辣椒疫霉菌在土壤中消长动态研究

为有效防治辣椒疫霉病，对辣椒疫霉病田土壤进行了病菌分离、菌株配对培养、越冬存活形式等研究。结果表明：病田土壤中的疫霉菌数量有明显的季节性变化。以5-8月最多，冬季和初春最少；湖南长沙地区疫霉菌的配对型有A2和A1A2两种类型，多以卵孢子形态在土壤中越冬；病田土壤和植物病残体是辣椒疫霉病最主要的初侵染源。     

辣椒疫霉菌的致病性及其影响因素

辣椒疫霉菌的致病性及其影响因素彭相儒，刘文朴（乌鲁木齐市蔬菜研究所，乌鲁木齐，８３００１１）程秉铨，孙晓陆，肖英，周俊，陈璐（新疆农科院中心实验室）辣椒疫霉病在新疆始见于６０年代初，７０年代偶尔发生，８０年代中期以来连年发生，尤其以乌鲁木齐、昌吉、石...     

安克对辣椒疫霉菌的毒性测定

安克（Ｄｉｍｅｔｈｏｍｏｒｐｈ）是肉桂酸衍生物类杀菌剂,经测定,其对辣椒疫霉菌（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏａ ｃａｐｓｉｃｉ）的抑制作用显著高于甲霜灵。安克抑制Ｐ．ｃａｐｓｉｃｉ菌丝生长的ＥＣ９５为０．６０８５ｕｇ／ｍｌ,比甲霜灵低１０．６２倍。安克对Ｐ．ｃａｐｓｉｃｉ孢子囊形成具极强抑制作用,抑制率回归方程为ｙ＝７．４１０９＋１．３１４３ｘ,ＥＣ９５为０．２６１３ｕｇ／ｍｌ,比甲霜灵低３６２．１１倍。安克对游动孢子萌发的ＥＣ９５为９．５２６ｕｇ／ｍｌ,而游动孢子萌发对甲霜灵的敏感性则较差,ＥＣ９５大于８００ｕｇ／ｍｌ。     

辣椒疫霉菌在山西省土壤中的季节性变化

研究了山西省主要菜地中辣椒疫霉菌种群数量的季节性变化、垂直分布及在土壤中的残存。结果表明 ,辣椒疫霉菌种群数量的季节性变化与温度的关系最密切 ,夏、秋季菌量最多 ,最适温度为 2 5～ 2 8℃。辣椒疫霉菌主要分布在 0～ 10cm土层内     

辣椒疫霉菌毒素的致病性及其对辣椒组织的毒性研究

辣椒疫霉菌可产生对寄主植物有致病性的毒素,该毒素是一种非专化性毒素,能抑制辣椒、绿豆、豇豆和黄瓜种子胚根生长。辣椒疫霉菌毒素对辣椒叶片具有强烈地毒害作用,可使辣椒叶片产生类似病菌侵染引起的坏死斑。用电导法测定毒素处理的辣椒叶片组织细胞膜透性,可见毒素能导致叶组织细胞膜受损,细胞内电解质外渗,且不同抗性品种的辣椒对毒素反应有明显差异,抗病品种的叶组织渗出液电导率明显低于感病品种。 电子显微镜下可见,在辣椒疫霉菌毒素作用下,辣椒不同抗性品种3叶期叶组织细胞超微结构都发生了显著变化,表现为质膜内陷,叶绿体膜、线粒体膜和核膜结构破坏;细胞器基质的电子密度下降;叶绿体基粒片层肿胀,排列紊乱;线粒体脊消失,出现空泡化等。损害发生最早最严重的是质膜和叶绿体膜,抗病品种比感病品种的超微结构受害轻,对毒素作用的反应迟。     

辣椒疫霉菌的致病力研究

通过活体植株和离体叶片试验,对来源于北京、陕西、广东、广西、江苏南京和湖南长沙、衡阳、郴州等地15个辣椒疫霉菌菌株的致病力强弱进行对比研究。结果表明,不同来源地的辣椒疫霉菌致病力强弱差异明显,且活体植株和离体叶片试验结果基本一致。     

