略。