辣椒几丁质酶基因受疫霉菌及灰霉菌侵染时的表达变化

通过对已知全部辣椒表达序列标签(EST)数据分析发现,辣椒中至少含7个编码几丁质酶基因(分别为CaCHT-1、CaCHT-2、CaCHT-3、CaCHT-4、CaCHT-5、CaCHT-6和CaCHT-1.1)。采用半定量RT-PCR技术,分析辣椒幼苗在分别接种疫霉菌和灰霉菌后CaCHTs表达强度的变化。结果表明:在受到辣椒疫霉菌侵染时,除CaCHT-6外,CaCHT-1、CaCHT-2、CaCHT-3、CaCHT-4、CaCHT-5和CaCHT-1.1的表达水平均明显上升;而受到辣椒灰霉菌侵染时,CaCHT-1、CaCHT-4、CaCHT-5和CaCHT-1.1的表达水平均有不同程度的上升,CaCHT-3未检测到有表达,CaCHT-2和CaCHT-6的表达水平无可见的变化。结果提示,辣椒几丁质酶基因大部分成员均可受辣椒疫霉菌和灰霉菌的侵染诱导表达。     

不同来源辣椒疫霉菌的系统发育分析

运用PCR直接测序法,对9个辣椒疫霉菌株和1个外类群大豆疫霉菌株的nrDNA的ITS区(包括ITS1、5.8SrDNA和ITS2)进行序列测定。结果表明,不同来源的辣椒疫霉菌的ITS序列总长度为750~753bp。采用PAUP软件进行系统发育分析表明:来自辣椒寄主和土壤的辣椒疫霉菌各自聚为一组,与其地理来源没有明显的相关性。     

哈密地区辣椒疫霉菌的鉴定及部分生物学测定

哈密地区辣椒上的疫霉病菌,经分离培养和镜检,其孢子囊多为倒梨形、卵圆形,孔突较明显,未见厚垣孢子和卵孢子。此菌不仅对辣椒和番茄高度致病,还侵染黄瓜和豇豆,其特性不同于瓜疫霉菌和寄生疫霉菌,与国内外报道的辣椒疫霉菌基本一致。其菌丝体和孢子囊在高湿条件下可高度侵染无人为伤口的辣椒根、茎、叶、果实等器官,潜育期2—3天;菌丝在20℃和25℃干燥条件下只能存活2—3天,在水中的致死温度为45℃(10min)。病果种子带菌率可达100％,但在哈密室内外干燥条件下种子上的病菌只能存活2—3天。     

诱发辣椒疫霉菌大量产孢的最佳方法

对诱发辣椒疫霉菌在量产生游动孢子囊的５种方法（丝瓜培养法、土壤浸出液法、病茎浸出液法、Ｐｅｔｒｉ溶液法及ＭＳＳ溶液法）进行了比较研究，结果表明，供试的５种方法虽均能诱发产生大量孢子囊，但以ＭＳＳ溶液法效果最佳，产孢量大，所需时间短，孢子囊成熟度一致，且能一次性释放游动孢子，从而成功地解决了辣椒疫霉病抗性鉴定和筛选工作中产孢难这一重要问题。     

沼液处理对土壤辣椒疫霉菌抑制效果及土壤性状的影响

设施辣椒栽培土传病害严重,已成为制约辣椒生产可持续发展的瓶颈问题。采用室内模拟的方法,以江苏铜山、南京、宜兴3地不同pH土壤为研究对象,研究原始沼液及铵强化沼液对辣椒疫霉菌的抑制效果,以期为探索新的克服土传病害方法提供理论依据。结果表明,淹水或沼液处理均导致土壤铵态氮含量增加,硝态氮含量降低。沼液处理后,土壤水溶性有机碳、水溶性有机氮显著增加。淹水降低了土壤细菌、真菌的数量及土壤脲酶、脱氢酶活性,而对放线菌数量影响不明显。淹水期间,土壤细菌、放线菌数量呈先上升后下降趋势,而真菌数量持续下降。铵强化沼液处理的土壤细菌数量最多,真菌、放线菌数量处理间差异不明显。各处理脱氢酶、脲酶活性于第2～4 d内达最大值,此后缓慢下降。试验结束时,铜山、南京、宜兴3种土壤脱氢酶活性较试验初始值分别降低15.2%～59.6%、7.9%～38.4%、2.8%～37.9%,脲酶活性分别下降了16.7%、17.3%、17.1%;疫霉菌的数量分别下降2～3、1～2、1个数量级。铵强化沼液处理的疫霉菌数量最低,较淹水对照分别降低54.7%、62.8%、51.9%,说明提高沼液氨浓度,可以增强对土壤疫霉菌的抑制效果。     

12种杀菌剂对辣椒疫霉菌的室内毒力比较

采用生长速率法和孢子囊形成法测定了常用的12种杀菌剂对辣椒疫霉菌的毒力.试验结果表明,供试杀菌剂对辣椒疫霉菌菌丝生长、孢子囊形成的抑制作用间存在明显差异,其中以50%安克和68%精甲霜锰锌的对菌丝抑制作用相对较强,它们对菌丝生长的毒力回归方程分别为y=4.434 6+0.759 8x和y=4.569 7+0.522 6x,抑制中浓度分别为5.55μg/mL和6.66μg/mL;而50%安克和72.2%霜霉威对孢子囊形成的抑制作用相对较强,毒力回归方程分别为y=2.393 3+1.304 9x和y=2.269 5+1.303 6x,抑制中浓度分别为99.45μg/mL和124.34μg/mL.其它供试杀菌剂的毒力效果均不太理想.     

江西省地方辣椒种质资源对辣椒疫霉菌的抗性差异

采用游动孢子灌根法对205份江西省地方辣椒种质资源的辣椒疫霉菌抗性进行鉴定,分析辣椒种质接种5、9、14 d后抗性的差异。结果表明:接种后14 d病株率为0%～30.0%、30.1%～70.0%和70.1%～100%的材料分别有39、56、110份,分别占供试材料的19.02%、27.32%和53.66%;抗性表现为高抗、抗病、中抗和感病的材料分别有26、43、33和103份,分别占供试材料的12.68%、20.98%、16.10%和50.24%。分析供试材料在接种后5、9、14 d的发病情况可知,材料间发病速率存在显著差异,不同时间段材料间的病情相关性不显著,接种后14 d调查时病情发展趋于缓慢,可以此次鉴定结果来评价材料的最终抗病性。     

辣椒疫霉菌致病毒素的纯化及其致病性的研究

通过硫酸铵沉淀法提取到疫霉菌的原始毒素。采用甜椒叶片注射法检测毒素的活性。采用两种方法对原始毒素进行纯化,用连续Bio-gel P-100柱层析法纯化能将毒素提至层析纯。在离子交换一分子筛层析法中,原始毒素依次经DEAE52-cellulose→CM32-cellulose→Sephadex G-75柱层析纯化后,经电泳检测为单一条带,说明达到电泳纯。采用SDS—PAGE法测定毒素的分子量为41．9ku。对毒素的组分进行了测定,结果表明毒素中蛋白质含量为70．4％,糖含量为29．6％。毒素经蛋白酶K和胰蛋白酶处理后活性均下降,而用β-葡萄糖苷酶处理后活性变化不大,说明蛋白质亚基在P.capsici毒素活性中起着主要作用。     

不同来源辣椒疫霉菌的遗传多样性分析

[目的]探索来自辣椒寄主和土壤的辣椒疫霉的遗传多样性。[方法]通过利用12个10碱基随机引物对来自我国4个不同地理区域的22个辣椒疫霉菌株的亲缘关系进行RAPD分析。[结果]受试22个菌株共产生101条谱带,其中多态性为99条,占98.02%,说明受试辣椒疫霉菌具有丰富的遗传多样性。根据引物扩增的DNA指纹图谱,运用UPGMA分析法,以遗传相似系数0.5为阈值,将供试22个菌株划分为3个遗传聚类组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)。RAPD标记技术分析表明,来辣椒寄主和土壤的菌株的全基因组DNA扩增图谱差异很大。[结论]供试菌株具有丰富的遗传多样性,来自不同遗传背景的菌株差异显著,聚类组的划分与菌株的来源有一定的相关性。     

诱发辣椒疫霉菌大量产孢的最佳方法

对诱发辣椒疫霉菌大量产生游动孢子囊的５种方法（丝瓜培养法、土壤浸出液法、病茎浸出液法、Ｐｅｔｒｉ溶液法及ＭＳＳ熔液法）进行了比较研究，结果表明，供试的５种方法虽均能诱发产生大量孢子囊，但以ＭＳＳ溶液法效果最佳，产孢量大，所需时间短，孢子囊成熟度一致，且能一次性释放游动孢子，从而成功地解决了辣椒疫霉病抗性鉴定和筛选工作中产孢难这一重要问题。     

淮安地区辣椒疫霉菌生理小种鉴定

研究了从江苏淮安地区的棉花庄镇、赵集镇、黄码乡分离到的3份辣椒疫霉菌,利用一套鉴别寄主对其进行生理鉴定,结果表明:这3份辣椒疫霉菌均属于生理小种1(Race 1)。